2025年华东师大版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.①过程的完成需要逆转录酶B.②过程需用限制性核酸内切酶C.目前获取目的基因的方法只有，上图所示的两种D.cDNA的构建需要提前了解目的基因的有关信息4、以下有关蛋白质工程的叙述，错误的是（）A.蛋白质工程发展的基础是基因工程B.蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现5、“胡萝卜—羊角芹”是科学家用植物细胞工程方法培育出的蔬菜新品种；培育过程如图所示，下列说法正确的是（）

A.过程①也可用蜗牛消化道提取液实现B.过程②常用的方法有PEG融合法、电融合和灭活病毒诱导法等C.过程④为脱分化，需要在一定的光照条件下进行D.过程⑤为再分化，培养基中生长素浓度大于细胞分裂素6、某生物兴趣小组尝试对土壤中分解尿素的细菌进行分离并计数，相关叙述正确的是（）A.制备选择培养基时，需加入尿素、琼脂、葡萄糖、硝酸盐等物质B.用活菌计数法统计结果，活菌的实际数目往往比统计的菌落数低C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红D.每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M，C为某一稀释度下平板上的平均菌落数7、云南农业大学研究人员培育出10头猪蹄发荧光的转基因猪。主要研究过程是①将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因导入猪胎儿成纤维细胞；②将转基因的成纤维细胞核移植到去核的猪卵母细胞，并培育形成早期胚胎；③将胚胎移植到代孕母猪体内，最终获得转基因猪。在这一过程中不必进行的是（）A.将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因拼接，并构建基因表达载体B.培养并筛选处于减数第二次分裂中期的猪次级卵母细胞C.筛选出转基因猪胎儿成纤维细胞和转基因克隆胚胎D.给代孕母猪注射环孢霉素A（免疫抑制剂）阻止T细胞增殖，以利于代孕母猪接受胚胎8、下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，不正确的是（）A.可选择香蕉、菜花、猪血等新鲜材料提取DNAB.加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNAC.提取的DNA可溶解在2mol/L的NaCl溶液中D.使用二苯胺试剂鉴定DNA时需要沸水浴加热9、如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图；下列相关叙述错误的是（）

A.干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等B.诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性C.除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞D.将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、表中生物工程实验选择的材料与实验目的搭配合理的是（）

。组别实验目的实验材料材料特点A获得生产人生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁将相应产物排出体外B获得脱毒苗茎尖分生区附近病毒极少，甚至不含病毒C获得植物突变体愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变D胚胎干细胞培养囊胚内细胞团能分化形成各种组织和器官A.AB.BC.CD.D11、下列关于基因工程中的基本工具的说法中，正确的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶和DNA连接酶B.DNA连接酶可将任意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C.质粒上必须有标记基因才可作为载体D.限制性内切核酸酶一般不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子12、哺乳动物的造血干细胞具有以下哪些性质？（）A.分化为骨骼肌细胞B.分化为红细胞C.分化为嗜中性粒细胞D.分化为神经细胞13、农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环；并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是（）

A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置14、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类；研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲；乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）

A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选15、在进行拟矮牵牛和矮牵牛的种间原生质体融合时，利用亲本材料对药物抗性的差异来选择杂种细胞的过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长B.同一株植物的不同细胞经离体培养获得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合过程一定要在无菌水中进行，防止杂菌污染D.通过③得到的愈伤组织等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子16、在新冠病毒的核酸检测过程中采用的逆转录PCR（RT—PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的广泛应用。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，进而获得检测的目的基因S。下列关于RT-PCR的叙述错误的是（）A.RT-PCR所用的酶包括逆转录酶和热稳定RNA聚合酶B.RT-PCR所用的两引物序列不同，两者间可进行互补配对C.RT-PCR过程中需添加ATP，反应过程中会有磷酸键断裂D.至少经过2次循环，方可获取与目的基因等长的DNA单链17、下列关于“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术及安全伦理的叙述，错误的是（）A.“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理都是无性生殖B.“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术对人类的作用是相同的C.“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后植入母体孕育D.不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)18、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。19、动物基因工程：______。20、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。21、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。22、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。23、我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家。我国政府对生物武器的态度是什么？我们为什么认同这种态度？__________24、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)25、理性看待转基因技术，就是听之任之，不管不问（______）A.正确B.错误26、通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，该技术的成功率已经很高。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误27、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，体现了动物细胞的全能性。（选择性必修3P52）()A.正确B.错误28、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共40分)29、在酿酒；酿醋、制作腐乳、酸奶过程中都要涉及各种微生物；请回答下列问题。

