2025年湘师大新版选修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘师大新版选修3生物下册月考试卷656考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列关于基因表达载体的构建，叙述正确的是A.通常需要用相同的限制酶来切目的基因和载体B.基因表达载体必须含启动子，以便驱动翻译C.将目的基因导入受体细胞是基因工程的核心D.四环素合成基因的作用是鉴定受体细胞中是否含目的基因2、水仙是传统观赏花卉，是中国十大名花之一。如图为水仙根细胞的染色体核型，下列相关分析错误的是（）

A.水仙根细胞中每个染色体组含有3条染色体B.每个染色体组中各染色体DNA的碱基序列不同C.同源染色体联会紊乱导致水仙高度不育D.可采用无性繁殖技术快速培养优良品种3、牛的雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（）A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌B.若做DNA分析鉴定性别应选用桑椹胚时期滋养层细胞C.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体D.鉴定后的雄性胚胎可直接做胚胎移植4、供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是A.防止受体牛不愿意接受胚胎B.只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育C.只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同D.同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强5、下列有关胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是A.用于移植的早期胚胎可以由重组细胞体外培养发育而来B.囊胚外表面的一层扁平细胞可以不断增殖分化发育成胎儿C.胚胎移植的受体母畜必须经过免疫检验，以防止排斥外来胚胎D.利用同一胚胎的内细胞团细胞进行核移植得到的后代性别比为1:16、下列不符合生态工程基本原理的说法是（）A.超载放牧导致草地退化，主要违背协调与平衡原理B.矿区生态环境的恢复工程中，关键是土壤微生物群的构建和植被恢复C.城市生活垃圾实现废物资源化利用依据的是物质循环再生原理D.退耕还湿地和建立自然保护区的主要目的是为了给人类提供游览胜地7、在矿区生态环境的恢复工程中，关键的措施是（）A.人工制造表土B.特殊隔离C.土壤侵蚀控制D.植被恢复评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，不正确的是A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D.利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率要低9、如图为杂交瘤细胞制备示意图。下列叙述正确的是（）

A.骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合B.骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖C.免疫B细胞的种类不唯一所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选D.筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染10、如图为某哺乳动物生殖过程示意图（b为卵子）。下列相关叙述正确的是（）

A.动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖B.动物个体②是克隆动物，其核基因来自c，而质基因来自bC.按照动物个体①的产生方式，后代的性别比例接近1∶1D.图中a、b、c三种细胞的产生方式，仅c为有丝分裂11、下列关于受精过程的叙述正确的是（）A.获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠B.受精完成的标志是雌雄原核融合为合子C.精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵D.雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂12、我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。相关叙述错误的是（）

A.科学家通过对母兔注射孕激素，进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞B.异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素C.囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织D.兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔13、下列有关胚胎工程的叙述中，错误的是（）A.早期胚胎培养需要添加氨基酸、核苷酸、维生素、激素、血清等物质B.受体对植入子宫的外来胚胎基本不会免疫排斥，为胚胎收集提供了可能C.胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺，细胞和细胞核的体积都较小D.对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团进行均等分割14、生态浮床是将水生植物植入预制好的漂浮载体种植槽内，让植物在类似无土栽培的环境下生长。植物根系自然延伸并悬浮于水体中，吸附、吸收水中的含氮、磷等的有机污染物质，使得水体中的营养物质得到转移。据此判断，下列说法正确的是（）A.生态浮床是一种在物质上自给自足的人工生态系统B.生态浮床可形成新的城市园林景观带，体现了生物多样性的直接价值C.生态浮床可促进水体中藻类的大量繁殖，改善水体环境D.生态浮床能增大水体中的溶氧量评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______16、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。17、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。18、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。19、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。20、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。21、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共35分)22、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误23、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误24、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误25、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误26、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共4题，共32分)27、长春碱在杀死癌细胞的同时对正常细胞也有较大的毒性作用。单克隆抗体可携带长春碱特异性杀伤癌细胞；单克隆抗体和长春碱连接时，长春碱的分子结构改变会降低药效，本世纪初研发的双特异性抗体(能同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体)可解决这个问题。如图是科研人员通过杂交一杂交瘤技术生产能同时识别癌抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请回答下列问题：

(1)在生物体内；抗体是由___________细胞分泌的，该细胞可以来自______________________的增殖；分化。

(2)过程①的目的是____________________________________________。过程②常用的诱导因素有_________________________________(至少答2种)。过程③在选择培养基上能生长的细胞是______________________；过程⑤给小鼠注射的是______________________。

