2025年沪科版选修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选修3生物下册阶段测试试卷125考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、韩国某生物技术公司帮助宠物爱好者“复活”死去的爱犬，他们从狗的遗体细胞中获取核DNA移植入去核的卵细胞中，再将进一步分化成的胚胎移植入母狗体内。该“复活”技术的生物学原理是A.细胞核的全能性B.细胞具有全能性C.有性生殖D.受精作用2、下列关于DNA连接酶的作用的叙述中，正确的是A.将单个核苷酸加到某DNA片段的3’端，形成磷酸二酯键B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能讲双链DNA片段的平末端连接起来3、在动物的胚胎发育过程中，早期原肠胚的细胞从一个部位移植到另一个部位时，被移植的细胞能适应新的部位并参与那里的器官形成。但如果在原肠胚的末期，未来发育为蝾螈下肢的部分移植到蝾螈胚胎不长下肢的部分，将发育为一条额外的腿，这说明（）A.原肠胚末期已出现了组织和器官的形成B.原肠胚末期开始出现细胞分化C.原肠胚末期确定了细胞发育的方向D.原肠胚末期的细胞开始具有了全能性4、将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”；能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”。下列有关叙述错误的是（）

A.经①形成的细胞都能无限增殖并产生相应抗体B.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞C.构成“弹头”的化学药物、细胞毒素等物质没有选择杀伤癌细胞的功能D.抗癌细胞的单克隆抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性5、下列有关动物胚胎移植的叙述错误的是A.常用桑椹胚或囊胚进行胚胎移植B.受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态C.超数排卵技术要使用一定的激素D.由该技术培育而成的动物遗传物质全部来自一个亲本6、“无废弃物农业”是生态工程最早的模式之一。如图是“无废弃物农业”中对有机废弃物进行处理的一种方案；有关叙述不正确的是（）

A.从废弃物资源化、无害化角度分析，途径④优于②、③B.施用有机肥可改善土壤结构，培育土壤微生物C.该模式遵循物质循环再生原理、整体性原理等基本原理D.蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者能有效促进物质和能量的多级利用评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、下列关于基因工程的叙述，正确的是A.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理质粒的DNAB.限制酶和DNA连接酶是构建重组质粒常用的工具酶C.基因工程的操作步骤首先要提取目的基因D.质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器8、草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列有关叙述错误的是（）

A.方法一中，甲常选用茎尖，原因是其几乎未感染病毒B.通常采用95％的酒精和5％次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理C.C两个过程属于植物组织培养，都经过脱分化和再分化D.判断两种选育方法的效果都需要通过病毒接种实验9、如图为杂交瘤细胞制备示意图。下列叙述正确的是（）

A.骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合B.骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖C.免疫B细胞的种类不唯一所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选D.筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染10、表中生物工程实验选择的材料与实验目的搭配合理的是（）

。组别实验目的实验材料材料特点A获得生产人生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁将相应产物排出体外B获得脱毒苗茎尖分生区附近病毒极少，甚至不含病毒C获得植物突变体愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变D胚胎干细胞培养囊胚内细胞团能分化形成各种组织和器官A.AB.BC.CD.D11、某女子的线粒体存在遗传缺陷，研究人员取其卵细胞的细胞核，注入捐献者的去核卵细胞中，经体外培养、体外受精和早期压胎培养，将早期胚胎移入该女子的子宫内并发育成胎儿，该婴儿称为“三体婴儿”。下列说法错误的是（）A.“三体婴儿”同时含有父亲、母亲及卵细胞捐献者的部分基因B.该技术能避免“三体婴儿”携带父亲和母亲染色体上的致病基因C.在体外受精前，完成核移植的卵细胞需处于MⅡ期D.在体外受精前，可根据该夫妻的意愿选择X精子或Y精子12、所谓“设计试管婴儿”，是指将体外受精形成的胚胎（几个细胞期）在植入母体孕育前，将一个细胞取出进行某些基因检测，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。下列有关叙述正确的是（）A.“设计试管婴儿”应用了细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术B.与“设计试管婴儿”相比，“试管婴儿”不需要经过遗传学诊断C.“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都是有性生殖D.对于“设计试管婴儿”技术，我们应该强行禁止、反对争论13、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞；制备流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，可注射孕激素促进雌鼠产生更多的卵子B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.细胞a、b均是胚胎干细胞的良好来源，可在饲养层上分裂、分化14、下图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法不正确的是（）

