2025年统编版2024选择性必修3生物上册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年统编版2024选择性必修3生物上册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下列选项中能正确说明生物工程技术的是（）A.植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体B.动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物C.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造D.动物克隆技术的基础是动物细胞培养2、细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养；以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析错误的是（）

A.成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需先将组织块分散成单个细胞B.细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境C.推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂D.通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式3、菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长。科研人员利用菌株Ⅰ和菌株Ⅱ进行如下实验：

实验1：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ在同时添加VB1和VB7的基本培养基中混合培养一段时间后；再将菌体离心提取；接种在基本培养基上，发现长出了菌落。

实验2：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ用微孔滤板（细菌不能通过；DNA等化合物可通过）隔离，培养一段时间后，再将两种菌体分别离心提取；接种在基本培养基上，发现均不长出菌落。

依据实验结果推测，最可能发生的是（）A.混合培养时发生DNA转移B.隔离培养时发生DNA转移C.混合培养时发生基因突变D.隔离培养时发生基因突变4、为了示踪衰老细胞在机体中的分布，科研人员综合利用基因工程和细胞工程的技术手段，将绿色荧光蛋白基因gf插入到了小鼠p16基因的下游，使两个基因“融合”。转基因小鼠的衰老细胞中，p16和gfp会特异性表达，从而使其在紫外光下呈绿色。下列分析错误的是（）A.可用PCR技术特异性地快速扩增绿色荧光蛋白基因gfpB.转基因小鼠的p16基因和gfp基因具有各自独立的启动子C.常用显微注射法将改造好的融合基因注入小鼠的受精卵中D.可选择发育到桑葚胚期的转基因小鼠胚胎移植到受体母鼠子宫内5、下列有关生物技术安全和伦理问题的观点不合理的是（）A.理论上生殖性克隆和治疗性克隆都不能丰富人类基因的多样性B.克隆人冲击了现有的婚姻，家庭和两性关系的伦理道德观念C.可通过基因工程等手段进行人类改造，制造“完美人类”D.在任何情况下，我国不发展、不生产、不储存生物武器6、新冠病毒是一种单链RNA病毒，用“荧光RT-PCR技术”进行检测，方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA，并大量扩增，用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA．在检测过程中，得到一条荧光强度的变化曲线，如图所示（根据超过阈值时Cyle的次数确定是否是新冠确诊病例）。下列说法错误的是（）

A.“荧光RT-PCR技术”中遵循的碱基配对原则与转录过程不完全一致B.若a点左移，则说明检测样本中的新冠病毒含量较高C.“平台期”出现是受限于荧光探针、引物、及原料的数量D.样本经“荧光RT-PCR技术”扩增后，只要超过阈值即为新冠确诊病例评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)7、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养8、某学习小组从富含纤维素分解菌土壤中获取纤维素分解菌并进行了下列操作：称取土样20g，加入装有30mL培养基的摇瓶中并完成稀释，在30℃下将摇瓶置于摇床上振荡培养；吸取一定的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊时，吸取0.1ml培养液进行梯度稀释和涂布平板，以达到分离纯化培养的目的。下列叙述错误的是（）A.取样土壤须在无菌条件下，用蒸馏水稀释B.为确定所用的固体培养基是否灭菌严格，应选择未接种的牛肉膏蛋白胨培养基进行空白培养C.摇床上振荡培养的目的是保证纤维素分解菌所需要的有氧环境及提高营养物质的利用率D.在所用的固体培养基中添加刚果红，若存在纤维素分解菌，则其菌落周围会呈现红色的透明圈9、载体是基因工程中携带外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞的重要运载工具，常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。下图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程示意图，下列相关叙述正确的是（）

A.重组载体重组载体B分别是基因克隆载体和基因表达载体B.载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因C.必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间D.培养细菌A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异10、通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列叙述正确的是（）

