2025年沪教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷155考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、实验人员利用矮牵牛（二倍体，2n=14）的红色花瓣细胞（液泡呈红色）与枸杞（四倍体，4n=48）叶肉细胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是（）A.获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题B.可利用聚乙二醇、灭活的病毒等作为融合剂诱导原生质体融合C.可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体D.若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目可能为28、96或62条2、下列哪项是对待生物技术的理性态度？（）A.转基因技术是按照人们的意愿对生物进行的设计，不存在负面影响B.转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险C.大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交D.转基因技术如果被恐怖分子利用将可能导致人类灭绝，应停止转基因研究3、下列有关生物工程技术图解的叙述正确的是（）

A.基因工程除了需要图一所示的工具外，还需两种工具酶B.图二中的4是指受精卵的体外培养过程C.图三中的内细胞团最终发育成胎膜和胎盘D.图四高度概括了系统整体性原理4、中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（）A.泡菜制作过程中，酵母菌将葡萄糖分解成乳酸B.馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2C.米酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长D.酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸杆菌5、科学家成功地把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使正常基因被取代或破坏而失活，然后将得到的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎中，培育出患病的嵌合体小鼠。下列有关叙述错误的是（）A.在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等B.通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因C.这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代D.“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究6、如图表示获得细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因cDNA的操作过程；下列相关分析正确的是（）

A.获得该mRNA的最佳材料是心肌细胞B.构建基因表达载体最常用的载体是腺病毒C.完成过程①、②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)7、营养缺陷性菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力；只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙；丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。

下列分析正确的是（）A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型8、下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是（）A.克隆羊、试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态C.受精时防止多精入卵的两屏障是顶体反应和卵细胞膜反应D.滋养层细胞在囊胚期发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定9、下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，合理的是（）A.对转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B.我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C.我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散D.对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权10、科学研究发现，未经人工转基因操作的番薯都含有农杆菌的部分基因，而这些基因的遗传效应促使番薯根部发生膨大产生了可食用的部分，因此番薯被人类选育并种植。下列相关叙述正确的是（）A.农杆菌这些特定的基因可以在番薯细胞内复制B.农杆菌和番薯的基因都是4种碱基对的随机排列C.农杆菌和番薯的基因都是有遗传效应的DNA片段D.农杆菌这些特定的基因可能在自然条件下转入了番薯细胞11、转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，插入另一位点。转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移，在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动。有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞。下列推测合理的是A.转座子不能独立进行DNA复制B.转座子可造成染色体变异或基因重组C.转座子可用于基因工程的研究D.细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)12、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。13、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。14、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。15、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。16、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。17、获取目的基因的方法______、______、______18、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。19、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。20、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

评卷人得分四、实验题(共4题，共24分)21、单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用；下图1是单克隆抗体制备流程图，下图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图3是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。

（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建____________________，并导入用__________处理的大肠杆菌细胞中；获取大量膜蛋白。

（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基嘌呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的__________（填“HAT培养基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以达到筛选目的，其原理是______________________________。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是______________________________。

（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________，体现的是双特异性单克隆抗体在__________方面的用途。22、霍山石斛多糖具有显著的免疫调节效应。为探究引起该免疫调节效应的物质是大分子霍山石斛多糖还是多糖小分子片段；某科研小组进行了如下实验：将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，利用该抗体探究霍山石斛多糖引起的免疫调节效应。制备单克隆抗体的流程如图所示。请回答：

（1）图中细胞a是免疫后小鼠体内的___________，通常情况下该细胞不能进行增殖，原因是___________。

（2）与植物原生质体融合相比，①过程特有的诱导因素是___________。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还可能有__________和__________。筛选时，需用特定的____________培养基才能把实验所需细胞选择出来。

（3）在筛选过程中需进行__________和__________，以便获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞，还需用___________作为检测特异性抗体的物质。

（4）将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内，可从小鼠____________中提取单克隆抗体。

（5）研究发现，霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，这些片段不能与获得的单克隆抗体结合。科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后，取出小肠、肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。该实验____________（填“能”或“不能”）说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖，理由是___________。23、氨基丁酸（GABA）是具有降血压；抗焦虑等功能的水溶性氨基酸。科研人员通过实验研究了白方腐乳在前发酵盐腌和后发酵过程中GABA的含量变化；为寻找生产富含GABA腐乳的工艺奠定基础。实验步骤如下：