A.图中A所示细胞将来能够发育成胎膜和胎盘B.胚胎干细胞的体积和细胞核都较小C.胚胎干细胞可以增殖而不发生分化D.利用胚胎干细胞培养的人造器官正在大规模应用15、为了推进乡村报兴，江苏科技人员在某村引进赤松茸，推广“稻菇轮诈”露地栽培模式，如下图所示，相关叙述正确的是（）

A.当地农田生态系统中引进的赤松茸，是该系统中的生产者之一B.该模式沿袭了“无废弃农业”的传统，菌糠和秸秆由废弃物变为了生产原料C.该模式充分利用了水稻秸秆中的能量，提高了能量传递效率D.该模式既让土地休养生息，又增加了生态效益和经济效益评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______17、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。18、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。19、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。20、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。21、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。22、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。23、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共40分)24、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误25、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误26、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误27、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误28、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共8分)29、EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体；科研人员用小鼠进行实验。

（1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的_______免疫；产生相应的抗体。

（2）多次免疫后；分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。

①EV71免疫的小鼠血清抗体_______（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是___________。

②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度，目的是排除___________________的影响。

③制备抗EV71单克隆抗体时，选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是___________________________________________。

（3）取相应免疫组小鼠的脾脏，剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞，用灭活的病毒诱导，与________细胞融合；筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。

（4）为进一步研究抗体的作用效果，科研人员培养上述杂交瘤细胞株，获得5种单克隆抗体，分别将它们与等量EV71混合，加入到5组RD细胞（EV71的宿主细胞）中，测定______________，以分析抗体的作用效果。30、乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一；其发生与R基因的异常表达有关，请回答问题：

（1）乳腺细胞的原癌基因或抑癌基因发生______后，转化为______的癌细胞；导致癌组织体积和重量不断增加。

（2）R基因表达的产物为核糖体蛋白，其合成场所为______。

（3）科研人员利用免疫荧光技术分别研究了32例正常乳腺组织（图中A）和36例乳腺癌患者乳腺组织（图中B）中R基因的表达情况；如图所示。

①实验选用的细胞，在______培养箱中进行培养，培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有______。

②免疫荧光技术的原理是以R基因的表达产物为______，注射到免疫动物体内，引起特异性免疫反应，获得特异性的抗体，将获得的抗体标上荧光素（荧光素在光的照射后会发出一定波长的荧光），再注射到待测组织或细胞中，利用______技术；依据荧光的位置和强度可以确定组织中抗原的数量和位置。

③通过正常细胞和乳腺癌细胞荧光强度的比较，可知______。31、“基因靶向”技术；指的是应用DNA同源重组原理，通过一定的载体，用设计好的目的基因替代靶基因，从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术，科学家可以用小鼠进行实验，使其体内的某种特定基因丧失功能，以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程．请回答有关问题：

（1）获得胚胎干细胞（ES细胞）。ES细胞是由______中分离出来的一类细胞。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞，这是因为ES细胞具有发育的______。

（2）获取目的基因：

①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失，就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因，可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造，这一技术叫做______工程。

②为了提高实验成功率，需要通过________技术扩增目的基因；以获得目的基因的大量拷贝。

（3）构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有______基因，以便于细胞的筛选。质粒具有的一个或多个_________位点；使目的基因插入其中成为可能，因此常被选作运载体．

（4）_________；并从中筛选，然后培育出小鼠。

①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用______技术和______技术。

②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组，可通过观察小鼠的性状来检测，这属于______水平的鉴定。32、2017年11月27日世界上首个体细胞克隆猴“中中”诞生；12月5日第二个克隆猴“华华”诞生，该成果标志中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代，实现了我国在非人灵长类研究领域由国际“并跑”到“领跑”的转变。据此回答问题。

