2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.体外培养单个浆细胞可持续大量获得单克隆抗体B.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞内C.ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物D.选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点2、将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒，图中Apr表示氨苄青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是（）

A.目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中B.为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstIC.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子杂交或抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达3、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）A.培养贴附性细胞时要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附B.需将培养细胞的松盖培养瓶置于95%CO2和5%O2的混合气体培养箱中C.传代培养时，少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，其遗传物质已经改变D.培养正常的或病变的细胞，可用于生理、病理、药理等方面的研究4、新冠疫情的快速控制；离不开政府的科学决策和我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如右图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（）

A.检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNAB.PCR每个循环包括变性、退火（引物和模板结合）、延伸3个阶段C.Ct值就越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性5、下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是（）A.可用蒸馏水胀破细胞的方法从猪红细胞中提取到DNA和蛋白质B.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除部分杂质C.透析法分离蛋白质的依据是利用蛋白质不能通过半透膜的特性D.进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、电泳法等6、检测抗虫基因是否在棉花体内发挥功能作用的第一步是（）A.检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带B.通过观察害虫吃棉叶是否死亡C.检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D.检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、科学家通过“治疗性克隆”研究发现；利用病人本身的细胞可治疗其患有的某些疾病。一般将胚胎干细胞进行基因修饰后，经诱导分化成相应的组织器官用于移植。其过程如下图所示。下列关于“治疗性克隆”的叙述不正确的是（）

A.人类“治疗性克隆”属于生物工程中的细胞工程B.该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养、胚胎移植等C.此过程体现了胚胎干细胞具有全能性D.“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比，其优点之一是避免了免疫排斥反应8、关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（）A.对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器B.中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆，但禁止生殖性克隆人C.对转基因植物外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质D.转基因生物出现了安全性问题，不一定要马上停止实验9、下图1表示的是某DNA分子上的一些限制性内切酶的酶切位点。用XhoI和SalI两种限制酶分别处理该DNA分子；经电泳分离结果如图2。以下叙述正确的是（）

A.所用两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列可能相同B.限制酶通过作用于磷酸二酯键和氢键得到相应产物C.根据泳道②电泳示意图可知使用的限制性内切酶为XhoID.用两种限制酶同时处理后进行电泳，条带可多于6条10、化工厂污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A；研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）实验的主要步骤如图所示。下列叙述错误的是（）

A.培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌B.实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落D.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种11、为对某样品中噬菌体计数，工作人员将0.1mL稀释倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬菌斑（1个噬菌斑为1个pfu），噬菌体效价可用每毫升样品中含有的pfu数表示。下列叙述正确的是（）

A.透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的B.噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附C.若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为1.5×108pfu/mLD.若有少数活噬菌体末能侵染细菌，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低12、某植物有甲、乙两品种，科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是（）。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/（μmol·L-1）生长素/（μmol·L-1）I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3

A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基，即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素13、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组14、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖15、下列叙述中错误的是（）A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.细胞代谢产物的工厂化生产体现了细胞的全能性C.在pH和温度相同时加酶洗衣粉的洗涤效果好于普通洗衣粉D.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。17、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。18、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。19、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。20、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。21、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、判断题(共3题，共6分)22、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，体现了动物细胞的全能性。（选择性必修3P52）()A.正确B.错误23、雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力()A.正确B.错误24、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共5分)25、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分六、综合题(共3题，共21分)26、人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃；可用来发酵处理秸杆，提高秸杆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)平板划线法__________（“能”或“不能”）用于实验室中分离纯化微生物。

(2)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是______（填序号）。

①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水。

(3)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是______________________________。

(4)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是______。

(5)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落（见图1），图中降解圈大小与纤维素酶的_______有关。图1中降解纤维素能力最强的菌株是_______（填图中序号）。