A.引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体B.PCR的过程主要包括变性→延伸→复性（退火），温度逐渐降低C.第3轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因D.每一轮PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充11、发酵工程与农业、食品工业、医药工业及其他工业生产有着密切的联系。下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的是（）A.啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成B.食品添加剂虽能改善食品的口味、色泽和品质，但会降低食品的营养C.将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗D.利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是生物防治的有效手段评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)12、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。13、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。14、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。15、现代的腐乳生产是在严格的____________条件下，将优良__________菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免__________________的污染，保证产品的质量。16、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。17、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。18、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。19、第四步：_____评卷人得分四、实验题(共1题，共9分)20、使用日益广泛的手机；在方便人们通讯联络的同时也成为细菌等病原体传播的途径。为了解手机上细菌的情况，某兴趣小组进行了如下实验，请回答相关问题：

(1)取附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行系列梯度稀释的目的是_______。

(2)A平板上生长的菌落有多种形态，说明附着在手机细菌有____种。若要使菌落能在A平板上生长，下列培养基组分中最合理的是_____(选填“甲、乙、丙”)，原因是_____。可采取____________来检测培养基A制备是否合格。培养基编号培养基组分甲蔗糖、NaC1、琼脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落。然后用伊红-美蓝染液对C进行染色，根据染色后D中出现的结果，可判断平板B中______(选填图中数字)是大肠杆菌的菌落。

(4)某同学采用平板划线法进一步纯化大肠杆菌，接种培养一段时间后，发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此情况的可能原因____________。评卷人得分五、综合题(共4题，共16分)21、目前，常态化疫情防控已经成为我们生活的一部分，正确佩戴口罩是预防新冠肺炎的有效手段。为了解某种医用防护口罩（经灭菌）佩戴时间对防护功能的影响，进行了实验研究，参与实验的志愿者随机分为甲、乙，丙三组，在无菌实验室佩戴不同时间后取样。取样过程：分别剪取口罩内层（与口和皮肤接触面）和外层6cm×6cm无纺布，剪碎后加入5mL培养液中，震荡2分钟，待无纺布碎片自然沉降后，取上清液1mL接种于固体培养基上，37℃培养箱培养48小时后，在放大镜下统计每cm2培养基上的菌落数；每组取平均值。滤菌率=（内层菌落数-外层菌落数）/内层菌落数。结果见表。

。组别佩戴时间培养基上每cm2菌落数（个）滤菌率%内层外层内层外层甲20分钟23.670.9596.13乙2小时73.932.9196.06丙4小时129.7510.1692.17（1）上述实验中，需要进行灭菌处理的是____________

A．剪刀B．培养基C．放大镜D．取样的口罩纱布。

（2）口罩上细菌可能的来源有____________

A．人体皮肤B．人体呼出气体C．口罩D．外界空气。

（3）培养基上统计的菌落数往往比口罩上活菌的实际数目_____________，原因是_____________。

（4）从表中数据可知，口罩内层细菌数量较多，且随着佩戴时间的延长细菌数量增长显著。根据你的生活经验和所学知识，分析口罩内层细菌数量增长的可能原因是____________________。（要求答出两点）

（5）我国规定医用防护口罩对细菌的滤菌率达到95%为合格。根据表中数据，医务人员佩戴此类一次性口罩较为合理的时间是__________________。22、EPO是促红细胞生成素的英文简称；是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：

(1)从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到_________，再通过__________获得大量EPO基因。

(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8～12枚，为使其超数排卵，需注射_________激素以排出更多的卵子，培养到___________时期与获能的精子相遇时，精子首先发生__________反应；穿越放射冠和透明带，完成体外受精。

(3)①过程构成了基因表达载体，内部包括不可缺少的组成部分，其中________能驱动基因的转录。

(4)采用_____技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及_______等物质。

(5)当胚胎发育至________时期，向受体移植，为获得更多个转基因胚胎，要将___________均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。