（1）“中中”和“华华”的诞生，体现出动物细胞的___________具有全能性，克隆技术在繁殖类型上属___________；非人灵长类克隆技术实践日益成熟对人类治疗性克隆具有重要意义，但我国政府一再重申___________、___________、___________；不接受任何生殖性克隆人的实验。

（2）相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，原因是___________，继而在克隆过程中需要使用___________，原因是___________。

（3）在干细胞研究领域中，科学家裴端卿的团队用人的尿液在小鼠体内培育出了人再生牙齿，目前他们己经能够将尿液中提取的多能干细胞与滋养细胞共同培养，或在培养液中加入___________，如________等物质可进一步使之变成血液细胞、骨细胞、皮肤细胞、肝细胞以及神经细胞等多种组织细胞。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)33、甲型流感病毒为RNA病毒；易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。

（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用___________技术扩增，并将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的___________；因此不能产生子代病毒。将该改造基因；表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。

（2）构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸（Uaa）。将该基因与___________连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的__________进行分子杂交鉴定；筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。

（3）利用转基因宿主细胞制备疫苗。将（1）中的重组质粒导入（2）中的转基因宿主细胞，并在补加__________的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是_________。

A．病毒的DNA聚合酶。

B．宿主的DNA聚合酶。

C．病毒的RNA聚合酶。

D．宿主的RNA聚合酶。

（4）上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖，没有致病性，因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比，该病毒活疫苗的优势之一是可引起_________免疫，增强免疫保护效果。34、实验室欲采取措施加快某动物优良性状的繁殖；根据所学知识，回答下列问题：

（1）若想选用动物细胞核移植技术，应先从具有优良性状的动物身上获取其体细胞中的______，然后将其导入_______的卵细胞中，若想要使后代尽可能保留优良性状，则___________，激活重组细胞活性采用的技术是___________________。

（2）若采用试管牛的工厂化生产方式进行繁殖，先从公牛体内取出精子后用钙离子A23187溶液处理，处理的目的是_____________，同时为让母牛进行超数排卵，需要给母牛注射___________，待精卵发育形成受精卵后需要通过_______________将其导入母牛体内。

（3）如需对初期胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的__________细胞进行鉴定。

（4）在重组细胞进行早期培养时，需向培养箱中通入CO2，其主要作用是____________。

（5）在胚胎工程中，常需进行冲卵，冲卵冲出的_________（是或不是）卵子。

（6）如想继续获得转基因牛，需将目的基因导入_______中，常用的方法为__________。35、如图是应用生物工程技术获得人们所需要的生物新品种或新产品的示意图。据图回答下列问题。

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中；①过程需要的工具酶是____________________，②过程常用的方法是___________。③过程先通过早期胚胎培养技术培养到__________或囊胚阶段，可以采用__________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（2）prG能激发细胞不断分裂；通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ是_______细胞，Ⅲ代表的细胞具有________________________________的特点。

（3）在抗虫棉的培育过程中，④过程中的受体细胞一般采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是___________，⑤过程采用的技术是___________。若从个体水平检测抗虫棉是否培育成功，请写出具体的鉴定方法________________________________。36、野化单峰骆驼原产于北非和亚洲西部及南部，多年前野生单峰骆驼就已经灭绝，仅圈养条件下还有部分驯养单峰骆驼存在。近几年，在我国戈壁无人区，科学家又发现了野化单峰骆驼小种群，由于数量极少，科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，技术流程如图所示。回答下列问题：

(1)为了让野化单峰骆驼母本提供更多优质的卵母细胞，需给野化单峰骆驼母本注射___________激素；对受体野化单峰骆驼也要注射相关激素以达到__________的生理状态。

(2)若通过染色体测定对野化单峰骆驼进行性别鉴定，选择滋养层细胞而不选择内细胞团细胞的原因是__________，测定的结果是看滋养层细胞中__________。

(3)过程c需要注意的是___________；在进行过程b或d之前是否需要对受体进行免疫检测，并请说明原因。__________。

(4)过程e需在培养基中加入____________。有科学家用干细胞成功克隆出了活体小鼠，若将这一技术用于克隆人，从伦理方面来讲，克隆人存在的问题有__________（答两点）。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、A【分析】【分析】