①豆腐白坯表面接种毛霉孢子后；在适宜的温度和湿度下培养48h，获得毛坯。

②将毛坯分层整齐地摆放在瓶中；盐腌5天。

③腌制后加入卤汤；置于28℃恒温箱中后发酵90天。

④分别采集各时段的腐乳坯样品；测定GABA含量，结果如图。

请分析并回答问题：

（1）前发酵过程中，毛坯的GABA含量发生明显变化的原因是毛霉产生的_______促进蛋白质水解产生GABA。

（2）步骤②中，加盐腌制的正确操作是______________。此过程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA会____________而导致测定值减小。

（3）后发酵所加的卤汤中，具有抑菌防腐和调味的成分主要有_______。此过程中，发酵_______天后的白方腐乳出厂销售比较适宜。24、科研人员进行了土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；实验流程如图1所示。农药；除草剂的长期使用，会使土壤受到严重污染。某科研小组为筛选能分解除草剂草甘膦的微生物，其流程示意图如图2所示。回答下列问题：

(1)图1中，“？”处是__________，纯化培养时采用的接种方法是_______________，该方法可用于菌落数的统计，原因是_________________________。

(2)图1中纯化培养所利用的培养基在营养成分和物理性质上的特点分别是____________________，图1和图2中的两个培养基在用途方面的共同点是____________________。

(3)图2中的接种方法需要连续划线，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是_________________。结果有的菌落周围有透明圈而有的没有，原因是________________。评卷人得分五、综合题(共4题，共16分)25、萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用；而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。

（1）研究者将重组质粒置于经__________处理的大肠杆菌细胞悬液中；获得转基因大肠杆菌。

（2）检测发现；转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图中方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。

①这是一种定点的__________技术。

②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”；若不选用该引物则划“×”）__________。

。引物A引物B引物C引物DPCR1________________________________________PCR2________________________________________PCR3________________________________________PCR4________________________________________（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和__________分别导入大肠杆菌；提取培养液中的蛋白质，用__________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较__________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。

（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是__________。26、基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由某基因（A）突变引起的，将正常A基因定点整合到A基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。基因定点整合的过程如图所示，已知neor基因可作为标记基因，含有neor的细胞具有对G418的抗性。回答下列问题：

(1)构建重组载体，常用的工具酶有__________。构建重组载体时，需要大量A基因，常用__________技术合成A基因，利用该方法合成A基因时需要设计并合成__________种引物。

(2)将重组载体导入患病小鼠胚胎干细胞的常用方法为__________。检测患病小鼠胚胎干细胞中是否导入重组载体的方法是在含有__________的培养液中培养胚胎干细胞。

(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现A基因错误整合。错误整合时，重组载体上的两个HSV-tk至少会有一个neor一起整合到染色体DNA上。已知HSV-tk1、HSV-tk2的产物都把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。将导入重组载体胚胎干细胞置于同时含有G418和DHPG的培养，存活下来的是__________（填“正确整合”或“错误整合”）的胚胎干细胞。

(4)将上述筛选得到的胚胎干细胞培育成转基因小鼠，还需要__________技术和_________技术。27、布设于道路周边或地势较低区域的生物滞留池可截留雨水；某城市道路收集到的雨水含有高浓度污染物，其中的多环芳烃（PAHs）会严重危害城市水环境。科研人员拟通过转基因技术获得高效降解污染物的工程菌。

（1）经检测发现；生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高，研究者尝试筛选能降解芘的菌种：

①筛选菌种的基本操作步骤如下，请将下列方框内字母后面内容补充完整：a__；b__；c__。

②在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到100kPa而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该__（填操作过程）。

（2）科研人员筛选出在生物滞留池中占比较高且对芘具有较高耐受性的菌株作为受体菌；运用转基因技术获得高效降解芘的工程菌，回答下列相关问题：

①研究者先用PCR技术扩增能高效降解芘的外源基因，但外源基因序列两端无限制酶酶切位点，根据图1和表信息推测，扩增外源基因时应在所用的一对引物一端分别加上的限制酶识别序列是__。

限制酶识别序列。限制酶识别序列BamHⅠHindⅢEcoRⅠXbaⅠ

②将基因表达载体与经Ca2+处理的处于__的受体菌细胞于缓冲液中混合；完成转化过程。

③将完成转化的受体菌接种在加有__的培养基上初步筛选后，再进一步检测、鉴定。28、铜绿假单胞菌常常引起禽类、水貂等发生败血症及呼吸系统感染等疾病，给养殖业带来严重损失。科研人员尝试克隆和表达该菌外膜蛋白oprD基因；以用于后期的疫苗研制工作。相关限制酶识别序列及用于构建基因表达载体的质粒图示如下，其中Amp“表示氨苄青霉素抗性基因，请回答下列问题：