(3)制备双特异性单克隆抗体的过程中；用到的细胞工程技术有_________________________________(答出2条)。

(4)因双特异性天然抗体和抗原的亲和力比较低，抗原抗体复合物容易解离，在实际应用时需要对抗体结构进行定向改造。若要对天然抗体的结构进行定向改造，使其能够结合一些自然界没有的蛋白质，可以使用___________技术对___________分子进行改造。28、已知细胞合成DNA有D和S两条途径；其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。

（3）②过程为________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠________内培养，体内培养与体外培养相比，其优点是____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要③过程向培养液中加入_____________，理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。29、现代生物科技在畜牧业生产中有着广泛的应用；以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程。请据图回答有关问题：

（1）为提高良种奶牛的繁殖能力，在获取卵细胞之前需用_____对奶牛进行处理使其_______

（2）“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是______，过程h常用的方法是____________。

（3）图中数字标号①代表的结构为______，A、B牛基因型是否相同？______

（4）在培育良种牛的过程中，都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的____________。30、科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS）；继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后需要配制细胞悬液，对其进行原代培养，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为_____________。此时需要用_____________处理；以便进行传代培养。

（2）为避免杂菌污染，整个过程要求在______________的环境下培养，培养的空气中通常需含5%的CO2，目的是________________________。

（3）图中重组囊胚通过_____________技术移入白鼠子宫内继续发育。在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是_________。

（4）胚胎干细胞（ES）除了从早期胚胎中分离出来还可以来自____________________，该细胞在功能上具有____________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)31、我国科学家培育抗虫棉的流程如图所示。回答下列有关问题。

（l）基因工程中用到的基本工具酶是____________________。细菌的基因能整合到棉花细胞的DNA上并在棉花细胞中表达的原因是______________________________。

（2）①过程是指____________________；该过程所依据的原理是____________________，常用于调节该过程的植物激素有________________________________________。

（3）若要检测Bt毒蛋白基因在棉花细胞中是否完全表达；在分子水平上的检测方法是_____________________。

（4）为了保持抗虫性状，可利用抗虫棉的体细胞脱分化产生愈伤组织，然后进一步制造人工种子。人工种子的结构包括____________________。32、图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程。图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702，其中tsr为硫链丝菌素抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ；BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。

表1。pIJ702pZHZ8BglⅡ5.7kb6.7kbClaⅠ5.7kb2.2kb，4.5kbPstⅠ5.7kb1.6kb，5.1kb

(1)图1中应用到的生物工程技术有()（写3个）。c分子称为()，其上的生长激素基因表达产物几乎可以作用于丁鼠的所有细胞，主要原因是这些细胞膜上具有()。

(2)若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的情况是()（不考虑基因突变）。

(3)用SacⅠ和SphⅠ同时切割大鼠生长激素基因和质粒pIJ702，获取的目的基因去置换pIJ702上0.4kb的片段，构成重组质粒pZHZ8.上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因的片段长度为()kb。参照表1数据，如果用PstⅠ和ClaⅠ同时酶切重组质粒pZHZ8，则两种酶可将pZHZ8切成()个片段。

(4)重组质粒pZHZ8上的标记基因是()，在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰()菌落。33、Anti基因是小型猪器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪；用于解决器官移植时免疫排斥的问题。

（l）可用________对reAnti基因进行扩增，在构建基因表达载体时，一般用_____种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏性末端；使得目的基因定向连接到运载体上。

（2）培育转基因猪时，使用__________技术将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。再将该转基因猪的细胞核注入____________（时期）的卵母细胞中；构建重组胚胎。

（3）胚胎培养液中除了一些无机盐和有机物外；还需要添加“两酸；两素”以及动物血清，其中的“两素”是指________________________。

（4）用_________________技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因，可推断器官表面_________（填“含有”或“不含有”）抗原，原因是_____________________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、A【分析】【分析】

构建基因表达载体是基因工程的核心步骤；该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子；基因表达载体的组成包括复制原点；启动子、目的基因、标记基因和终止子。

【详解】

A；一般情况有相同的黏性末端；目的基因和运载体才能重组，所以需要同种限制酶切割，A正确；

B；基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因；其中启动子位于目的基因的首端，是启动转录的一段DNA，所以是RNA聚合酶识别和结合的部位，B错误；

C；基因表达载体使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用；是基因工程的核心步骤，C错误；

D；抗生素抗性基因的作用是作为标记基因；用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因，D错误。

故选A。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具和操作步骤，掌握各操作步骤中的相关细节，能运用所学的知识准确判断各选项。2、A【分析】【分析】