核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；原理是细胞核的全能性。

【详解】

根据题干信息分析可知；该项技术是核移植，依据的生物学原理是动物细胞核全能性。

综上所述；BCD不符合题意，A符合题意。

故选A。2、B【分析】试题分析：DNA连接酶能连接两个DNA片段，而不是将单个核苷酸连接到已有的DNA链上，故A错误，B正确；两个DNA链中的氢键的形成不需要酶的作用，故C错误；DNA连接酶包括E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端；也能连接平末端，只不过连接平末端的效率较低，故D错误。

考点：本题考查基因工程的工具有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。3、C【分析】【分析】

根据题干信息“如果在原肠胚的末期；未来发育为蝾螈下肢的部分移植到蝾螈胚胎不长下肢的部分，将发育为一条额外的腿”，说明原肠胚的末期细胞已经分化，并确定了细胞发育的方向，在移植这种细胞后，它们将继续分化发育成特定的组织和器官。

【详解】

A；原肠胚末期组织和器官并未形成；但是出现了细胞的分化，A错误；

B；原肠胚末期之前；细胞已经开始分化，B错误；

C；根据题干信息可知；原肠胚末期时细胞已确定了发育的方向，C正确；

D；原肠胚末期的细胞移植后只发育成特定的组织器官；不能体现细胞的全能性，D错误。

故选C。

【点睛】

精、卵结合后，受精卵开始卵裂，从卵裂期到桑椹胚的早期胚胎，细胞具有全能性，原肠胚的细胞已经分化，不具有全能性。4、A【分析】【分析】

1.单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体;

2.单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确；高效、简易、快速的优点．②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症；可制成“生物导弹”。

【详解】

A；经①诱导融合过程形成的细胞不都能无限增殖并产生相应抗体的细胞；还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，A错误；

B；②过程需要筛选出既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞并克隆单个杂交瘤细胞；获得单克隆抗体，B正确；

C；用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞；在原位杀死癌细胞，其中，构成“弹头”的化学药物、细胞毒素等物质没有选择杀伤癌细胞的功能，而单克隆抗体能将这种杀伤功能定位，C正确；

D；过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性；使其靶向作用非常准确，D正确。

故选A。

【点睛】5、D【分析】试题分析：动物胚胎移植常用桑椹胚或囊胚进行胚胎移植；A正确；受体母畜必须处于与供体母畜必须进行同期发情处理，B正确；一般要对母本需先注射促性腺激素促进其超数排卵，C正确；由该技术培育而成的动物胚胎可能来自受精卵，所以遗传物质不是全部来自一个亲本，D错误。

考点：本题考查动物胚胎移植的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。6、A【分析】【分析】

“无废弃物农业”是生态工程最早和最生动的模式；通过积极种植能够固氮的豆科植物，以及收集一切可能的有机物质，采用堆肥和沤肥等方式，制成有机肥料，改善土壤结构，培育土壤微生物，实现土壤中养分的循环利用。

【详解】

A；对有机废弃物进行②、③的处理；既实现了物质和能量的多级利用，又减少了④处理过程中产生的污染问题，所以从资源化、无害化角度分析，途径②、③优于④，A错误；

B；施用有机肥能为作物提供更多的营养物质；可改善土壤结构，培育土壤微生物，B正确；

C；结合分析可知该模式遵循物质循环再生原理、整体性原理等基本原理；C正确；

D；通过蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者能有效地促进系统中物质循环利用以及物质和能量的多级利用；D正确。

故选A。二、多选题(共9题，共18分)7、B:C【分析】【详解】

在基因工程，通常使用同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们产生相同的黏性末端，以便形成重组质粒，A错误；限制酶和DNA连接酶是构建重组质粒常用的工具酶，B正确；基因工程的操作的第一个步骤是提取目的基因，C正确；质粒不是细胞器，是广泛存在于细菌细胞质中的环状DNA分子，D错误。8、B:D【分析】【分析】

植物组织培养的过程是离体的植物器官；组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化形成根，芽，最终发育成植物体。