（1）酿酒利用的微生物是酵母菌，制作过程中，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，然后再进行酒精发酵，检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成________________色。如果葡萄酒酿造过程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸发酵时温度一般应控制为_______________。

（3）在臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是________________，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的______________________。

（4）民间制作腐乳时，豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐、酒，若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现什么现象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封坛的作用是__________________________，欲检测泡菜在腌制过程中产生的亚硝酸盐含量，使用检测试剂后颜色变为_____________。30、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。31、佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施之一。使用过的口罩；如果没有妥善处理会对生态环境造成巨大威胁。某科研团队欲从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌。请回答下列问题：

(1)该科研团队设计了一个对照实验；请将以下实验步骤补充完整：

①采集来自不同环境的等量土壤，编号为A、B、C、D。将同型号等量的一次性口罩经___________处理后埋入各组土壤中。

②在相同且适宜条件下培养一段时间后；观察各组中口罩的腐烂程度。

③从口罩腐烂程度_________的一组上采集细菌样品。

(2)分离纯化目的菌时，培养基以______________作为唯一的碳源。这样的培养基按功能划分，属于_________培养基，其含义是指______________。

(3)若需进一步对土样中的细菌计数，上图所示微生物接种的方法是_____________，在3个平板上分别滴加0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是65、66和67，则1g土壤中的活菌数约为__________个。该方法所得测量值一般比实际值偏低的原因是________________________。32、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。评卷人得分六、综合题(共2题，共12分)33、有些细菌可分解原油；从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__________培养基。

（2）纯化菌种前需要对培养基灭菌，常用的灭菌方法是__________。

（3）为了得到单菌落并统计数量，采用的接种方法是_____________，统计到的菌落数比实际值偏______，因为____________________________。若统计出在稀释倍数为105的平板上菌落数目分别是193、202、199、29，涂布时所用的稀释液体积为0.1mL，则每毫升样品中的细菌数为_____________。

（4）为了筛选出高效分解原油的菌株，应该选择_____________。34、精子与卵子的发生。

（1）精子的发生：精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂；变形过程中，细胞核为精子头的主要部分，_____发育为______，______演变为精子的_____，______在尾基部形成线粒体鞘膜，其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。[______为精子运动提供能量]

（2）卵子的发生：卵原细胞演变成初级卵母细胞[被卵泡细胞包围]，减一分裂在_____，形成次级卵母细胞和第一极体进入______准备受精；减二分裂是在_____中完成的。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

胚胎干细胞：（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来；（2）胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。（3）胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合症；还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小、核大、核仁明显、蛋白质合成旺盛等特点，A正确；

B；哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；除了可以来自内细胞团外，还可来自原始的性腺，B正确；

C；胚胎干细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中可以增殖而维持不分化的状态；C正确；

D；胚胎干细胞的胰岛素基因不表达；若用胰岛素基因作探针对胚胎干细胞的mRNA进行检测，不能形成杂交带，D错误。

故选D。2、B【分析】【分析】

1；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。克隆动物的细胞核来自供体，其染色体和供体的一致。

2；获取克隆猴过程：将供体细胞核移入去除核的卵母细胞中；诱导融合成重组细胞，诱导发育形成早期胚胎，将早期胚胎移入代孕母猴子宫中继续发育，获得克隆猴。

【详解】

A；动物克隆过程涉及到核移植技术、早期胚胎培养技术以及胚胎移植技术；A正确；

B；克隆猴的核遗传物质由核供体细胞提供；但细胞质中的遗传物质由去核卵母细胞提供，故克隆猴体细胞中的遗传物质与核供体的遗传物质大部分相同，B错误；

C；哺乳动物雌雄个体的体细胞中；细胞核内常染色体的数目是相同的，性染色体组合是不同的，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，则得到的克隆动物的体细胞中常染色体的数目相同，C正确；

