2025年新科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年新科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷401考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、科研小组利用蛋白质工程将某细胞中的一种转运蛋白X进行改造，并使改造后的转运蛋白X基因在细胞中正常表达。下列说法正确的是A.该过程无需构建基因表达载体B.该过程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用C.经改造后的蛋白质不需要再进行功能鉴定D.经改造后的基因在表达过程中不遵循中心法则2、果酒、果醋、泡菜都是通过传统发酵技术生产的产品。下列哪项不是果酒、果醋和泡菜发酵制作的共同点（）A.利用微生物的代谢活动将有机物质转化成产品B.使用的菌种都没有细胞核和线粒体等具膜结构C.发酵过程的主要反应都在微生物的细胞内进行D.通过人工接种菌种均可提高发酵产品的质量3、下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（）A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B.保护濒危物种C.获得组织器官异体移植的供体D.大量生产紫杉醇4、下列关于转基因技术的叙述中，错误的是（）A.科学家应科学地认识，评估和利用转基因产品B.社会公众在购买相关产品时应享有知情权C.转基因生物有可能被用于制造生物武器D.转基因产品的研究和利用不会影响生态系统的稳定性5、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞；制备流程如图示。下列叙述正确的是（）

A.欲提高胚胎的利用率，可用胚胎分割技术将细胞b均等分割B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养6、下列有关生物技术引起的伦理问题的叙述，不正确的是A.人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.进行基因检测时，可通过测定基因的表达产物——蛋白质来进行D.对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法解决7、某生物兴趣小组的同学测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对小鼠的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行培养。下列说法正确的是A.利用胃蛋白酶处理两种肝组织块后可得到肝细胞悬液B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象D.该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒8、应用特定的测序技术发现某明代古沉船船体饱水木材样品与沉积物中含有丰富的原核微生物类群，与漆黑海底现场取的木材样品与沉积物中的菌群种类相似，但是菌群含量存在明显的差异。下列叙述正确的是（）A.可用加入酚红试剂的鉴别培养基鉴定古沉船船体木材中是否存在纤维素分解菌B.在漆黑的海底现场获取的木材样品中含有大量能够进行化能合成作用的硝化细菌菌群C.海底沉积物为多种多样的细菌菌群提供了生长、繁殖所需的全部的碳源和氮源D.用血细胞计数板统计某细菌的种群数量时后盖盖玻片会导致所得结果比实际值偏大9、脂多糖（LPS）是伤寒沙门氏菌的主要致病毒素。在研发伤寒沙门氏菌LPS疫苗的过程中，利用多肽模拟细菌LPS，多肽模拟LPS抗原特征的相似程度越高，其与LPS竞争抗体结合位点的能力越强。为初步鉴定多肽A、B模拟LPS抗原特征的相似程度，研究人员利用抗LPS单克隆抗体进行检测，部分实验步骤如图1，实验结果如图2。下列相关叙述错误的是（）

A.抗LPS单克隆抗体的制备过程中利用了细胞膜的流动性和细胞增殖原理B.b过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合C.图1步骤c中与多肽结合的抗体会被洗脱掉，与LPS结合的抗体未被洗脱D.图2表明多肽B模拟LPS效果更好评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、下列相关实验的叙述，正确的是（）A.发酵过程中，要严格控制温度、pH等发酵条件，否则会影响菌种代谢产物的形成B.DNA的粗提取与鉴定实验中，用菜花替代鸡血作为实验材料，实验操作会有不同C.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液、蒸馏水等在使用前不用灭菌D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、分子大小无关11、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养12、地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，错误的是（）

A.②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面B.甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种C.Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配置时先灭菌后调节pHD.可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化13、抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如图b。分析结果；可得出的结论是。

A.甲菌产生了抗生素B.丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制C.乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制D.丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长14、MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素I~IV的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上，进行药敏试验以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验器材，图2为实验结果。下列叙述正确的是（）

A.为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①②③B.据图2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素IV的突变株D.图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素IV的抗性越强15、扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图实验，其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①~⑤号部位，其中⑤为剩余部分。测定病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如下。下列说法正确的是（）