根据题图；方法一是采用植物组织培养的方法培育脱毒苗，方法二是通过基因工程手段获得的抗病毒草莓。

【详解】

A；植物的分生区附近(如茎尖)的病毒极少；几乎不含病毒，因此对茎尖进行植物组织培养，可以获得脱毒植株，A正确；

B；在植物组织培养中；需要用75％的酒精和5％次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理，保证植物组织培养的成功，B错误；

C；A、C两个过程属于植物组织培养；都经过脱分化形成愈伤组织和再分化形成根芽，最终发育成植株，C正确；

D；方法一获得的无病毒苗应根据植株性状检测；不需要接种病毒；方法二获得的抗病毒草莓需要通过接种病毒检测，D错误。

故选BD。9、B:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用灭活的仙台病毒诱导融合；形成杂交瘤细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖；但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞和骨髓瘤细胞、免疫B细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B正确；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止细菌污染；D错误。

故选BC。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。10、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞；具有很强的分裂能力，可以用胚胎干细胞培养；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时，受体细胞是受精卵，因为受精卵全能性最高。

【详解】

A；采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时；受体细胞是受精卵而不是乳腺细胞，因为受精卵全能性最高，A错误；

B；植物分生区附近（如茎尖）含病毒极少；甚至不舍病毒，因此可采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗，B正确；

C；愈伤组织分裂能力强；易发生突变，容易获得突变体，C正确；

D；囊胚的内细胞团细胞具有很强的分裂能力；可以用于胚胎干细胞培养，进而诱导培养成各种组织和器官，D正确。

故选BCD。11、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中；使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。

【详解】

A；三亲婴儿“的细胞核基因一半来自母亲；一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，所以“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，A正确；

B；该技术能避免“三体婴儿”携带母亲细胞质中的致病基因；B错误；

C；若进行体外受精；应使用培养到MⅡ中期的卵母细胞，该时期的细胞才具备完成受精的能力，C正确；

D；国家不能筛选胎儿的性别；则不能选择X精子或Y精子，D错误。

故选BD。12、B:C【分析】【分析】

试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；“设计试管婴儿”没有应用细胞核移植技术；A错误；

B；“试管婴儿”技术不需要检测基因；也不需要经过遗传学诊断，B正确；

C；“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都需要体外受精；都是有性生殖，C正确；

D；“设计试管婴儿”不同于为解决不孕夫妇的生育问题出现的试管婴儿。一般是为了救治病人；需要试管婴儿的骨髓、干细胞、脐带血等，这样的设计都符合伦理道德，D错误；

故选BC。13、A:C:D【分析】【分析】

囊胚期胚胎分化为了内细胞团和滋养层；内细胞团细胞具有全能性，可以诱导分化为各种类型的细胞。

【详解】

A；为获得更多的囊胚；可注射促性腺激素促进雌鼠产生更多的卵子，A错误；

B、胚胎干细胞和诱导出的各种动物细胞都需在CO2培养箱中进行培养；B正确；

C；用胰蛋白酶将细胞a周围的胶原蛋白水解后；而不是将膜蛋白水解，可获得分散的胚胎干细胞，C错误；

D、细胞a是内细胞团细胞，是胚胎干细胞的良好来源，细胞b是滋养层细胞已经不是具有全能性的胚胎干细胞了；将胚胎干细胞培养在饲养层上，只能分裂不能分化，D错误。

故选ACD。14、A:B:D【分析】【分析】

1；哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。

2；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

3；胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症；如帕金森综合症。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；图中A所示细胞为内细胞团细胞；具有全能性，将来能够发育成胎儿的各种组织，A错误；

B；胚胎干细胞的体积小；细胞核大，核仁明显，B错误；

C；在体外培养的条件下；胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，C正确；

D；利用胚胎干细胞培育的人造器官；还正在临床试验阶段，D错误。

故选ABD。

【点睛】15、B:D【分析】【分析】

据题干信息可知；该生态农业模式，沿袭了“无废弃物农业”的传统，充分利用了秸秆中的能量，从而提高能量的利用率，菌糠和秸秆由废弃物变为了生产原料，实现了物质的循环利用，该模式既让土地休养生息，在确保土地的肥力的同时又增加了生态效益和经济效益。