限制酶识别序列BamHⅠ5'G↓GATCC3'EcoRⅠ5'G↓AATTC3'NotⅠ5'GC↓GGCCGC3'XhoⅠ5'C↓TCGAG3'

(1)质粒的基本单位是_________________，一个质粒分子中通常含______________个游离的磷酸基团。Amp基因常作为基因工程中的标记基因，标记基因的作用是____________。

(2)若已知铜绿假单胞菌的oprD基因序列，可利用____________技术快速大量扩增该基因。为便于扩增的oprD基因与表达载体的连接，在设计引物时，常在两条引物的____________端加上限制酶的识别序列；设计后的引物如下：

引物1：5'-CGGGATCCATGAAAGTGATGAAGTGG-3'；

引物2：5'-CCCTCGAGTTACAGGATCGACAGCGG-3'.

(3)根据上题中的引物信息分析，在构建oprD基因表达载体时，可选择_________和____________两种不同的限制酶同时切割目的基因和质粒；以提高目的基因和质粒的重组效率。

(4)将目的基因导入大肠杆菌时，一般先用Ca2+溶液处理大肠杆菌，使细胞处于___________的生理状态即感受态。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

诱导植物细胞融合前；先要采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，获得原生质体；诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激；振动等）和化学方法（聚乙二醇）；若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞，杂种细胞。可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体。

【详解】

A；植物体细胞杂交技术能克服远源杂交不亲和的障碍；因此获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题，A正确；

B；诱导植物原生质体融合时不能用灭活的病毒作为诱导剂；B错误；

C；显微镜下可以观察到染色体；因此可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体，C正确；

D；若原生质体均为两两融合；则有三种情况，即矮牵牛细胞自身融合、枸杞细胞自身融合、矮牵牛细胞和枸杞细胞融合，因此融合后的细胞中染色体数目可能为28、96或62条，D正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：

（1）食物安全：滞后效应；出现过敏源、食物的营养成分改变等；

（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁；

（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。

【详解】

A；转基因技术存在负面影响；A错误；

B；转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用；同时也存在一定风险，B正确；

C；大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交；容易造成基因污染，是不理性的表现，C错误；

D；转基因技术有其优点和缺点；应正确判断，不能因噎废食，D错误。

故选B。

【点睛】3、A【分析】【分析】

分析图一：图一表示质粒的结构；质粒是双链环状结构；

分析图二：1为精子；2表示体外受精过程，3表示受精卵，4表示胚胎移植；

分析图三：图三表示胚胎分割；对囊胚期进行分割时注意将内细胞团均等分割；

分析图四：图四表示系统的结构决定功能原理；即要通过改善和优化系统结构改善功能。

【详解】

A；图一为质粒；可作为基因工程的运载体，此外基因工程还需要两种工具酶，即限制酶和DNA连接酶，A正确；

B；图二中的4是指胚胎移植过程；B错误；

C；图三中的内细胞团最终发育成各种组织；C错误；

D；图四高度概括了系统的结构决定功能原理；D错误。

故选A。

【点睛】4、B【分析】【分析】

1；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

2；参与泡菜制作的微生物是乳酸菌；泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。

3；醋酸菌好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

【详解】

A；泡菜制作过程中；主要是乳酸菌将葡萄糖分解形成乳酸，A错误；

B；做馒头或面包时；经常要用到酵母菌，酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳和酒精，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包暄软多孔，B正确；

C；酵母菌在有氧条件下可以大量繁殖；在密封也就是无氧条件下产生酒精，C错误；

D；酸奶制作过程中；后期低温处理时大部分乳酸杆菌已死亡，不会大量繁殖，D错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中；使正常基因被取代或破坏而失活，该技术属于DNA重组技术。患病的嵌合体小鼠部分细胞中存在外源基因。

【详解】

A；DNA重组技术需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等；A正确；

B；通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因；以研究该基因的功能，B正确；

C；这种嵌合体小鼠长大后；若原始生殖细胞存在外源基因，则可能会遗传给后代，C错误；

D；培育出患病的嵌合体小鼠；有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究，D正确。

故选C。

【点睛】6、C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；由于乙酰胆碱受体大量分布于神经细胞膜上；所以在神经细胞中最易获得该基因的mRNA，A错误；

B；腺病毒不能作为基因表达的载体；但可以作为基因表达载体的受体，B错误；

C；①是逆转录过程；需要逆转录酶，②是DNA的复制，需要DNA聚合酶，C正确；

D；探针筛选的目的是保留被感染的细胞；因为细胞被感染证明基因已经成功转入受体细胞，而应淘汰未被感染的细菌，D错误。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)7、A:C【分析】【分析】