D；哺乳动物雌雄个体的体细胞中；细胞核内常染色体的数目是相同的，性染色体组合是不同的，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，则得到的两个克隆动物体细胞的性染色体组合不同，D正确。

故选B。

【点睛】

本题考查动物细胞的核移植技术等相关内容，意在考查学生识记和理解能力，难度不大。3、C【分析】【分析】

题图分析；图中显示了两种获取目的基因的方法。图中①表示逆转录过程，②表示用限制酶切割DNA分子得到一定大小范围DNA，③表示获取目的基因。

【详解】

A；①为逆转录过程；完成该过程需要逆转录酶，A正确；

B；②表示将DNA分子切割；因此需用限制性核酸内切酶，B正确；

C；目前获取目的基因的方法除了从基因文库中获取外；还可利用PCR技术扩增和人工化学合成，C错误；

D；cDNA的构建需要首先获得相应的mRNA；因此，cDNA的构建需要提前了解目的基因的有关信息，D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程．蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。

【详解】

A；蛋白质工程是在基因工程的基础上；延伸出来的第二代基因工程，A正确；

B；蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程；B正确；

C；对蛋白质的改造是通过直接改造相应的基因来实现的；C错误；

D、蛋白质工程可以通过改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性，如在T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性；D正确。

故选C。

【点睛】5、A【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术是指将不同种的植物体细胞；在一定的融合形成杂种细胞，并杂种细胞培养成新植物体的技术，实验流程是：①A；B两种植物细胞进行酶解法获得原生质体→②A、B原生质体融合形成杂种原生质体→③出现新细胞壁，形成杂种细胞→④脱分化→⑤再分化→杂种植物体。

【详解】

A；因蜗牛消化道提取液中；可能含有纤维素酶和果胶酶，而植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故科学家在制备植物原生质体时，有时用蜗牛消化道提取液来降解植物的细胞壁，A正确；

B；过程②为诱导原生质体融合；常用的方法包括PEG融合法、电融合，但不包括灭活的病毒诱导法，B错误；

C；过程④为脱分化；脱分化过程应在避光条件下进行，C错误；

D；过程⑤为再分化；再分化过程中应根据不同的生根或生芽需求调整生长素和细胞分裂素的比例，D错误。

故选A。6、D【分析】1；培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

2；分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌；

（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

A；分离土壤中分解尿素的细菌；培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不能加硝酸盐，否则无法起到选择出尿素分解菌的作用，A错误；

B；用活菌计数法统计结果时；有的活菌在培养过程中会死亡，而有的菌落是由多个活菌共同形成的，故活菌的实际数目往往比统计的菌落数高，B错误；

C；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH增加；加入酚红指示剂后变红，C错误；

D；每克样品中的菌株数=（C÷V）×M；其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数，D正确。

故选D。7、D【分析】根据题干信息分析可知；转基因猪的培育涉及到基因工程技术；核移植技术、胚胎移植技术等，回忆这些技术的过程、原理、结果等，据此分析答题。

【详解】

A；一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。题干中瘦素基因是目的基因；绿色荧光蛋白基因是标记基因，需要用DNA连接酶将两者连接起来构建基因表达载体，A正确；

