2025年新科版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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A.纤维素酶是由多种酶组成的复合酶，其中催化纤维二糖水解的酶是C1酶和CX酶B.选择培养的培养基中，纤维素是唯一的碳源，且要持续通入无菌空气，提供充足氧气C.鉴别纤维素分解菌时，不能在长出菌落的培养基上直接滴加刚果红染液D.要长期保存菌种，可将菌液与灭菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷冻箱中保存3、下图是4种限制酶的识别序列及其酶切位点；下列叙述错误的是（）

A.不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端，有的产生平末端B.不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端C.用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子不能被酶2识别D.用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经T4DNA连接酶催化能连接形成重组DNA分子4、有关PCR技术，下列叙述不正确的是（）A.是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B.在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C.PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸D.PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸5、现有某种二倍体作物的两个纯合品种甲和乙，其中甲品种固定CO2酶的活性高于乙品种，但乙品种的抗病能力强，相关性状均由核基因控制。若要利用甲、乙品种培育出固定CO2酶活性高、抗病能力强的纯合二倍体植株，下列方案中最佳的是（）A.使两品种有性杂交获得F1，再利用单倍体育种技术获得植株后筛选B.将乙品种的抗病基因导入甲品种的卵细胞中，进行离体培养后筛选C.利用多倍体育种将品种甲和品种乙染色体加倍，进行有性杂交后筛选D.诱导两种植物的花粉融合，再经植物组织培养获得植株后筛选6、试管婴儿（test-tubebaby）是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育诞生的婴儿。自1988年3月，我国内地首例试管婴儿在北京诞生以来，该技术在我国也越来越普及。下列相关叙述正确的是（）A.从亲体取出的精子需要经过获能处理，而卵细胞无需经过处理即可完成受精B.判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志C.体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或原肠胚才可进行移植D.试管婴儿属于生殖性克隆技术，为不孕不育患者孕育新生命提供了可能7、如下图所示，a表示现代生物工程技术，b表示其结果；下面说法正确的是（）

A.如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞具有全能性B.如果a是体外受精技术，则形成的b属于克隆动物C.如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型和表型一定相同D.如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器，则需对移植的胚胎进行性别选择8、重庆忠州豆腐乳被业界称为“腐乳王”，因风味独特而盛销不衰，远销英国、加拿大、中东、东南亚等国家和地区，腐乳的制作流程为“让豆腐块长出白色菌丝（前期发酵）→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制”。下列相关说法正确的是（）A.腐乳制作过程中有多种微生物的参与，其中起主要作用的是曲霉B.霉菌分泌的蛋白酶等物质，能将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸C.加盐和卤汤腌制的目的仅仅是调味，并不能抑制瓶内杂菌的生长D.豆腐块相当于固体培养基，腌制用的玻璃瓶常用紫外线进行灭菌评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害10、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是（）A.利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素B.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆C.中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器D.基因编辑技术不仅可用于疾病预防领域研究，也可用于编辑婴儿11、下列关于生物技术的叙述，不正确的是（）A.烟草叶片可离体培养产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖B.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒C.目的基因必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间，才能进行转录D.目的基因与荧光标记的DNA探针进行分子杂交，能形成磷酸二酯键12、从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髓中分离骨髓间充质干细胞（MSC），诱导分化成胰岛样细胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素，患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是（）A.培养骨髓间充质干细胞的培养液通常需加入血清B.在体外连续培养时，利用胰蛋白酶将接触抑制的骨髓间充质干细胞分开C.在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性D.治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变13、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周这个时间段内分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳头中可能含有的细菌，加上挤乳过程中产生的少量污染，常乳中会有一定量的细菌存在。研究小组要检测一份常乳样品中细菌的总量（不考虑菌种），检测流程如下图，每个平板上接种菌液量为0.1mL。下列说法正确的是（）

A.倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染B.上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长C.也可以通过连续划线的方法接种，通过菌落数计算样品中的细菌总数D.若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为5.9×10714、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源15、刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，当红色复合物中的纤维素被分解后红色消失。表中是筛选纤维素分解菌的培养基，利用此培养基可从土壤中筛选纤维素分解菌，结果如图。下列说法正确的是（）。培养基的成分：纤维素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g刚果红适量MgSO40．5g琼脂20g定容1L

A.培养基中纤维素和尿素分别提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供无机盐的同时还能维持培养基的pHC.将土壤稀释液接种在平板上的方法为稀释涂布平板法D.平板上5个菌落都有透明圈，说明5个菌落都能分解纤维素16、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)17、基因工程取得了突飞猛进的发展。_____、_____等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的应用前景。抗虫棉中的抗虫基因来自_____，抗虫基因作物的使用，不仅减少了_____，降低了____，而且还减少了_____。18、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。19、植物体细胞杂交的意义：_____。20、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____21、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共2题，共14分)22、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误23、我国对转基因技术的方针是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。（选择性必修3P104）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共8分)24、科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接种预防，简要过程如图所示。回答下列问题：