【详解】

A；由图观察可知；赤松茸接种在以秸秆发酵的栽培基料上，属于该生态系统中的分解者，A错误；

B；该模式沿袭了“无废弃物农业”的传统；遵循物质循环再生原理，菌糠和秸秆由废弃物变为了生产原料，实现了物质的循环利用，B正确；

C；该模式充分利用了秸秆中的能量；从而提高能量的利用率，但不能提高能量的传递效率，C错误；

D；该模式既让土地休养生息；在确保土地的肥力的同时又增加了生态效益和经济效益，D正确。

故选BD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码17、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补19、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存20、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆21、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用22、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖23、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共40分)24、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。25、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。26、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。27、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。28、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、实验题(共4题，共8分)29、略

【分析】【分析】

本题主要考查人体免疫系统在维持稳态中的作用及单克隆抗体制备过程。由题意分析可知；小鼠血清中含有多种血清，能和多种抗原结合。

【详解】

（1）将EV71灭活病毒；EV71外壳蛋白VP1和VP2作为抗原；分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的体液免疫，产生相应的抗体。

（2）①EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体；判断依据是EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71；VP1和VP2多种抗原。

②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度；目的是排除抗体与其他蛋白的非特异性结合对实验结果的影响。

③制备抗EV71单克隆抗体时；选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2。

（3）取相应免疫组小鼠的脾脏；剪碎并用胰蛋白酶处理得到小鼠脾脏细胞，用灭活的病毒诱导，与骨髓瘤细胞融合，筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。

（4）为进一步研究抗体的作用效果；科研人员培养上述杂交瘤细胞株，获得5种单克隆抗体，分别将它们与等量EV71混合，加入到5组RD细胞（EV71的宿主细胞）中，测定RD细胞被EV71感染概率，以分析抗体的作用效果。

【点睛】

单克隆抗体的制备：

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【解析】抗原体液不是EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原抗体与其他蛋白的非特异性结合对实验结果VP1第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2胰蛋白骨髓瘤RD细胞对EV71的感染率30、略

【分析】【分析】

动物细胞培养需要提供充足的营养供给，如微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等，95%空气+5%CO2的气体环境；温度36.5℃±0.5℃，pH在7.2～7.4的无菌；无毒的环境；通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染；此外应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。对比正常乳腺组织和乳腺癌患者组织内R基因的表达情况，可知，R基因在乳腺癌组织中表达量呈下降趋势。

【详解】

（1）乳腺细胞的原癌基因或抑癌基因发生突变后；转化为能无限增殖的癌细胞，导致癌组织体积和重量不断增加。

（2）基因表达的产物是蛋白质；蛋白质的合成场所是核糖体。

（3）①动物细胞培养需要在CO2培养箱中培养；人工配制的培养液中除抗生素和一般营养物质外，还缺乏一定的细胞因子等物质，所以需要加入动物血清等。

②免疫荧光技术的原理是以R基因的表达产物为抗原；注射到免疫动物体内，引起特异性免疫反应，获得特异性的抗体，将获得的抗体标上荧光素（荧光素在光的照射后会发出一定波长的荧光），再注射到待测组织或细胞中，利用抗原-抗体杂交技术，依据荧光的位置和强度可以确定组织中抗原的数量和位置。

③通过正常细胞和乳腺癌细胞荧光强度的比较；可知R基因在乳腺癌组织中表达下降，R基因表达量降低会促进乳腺癌的发生。

【点睛】

本题结合动物细胞培养和实验，考查学生对动物细胞培养条件的掌握和分析实验现象，得出结论的能力。【解析】突变无限增殖核糖体CO2动物血清抗原抗原抗体杂交法R基因在乳腺癌组织中表达下降，R基因表达量降低会促进乳腺癌的发生31、略

【分析】【详解】

试题分析：

（1）ES细胞具有发育的全能性；获取ES细胞的常用方法：从早期胚胎（囊胚内细胞团）中分离；从胎儿的原始性腺中分离；通过核移植技术培育得到。

（2）①蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。所以根据蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造技术叫做蛋白质工程。