分析题图核型分析可知：中国水仙是三倍体；含有30条染色体，细胞中有3个染色体组，据此分析作答。

【详解】

A；中国水仙是三倍体；正常体细胞中含有3个染色体组，每个染色体组含有10条染色体，A错误；

B；染色体组是控制生物生长、发育的一组非同源染色体；每个染色体组中各染色体DNA的碱基序列不同，B正确；

C；由于中国水仙是三倍体；减数分裂时同源染色体联会紊乱，不能产生正常生殖细胞，因此中国水仙高度不育，C正确；

D；利用组织培养技术；可以在短时间内大批量的培育出所需要的植物新个体，可采用无性繁殖技术快速培养优良品种，D正确。

故选A。3、C【分析】【分析】

效应B细胞能够分泌抗体；但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无线增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体；该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强；灵敏度高、可大量制备等特点。

【详解】

A；单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌产生的；A错误；

B；做性别鉴定时应选择囊胚期的滋养层细胞；B错误；

C；用H-Y抗原免疫母牛；使其体内发生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，C正确；

D；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药；则鉴定后的雌性胚胎可直接进行胚胎移植，雄性胚胎没有意义，D错误。

故选C。

【点睛】

本题主要考查单克隆抗体的制备，要求考生理解单克隆抗体制备的过程，理解乳腺生物反应器的操作过程。4、B【分析】【分析】

胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的；生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境，所以要用激素进行同期发情处理，使受体与供体的生理状态相同，保证被移植的胚胎继续正常发育。

【详解】

A、用激素进行同期发情处理的原因是为了使供受体的生理状态相同，A错误；

B、只有供、受体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育，所以要用激素进行同期发情处理，B正确；

C、同期发情处理的根本目的是保证被移植的胚胎继续正常发育，C错误；

D、同期发情不会使卵细胞和精子受精结合能力增强，D错误。

故选B。5、A【分析】用于移植的早期胚胎可以由受精卵发育而来；也可以由重组细胞体外培养发育而来，A项正确；囊胚外表面的一层扁平细胞为滋养层细胞，可以不断增殖分化发育成胎膜和胎盘，B项错误；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，故C项错误；利用同一胚胎的内细胞团细胞进行核移植，由于该胚胎的性别已经唯一，不是雄性就是雌性，因此后代性别均相同，均为雄性或雌性，D项错误。

【点睛】

本题考查了胚胎移植、胚胎发育以及细胞核移植等方面的知识，解题的关键是明确用于胚胎移植的胚胎来源不唯一，再结合选项进行相应判断。6、D【分析】【分析】

生态工程依据的基本原理：

（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复；分层分级利用；

（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；

（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；

（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然；经济、社会的整体影响；

（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系；使得能量；物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【详解】

A；超载放牧导致草地退化；主要违背协调与平衡原理，A正确；

B；土壤微生物群的构建和植被恢复是矿区生态环境的恢复工程中的关键的措施；B正确；

C；城市生活垃圾实现废物资源化利用依据的是物质循环再生原理；C正确；

D；退耕还湿地和建立自然保护区的主要目的是为了保护野生动植物；D错误。

故选D。7、D【分析】【分析】

矿区废弃地的生态恢复工程：

(1)问题：矿区土体；土壤和植被；乃至整个地区生态系统的破坏。

(2)对策：人工制造表土；多层覆盖、特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等；关键是植被恢复及其所必需的土壤微生物群落的重建。

(3)案例：赤峰市元宝山矿区生态恢复工程。

【详解】

在矿区生态环境的恢复工程中；关键的措施是植被的恢复及其所必需的土壤微生物群落的重建，D正确。

故选D。二、多选题(共7题，共14分)8、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

A.采取注射促性腺激素等方法；对良种母牛作超数排卵处理，A正确；

B.体外培养发育到桑椹胚或囊胚的胚胎进行移植；B错误；

C.受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；不需要注射免疫抑制剂，C错误；

D.利用胚胎分割技术；同卵双胎较同卵多胎成功率更高，D正确。

故选：BC。9、B:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用灭活的仙台病毒诱导融合；形成杂交瘤细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖；但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞和骨髓瘤细胞、免疫B细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B正确；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止细菌污染；D错误。

故选BC。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。10、A:B:C:D【分析】分析题；图示为哺乳动物生殖过程示意图，其中a为精子，b为卵子；c为体细胞；动物个体①的产生经过两性生殖细胞的结合，属于有性生殖；动物个体②的产生采用了核移植技术，属于无性生殖，产生的动物为克隆动物。