(6)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵。测得发酵液中酶活性的结果图2，推测菌株____________________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是______________________________________________________________________。27、甘蓝型油菜中；抑制PEP基因的表达可提高油菜籽的含油量。通过基因工程将PEP基因反向连接在启动子后，构建转反义PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技术路径。请回答下列问题：

(1)为将PEP基因反向连接在启动子后，构建反义PEP基因，需要将限制酶酶切位点设计在引物上，PEP基因的上游引物和下游引物中应分别引入________酶切位点。

(2)用激光照射油菜愈伤组织时，可在细胞膜上打出一个穿孔，转反义PEP基因表达载体由此小孔进入油菜细胞，几秒钟后小孔封闭，该过程体现了细胞膜具有____________。目的基因表达载体进入细胞后；Ti质粒上的T－DNA区段可转移到油菜细胞的基因组中。

(3)筛选时，需在油菜愈伤组织培养基中加入__________进行初步选择。在激光照射下，存活的细胞一般会发出______________。为检测反义PEP基因是否整合到染色体上，研究者通常检测细胞中是否存在ntp基因，而不检测PEP基因。不直接检测PEP基因的原因是________________。28、双酚A（BPA）是一种含碳有机物；是重要的工业原料，在环境中不易降解，科研人员对土壤中细菌等微生物降解BPA进行了相关研究。

(1)BPA由多种途径进入环境，沿着________________在生态系统中传递；并逐级积累，产生富集现象。

(2)为探究BPA对土壤中的细菌数量及种类的影响；科学家进行了以下实验。

①首先测定不同浓度BPA对土壤细菌生长情况的影响，结果如图1所示，实验结果表明______________。

（注：电泳条带宽度与细菌相对数量的多少有直接关系）

②16SrDNA基因存在于所有细菌中，该基因包含多个恒定区和可变区，恒定区序列在所有细菌间无显著差异，可变区序列具有种的特异性。为探究BPA对细菌群落多样的影响，利用16SrDNA基因的“恒定区”序列设计引物，PCR扩增16SrDNA片段，电泳结果如图2。如图A、B、C条带是各处理所共有的，说明各处理土壤中具有相同的细菌种类。不同浓度BPA处理出现了特有条带，如d，e，f，g和h条带，说明_____________。且共有条带中宽度不同（如C），可推测不同浓度BPA导致不同细菌的_____________发生改变，由此推测该细菌群落在发生_____________。

(3)经过筛选，科研人员得到3株具有降解BPA能力的菌株，下列叙述哪些是正确的_____________。A．分离BPA降解菌的培养基需要以BPA为唯一碳源B．培养基中营养物质浓度越高，对微生物生长越有利C．依据菌落的形状、大小、颜色等可进行菌种的初步鉴定D．比较3株菌株降解BPA能力后，剩余菌液可直接倒掉参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、A【分析】【分析】

1.细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变；引起细胞癌变的致癌因子有物理致癌因子；化学致癌因子和病毒致癌因子。

2.细胞凋亡是指由基因所决定的自动结束生命的过程；由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程序性调控，所以也被称为编程性死亡。细胞坏死是在种种不利因素的影响下，由于细胞正常代谢活动受损或中断引起的细胞损伤和死亡。

题图分析；抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。

【详解】

A；体外培养单个浆细胞不能持续大量获得单克隆抗体；因为浆细胞没有分裂能力，A错误；

B；结合图示可知；ADC进入肿瘤细胞的方式为胞吞，B正确；

C；溶酶体是细胞中的消化车间；图中ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物，C正确；

D；根据抗体能与抗原发特异性结合的特点可推测；抗体-药物偶联物（ADC）选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点，D正确。

故选A。

【点睛】2、D【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；分析图示可知；为保证目的基因的完整性，不能选用BamHⅠ酶；为了防止目的基因自身环化，应选用目的基因两侧的两种不同的限制酶；重组质粒中至少要保留一个抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能选其中一个；综上所述，可选用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，为保留重组质粒中的复制原点，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒。

【详解】

A；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据这一特点，将目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中，A正确；