A.该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小B.可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染C.病斑越大，靠近腐烂部位的果肉中Pat含量越高D.由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后可放心食用16、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶17、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌18、我国科研人员在实验室中通过构建多种酶催化体系的方法，首次实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程。下列有关叙述正确的是（）A.可从不同物种的基因中扩增得到多酶催化体系中的目标酶基因B.在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断C.该方法可在分子水平上直接改变氨基酸的序列，实现对酶特性的改造和优化D.若该科研成果成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)19、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。20、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。21、通过____________的方式，来控制NaCL溶液的浓度，使DNA在盐溶液中溶解或析出。22、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。23、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁24、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。25、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。评卷人得分四、实验题(共2题，共16分)26、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________27、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分五、综合题(共3题，共21分)28、受精卵的形成标志着受精过程圆满结束；新生命发育的历程由此开始。回答下列问题：

（1）自然孕育时，精子与卵子在______________（填器官）中完成受精过程，判断卵子已经受精的标志是__________________________________________。

（2）受精卵形成早期胚胎的主要历程为：受精卵→桑椹胚→囊胚→______________具有三个胚层的其中____________________________（填阶段）全部在透明带内进行，桑椹胚的所有细胞及囊胚的______________细胞都具有发育的全能性。

（3）除孕早期外，胚胎发育所需要的营养都是通过胎盘从母体中获得的，胎盘由囊胚的______________细胞发育而来。

（4）胚胎移植后一般都能在母体子宫内存活，其生理学基础是_______________。29、不知从什么时候开始；酵素被赋予了各种神奇色彩，如“排毒；美容养颜，甚至减肥，用酵素敷面膜，效果更好”，等等。但实际上，酵素最初的含义就是与发酵过程有关的酶而已。请回答下列问题：

(1)苹果酒是产量仅次于葡萄酒的世界第二大果酒，参与苹果酒发酵的酶主要位于酵母菌细胞的____________________中，该过程的酶发挥作用的主要环境条件是____________________。

(2)为了提高苹果酒的品质，需要用__________（填两种酶）去除苹果细胞的细胞壁。苹果酒如果开瓶后不及时喝掉，很快就会变酸，这是由于____________________。

(3)豆鼓是我国传统的发酵豆制食品和调味料，与腐乳的制作过程类似，都是利用微生物产生的______（酶的名称）进行发酵制作而成，含有多种营养成分。在制作腐乳的过程中，加盐的作用是__________，使豆腐块变硬，同时__________；避免豆腐块变质。

(4)纤维素分解菌产生的纤维素酶可以将废弃物转化为简单糖类等产品，对能源、食品和化工原料以及环境污染等具有重要的现实意义，纤维素酶是一种复合酶，其中葡萄糖苷酶的作用是_____________。30、尿素[CO（NH2）2]是有机态氮肥；只有在被土壤中的微生物分解后，才能被农作物吸收和利用。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌；相关流程如图所示。回答下列问题：

(1)为了分离得到尿素分解菌，需要配制培养基，培养基中加入的尿素能为微生物提供的营养成分是__________。

(2)配制好的培养基，采用__________法进行灭菌，待平板冷却凝固后需要将平板__________（填放置方式），这样做的目的是____________________（答出1点）。

(3)据图分析，该兴趣小组设置了三个培养皿进行接种，所采用的接种方法是__________，培养一段时间后，经过统计，在培养基表面分别形成了51、42、45个菌落，据此计算，1g土壤样品中约有分解尿素的细菌__________个。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

1；蛋白质工程：指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。

2；蛋白质工程的过程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。

【详解】

A；应直接对控制转运蛋白质X合成的基因进行改造；需构建基因表达载体，A错误；

B；蛋白质工程最终需要基因工程来实现；基因表达载体构建需要限制酶和DNA连接酶，B正确；

C；经改造后的蛋白质仍需要再进行功能鉴定；C错误；

D；经改造后的基因在表达过程中遵循中心法则；D错误。

故选B。

【点睛】

本题考查蛋白质工程的相关知识，要求考生识记蛋白质工程的概念、基本操作程序及相关应用实例，能结合所学的知识准确判断各选项。2、B【分析】【分析】

果酒；果醋、腐乳和泡菜发酵制作比较：

【详解】

A；果酒发酵的主要微生物是酵母菌；果醋发酵的主要微生物是醋酸菌，泡菜发酵的主要微生物是乳酸菌，果酒、果醋和泡菜都是利用微生物的代谢活动将有机物质转化成产品，A不符合题意；