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

【详解】

A；甲培养皿的菌落均匀分布；接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲、丙培养基菌落数目多；包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；乙培养皿的培养基是基本培养基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D错误。

故选AC。8、A:C:D【分析】【分析】

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES可以增殖而不发生分化。ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中能够维持不分化状态。

【详解】

A；试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式属于无性生殖，A错误；

B；胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态；B正确；

C；受精时防止多精入卵的两屏障是透明带反应和卵细胞膜反应；C错误；

D；囊胚期的滋养层细胞可用于性别鉴定；将来可以发育成胎膜和胎盘，D错误。

故选ACD。9、A:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。

3；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

4；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。

【详解】

A；对转基因技术；我们应该趋利避害，理性看待，A正确；

B；中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，B错误；

C；中国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；

D；对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权；D正确。

故选ACD。10、A:C:D【分析】【分析】

1；基因的概念：基因是具有遗传效应的DNA片段；是决定生物性状的基本单位。

2；基因和遗传信息的关系：基因中的脱氧核苷酸（碱基对）排列顺序代表遗传信息。

【详解】

A；DNA能够自我复制；农杆菌这些特定的基因可以在番薯细胞内复制，A正确；

B；基因中4种碱基对的排列顺序是特定的；B错误；

C；农杆菌和番薯的基因都是有遗传效应的DNA片段；C正确；

D；农杆菌这些特定的基因可能在自然条件下转入了番薯细胞；如利用运载体，D正确。

故选ACD。

【点睛】11、B:C:D【分析】【分析】

本题考查DNA复制；生物变异的相关知识；意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。

【详解】

根据题干中“转座子是一段可移动的DNA序列；这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来”，说明转座子可以独立进行DNA复制，A错误；根据题干中“转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移”，说明转座子可造成真核生物染色体变异或基因重组，B正确；根据题干中“转座子可在细菌的拟核DNA；质粒或噬菌体之间自行移动”，说明转座子可用于基因工程的研究，C正确；根据题干中“有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞”，说明细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变，D正确。

【点睛】

可遗传的变异有三种来源：基因突变、染色体变异和基因重组：

（1）基因突变是基因结构的改变；包括碱基对的增添；缺失或替换。

（2）基因重组的方式有同源染色体上非姐妹单体之间的交叉互换和非同源染色体上非等位基因之间的自由组合，另外，外源基因的导入也会引起基因重组。

（3）染色体变异是指染色体结构和数目的改变。三、填空题(共9题，共18分)12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、13、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子16、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7519、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在四、实验题(共4题，共24分)21、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）

据图分析，科研人员利用基因工程将目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建基因表达载体，并导入用CaCl2处理的大肠杆菌细胞中；使目的基因增殖并表达可获取大量膜蛋白。

（2）

杂交瘤细胞由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成；其合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径。“HAT培养基”有筛选作用，在添加了氨基喋吟的HAT培养基中，杂交瘤细胞“D途径”虽然被氨基嘌呤阻断，但可通过“S途径”合成DNA，不断分裂增殖；而淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，而不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，也不生长。

（3）

带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合；可起到标记目标微生物的作用。

（4）

双特异性单克隆抗体借助单克隆抗体的导向作用；能将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病方面起到运载药物的用途。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】（1）基因的表达载体Ca2+或CaCl2

（2）HAT培养基淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力；故不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。

（3）标记目标微生物。

（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞治疗疾病（运载药物）22、略

【分析】【分析】

1.体液免疫的具体过程：

(1)感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外；大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；

(2)反应阶段：B细胞接受抗原刺激后；开始进行一系列的增殖；分化，形成记忆细胞和浆细胞；

(3)效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合；发挥免疫效应。

2.单克隆抗体的制备：

(1)细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体；在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。

(2)杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖；又能产生特异性抗体。

(3)两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

(4)两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

(5)提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

(6)单克隆抗体的优点：特异性强；灵敏度高；并可能大量制备。

【详解】

（1）图为单克隆抗体的制备的流程；图中细胞a是免疫后小鼠体内的B细胞（或浆细胞），该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂。

（2）与植物原生质体融合相比；动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还有两两融合的细胞，由于细胞的融合是随机的，两两融合的细胞包括杂交瘤细胞和同种细胞融合成的细胞。筛选时，需用特定的选择性培养基才能从中筛选出杂交瘤细胞。

（3）要想获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞；在筛选过程中需进行克隆化培养和抗体检测，该过程是将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，因此还需用（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物作为检测特异性抗体的物质。