(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可以采用___________技术对血液来进行检测。23、米诺环素（分子式：C23H27N3O7）是一种四环素类抗生素，应用于人类疾病治疗和畜禽养殖。由于进入人体或动物体内不能完全被吸收，造成其在环境中残留。某研究人员在自然水域中筛选和分离得到了一种米诺环素高效降解菌DM13，并展开相关研究。下表是研究过程中使用的培养基种类及配方，回答下列问题。培养基种类配方BP培养基蛋白胨5．0g、牛肉膏3．0g、氯化钠5．0g，蒸馏水定容至1000mlBPA培养基蛋白胨5．0g、牛肉膏3．0g、氯化钠5．0g、琼脂25．0g，蒸馏水定容至1000mlMM培养基MgSO4•7H2O0．15g、FeSO4•7H2O0．01g、CaCl20．02g、KH2PO41g、Na2HPO41g、NH4NO31g、葡萄糖0．5g，蒸馏水定容至1000ml

(1)分离微生物前，可通过选择培养来增加米诺环素降解菌的浓度，需在BP培养基中添加一定浓度的_____，该物质同时提供微生物生长需要的_____。

(2)选择培养得到的微生物样品先稀释，再涂布到_____（BP/BPA/MM）培养基的平板进行培养。如果水样中降解米诺环素的微生物数量较少，为了避免分离筛选失败，可采取的措施是_____（回答1点）。

(3)为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果；在锥形瓶中用自然水体配制四种不同初始浓度的米诺环素溶液，进行实验。

①8h处理后，在米诺环素溶液初始浓度100ug/L的水体中，空白对照测得的米诺环素溶液浓度41．8ug/L，加入菌株DM13测得的浓度24．3ug/L，相较空白对照组，米诺环素降解菌的降解率为_____。

②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的MM培养基替换自然水体，这样做的目的是_____。24、在培养基中存在乳糖时；能诱导野生型大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶，该酶可催化乳糖水解成单糖。乳糖水解完毕后，β-半乳糖苷酶的含量迅速恢复到诱导前的状态。有活性的β-半乳糖苷酶还可以作用于显色剂X-gal产生蓝色化合物。

回答下列问题：

(1)乳糖在β-半乳糖苷酶的催化下水解，产物是_______。一般情况下，培养野生型的大肠杆菌菌落呈白色，若要使得菌落呈蓝色，根据以上显色原理，需要在培养基中添加的物质是_______。

(2)以添加的乳糖含量作唯一自变量，配制了多组培养基来培养野生型大肠杆菌。在相同的条件下培养一段时间后发现，有多组菌落呈白色，也有多组菌落呈蓝色。推测该结果的出现可能与β-半乳糖苷酶作用于X-gal产生蓝色化合物需要较长的时间有关。若该推测正确，则上述实验的自变量设置与实验结果的对应关系是_______。

(3)大肠杆菌拟核DNA中；能够编码完整β-半乳糖苷酶的基因记作lacZ＇，编码不完整β-半乳糖苷酶的基因记作lacZ。某突变型大肠杆菌编码β-半乳糖苷酶的基因是lacZ。下图是一种质粒载体PO的结构图，其中的lacZ＇基因编码的多肽链无β-半乳糖苷酶的活性，但与lacZ-编码的多肽链共存时，两种肽链可以互补为有活性的β-半乳糖苷酶。（Amp＇表示氨苄青霉素抗性基因；MCS是允许外源DNA插入的位点，目的基因插入成功后会造成lacZ＇基因失活）

基因工程中，以突变型大肠杆菌为受体菌进行转化时，转化状况有三种：未被转化、含有质粒载体PO、含有MCS插入了目的基因的重组质粒P1。为区分这三种大肠杆菌，当培养基中营养成分和显色所需物质齐备且添加了氨苄青霉素的条件下，上述三种大肠杆菌的生长结果依次是_______、_______、_______。利用大肠杆菌的生长结果来区分转化状况，这属于基因工程操作步骤中的_______。（写步骤名称）。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

