2025年新科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的“产品”；没有“父母”，这可能导致他们在心理上受到伤害。

②生殖性克隆技术可能带有一定的致癌风险。

③由于技术问题；可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人。

④克隆人的家庭地位难以认定；可能使以血缘为纽带的父子；兄弟和姐妹等人伦关系消亡。

⑤生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻；家庭和两性关系的伦理道德观念。

⑥克隆人作为一项科学研究属于中性的；但可能带来严重的基因歧视。

⑦生殖性克隆人是对人类尊严的侵犯⑧生殖性克隆人破坏了人类基因多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化A.①②③④⑤⑥B.①③④⑤⑦⑧C.①②③⑤⑦⑧D.①④⑤⑥⑦⑧2、下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是（）

A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B.②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成C.③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群3、据报道；某科学实验室运用克隆技术，成功培育克隆猪，其流程如图所示，下列有关叙述错误的是（）

A.过程①中培养的细胞会出现贴壁生长和接触抑制等现象B.过程②与过程③所用的培养液成分相似且一般都含有血清C.过程④代表胚胎移植，常选择囊胚或原肠胚作为移植对象D.过程④常用激素处理代孕猪，使其处于易接受外来胚胎的生理状态4、为拓宽白菜育种的基因资源，改良白菜品质，研究人员以白菜（2n＝20，AA）和甘蓝（2n＝18，CC）为材料进行植物体细胞杂交，得到杂种植物。对两种亲本和某融合植株进行细胞DNA含量检测，结果如图。下列说法正确的是（）

A.白菜的DNA相对含量较少说明其基因数量比甘蓝少B.操作中只能用PEG诱导原生质体融合C.该技术需要再生细胞壁后才能进行植物组织培养D.检测结果说明待检测植株为白菜—甘蓝杂种植株5、下面的资料表明在各种培养基中细菌的生长状况（S、C、M为简单培养基；U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质），据表推测细菌自身不能合成的物质是（说明：“+”表示能正常生长，“-”表示不能生长）。（）。培养基生长状态S、C、M-S、C、M，+V+Z-S、C、M，+U+Y+S、C、M，+Z+X-S、C、M，+V+Y+S、C、M，+U+X-S、C、M，+Y+Z+

A.UB.VC.YD.Z6、精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，待培养至菌落不再增加时，将甲中菌落转移到乙培养基中继续培养得到如图所示的结果。下列相关叙述错误的是（）

A.野生型菌液的培养皿中不会出现菌落B.乙培养基与甲相比可能缺少了精氨酸C.紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生可遗传变异D.乙中的菌落是通过影印法接种获得的，菌落A为鸟氨酸发酵的优良菌种7、动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（）A.CO2培养箱中95%的氧气可保证细胞进行正常呼吸B.原代培养的贴壁细胞需经胰蛋白酶处理后再进行传代培养C.传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞发生分化所致D.对杂交瘤细胞进行克隆培养即可获得所需的单克隆抗体评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)8、下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是（）A.制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用B.单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高C.工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得D.单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的9、PCR可以特异性地快速扩增目的基因，成功的扩增应该产生与目的基因大小一致的扩增产物，不严谨的操作会导致无扩增产物或出现非目的基因扩增产物。下列说法正确的是（）A.若PCR反应缓冲溶液中未加入Mg2+，则结果可能不会出现扩增产物B.若模板DNA中含有抑制耐高温的DNA聚合酶活性的杂蛋白，则结果可能不会出现扩增产物C.若引物与非目的序列发生碱基互补配对，则结果可能会出现非目的序列扩增产物D.若引物间发生碱基互补配对，则结果可能会出现非目的序列扩增产物10、农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环；并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是（）

A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置11、猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白；对于病毒入侵细胞至关重要。研究人员利用E2蛋白来制备抗CSFV单克隆抗体的过程如图。下列叙述错误的是（）

A.注射E2蛋白后，从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞均能产生E2蛋白抗体B.过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法，得到的③不一定是杂交瘤细胞C.细胞③经一次筛选即可得到足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞D.此过程生产的单克隆抗体既可用于CSFV的检测，也可用于该种猪瘟的治疗12、体细胞核移植胚胎组的蛋白甲基化可导致克隆效率降低；毛壳素是组蛋白H3K9甲基化转移酶SUV39H1/2的特异性化学抑制剂，使用毛壳素处理供体细胞，可降低SUV39H1/2在供体细胞和核移植胚胎中的表达水平，提高猪胚胎的发育率，如图是利用不同浓度毛壳素处理对猪胚胎细胞核移植技术成功率的实验流程示意图，下列叙述正确的是（）