B；胚胎工程中受体细胞要用处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞；B正确；

C；该转基因猪的培育需要筛选出转基因猪胎儿成纤维细胞和转基因克隆胚胎；C正确；

D；胚胎移植过程中需对供、受体进行同期发情处理；处理后的受体对移入的胚胎基本上不发生免疫排斥反应，所以不需要注射环孢霉素A阻止T细胞的增殖，D错误。

故选D。8、A【分析】【分析】

DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：

①DNA的溶解性；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；

②DNA不溶于酒精溶液；细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；

③DNA对于酶；高温和洗涤剂的耐受性；蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；

④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。

【详解】

A；哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核；没有DNA，因此不能作为提取DNA的材料，A错误；

B；DNA不溶于95%的冷酒精；加入预冷的酒精溶液后析出的丝状物是DNA，B正确；

C；当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时；随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度增加，DNA的溶解度升高，因此提取的DNA可溶解在2mol/L的NaCl溶液中，C正确；

D；在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色；D正确。

故选A。9、B【分析】【分析】

动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞；干细胞存在于早期胚胎；骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。

【详解】

A；动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞；存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确；

B；诱导iPS细胞分化的实质是基因选择性表达的结果；B错误；

C；iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来；后来发现已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞，C正确；

D；用患者自己的体细胞通过体外诱导成胰岛细胞；并将胰岛细胞细胞移植回病人体内，由于移植的细胞是由病人自身细胞得到的，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)10、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞；具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高。

【详解】

A；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时；受体细胞是受精卵而不是乳腺细胞，因为受精卵全能性最高，A错误；

B；植物分生区附近（如茎尖）含病毒极少；甚至不舍病毒，因此可采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗，B正确；

C；愈伤组织分裂能力强；易发生突变，容易获得突变体，C正确；

D；囊胚的内细胞团细胞具有很强的分裂能力；可以用于胚胎干细胞培养，进而诱导培养成各种组织和器官，D正确。

故选BCD。11、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性内切核酸酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶；A正确；

B；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键；B错误；

C；质粒上必须有标记基因才可作为载体；便于筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；限制性内切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保护自身DNA的安全，D错误。

故选AC。

【点睛】12、B:C【分析】【分析】

该题主要考察了细胞的分化；干细胞是一类仍然保留有分裂和分化能力的细胞，其可以分为全能干细胞；多能干细胞和专能干细胞，其中造血干细胞属于多能干细胞。

【详解】

造血干细胞属于多能干细胞；其可以分化为血液中的多种细胞，例如红细胞；血小板和白细胞，白细胞包括嗜中性粒细胞，B、C正确；骨骼肌细胞不是造血干细胞分化来的，神经细胞是由神经干细胞分化而来，A、D错误；

故选BC。13、A:D【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理；A正确；

B；进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B错误；

C；DNA的两条链反向平行；子链从引物的3′端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误；

D；通过与受体细胞的基因组序列比对；即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选AD。

【点睛】14、A:D【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；平板上不含任何生长因子；若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；

B；制备平板时；先灭菌再倒平板，B错误；

C；图中菌落生活在乙丙区域之间；说明同时需要乙和丙，C错误；

D；不同菌种所需生长因子不同；可利用生长图形法筛选菌种，D正确。

故选AD。15、C:D【分析】【分析】

人工种子是以植物组织培养的胚状体；不定芽、顶芽和腋芽为原料,用人工薄膜包装而成的种子。

【详解】

A；由图可知；只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长得到杂种植物，A正确；

B；同一株植物的不同细胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型与体细胞的基因型不同，离体培养获得的再生苗基因型可能不相同，B正确；

C；②是原生质体的融合过程；原生质体放入无菌水中可能会吸水涨破，C错误；

D；通过③得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子；D错误。

故选CD。16、A:B:C【分析】【分析】

分析题干信息；在RT—PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，由此可知该过程需要逆转录酶和热稳定DNA聚合酶的催化。DNA解旋过程不需要解旋酶参与，反应过程中高温即可解旋。