（4）若将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内；则可从小鼠腹水中提取单克隆抗体。

（5）科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后；取出小肠；肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段，因此该实验不能说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖。

【点睛】

本题考查免疫调节、单克隆抗体的制备等知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力以及获取信息、分析问题的能力。【解析】B细胞（或浆细胞）该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂灭活的病毒杂交瘤细胞同种细胞融合成的细胞选择性克隆化培养抗体检测（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物腹水不能霍山石斛多糖在肠腔中被降解，产生的多糖小分子片段可能具有免疫调节效应（或该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段）23、略

【分析】【分析】

腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

1；让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。

2；加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中；同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐研制的时间约为8d左右．加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

3；加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。

4；密封腌制。

【详解】

（1）前发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶促进豆腐中的蛋白质水解产生GABA，使得毛坯的GABA含量明显升高。

（2）步骤②中；加盐腌制的正确操作是将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。此过程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食盐会抑制毛霉生长，酶的活性降低；②豆腐中的水分渗出，部分GABA会溶解于水而导致测定值减小。

（3）卤汤是由料酒及各种香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。后发酵过程中GABA的含量变化曲线图显示，在60天以后，GABA的含量达到最大值且保持相对稳定，所以此时出厂销售白方腐乳比较适宜。

【点睛】

解答本题的关键是掌握腐乳的制作的相关流程和知识要点，主要依靠学生对课本知识的理解和掌握，并结合题目中所给的GABA为水溶性氨基酸这一关键信息回答问题，同时需要学生在做题时思考符合经济效益的选择。【解析】蛋白酶逐层加盐随着层数的加高增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些随水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6024、略

【分析】【分析】

将微生物接种到固体培养基常用稀释涂布平板法；接种前先要将菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一定的稀释度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成单个细胞，在适宜的条件下培养让菌体进行繁殖，能够在培养基表面形成单个菌落。稀释涂布平板操作：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽。②取少量菌液，滴加到培养基表面。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽冷却8-10s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基上，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。

【详解】

（1）图1中是将土壤悬浮液取1mL；加入9mL无菌水进行稀释10倍。图1中微生物接种方式为稀释涂布平板法。该方法可以用于对菌落数进行计数，因为当样品的稀释度足够高时，培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

（2）土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；培养基需要采用固体培养基，才可用于稀释涂布平板法，且因为是分离固氮菌，所以培养基中不加氮源。图1和图2中的两个培养基都是用于从多种微生物中分离目的菌种。

（3）图2中接种方法为平板划线法，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果。图2中培养基时为了筛选出能分解除草剂草甘膦的微生物，所以有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈。【解析】(1)无菌水稀释涂布平板法当样品的稀释度足够高时；培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

(2)没有氮源；属于固体培养基从多种微生物中分离出目的菌。

(3)将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈五、综合题(共4题，共16分)25、略

【分析】含有蛋白A基因的重组质粒；空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。

【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法;

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）大肠杆菌需事先用氯化钙进行处理；增大细胞壁的通透性，使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，以便重组质粒的导入。

（2）①根据题意和图示分析；经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。

②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好；因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物，如下表所示：

。

引物A

引物B

引物C

引物D

PCR1

√

√

×

×

PCR2

×

×

√

√

PCR3

×

×

×

×

PCR4

√

×

×

√

（3）将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒；空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌；提取培养液中的蛋白质，用抗原-抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。

（4）作为微生物农药；使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人；畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。

【点睛】

本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。【解析】CaCl2基因突变。

。

引物A

引物B

引物C

引物D

PCR1

√

√

×

×

PCR2

×

×

√

√

PCR3

×

×

×

×

PCR4

√

×

×

√

26、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

(1)

构建重组载体时；需要使用的工具酶为限制酶和DNA连接酶。大量制备A基因，即特定基因的扩增，常用PCR技术，利用PCR技术扩增基因时需要合成基因两侧的两种不同的引物。

(2)

由题意可知，小鼠胚胎干细胞为受体细胞，培育转基因动物时将重组载体导入受体细胞的常用方法为显微注射法。由题意可知，neor为标记基因；结合题中该基因的作用可知，欲筛选含有重组载体的小鼠胚胎干细胞，应将处理后的胚胎干细胞放在含有G418的培养液中进行培养，存活下来的即为导入重组载体的胚胎干细胞。

(3)

由题意可知，含有neor基因的细胞具有对G418的抗性，转化的胚胎干细胞能在含G418的培养液中存活，说明转化后的胚胎干细胞中含