【详解】

A；动物个体①是体外受精而来的；产生方式属于有性生殖，动物个体②是通过核移植产生的克隆动物，产生方式是无性生殖，A正确；

B、由图可知，动物个体②的细胞核遗传物质来自c，细胞质遗传物质来自b；B正确；

C；动物个体①是体外受精而来的；产生方式属于有性生殖，因为雄性动物产生的含X染色体的精子：含Y染色体的精子=1：1，而卵细胞只有含X染色体的，故体外受精，后代的性别比例为1：1，C正确；

D、图中a和b是通过减数分裂产生的；c是体细胞，是通过有丝分裂产生的，D正确。

故选ABCD。

【点睛】11、B:C:D【分析】【分析】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

A；获能后的精子与卵子相遇后；释放顶体酶穿过放射冠进入透明带，A错误；

B；根据分析可知；受精完成的标志是雌雄原核融合为一个细胞核，形成合子，B正确；

C；受精时精子与卵细胞膜相互融合；精子的细胞核进入卵子，C正确；

D；雄原核形成的同时；卵子完成减数第二次分裂，D正确。

故选BCD。12、A:B【分析】【分析】

分析图解：异种克隆大熊猫的培育首先通过核移植技术获得重组细胞；然后经过早期胚胎培养获得异种重构囊胚，再利用胚胎移植技术将重构囊胚移植如代孕兔体内。

【详解】

A；科学家通过对母兔注射促性腺激素；进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞，A错误；

B；异种重构囊胚在体外培养时；往往需要在培养液中加入抗生素，从而保证无毒无菌环境，B错误；

C；囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成；其中滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜，内细胞团将来发育成胚胎的各种组织，C正确；

D；目前；异种重构囊胚在代孕兔的子宫内能正常着床，但是不能正常发育生产出大熊猫幼仔，很可能是代孕兔提供的营养物质不能让异种重构囊胚正常发育，D正确。

故选AB。

【点睛】13、B:C【分析】【分析】

胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的；生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术。

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。

【详解】

A；早期胚胎培养需要添加氨基酸、核苷酸、维生素、激素、血清等物质；A正确；

B；受体对植入子宫的外来胚胎基本不会免疫排斥；为胚胎移植成功提供了可能，B错误；

C；胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺；细胞体积小，细胞核的体积大，C错误；

D；对囊胚阶段的胚胎进行分割时；要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，D正确。

故选BC。14、B:D【分析】【分析】

生态浮床是指将植物种植在浮于水面的床体上；体现了群落的空间结构，可以为鸟类及鱼类提供栖息环境和食物。其处理污水具有简单有效；花费少、耗能低和无二次污染等优势。同时浮床还可以美化环境。

【详解】

A；生态浮床必须从水体中不断获取物质；自身不是一个自给自足的人工生态系统，A错误；

B；生态浮床可形成新的城市园林景观带；体现了生物多样性的直接价值，B正确；

C；生态浮床可减少水体中藻类的大量繁殖；改善水体环境，C错误；

D；生态浮床可以吸附、吸收水中的含氮、磷等的有机污染物；减少水体中藻类的大量繁殖，从而增大水体中的溶氧量，D正确。

故选BD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补18、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存19、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用20、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖21、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共35分)22、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。23、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。24、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。25、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。26、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共4题，共32分)27、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程：给小鼠注射特定的抗原→从脾脏中分离浆细胞→诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合→选择培养→杂交瘤细胞→筛选；克隆培养→特定杂交瘤细胞群→单克隆抗体。

【详解】

(1)在生物体内；抗体是由浆细胞分泌的，该细胞由B细胞；记忆细胞增殖、分化而来。

(2)过程①是小鼠注射特定的抗原；目的是使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。过程②常使用聚乙二醇(PEG)；灭活的病毒、电激等技术手段诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合。经过过程②有未融合细胞、同种融合细胞和杂交瘤细胞。因此，过程③中能在选择培养基上生长的细胞是融合的杂交瘤细胞。要获得双特异性抗体，过程⑤给小鼠注射的是一定浓度的长春碱。

(3)制备双特异性单克隆抗体的过程中；用到的细胞工程技术有动物细胞融合；动物细胞培养。

(4)因双特异性天然抗体和抗原的亲和力比较低；抗原抗体复合物容易解离，在实际应用时需要对抗体结构进行定向改造。若要对天然抗体的结构进行定向改造，使其能够结合一些自然界没有的蛋白质，可以使用蛋白质工程技术对DNA分子进行改造。