A.克隆猪的遗传物质来自供体细胞和代孕母猪B.过程①使用的培养液需添加动物血清或血浆C.过程④采用灭活的病毒处理以促进精卵结合D.过程⑤成功与否与代孕母猪的生理状态有关13、据人民网报道，“一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿于2018年11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿”。下列有关说法不正确的是（）A.基因编辑制造人类的行为是符合伦理道德的B.基因编辑技术，可改变人类进化的速度和方向，有利于人类的进化C.通过基因编辑技术改变了人类的遗传物质，使人类进化成新物种D.基因编辑技术可用于疾病预防领域研究，但不能用于编辑婴儿14、如图为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置示意图。下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（）

A.果酒发酵时，图中装置应用70%的乙醇消毒和用洗洁精洗涤B.用该装置进行果酒发酵时，需要维持阀a、b的开放状态C.利用该装置进行果醋发酵，发酵温度需要维持在30～35℃D.果酒、果醋发酵所用的菌种细胞内均含有多种细胞器15、通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列叙述正确的是（）

A.引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体B.PCR的过程主要包括变性→延伸→复性（退火），温度逐渐降低C.第3轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因D.每一轮PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、一般包括______、______等技术17、获取目的基因的方法______、______、______18、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。19、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。20、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。21、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)22、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共27分)23、鼠伤寒沙门氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培养基（含微量组氨酸）上生长形成菌落，而突变型的组氨酸营养缺陷型菌株（his-）不能合成组氨酸；无法在基本培养基上形成菌落。利用his菌株可检测环境或食品中是否存在化学致癌剂（诱发his-菌株突变）。回答下列问题：

(1).基本培养基的成分主要包括_____。制备基本固体培养基的操作：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时应注意：_____。

(2).检测是否存在化学致癌剂时，用_____法将his-菌株接种于基本培养基上，使其密集均匀分布在平板上，将浸泡过待测化合物的滤纸片贴于平板中央。若培养基灭菌合格，则可能影响该检测结果的两个重要因素是_____。若图A为对照组，B为实验组，则A组滤纸片的处理方法是_____。经正确检验后，结果如B所示，则实验结果和结论为_____。

(3).使用过的培养基在丢弃之前应做的处理及目的是_____。24、下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图；请据图回答：

（1）泡菜是乳酸菌发酵的产物，乳酸菌的代谢类型是___________________。制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是____________________________。

（2）将盐与清水按照一定的比例配制盐水，待盐水煮沸冷却后，注入装好原料的泡菜坛中，同时加入一定量的“老汁”(陈泡菜水)。将盐水煮沸冷却的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法是_________________。即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与____________________________发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成_______________色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的____________进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。25、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。评卷人得分六、综合题(共3题，共6分)26、GDNF是一种神经营养因子；对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：

（1）基因表达载体除了目的基因外，还必须有启动子、_____以及_____等。启动子是RNA聚合酶_____的部位；有了它才能驱动基因转录出mRNA。

（2）一般将GDNF基因的表达载体导入大鼠神经干细胞的方法是_____。

（3）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的_____限制酶进行酶切。

（4）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种，单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第_____泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。如果换用HPaⅠ酶和XhoI酶进行双酶切，能否鉴定出载体与目的基因是正向连接还是反向连接，_____（填“能”或“否”），用这两种酶切的结果中DNA片段最长的是_____，最短的是_____。

（5）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的_____与提取的蛋白质杂交。检测目的基因是否转录出mRNA的方法（技术）是_____。27、动物细胞的培养传代比较困难；为长期保存动物的基因组，一般利用大肠杆菌构建基因组文库，具体流程如下图所示。回答下列问题：

(1)为保证载体和基因组DNA片段能够连接，载体要先用__________（酶）处理。将基因组DNA导入大肠杆菌菌群前，大肠杆菌需要提前用__________处理；使其处于感受态。

(2)研究者需要从基因组文库中获取动物细胞的Y基因进行实验。利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有______和4种脱氧核苷酸，该技术依据的生物学原理是______。

(3)甲链为Y基因的转录模板链，乙链为甲链的互补链。转化之后，为了判断Y基因是否进入受体细胞，可以用__________。链片段作为探针；为判断目的基因是否成功转录，可以用__________链片段作为探针。28、戴口罩；勤洗手是预防新型冠状病毒（COVID-19）的有效措施。某公司在防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了凝胶洗手前后，手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。请根据上表实验回答下列问题：