(1)新冠病毒是一种RNA病毒，一般先通过_____________________得到cDNA，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR的中文全称是_____________________。

(2)PCR技术还需用到_____________________酶，该酶能够使脱氧核苷酸从引物的_____________________端开始连接，据下图分析，可选择的引物是_____________________。

(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性；请设计简单的检测方案并预期检测结果。

方案:_________________________________。

结果:_________________________________。25、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

对微生物的基因改造是基因工程中研究最早；最广泛和取得实际应用成果最多的领域；这是因为微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行遗传物质操作等优点。

【详解】

A；微生物具有生理结构和遗传物质简单的优点；便于研究，A正确；

B；微生物的生长周期短；具有生长繁殖快的优点，B正确；

C；微生物对环境因素敏感；如在某种抗生素的环境中不能生存，C错误；

D；微生物的遗传物质简单；具有容易进行遗传物质操作的优点，D正确。

故选C。2、D【分析】【分析】

1、纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶三种；其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是葡萄糖苷酶。

2；微生物的培养基的主要成分包括碳源、氮源、水和无机盐；有的还有特殊营养物质（生长因子、维生素）。

3；纤维素分解菌常采用刚果红染液进行鉴定；刚果红可以与纤维素结合形成红色物质，纤维素分解菌由于能够将纤维素分解而在平板上的菌落周围出现无色的透明圈，透明圈的大小可以反应纤维素分解菌产生的酶的多少。

【详解】

A、纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；其中葡萄糖苷酶可以将纤维二糖分解成葡萄糖，A错误；

B；从白蚁消化道中分离能高效降解纤维素的细菌；呼吸类型应该为无氧呼吸，B错误；

C；鉴别纤维素分解菌时；可以向长出菌落的培养基上直接滴加刚果红染液，C错误；

D；要长期保存菌种；采用甘油管藏的方方法，将菌液与灭菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷冻箱中保存，D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

1；限制性核酸内切酶（限制酶）；

（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2；题图分析：酶1和酶2切割会形成黏性末端；并且形成的末端序列相同；酶3和酶4切割会形成平末端。

【详解】

A；结合图示可知；不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端（酶1和酶2），有的产生平末端（酶3和酶4），A正确；

B；不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端；如图中的酶1和酶2，B正确；

C；用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒；形成的末端序列相同，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别，C错误；

D、用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，产生的是平末端，而T4DNA连接酶能将平末端连接起来，即用酶3和酶4切割目的基因和质粒形成的产物经T4DNA连接酶催化可以连接形成重组DNA分子；D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；聚合酶链式反应；是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术，A正确；

B；在用PCR技术扩增DNA时；DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，B正确；

C；PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行；需提供DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸及热稳定DNA聚合酶等，C错误；

D；PCR一般经历三十多次循环；每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段，D正确。

故选C。

【点睛】5、A【分析】【分析】

1；基因工程是指按照人们的意愿；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

2；植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍；扩大亲本范围。

【详解】

A、使两品种有性杂交获得F1，F1含有甲、乙两个品种的优良基因，再利用单倍体育种技术获得植株后筛选，能获得具有固定CO2酶活性高；抗病能力强的纯合二倍体植株；且耗时较短，符合题意，A正确；

B；将乙品种的抗病基因导入到甲品种的卵细胞后；然后进行离体培养得到的是单倍体植株，单倍体植株弱小，高度不育，不符合题意，B错误；

C；利用多倍体育种将品种甲和品种乙染色体加倍；染色体加倍后该植株为四倍体，进行有性杂交后筛选得到的植株仍为四倍体，不符合题意，C错误；

D；“花粉融合”后再经植物组织培养获得植株中不含同源染色体；后代不可育，不符合题意，D错误。

故选A。6、B【分析】【分析】

试管婴儿是指分别将卵子与精子取出后；置于试管内使其受精，再将胚胎前体即受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。试管婴儿是用人工方法让卵子和精子在体外受精并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。

【详解】

A；从亲体取出的精子需要经过获能处理；卵细胞无需要培养到减数第二次分裂中期才可完成受精，A错误；

B；受精的标志是在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体；还有一个是第二极体），故判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志，B正确；