1；植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性；即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

2；动物克隆为无性繁殖；其技术基础是动物细胞培养。

3；动物细胞融合也称细胞杂交；是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，主要的用途是制备单克隆抗体。

【详解】

A；植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化和再分化形成新个体；A错误；

B；动物细胞融合技术的最重要用途是制备单克隆抗体；B错误；

C；细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造；人工诱变的原理是基因突变，具有不定向性，C错误；

D；动物克隆的技术基础是动物细胞培养；D正确。

故选D。

【点睛】2、B【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）。

３；动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象。

【详解】

Ａ；成块的组织中细胞与细胞靠在一起；在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将组织块成为单个细胞后才能进行培养，Ａ正确；

Ｂ；细胞培养过程需要对培养液、培养用具进行灭菌；细胞培养过程需要对培养液添加抗生素防止细菌污染，定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害，Ｂ错误；

Ｃ；动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象；由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂，Ｃ正确；

Ｄ；细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体；以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，Ｄ正确。

故选Ｂ。

【点睛】

3、A【分析】【分析】

题图分析；将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ单独涂布于基本培养基上时都没有产生菌落，而将两者混合后涂布于基本培养基上时产生了菌落，据此推测可能是二者在混合培养过程中发生了基因的转移。

【详解】

A、菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长；但混合培养后在基本培养基上长出菌落，据此可推测混合培养时发生DNA转移，A正确；

B；根据实验结果可知；隔离培养可能没有发生DNA转移，因而两种菌种依然不能在基本培养基上生长，B错误；

C；基因突变的发生于混合培养没有必然的联系；因此根据上述实验结果不能推出混合培养时发生基因突变的结论，C错误；

D；基因突变具有自发性；但根据隔离培养后菌落都没有在基本培养基上出现，不能推出在隔离培养时发生基因突变的结论，D错误。

故选A。4、B【分析】【分析】

基因工程的操作步骤：(1)目的基因的获取；方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；(3)将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同；导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；绿色荧光蛋白基因gfp为DNA片段；可用PCR技术特异性地快速扩增，A正确；

B；将绿色荧光蛋白基因gfp插入到了小鼠p16基因的下游；使两个基因“融合”，因此p16基因和gfp基因共用了一个启动子，它们之间关联表达，B错误；

C；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；C正确；

D；胚胎移植时；应选择处于桑葚胚或囊胚期的胚胎，D正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

克隆人：两种不同观点；多数人持否定态度：

1；否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德；是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。

2；肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。

3；中国政府的态度：禁止生殖性克隆；不反对治疗性克隆。四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。

【详解】

A；克隆是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。理论上生殖性克隆和治疗性克隆的利用都不能丰富人类基因的多样性；A正确；

B；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人；B正确；

C；生殖性克隆目的是产生一个完整的人；由于生殖性克隆会对人类现有的有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念产生冲击，克隆技术的不成熟会导致生理缺陷或心理缺陷克隆人的出现，我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，故不可通过基因工程等手段进行人类改造，制造“完美人类”，C错误；

D；在任何情况下；我国不发展、不生产、不储存生物武器，D正确。

故选C。6、D【分析】【分析】

根据题意可知：RT-PCR检测的步骤与方法：提取检测者的RNA；反转录成cDNA，体外用带有荧光标记的引物对cDNA进行扩增，如果有扩增后有荧光信号证明感染病毒。

【详解】

A；根据分析可知：“荧光RT-PCR技术”中遵循的碱基配对原则与转录过程不完全一致；A正确；

B；若a点左移；说明样本中的新冠病毒含量更高，达到阈值所需的循环数更少，B正确；

C；根据曲线图可知：图中曲线通过荧光强度变化反映产物量的变化；因此曲线中“平台期”出现的最可能原因是试剂盒中的原料（引物、探针）数量一定，导致超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链不再增加”，C正确；