实验组别对照设置接种处理数据统计，求平均值A不洗手按上述实验步骤处理；每组设置3个平板。

B用水吸收C有洗手凝胶洗手D空白不接种

(1)人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质称为________，虽然它的配方不同，但一般都含有水、碳源、__________和无机盐。如果培养乳酸杆菌，还需要在其中添加___________。

(2)在实验中，需要对图中培养皿进行灭菌，常用的方法是___________。

(3)表格实验步骤中添加D组的目的是____________________。

(4)如果想了解手部是否有大肠杆菌，可以在培养基中加入一定量的_____染料；观察菌落的特点。

(5)新型冠状病毒不能用基本培养基培养，原因是__________________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

1；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

2；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的“产品”；没有“父母”，这可能导致他们在心理上受到伤害，①符合题意；

②生殖性克隆人不会带有致癌风险；②不符合题意；

③由于技术问题；可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人，③符合题意；

④克隆人的家庭地位难以认定；可能使以血缘为纽带的父子；兄弟和姐妹等人伦关系消亡，④符合题意；

⑤生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻；家庭和两性关系的伦理道德观念；⑤符合题意；

⑥生殖性克隆人不涉及转基因技术；因此不存在基因歧视，⑥不符合题意；

⑦生殖性克隆人是对人类尊严的侵犯；⑦符合题意；

⑧生殖性克隆人破坏了人类基因多样性的天然属性；不利于人类的生存和进化，⑧符合题意。

故选B。

【点睛】

2、D【分析】【分析】

1；杂交瘤技术的目的是制备对抗原有特异性的单克隆抗体；所以融合一方必须是经过抗原刺激产生的效应B淋巴细胞（浆细胞）。

2；使用细胞融合剂造成细胞膜一定程度的损伤；使细胞易于相互粘连而融合在一起。最佳的融合效果应是最低程度的细胞损伤而又产生最高频率的融合。聚乙二醇是目前最常用的细胞融合剂。

3；细胞融合是一个随机的物理过程；在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬液中，经融合后细胞将以多种形式出现。如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。

【详解】

A；①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞；A错误；

B；在动物细胞融合的过程中；可用物理法、化学法和生物法诱导细胞融合，而胰蛋白酶是在动物细胞培养过程用于分离细胞的，B错误；

C；杂交瘤细胞同时具有效应B细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性；C错误；

D；④表示用选择培养基筛选出的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群；D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

1；核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中；所以实验前要去除卵母细胞的细胞核。基因表达的产物是蛋白质，所以提取小鼠骨髓细胞的蛋白质进行抗原-抗体杂交。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。

【详解】

A；过程①培养猪的体细胞时；会出现贴壁生长和接触抑制的现象，A正确；

B；过程②动物细胞培养与过程③早期胚胎培养所用的培养液成分相似且一般都含有血清；B正确；

C；过程④代表胚胎移植；一般选择囊胚或桑椹胚的胚胎作为移植对象，C错误；

D；通常用激素处理代孕母猪和供体母猪；对他们进行同期发情处理，故过程④常用激素处理代孕猪，使其处于易接受外来胚胎的生理状态，D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交过程：酶解法去壁获取原生质体→人工诱导原生质体融合→再生出新细胞壁；标志着原生质体融合完成→经脱分化和再分化过程，通过组织培养把杂种细胞培育成杂种植株。

【详解】

A；基因是具有遗传效应的DNA片段；白菜的DNA相对含量较少，不一定其基因数量比甘蓝少，A错误；

B；诱导原生质体融合可以用化学方法PEG诱导；也可以用物理方法如离心法，B错误；

C；原生质体融合成功的标志是再生出新的细胞壁；故该技术需要再生细胞壁后才能进行植物组织培养得到完整植株，C正确；

D；据图可知；白菜DNA相对含量约为50，甘蓝DNA相对含量约为75，检测结果DNA相对含量为＞150，说明待检测植株不是白菜—甘蓝杂种植株，可能为甘蓝-甘蓝杂合植株，D错误。

故选C。5、C【分析】【分析】

培养基是按照微生物的生长需要；用人工方法配制而成的营养物，其中有些是各种微生物都必需的，大多数情况下微生物特殊营养要求配制的培养基，称选择培养基。

【详解】

分析表格可知；U；V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质，凡添加了物质Y的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质Y是细菌不能合成的。

故选C。6、D【分析】【分析】

由图分析可知；图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在含精氨酸的培养基上，②表示继续培养在缺乏精氨酸的培养基上，图甲中有A；B两种菌落，图乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株。