【详解】

A；RT-PCR过程需要逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶；A错误；

B；引物之间不能相互配对；否则不能正常发挥作用，B错误；

C；RT-PCR过程中需添加的原料是dNTP；不需添加ATP，反应过程中会有特殊化学键断裂，C错误；

D；至少经过2次循环；方可获取与目的基因等长的DNA单链，D正确。

故选ABC。17、A:B【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；试管婴儿的培育主要采用的是体外受精、胚胎移植等技术；属于有性生殖。试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，属于有性生殖，A错误；

B；设计试管婴儿可用于疾病治疗；试管婴儿用于解决不孕不育问题，B错误；

C；“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后选择符合要求的胚胎植入母体孕育；C正确；

D；不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争；D正确。

故选AB。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)18、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质21、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间22、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖23、略

【分析】【详解】

我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家，如在抗日战争中就遭受到了日军发动的细菌战的伤害，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，因而我们深知生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】我国是一个爱好和平的国家，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为：

在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。24、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、判断题(共4题，共28分)25、B【分析】【详解】

理性看待转基因技术，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食，所以本题错误。26、B【分析】【详解】

目前；用体细胞核移植技术得到克隆动物的成功率还很低。

故错误。27、B【分析】【详解】

动物细胞核移植技术体现了动物细胞核的全能性，不能体现动物细胞的全能性，高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，故错误。28、A【分析】【详解】

胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故该表述正确。五、实验题(共4题，共40分)29、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧条件下可生产二氧化碳和水，无氧条件下可生产酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长；避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用。

（1）

检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液；在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气），所以在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸；

（2）

酵母菌的异化作用类型为兼性厌氧型；即在有氧条件下可生成水和二氧化碳，在无氧条件下生成酒精和二氧化碳；醋酸发酵的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌的最适宜温度是30-35℃，故醋酸发酵时温度一般应控制为30～35℃；

（3）

豆腐的发酵中参与的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物将豆腐中的营养基质如蛋白质、脂肪等分解；豆腐相当于培养基，能提供毛霉等菌种生长的条件；

（4）

民间制作腐乳时；豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现不足以抑制微生物的生长，导致豆腐腐败变质的现象；

（5）

泡菜的制作的菌种是乳酸菌；属于厌氧型细菌，用水封坛的作用是隔绝空气，制造无氧环境，为乳酸菌的发酵提供无氧环境；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

【点睛】

本题主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知识点，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】（1）灰绿醋酸菌是好氧型细菌；而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气）

（2）30—35℃

（3）毛霉培养基。

（4）不足以抑制微生物生长；使豆腐腐败变质。

（5）制造无氧环境玫瑰红色30、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层31、略

【分析】【分析】

筛选目的菌株的原理：在寻找目的菌株时；要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。实验室中微生物菌株的筛选，也应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌株生长的条件（营养；温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。而在筛选菌株的时候，常用到选择培养基。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

【详解】

（1）①不同类型土壤中微生物的种类和数量不同；可采集来自不同环境（不同地区）的等量土壤，编号为A；B、C、D。本实验要筛选能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌，可人为制造有利于该菌生长的环境，因此将同型号的等量一次性口罩经灭菌处理后埋入各组土壤中。

②一段时间后；观察各组中口罩的腐烂程度。

③从口罩腐烂程度最大的一组上采集细菌样品；该样品即含有较强分解口罩能力的菌体。

（2）该目的菌是能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌；因此培养基以聚丙烯纤维作为唯一的碳源。这样的培养基按功能划分，属于选择培养基，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。

（3）据图可知，上述需要对土样中的细菌计数，先将菌液梯度稀释，然后涂布在平板上，该接种的方法是稀释涂布平板法。据图可知，1g土样加入到99mL无菌水，稀释了100倍，随后取1mL的菌液分别加入9mL的无菌水，稀释10倍，因此最后被稀释了106倍，根据公式每克样品中的菌株数=（C÷V）×M=（65+66+67）÷3÷0.1×106=6.6×108个。稀释涂布平板法常用菌落数表示菌液中细胞数，当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，