D；在检测过程中；有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈阳性，为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阈值时才确诊，D错误。

故选D。二、多选题(共5题，共10分)7、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确。

故选ABC。8、A:B:D【分析】【分析】

刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料；它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；取样土壤须在无菌条件下；用无菌水稀释，这样可以避免杂菌污染，A错误；

B；为检测所用的固体培养基是否灭菌严格；应选择未接种的上述培养基进行空白培养，若无菌落出现，则说明配制的固体培养基合格，B错误；

C；摇床上振荡培养不仅能保证纤维素分解菌所需要的有氧环境；而且还可以使菌体和营养液充分接触，进而提高营养物质的利用率，C正确；

D；在所用的固体培养基中添加刚果红；随着纤维素被分解利用，若存在纤维素分解菌，则其菌落出现透明圈，D错误。

故选ABD。9、A:B【分析】【分析】

分析题图：图中重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增；因此是基因克隆载体，而重组载体B导入受体菌后，表达产生胰岛素，因此是基因表达载体。

【详解】

A；重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增；因此是基因克隆载体，而重组载体B导入受体菌后，表达产生胰岛素，因此是基因表达载体，A正确；

B；作为运载体必须要具备的条件有：含有限制酶的切割位点(便于目的基因的插入)、复制原点(便于目的基因的扩增)及标记基因(便于筛选含有目的基因的受体细胞)等；因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因，B正确；

C；培养细菌A的目的是扩增目的基因；不需要获得表达产物，因此目的基因不一定要插入重组载体A的启动子和终止子之间，C错误；

D；培养细菌A的目的是扩增目的基因；培养细菌B的目的是获得胰岛素，因此培养两者的培养基在营养成分和功能上有明显差异，D错误。

故选AB。10、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA双链复制；步骤包括高温变性；复性、延伸。该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。根据图中可得，由于引物的一个碱基在不影响与模板链整体配对的前提下不与目的基因配对，再利用PCR技术实现了目的基因的定点诱变。其技术原理是碱基互补配对原则。

【详解】

A；引物中设计两种限制酶识别位点；可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，A正确；

B；在PCR反应过程中变性大约94℃→复性大约55℃→延伸大约72℃；B错误；

C；第3轮PCR中；物质②是引物2以引物1拓展得到的DNA链为模板进行复制得到的，故引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因，C正确；

D；PCR一次大概有30个循环；每一轮PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期补充，D错误。

故选AC。11、C:D【分析】【分析】

发酵工程的基本环节：选育菌种：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。发酵罐内发酵：这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量；产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。分离、提纯产物：如果是发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取恰当的提取、分离和纯化措施来获得产品。

【详解】

A；啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成；因此啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，A错误；

B；食品添加剂能改善食品的口味、色泽和品质；可以增加食品的营养，B错误；

C；通过基因工程技术；将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再结合发酵工程可生产乙肝疫苗，C正确；

D；利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病；不会对环境造成污染，是生物防治的有效手段，D正确。

故选CD。三、填空题(共8题，共16分)12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2014、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3015、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】无菌毛霉其他菌种16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇18、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定四、实验题(共1题，共9分)20、略

【分析】【分析】

1、微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、实验室常用的灭菌方法

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；

②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；

③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

(1)

取附着在手机上细菌进行取样培养后；对菌液进行系列梯度稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单个的菌落。

(2)

A平板上生长的菌落有多种形态；说明附着在手机细菌种类较多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要营养是氮源、维生素和生长因子。培养基乙含有碳源、氮源、水、无机盐这几类营养物质，且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到实验效果；培养基甲不含蛋白胨（氮源），菌落无法在该培养基上生长；培养基丙不含凝固剂（琼脂），无法形成固体培养基，无法在培养基表面形成菌落。检测培养基A制备是否合格，可将培养基置于适宜条件下培养一段时间，检测其是否杂菌生成。