B；酵母菌是真核生物；具有细胞核和线粒体等具膜结构，B符合题意；

C；果酒、果醋、泡菜的发酵制作过程的主要反应都是在微生物的细胞内进行的；C不符合题意；

D；通过人工接种菌种；短时间内使得相应菌种成为优势种群，从而提高相应发酵产品的质量，D不符合题意。

故选B。3、D【分析】【分析】

动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程；促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。

【详解】

A；体细胞核移植技术可加速家畜遗传改良进程；促进优良畜群繁育，A正确；

B；体细胞核移植技术可用于保护濒危物种；B正确；

C；体细胞核移植技术可用于获得组织器官异体移植的供体；C正确；

D；大量生产紫杉醇需要采用植物组织培养技术；D错误。

故选D。

【点睛】4、D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；为了保障现代生物技术的安全性；需要开展风险评估、预警跟踪等措施，A正确；

B；为了加强对农业转基因生物的标识管理；保护消费者的知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度，B正确；

C；转基因生物有可能被用于制造“生物武器”；C正确；

D；生物安全是指担心转基因生物会影响到生物多样性；从而影响生态系统的稳定，D错误。

故选D。5、D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A、为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚分割，应对内细胞团均等分割，而非对b滋养层分割；A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；需要先用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确。

故选D。6、B【分析】【详解】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人；设计试管婴儿是为了治疗疾病，但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响；进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物——蛋白质来进行检测；对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法解决。7、C【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2；细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上；称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

【详解】

A、处理肝组织块获得到肝细胞悬液用胰蛋白酶，A错误；

B、细胞培养应在含5%CO2，CO2用于维持培养液的pH值，B错误；

C、正常细胞不具有无限增殖能力，培养一段时间后会停止分裂，C正确；

D；病毒只能寄生在活细胞中；不能用培养液直接培养，D错误。

故选C。8、D【分析】【分析】

1；鉴别纤维素分解菌时需要在鉴定培养基中添加刚果红染色剂；纤维素被分解后，无法形成刚果红-纤维素复合物，培养基会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

2；硝化细菌是一种好氧细菌。

【详解】

A；鉴别纤维素分解菌时需要在鉴定培养基中加入刚果红染色剂；而不是酚红试剂，A错误；

B；硝化细菌是一种好氧细菌；需要生活在氧气充足的环境，而在漆黑的海底氧气缺乏，因此在漆黑的海底现场获取的木材样品中不会含有大量能够进行化能合成作用的硝化细菌菌群，B错误；

C；细菌菌群生长、繁殖所需的碳源和氮源不是全部来自于海底沉积物；氮源还可来自水中溶解的无机盐如硝酸盐等，C错误；

D；用血细胞计数板对尿素分解菌进行计数时；若先将培养液加入计数池，后盖盖玻片，可导致培养液体积大于计数室的实际体积，导致结果偏大，D正确。

故选D。9、D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。单克隆抗体制备过程中至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；抗LPS单克隆抗体的制备过程中所依据的生物学原理有两个；即细胞增殖和细胞膜的流动性，A正确;

C、b过程将多肽和抗体的混合液加入检测板；利用的原理是抗原和抗体的特异性结合，B正确；

C；因为与多肽结合的抗体会被洗脱掉；而LPS固定在检测板上，则未被洗脱的抗体就与LPS结合而残留在检测板上，C正确；

D；因为与多肽结合的抗体会被洗脱掉；而LPS固定在检测板上，则未被洗脱的抗体就与LPS结合而残留在检测板上；图2中模拟LPS效果更好的多肽是多肽A，由题干知多肽模拟LPS抗原特征的相似程度越高，其与LPS竞争抗体结合位点的能力越强，与多肽结合的抗体会被洗脱掉，而未被洗脱的抗体因与LPS结合而残留在检测板上，未被洗脱的抗体越少的多肽效果越好，图2显示加入多肽A的清洗后检测板上检出的抗体数量比加入多肽B的少，因此模拟LPS效果更好的多肽是多肽A，D错误。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)10、A:B【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定过程中破碎动植物细胞；获取含DNA的滤液区别：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