②目的基因的扩增常用PCR技术。

（3）基因表达载体由目的基因；标记基因、启动子和终止子等组成；其中标记基因用于细胞的筛选。质粒具有的一个或多个限制酶的切割位点，使目的基因插入其中成为可能，因此常被选作运载体。

（4）利用基因工程技术；将基因表达载体（目的基因）ES细胞，并从中筛选，然后培育出小鼠。①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

②通过观察小鼠的性状来检测该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组；这属于个体水平的鉴定。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【解析】早期胚胎（原始性腺）全能性蛋白工程PCR标记限制酶切割将基因表达载体（目的基因）导入ES细胞早期胚胎培养胚胎移植个体32、略

【分析】试题分析：克隆是取出一只动物的体细胞核；植入另一细胞细胞质中，然后发育成完整个体的过程；克隆分为生殖性克隆和治疗性克隆，我国政府的态度是不反对治疗性克隆，禁止生殖性克隆；

（1）“中中”和“华华”的诞生；利用动物细胞核移植技术；胚胎移植技术等，属于无性生殖，体现出动物细胞的细胞核具有全能性。中国政府对克隆技术的态度是禁止生殖性克隆人，但是不反对治疗性克隆。一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。

（2）动物细胞难以脱分化；体细胞核内虽然有全套基因，但大部分基因在分化后就不再表达，很难被激活，所以相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难；卵母细胞质中含有激活体细胞核全能性的物质，所以动物细胞克隆一般用去核的卵母细胞作为受体细胞。

（3）根据题意分析，在多能干细胞的培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等物质可进一步使之变成血液细胞、骨细胞、皮肤细胞、肝细胞以及神经细胞等多种组织细胞。【解析】细胞核无性繁殖不赞成不允许不支持细胞难以脱分化，体细胞核内虽然有全套基因，但大部分基因在分化后就不再表达，很难被激活去核的卵母细胞卵母细胞质中含有激活体细胞核全能性的物质分化诱导因子牛黄酸、丁酰环腺苷酸六、综合题(共4题，共20分)33、略

【分析】【分析】

本题以甲型流感病毒为素材；考查了基因工程；基因的表达、免疫调节的相关知识，意在考查学生的理解能力，综合运用所学知识解决问题的能力。可以改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力，此过程中需要用到PCR技术，然后通过基因工程构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。最后利用转基因宿主细胞制备疫苗，以预防该病毒再次侵染。

【详解】

（1）PCR技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法；由高温变性；低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。因此以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用PCR技术扩增，由于将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列，因此肽链合成提前终止，这样与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的多肽（或蛋白质），因此不能产生子代病毒。

（2）基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建；将该基因与载体连接后才能导入宿主细胞，检测目的基因是否成功表达上述tRNA时，利用核酸分子杂交技术，即用相应的DNA探针与宿主细胞的总RNA分子进行杂交鉴定，进而筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。

（3）因为设计的宿主细胞具有能合成一种特殊tRNA的基因；其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸（Uaa），因此可在补加非天然氨基酸（Uaa）的培养基中进行培养，筛选出宿主细胞。进而利用该宿主细胞，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。因为转录在宿主细胞内进行，且启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，因此需要使用宿主细胞的RNA聚合酶。故选D。

（4）不具侵染性的流感病毒灭活疫苗；不能侵入细胞内部，只能引起体液免疫，产生相应的抗体与记忆细胞，而该疫苗能够侵入细胞，引起的免疫属于细胞免疫。

【点睛】

解答本题需要考生掌握基因工程的原理、操作步骤及其一些细节问题，同时还要熟练掌握有关基因的表达及免疫调节方面的问题。【解析】①.PCR②.多肽（或蛋白质）③.载体④.总RNA⑤.非天然氨基酸（Uaa）⑥.D⑦.细胞34、略

【分析】【分析】

1.在体外受精前；要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法两种：对于啮齿动物；家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法，即将取自附睾的精子，放入人工配制的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能。

2.一般来说；动物细胞体外培养需要满足以下条件。

（1）无菌；无毒的环境。首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境；即对培养液和所有培养用具进行无菌处理。

（2）营养。细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同；例如，需要有糖