(3)

伊红为酸性染料；美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。由图可知3号菌落为大肠杆菌菌落。

(4)

采用平板划线法接种培养一段时间后；发现第一划线区域上都不间断长满菌落，第二划线区域几乎无菌落，原因可能是接种环灼烧后未冷却就划线或未从第一区域末端开始划线。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记微生物接种的方法、菌落计数、以及菌种保存等知识，意在考查考生对基础知识的掌握和灵活运用基础知识的能力。【解析】(1)将微生物分散成单个细胞；进而获得单个的菌落。

(2)多乙培养基乙含有碳源；氮源、水、无机盐这几类营养物质；且加入了琼脂作为凝固剂，可以达到实验效果将培养基置于适宜条件下培养一段时间，检测其是否杂菌生成。

(3)3

(4)第一次划线后接种环灼烧后没有冷却；未从第一次划线区开始划线五、综合题(共4题，共16分)21、略

【分析】【分析】

1；培养基的成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。

2；微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）剪刀作为取材工具；要防止取材时杂菌污染，还有培养基是用来培养菌种的，不能有杂菌污染，这二者需要进行高压蒸汽灭菌；放大镜是用来统计菌落数的，本身是否含有细菌不影响菌落的统计，无需灭菌；取样的口罩纱布上含有所需要统计的细菌，故不能灭菌。

故选AB。

（2）A；口罩内层与人体皮肤接触；人体表面存在细菌，A正确；

B；人体口腔内也有细菌；会随呼吸到达口罩，B正确；

C；口罩是经消毒灭菌后才销售的；故口罩本身不应含有细菌，C错误；

D；实验在无菌实验室进行；空气中无细菌，D错误。

故选AB。

（3）当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，所以培养基上统计的菌落数往往比口罩上活菌的实际数目低。

（4）从表中数据可知；口罩内层细菌数量较多，且随着佩戴时间的延长细菌数量增长显著，这可能是因为温度较高，比较潮湿及唾液等提供营养，有利于细菌的繁殖；人体呼出的细菌随时间积累。

（5）据表格数据可知：佩戴20分钟和2小时候滤菌率相差不大且都高于95%；而佩戴4小时后会低于95%，不合格。故医务人员佩戴此类一次性口罩较为合理的时间是2小时。

【点睛】

本题结合图表，考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术，能理论联系实际，结合所学的知识准确答题。【解析】ABAB低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落温度较高、比较潮湿及唾液等提供营养，有利于细菌的繁殖；人体呼出的细菌随时间积累2小时22、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。(1)

获取EPO基因（目的基因）；可从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到cDNA，再经PCR技术扩增。

(2)

为使供体母鼠超数排卵；需注射促性腺激素。采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期才具备受精能力。当卵子与获能的精子相遇时，精子首先发生顶体反应，穿越放射冠和透明带，完成体外受精。

(3)

基因表达载体的组成部分中；能驱动基因转录的是启动子。

(4)

将重组表达载体导入小鼠受精卵中；通常采用显微注射技术。发育培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素；激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清（血浆）等物质。

(5)

胚胎移植时；应选择发育到桑椹胚或囊胚阶段的胚胎。借助胚胎分割技术可获得更多的转基因胚胎，胚胎分割时，需要将内细胞团进行均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。依题意“采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物”可推知，在胚胎移植前，需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。

(6)

若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO；可以采用抗原-抗体杂交技术对血液来进行检测。

【点睛】

本题以“促红细胞生成素”的合成为题材，考查基因工程胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，识记胚胎移植的原理及应用，能结合题中信息准确答题。【解析】(1)①.cDNA②.PCR技术。

(2)①.促性腺②.减数第二次分裂中期③.顶体。

(3)启动子。

(4)①.显微注射②.血清##血浆。

(5)①.桑椹胚或囊胚②.内细胞团③.性别鉴定。

(6)抗原-抗体杂交23、略

【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如