C；体外受精获得的早期胚胎通常在培养液中培养到桑葚胚或囊胚阶段进行移植；C错误；

D；试管婴儿有精子和卵细胞结合成受精卵的过程；属于有性生殖，该技术不属于生殖性克隆技术（我国禁止一切生殖性克隆技术），D错误。

故选B。7、D【分析】【分析】

体细胞核移植的大致过程是：将供体体细胞核导入受体去核卵母细胞；形成重组细胞，用电脉冲刺激形成早期胚胎，导入代孕母羊的子宫，妊娠；出生后即克隆动物。胚胎移植概念：是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体（遗传特性和生产性能优秀），接受胚胎的个体叫受体（有健康的体质和正常繁殖能力）。

【详解】

A、如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞的细胞核具有全能性；A错误；

B、如果a是体外受精技术，则形成的b属于有性生殖产生的动物；B错误；

C、如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型一定相同；表型由于受到环境影响不一定相同，C错误；

D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器；目的基因表达的产物在雌性动物的乳汁中提取，则需对移植的胚胎进行性别选择，D正确。

故选D。8、B【分析】【分析】

腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【详解】

A；参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，A错误；

B；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶；将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸，B正确；

C；加盐腌制和加卤汤的目的是抑制瓶内杂菌生长的同时又能调制腐乳的风味；C错误；

D；豆腐块相当于固体培养基；能为微生物发酵提供营养条件等，在密封腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，用灼烧法进行灭菌，以防止瓶口被污染，D错误。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)9、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】10、C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；可以通过生物合成法、全化学合成法、半化学合成法来产生抗生素；其中生物合成法中可以通过工程菌制造法来产生，A正确；

B；克隆技术是可以克隆器官的；但是不可以人体克隆，禁止生殖性克隆，B正确；

C；中国声明：在任何情况下；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；但不能用于编辑婴儿，D错误。

故选CD。11、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建（核心）；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体和用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞都采用了酶的专一性原理。诱导原生质体融合和动物细胞融合都采用了生物膜的流动性原理；植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖。

【详解】

A；由细胞工程原理可知；植物细胞或组织离体培养可以得到植物个体，动物细胞可以进行培养而实现增殖，A正确；

B；细胞工程应用非常广泛；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒，B正确；

C；基因表达载体构建必须使目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间；这样才能有利于目的基因表达，C错误；

D；DNA分子杂交的原理是碱基互补形成杂交带；不能产生磷酸二酯键，D错误。

故选CD。12、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养的原理利用的是细胞的增殖；培养过程需要无毒无菌的环境；充足的营养、适宜的温度和pH以及适宜的气体环境。

【详解】

A；细胞体外培养所需的营养物质与体内基本相同；需要加入血清，以补充培养基中缺乏的物质，A正确；

B；在体外连续培养时；常采用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将细胞分开，B正确；

C；骨髓间充质干细胞可以分化成胰岛样组织细胞；但没有发育成一个完整的个体人，不能说明其具有发育的全能性，C错误；

D；由于导入的是胰岛样细胞；与血型无关，治疗成功后康复者的血型不可能发生改变，D错误。

故选AB。13、A:B:D【分析】【分析】

分析题文描述和题图：图示为采用稀释涂布平板法分离常乳样品中细菌总量的流程图。首先将常乳样品进行一系列梯度稀释，然后取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养。为了防止杂菌污染；稀释涂布平板的所有操作都应控制无菌条件。

【详解】

A；为了防止杂菌污染；倒平板时应将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，A正确；

B；为了检测一份常乳样品中细菌的总量；图示对常乳样品进行了一系列梯度稀释，由此可见，上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长，B正确；

C；通过连续划线的方法接种；不易分离出单个菌落，不能用于微生物的计数，C错误；

D、取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养，若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为59÷0.1×105＝5.9×107；D正确。

故选ABD。14、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。15、A:B:C【分析】【分析】

本题知识点为刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理、培养基中各物质的作用。刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。

【详解】

A；在此培养基中；纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，A正确；

B、KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH，B正确；

C；从平板上纤维素分解菌的菌落分布可以看出（菌落较均匀）；接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D；菌落周围有透明圈不一定是细胞分解了纤维素；还有可能是分解了刚果红染料，D错误；

故选ABC。16、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共5题，共10分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因转移基因扩增医药卫生农牧业、食品工业环境保护苏云金杆菌农药的用量生产成本农药对环境的污染。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】克服了远缘杂交不亲和的障碍。20、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共2题，共14分)22、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。23、A【分析】【详解】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。

该说法正确。五、实验题(共2题，共8分)24、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。

【详解】

（1）利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录；起作用的酶为逆转录酶。在体外将DNA扩增的技术是PCR，中文名称为多聚酶链式反应。

（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；该过程需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶），热稳定DNA聚合酶(