【详解】

A；液体培养基只是用作细菌的快速大量繁殖；如果需要形成菌落，那么应该接种在固定培养基上，因此野生型菌液的培养皿中不会出现菌落，A正确；

B；图甲平板上有A、B两种菌落；乙平板上只有A菌落，据此推测A菌落可能是野生型谷氨酸棒状杆菌，B菌落是精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌，乙培养基中可能缺少精氨酸，B正确；

C；紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变；为可遗传变异，C正确；

D；乙中的菌落是在甲的基础上采用影印法接种培养后得到的结果；由图可知，菌落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D错误。

故选D。7、B【分析】【分析】

动物细胞培养的条件。

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；定期更换培养液；以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）适宜的温度和pH。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A、CO2培养箱中的混合气体是95%的空气和5%的CO2（维持pH）；A错误；

B；原代培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制；从而保证细胞的增殖过程，B正确；

C；正常细胞的细胞分裂次数是有限的；据此可知，传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞衰老或遗传物质发生改变所致，C错误；

D；对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测；将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞再在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中获得所需的单克隆抗体，D错误。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)8、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。9、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术扩增目的基因。

（1）原理：DNA双链复制。

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃；引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

【详解】

A、Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大；浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带，A正确；

B；若模板DNA中含有抑制耐高温的DNA聚合酶活性的杂蛋白；则可能会抑制PCR反应中的延伸步骤，导致结果不会出现扩增产物，B正确；

C；若引物与非目的序列发生碱基互补配对；则会使引物与模板结合位置错误，导致扩增片段错误出现非目的序列扩增产物，C正确；

D；若引物间发生碱基互补配对；则结果可能不出现扩增产物或产物减少，D错误。

故选ABC。10、A:D【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理；A正确；

B；进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B错误；

C；DNA的两条链反向平行；子链从引物的3′端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误；

D；通过与受体细胞的基因组序列比对；即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选AD。

【点睛】11、A:C【分析】【分析】

将浆细胞和骨髓瘤细胞融合；经筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞进行体内或体外培养，获得大量的特异性抗体的技术，称为单克隆抗体的制备。

【详解】

A；注射E2蛋白后；从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞有多种，不一定能产生E2蛋白抗体，A错误；

B；过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法；得到的③可能是杂交瘤细胞，或者是融合的B细胞或是融合的骨髓瘤细胞，B正确；

C；细胞③要进行克隆化培养和抗体检测；经过多次筛选，才可获得足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞，C错误；

D；猪瘟病毒（CSFV）的检测采用抗原-抗体杂交技术；抗CSFV的单克隆抗体能与猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白结合，故此过程生产的单克隆抗体可用于CSFV的检测，D正确。

故选AC。12、B:D【分析】【分析】

细胞核移植是指通过显微操作将一个细胞的细胞核移植到一个去核的卵母细胞内的技术过程。体细胞核移植技术包括核供体细胞与受体细胞的准备；细胞核移植、重构胚的融合、激活、培养和移植等过程。

【详解】

A；克隆猪的细胞核遗传物质来自提供细胞核的胎猪成纤维细胞；克隆猪的细胞质遗传物质来自去核的卵母细胞，A错误；

B；过程①不仅需要在培养液中添加毛壳素；还需要在培养液中添加动物血清或者血浆，提供一个类似生物体内的环境，B正确；

C；过程④使用显微操作技术使胎猪成纤维细胞与去核卵母细胞融合；C错误；

D；过程⑤是胚胎移植；胚胎移植时供体与受体的生理状态要相同，否则无法成功妊娠，D正确。

故选BD。13、A:B:C【分析】【分析】

基因编辑技术属于基因工程；而对于人体胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有对于人体的操作都应经过安全性审查，要符合伦理道德；但用于疾病预防领域的研究又具有进步意义。

【详解】

A；基因编辑制造人类的行为不符合伦理道德；A错误；

B；基因编辑技术；只是对个别人个别基因进行编辑，不一定改变人类进化的速度和方向，B错误；

C；基因编辑技术改变了人类的遗传物质；但并没有出现生殖隔离，即没有形成新物种，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；具有进步意义，但不能用于编辑婴儿，D正确。

故选ABC。14、A:C【分析】【分析】

1.果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一种好氧细菌；只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。