2；影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素很多；包括DNA分子大小和构型、琼脂糖浓度、所加电压、电泳缓冲液的离子强度等。

【详解】

A；微生物发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件；因为环境条件的变化不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响代谢产物的形成，A正确；

B；用菜花替代鸡血作为实验材料；其实验操作步骤不完全相同，如植物细胞有细胞壁，破碎细胞时需要研磨并加入食盐和洗涤剂，B正确；

C；为避免外源DNA等因素的污染；PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，C错误；

D；用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时；DNA分子的迁移速率与琼脂糖的浓度、DNA分子大小及构型等因素有关，D错误。

故选AB。

【点睛】

本题考查发酵技术、DNA和蛋白质技术等相关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验需要采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。11、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。12、A:B:C【分析】分解纤维素的微生物的分离实验的原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；根据Ⅰ号培养基上菌落分布均匀可知；②过程是用涂布器取乙中的样品稀释液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面，即乙中是分解纤维素菌的样品稀释液，不是菌液，A错误；

B；液体培养基的作用是让菌体增殖；而不是稀释菌种，甲、乙试管中的液体都是样品稀释液，捕食液体培养基，B错误；

C；配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；故需要先调pH，再灭菌，C错误；

D；刚果红能与纤维素形成红色复合物；若菌落周围出现透明圈，说明纤维素分解菌将纤维素进行了分解，可挑取该菌落用平板划线法继续纯化该菌体，D正确。

故选ABC。13、A:C【分析】【分析】

【详解】

分析培养结果（图b）可知，乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素，否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。进一步由b图可知；乙菌的生长被抑制，最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙；丁两种菌没有影响，AC正确。

故选AC。14、A:B:C【分析】【分析】

1；平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

2；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后形成单个菌落。

【详解】

A；为获得长满测试菌的琼脂平板；需要用到的接种方法是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法需要用到酒精灯、涂布器和培养基，A正确；

B；MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。说明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要达到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加浓度才行，B正确；

C；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株；这些突变株在抗生素的环境下能够存活并繁殖形成菌落。细菌是原核生物，发生变异最可能是基因突变，C正确；

D；在抑菌圈中出现的菌落都是对该种抗生素具有抗性的菌株；它们之间抗性的强弱无法根据题干信息进行判断。如果要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，D错误。

故选ABC。

【点睛】

本题考查的知识点包括：微生物接种，微生物培养及微生物的应用。15、A:B:C【分析】【分析】

1；据图分析可知；①号部位为病斑区域，即腐烂部位，①与②交界处为“病键交界处”，是腐烂部位与未腐烂部位交界的地方，②③④⑤均为未腐烂部位，且距离腐烂部位依次变远。

2；在曲线图中；病班部位的Pat含量最高，而距离病班部位越来越远，Pat含量就会越来越少。

【详解】

A；由曲线图可知；该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小，A正确；

B；青霉素可以抑制细菌生长；可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染，B正确；

C；病斑越大；说明病斑中扩展青霉素的密度就越大，产生的Pat就越多，C正确；

D；如果只去除腐烂部位；那么未腐烂部位中的Pat仍然会对人体造成伤害，存在健康风险，故窝烂苹果去除腐烂部位后不能食用，D错误。

故选ABC。16、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。17、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。18、A:B:D【分析】【分析】

蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及与其生理功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】

A；从不同物种的基因中扩增得到多酶催化体系中的目标酶基因后；可对获得的目的基因利用PCR技术在体外反应体系中扩增，A正确；

B；酶的作用条件较温和；不同的酶其适宜的温度和pH不同，在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断，B正确；

C；该方法在分子水平上；通过改变基因的碱基序列，间接改变氨基酸的序列，从而改变蛋白质的结构，实现对酶特性的改造和优化，C错误；

D；该科研实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程；若成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机，D正确。

故选ABD。三、填空题(共7题，共14分)19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】滴加蒸馏水逐渐稀释2mol/L浓度的NaCL溶液22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇25、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆四、实验题(共2题，共16分)26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是显微注射法。

（3）上述建构好的表达载体含有能够表达β-萄糖苷酶(BglB)的基因；转基因大肠杆菌能够分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能够降解纤维素。

（4）蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA连接酶显微注射法。

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列五、综合题(共3题，共21分)28、略

【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成