【点睛】

识记单克隆抗体的制备过程，结合题意分析解答便可。【解析】浆B细胞、记忆细胞使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞（或使小鼠产生相应的经过免疫的B淋巴细胞）聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等融合的杂交瘤细胞一定浓度的长春碱动物细胞融合、动物细胞培养蛋白质工程DNA28、略

【分析】【分析】

1；人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞发生融合后；培养皿中有3中融合细胞（人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞、杂交瘤细胞）和人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞。

2；鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞中只有D途径；杂交瘤细胞中有D和S两条途径。

【详解】

（1）生产单克隆抗体时；一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不能无限增殖。

（2）植物细胞常采用电刺激；聚乙二醇等手段进行融合；而动物细胞采用电刺激、聚乙二醇、仙台病毒等手段进行融合。因此，①过程中常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇。

（3）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入氧气维持细胞呼吸，通入CO2维持培养液的pH。

（4）杂交瘤细胞既可在体外培养；也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便。

（5）人淋巴细胞；鼠骨髓瘤细胞在培养皿中混合；加聚乙二醇促进细胞融合，培养液中的细胞有以下5种：人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞。其中，人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能无限繁殖，不久会衰老、死亡。向培养液中加入氨基嘌呤，氨基嘌呤可阻断D途径，只有D途径的鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞无法增殖，而杂交瘤细胞可利用S途径合成DNA，继续繁殖，从而分离出杂交瘤细胞。

【点睛】

掌握动物细胞培养的条件和单克隆抗体的流程，分析人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞发生融合后培养体系中细胞种类及其特点，结合题意进行解答便可。【解析】B淋巴细胞不能无限增殖聚乙二醇细胞维持培养液的pH腹腔无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便氨基嘌呤淋巴细胞中的S29、略

【分析】【分析】

由图可知，a体外受精、b早期胚胎培养；c胚胎分割、d胚胎移植、e生下A、B牛、f胚胎移植、g生下C牛、h把目的基因导入受体细胞。

【详解】

（1）为提高良种奶牛的繁殖能力；需要用促性腺激素处理使其超数排卵。

（2）由于受精卵的分化程度低；全能性高，全能性易于表达，故“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞。过程h用显微注射法把目的基因导入受精卵中。

（3）图中①表示内细胞团；会发育成胎儿的各种组织，A；B牛是经胚胎分割形成的，故基因型相同。

（4）在动物细胞培养过程中；为防止杂菌的污染而要加入一定量的抗生素。

【点睛】

动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的抗生素；避免细胞代谢产物积累对细胞产生伤害，需要定期更换培养液。【解析】促性腺激素超数排卵受精卵的全能性易于表达显微注射法内细胞团相同抗生素30、略

【分析】【分析】

1、动物细胞培养过程中，首先需要利用胰蛋白酶将细胞分散成单个的细胞，然后放入CO2培养箱中保温培养。在培养过程中细胞保持生长；分裂（繁殖）乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。

2、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

3；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序。

【详解】

（1）接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时；细胞就会停止分裂增殖的现象。实验室中常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理后分瓶继续传代培养。

（2）为避免杂菌污染，整个过程要求无菌、无毒的培养环境，培养的空气中通常需含5%的CO2；目的是维持培养基的pH。

（3）图中重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育；在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。

（4）胚胎干细胞简称ES细胞；除了从早期胚胎中分离出来还可以来自原始性腺，该细胞在功能上具有发育的全能性。

【点睛】

本题考查动物细胞培养、胚胎移植等相关知识，意在考查考生对生物学知识的理解能力和将其应用于实践的能力，熟记相关知识是解答此题的关键。【解析】①.接触抑制②.胰蛋白酶（胶原蛋白酶）③.无菌、无毒④.维持培养基的pH⑤.胚胎移植⑥.可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力⑦.原始性腺⑧.发育的全能性六、综合题(共3题，共9分)31、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原—﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）基因工程的基本工具是限制性核酸内切酶（简称限制酶）；DNA连接酶和基因运载体；其中属于工具酶的是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；生物的DNA分子都由四种脱氧核苷酸构成，具有双螺旋结构，所以异源DNA片段可以进行连接，并且生物界共用一套密码子，基因的表达机制相同，所以一种生物的基因可以在另一种生物的细胞中表达。

（2）①过程为植物的组织培养；其依据的原理是植物细胞具有全能性，该过程包括脱分化和再分化两个阶段。诱导脱分化和再分化的植物