B；由分析可知；为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒，B正确；

C；由分析可知；应选用EcoRI和PstI切割质粒，氨苄青霉素抗性基因被破坏，故成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素，C正确；

D；检测目的基因是否表达应检测是否成功产生蛋白质；可用抗原-抗体杂交技术，D错误。

故选D。3、B【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2；细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上；称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

【详解】

A；细胞会贴壁生长；培养贴附性细胞时要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附，A正确；

B、需将培养细胞的松盖培养瓶置于95%空气和5%O2的混合气体培养箱中；B错误；

C；随着细胞传代次数的增多；绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，与正常细胞相比，其遗传物质已发生突变，C正确；

D；科学家培养正常或各种病变的细胞；用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据，D正确。

故选B。

【点睛】4、C【分析】【分析】

据题干分析可知；荧光积累的越快，样本中目标DNA序列越多，达到设定阈值所需的循环数越少，即Ct值越小。

【详解】

A；检测新冠病毒时；需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNA，才能被检测到，A正确；

B；PCR每个循环包括变性（解开双链）、退火（引物和模板结合）、延伸（Taq酶作用）3个阶段；B正确；

C；Ct值就越大表示被检测样本中病毒数目越少；患者危险性更低，C错误；

D；若样本被污染；RNA酶将病毒RNA降解，则逆转录无法得到相应DNA，检测结果可能为阴性，D正确。

故选C。5、A【分析】【分析】

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和其他膜结构；而DNA的提取实验需要获取较多DNA，因此一般不用哺乳动物的血（包括猪血）做实验，所以蒸馏水涨破细胞的方法不适用于猪血提取DNA。但是可以用于血红蛋白的提取。

【详解】

A；猪属于哺乳动物；其成熟的红细胞没有细胞核和其他膜结构，而DNA的提取实验需要细胞内有较多DNA，但是该细胞可以用来提取蛋白质，A错误；

B；提取DNA的方法是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。利用这一特点；选择适当的盐溶液，就能使DNA充分溶解，使杂质沉淀，或相反，用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除部分杂质，B正确；

C；提取蛋白质的方法有透析法；透析法的原理是小分子可以自由进出半透膜，蛋白质分子不能透过半透膜，C正确；

D；进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、电泳法等；D正确。

故选A。6、C【分析】【分析】

目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带；是为了检测目的基因是否导入到了受体细胞内，A错误；

B；通过观察害虫吃棉叶是否死亡；是检测抗虫基因是否在棉花细胞内表达形成了抗虫蛋白，该步骤是转基因植物的最后检测手段，不是检测抗虫基因是否在棉花体内发挥功能作用的第一步，B错误；

C；抗虫基因是否在棉花体内发挥功能作用的第一步是先转录形成抗虫基因的mRNA；检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带可判断抗虫基因是否完成了转录，C正确；

D；检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带属于检测是否形成了抗虫蛋白；不属于检测抗虫基因是否在棉花体内发挥功能作用的第一步，D错误。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)7、B:C【分析】【分析】

1；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。2、分析题图：图示为治疗性克隆的大概过程，即从患者身上提取一个体细胞核，移植到去核的卵细胞中，形成一个新细胞，经过动物细胞培养成胚胎干细胞，经过细胞分裂、分化形成组织和器官。

【详解】

A；人类“治疗性克隆”应用的主要技术有核移植、动物细胞培养；属于生物工程中的动物细胞工程，A正确；

B；由图可知；该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养，没有应用胚胎移植技术，B错误；

C；此过程没有形成完整个体；不能体现胚胎干细胞的全能性，C错误；

D；“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比；器官来自于同一个体，其优点之一是避免了免疫排斥反应，D正确。

故选BC。8、A:B:C【分析】【分析】

1.生物武器是利用生物战剂杀伤人员；牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

2.转基因生物的安全性问题包括食物安全；生物安全和环境安全。

3.“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞；肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

