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文档简介
PAGE4/41.2基因工程的基本操作程序(第1课时)【学习目标】1、简述基因工程的基本操作步骤;2、了解获取目的基因方法;3、了解基因表达载体的构建过程及基因表达载体的组成。【自主学习1】从基因文库中获取目的基因1、基因文库定义:将含有某种生物不同基因的许多,导入受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。:含有一种生物的基因2、种类:含有一种生物的基因3、如何从基因文库中得到所需要的基因?。【合作探究1】如何构建部分基因文库(cDNA文库)?【自主学习2】利用PCR技术扩增目的基因1、PCR(多聚酶链式反应):是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。2、原理:。3、反应条件:模板、、、。【合作探究2】PCR与体内DNA复制的比较PCR技术DNA复制相同点原则原料条件不同点解旋方式场所酶结果【自主学习3】基因表达载体的构建1、基因表达载体的组成(1)启动子:位于基因的,它是识别和结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。(2)终止子:位于基因的,终止。(3)标记基因:受体细胞中是否含有,从而将含有目的基因的细胞筛选出来2、目的意义:使目的基因在受体细胞中,并且给下一代;使目的基因和。【合作探究3】1、画出完整的基因表达载体2、简述构建基因表达载体的过程个切口个黏性末端重组DNA分子(重组质粒)两个切口获得目的基因处理DNA分子质粒【基础巩固】1、基因工程的操作步骤包括以下几步,正确的操作顺序是()①目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③目的基因的检测与鉴定④提取目的基因。A.④①②③B.②④①③C.③②④①D.③④①②2、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③3、如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是()A.图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠC.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构【能力提升】4、嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时,选用基因组DNA作模板。(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入和
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