【详解】

A；果酒发酵时；为了避免杂菌污染，图中装置应用70%的乙醇消毒和用洗洁精洗涤，A正确；

B、用该装置进行果酒发酵时，需要先维持阀a，b的开放状态，此后阀a、阀b，发酵过程中定时打开阀b排气；B错误；

C；利用该装置进行果醋发酵；发酵温度需要维持在30～35℃，因为醋酸菌适宜的发酵温度是30～35℃，另外还需要通入无菌空气，保证醋酸菌代谢的需要，C正确；

D；果酒发酵的就菌种是酵母菌；酵母菌是真核生物，细胞中含有多种细胞器，果醋发酵的菌种是醋酸菌，醋酸菌是原核生物，细胞中只有核糖体这一种细胞器，D错误。

故选AC。15、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA双链复制；步骤包括高温变性；复性、延伸。该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。根据图中可得，由于引物的一个碱基在不影响与模板链整体配对的前提下不与目的基因配对，再利用PCR技术实现了目的基因的定点诱变。其技术原理是碱基互补配对原则。

【详解】

A；引物中设计两种限制酶识别位点；可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，A正确；

B；在PCR反应过程中变性大约94℃→复性大约55℃→延伸大约72℃；B错误；

C；第3轮PCR中；物质②是引物2以引物1拓展得到的DNA链为模板进行复制得到的，故引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因，C正确；

D；PCR一次大概有30个循环；每一轮PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期补充，D错误。

故选AC。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺20、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复21、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共1题，共8分)22、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。五、实验题(共3题，共27分)23、略

【分析】【分析】

培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节pH→分装→灭菌→倒平板→（冷却后）倒置平板。微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分离纯化。具体来说，就是在无菌条件下，用接种环或接种针等专用工具，从一个培养皿（上面可能存在各种杂菌落）挑取所需的微生物，转接到另一个培养基中进行培养的方法。【小问1】

培养基的组成成分包括碳源；氮源、水、无机盐、生长因子等。倒平板时；应待培养基冷却到50℃左右倒平板，平板冷凝后要将平板倒置，倒平板过程中应在酒精灯火焰附近进行，以防止杂菌污染。【小问2】

题干中表明菌体密集均匀分布在平板上；所以是稀释涂布平板法接种。培养基灭菌合格，影响因素应为除培养基灭菌以外可能的影响因素，因此，可能操作过程中是否无菌操作，以及使用的滤纸条是否灭菌合格等。A为对照组，应除自变量以外，其他条件都相同，因此，处理方法为浸泡在无菌水中处理后贴于平板中央；实验中能观察到出现野生型菌株菌落，说明环境中存在化学致癌剂导致突变型菌株突变成野生型菌株。【小问3】

使用过的培养基应灭菌后再丢弃；以防止培养基中的有害物质污染环境或感染实验操作者。

【点睛】

本题考查培养基的成分、制备过程以及微生物的接种方法等相关知识，意在考查考生对所学知识的识记和理解能力。【解析】【小题1】①.碳源；氮源、水和无机盐②.待培养基冷却至50℃左右时；在酒精灯火焰旁附近倒平板。

【小题2】①.稀释涂布平板②.滤纸片是否灭菌彻底和待测化合物是否含有杂菌③.（滤纸片）用无菌水浸泡④.his-菌株在培养基上突变为his+菌株；说明待测化合物中存在致癌剂（或待测化合物中存在化学诱变剂，这些化学物质具有致癌性，叙述合理即可）

【小题3】灭菌，避免对环境造成污染24、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2；泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水；将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。

3；泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定；即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

（1）

乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料；这是因为新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低。

（2）

将盐水煮沸冷却的目的是煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）

测定亚硝酸盐含量的方法是比色法。即在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成玫瑰红色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。

【点睛】

本题考查制作泡菜，要求考生识记制作泡菜的原理和过程，理解用比色法测定亚硝酸盐的含量，意在考查考生的识记能力和分析能力。【解析】（1）异养厌氧型亚硝酸盐的含量低。

（2）煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）比色法对氨基苯磺酸玫瑰红标准显色液25、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌六、综合题(共3题，共6分)26、略

【分析】【分析】

由图可知，载体上有HpaI酶切位点，无BamHI酶切位点，则载体自连情况下电泳得到的条带只有一条，且分子量为6000bp，即①；基因与载体正向连接或反向连接的情况下，都有BamHI和HpaI两个酶切位点，经酶切可产生两条链，且正向连接时，HpaI和BamHI之间有700bp，反向连接时HpaI和BamHI之间有200bp，则载体正向连接后产生一个700bp和一个6000bp的条带；即②。

（1）

基因表达载体除了目的基因外；还必须有启动子；终止子以及标记基因（便于目的基因的筛选和鉴定）等。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，有了终止子才能在合适的位置终止基因的转录，确保基因的正确表达。

（2）

大鼠神经干细胞是动物细胞；一般将GDNF基因的表达载体导入大鼠神经干细胞的方法是显微注射法