【详解】

A；对待生物武器的态度应明确而坚定；即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器，坚决禁止生物武器，A正确；

B；中国对于克隆人的态度是禁止生殖性克隆人；但不反对治疗性克隆，B正确；

C；对转基因植物外源DNA要进行认真选择；避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质，C正确；

D；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；要马上停止实验，并销毁重组生物，D错误。

故选ABC。9、C:D【分析】【分析】

题图分析：限制酶SalⅠ有三处切割位点；切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A错误；

B；限制酶通过作用于磷酸二酯键得到相应产物；B错误；

C；分析图1；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物，C正确；

D；用两种限制酶同时处理后进行电泳；若某些位点未被切割，则条带可多于6条，D正确。

故选CD。10、C:D【分析】【分析】

分析题干信息：该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

A；本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”；因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；

B；实验培养过程中进行振荡培养；可使目的菌和培养液充分接触，B正确；

C；为了防止污染；接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落，否则会导致高温使菌种死亡，C错误；

D；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能生长繁殖；不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种“纯化”，D错误。

故选CD。

【点睛】11、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一种个体微小结构简单；只含一种核酸(DNA或RNA)和蛋白质组成的，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞结构生物。

【详解】

A；噬菌体在细菌细胞中；没有裂解细菌，细菌繁殖导致透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，A正确；

B；噬菌体样品应有足够的稀释度；以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，会出现两个或多个噬菌体吸附同一个细菌，从而导致噬菌斑数量减少，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，B正确；

C、若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C错误；

D；若有少数活噬菌体末能侵染细菌；会导致形成噬菌斑数量减少，从而导致噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，D正确。

故选ABD。12、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时；两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化。

【详解】

A；Ⅰ阶段为脱分化；II阶段和Ⅲ阶段为再分化，Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达，A错误；

B；实验至少配制了3种不同的培养基；即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基，B错误；

C、由于参照品种B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L；C错误；

D；生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素；D正确。

故选ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。14、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。15、A:B:C【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

2；植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性；即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

【详解】

A；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出，A错误；

B；细胞代谢产物的工厂化生产利用的是细胞培养技术；原理是细胞增殖，未体现细胞的全能性，B错误；

C；相同时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉酶的催化作用需适宜的pH值；pH不适宜时，加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉，C错误；

D；精子与卵子相遇后；会发生顶体反应，释放顶体酶，透明带反应和卵黄膜封闭作用是阻止其他精子入卵的两道屏障，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，D正确。

故选ABC。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代21、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、判断题(共3题，共6分)22、B【分析】【详解】

动物细胞核移植技术体现了动物细胞核的全能性，不能体现动物细胞的全能性，高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，故错误。23、A【分析】【详解】

雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，精子获能的过程不是获得能量的过程，是获得受精能力的过程，可在获能液或受精液中完成，故正确。24、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。五、实验题(共1题，共5分)25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是显微注射法。

（3）上述建构好的表达载体含有能够表达β-萄糖苷酶(BglB)的基因；转基因大肠杆菌能够分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能够降解纤维素。

（4）蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA连接酶显微注射法。

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列六、综合题(共3题，共21分)26、略

【分析】【分析】

1；微生物培养的关键是无菌操作；微生物培养过程中除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，需对培养基和培养皿进行消毒，可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数。

2；刚果红可以与纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌；刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入，若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。

(1)

实验室中分离纯化微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法；故平板划线法能用于实验室中分离纯化微生物。

(2)

稀释涂布平板法中；培养基位于培养皿中，无菌水用于稀释，涂布在酒精灯火焰旁进行，以免杂菌污染，所以该过程不需要使用显微镜。故选③。

(3)

在涂布平板时；滴加到培养基表面的菌悬液量过多会在培养基表面出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，所以不能过多。

(4)

微生物培养的关键是避免杂菌污染；故分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净以防止杂菌污染。

(5)

在刚果红培养基平板上；筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