2025年新世纪版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年新世纪版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、如图为胚胎发育过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.该时期称为桑椹胚期，已经发生细胞分化C.进行胚胎分割时，可以选择图示时期的胚胎进行D.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化2、甲；乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中制备葡萄酒；在适宜的条件下进行发酵，发酵过程中，每隔一段时间均排气一次，如图所示。下列说法错误的是（）

A.甲同学的错误是未夹住发酵瓶的充气管，丙同学的错误是瓶中发酵液过多B.试验中，甲同学发酵产生的葡萄酒会从充气管中流出C.若实验中未及时排气，乙同学发酵瓶瓶塞可能被冲开D.一段时间后，只有乙和丙能够成功得到果酒3、下列有关微生物的培养说法正确的是（）A.在同一培养基中生长的微生物菌落所表现的形态、大小、隆起程度和颜色均相同B.在微生物培养的接种过程中超净工作台需要在紫外灯照射下进行，以防止杂菌污染C.小鼠肺炎病毒（PVM）的培养过程需要进行灭菌操作D.在统计菌落数目的时候需要将某一适宜的稀释度下的各平行组和对照组菌落数目相加取其平均值4、以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析，下列叙述正确的是（）

A.经过程①获得的a、b称为原生质层，②过程利用了细胞膜的流动性B.c细胞只有AABB这一种类型，再生出细胞壁标志着原生质体融合完成C.过程③和④分别是脱分化和再分化，脱分化与再分化过程具有基因选择性表达D.获得的植物d，因为在减数分裂时同源染色体能正常配对，所以理论上是可育的5、2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”，下列相关叙述正确的是（）A.“中中”和“华华”的获得涉及动物体细胞核移植过程B.通过此方法获得的克隆猴，与核供体相比，其体细胞的染色体数目加倍C.胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度大于体细胞核移植，因为与成体细胞相比，其全能性更加难以表现出来D.此过程中若分别以雌性和雄性个体的体细胞作为核供体，通常得到的两个克隆动物体细胞的性染色体组合相同6、现代生物科学技术在医药、动物繁殖、植物育种、环境保护等领域广泛应用。下列叙述错误的是（）A.利用杂交瘤技术可以制备大量单克隆抗体，为肿瘤治疗提供药物B.利用体外受精等技术可以实现优质奶牛种群的快速扩大，提高经济效益C.利用基因工程技术可以开发生物可降解的新型塑料，维护生态环境D.利用植物体细胞杂交技术获得的“番茄—马铃薯”具有两种植物的全部优良性状7、科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为：（）A.基因工程B.蛋白质工程C.胚胎工程D.细胞工程评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)8、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管9、下列关于基因工程中的基本工具的说法中，正确的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶和DNA连接酶B.DNA连接酶可将任意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C.质粒上必须有标记基因才可作为载体D.限制性内切核酸酶一般不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子10、下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是（）A.克隆羊、试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态C.受精时防止多精入卵的两屏障是顶体反应和卵细胞膜反应D.滋养层细胞在囊胚期发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定11、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因12、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种13、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中。下列相关叙述错误的是（）

A.获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株D.杂种植株含有控制甲品种青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递14、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，需要用科学的方法测定微生物数量。下列相关叙述不正确的是（）A.利用以尿素作为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出分解尿素的细菌B.平板划线法可以分离得到单菌落，也可用来测定样品中的活菌数C.样品的稀释度直接影响平板上的菌落数目，因此稀释度越大越好D.利用显微镜进行直接计数，可快速直观地测定样品中的活菌数15、下列有关菊花组织培养的叙述，正确的是（）A.实验中使用的培养基、器械和外植体都要灭菌B.外植体用酒精消毒30s后，再用流水充分冲洗C.诱导愈伤组织期间不需要光照，后续培养需要适当的光照D.一般先诱导根的形成，再转接到诱导生芽的培养基上评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。17、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

18、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。19、获取目的基因的方法______、______、______20、目的基因是指：______21、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。22、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）23、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________24、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共4题，共12分)25、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误26、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误27、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误28、生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质的区别。()A.正确B.错误评卷人得分五、综合题(共4题，共8分)29、EPO是促红细胞生成素的英文简称；是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：

(1)从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到_________，再通过__________获得大量EPO基因。

(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8～12枚，为使其超数排卵，需注射_________激素以排出更多的卵子，培养到___________时期与获能的精子相遇时，精子首先发生__________反应；穿越放射冠和透明带，完成体外受精。

(3)①过程构成了基因表达载体，内部包括不可缺少的组成部分，其中________能驱动基因的转录。

(4)采用_____技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及_______等物质。

(5)当胚胎发育至________时期，向受体移植，为获得更多个转基因胚胎，要将___________均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。

(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可以采用___________技术对血液来进行检测。30、重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物；使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子，并将改造后的目的基因导入质粒构建目的基因表达载体。

(1)上图所示的重叠延伸PCR技术中，PCR1的引物是_________。PCR4可获得大量定点诱变目的基因，此时的引物为__________。PCR3时模板DNA不能选择DNA分子③的原因是___________。

(2)为使重叠延伸PCR技术改造后的目的基因（该基因序列不含图中限制酶的识别序列）能与载体正确连接，PCR4时，应在基因上、下游引物的_________端分别添加限制酶_________的酶切位点。

(3)将目的基因、质粒及大肠杆菌混合，温育一段时间后涂在含四环素的平板上培养，一段时间后平板上长出菌落。这些菌落的菌体内_________（填“一定不一定”）含有目的基因，理由是_________。31、研究发现部分晚期胃癌患者体内存在人表皮生长因子受体2（HER2）的过量表达因此胃癌治疗可用HER2作为免疫治疗靶点。T—Dxd是由人源化抗HER2抗体参与构成的一种抗体——药物偶联物；可将细胞毒性药物选择性地送至胃癌细胞，达到治疗癌症的效果。为获得T—Dxd，科研人员先制备鼠源抗HER2的单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题：

(1)上述实验前需给小鼠注射特定的抗原，这些抗原应取自患者的______细胞，并定期多次注射，该处理的目的是______。

(2)写出以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：______。

(3)已知合成核苷酸有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如下图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。筛选1的培养基是加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”，筛选的依据是______。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是______。

(4)鼠源抗体易引发人体免疫排斥，科研人员拟通过改造抗体结构的FR区，获得鼠源区域占比更小的人源化抗体。请对下列操作步骤进行正确排序______

A．推测对应的核糖核苷酸序列。

B．设计替换FR区氨基酸序列。

C．从细胞培养液中分离抗体。

D．合成新的基因或改造基因。

E．导入受体细胞。

(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG），该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路______。32、干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白；广泛用于病毒感染；癌症等疾病的治疗。某科研小组欲利用现代生物工程技术获得高品质干扰素，并进行了一系列研究。图1是人干扰素基因及其上下游限制酶切割位点的示意图，图2是用于构建基因表达载体的质粒结构示意图，图3是获得转基因动物的过程。请据图分析回答相关问题。

(1)构建基因表达载体需要用到的酶有限制酶和___________。为了正确构建基因表达载体，图1和图2均需用__________切割。将构建完成的基因表达载体导入受体后，在加入了__________的培养液中培养；以筛选成功导入的细胞。

(2)干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，其可以在-70℃下保存半年，欲达到这一目的，可以采用的技术是__________，该技术的基本思路与中心法则___________（填“相同”或“相反”）。

(3)图3主要用到的技术手段有____________。获得的精子和卵子在受精前分别要进行的处理是___________。将基因表达载体导入受精卵常用的方法是__________。

(4)如果要将转基因动物作为乳腺生物反应器，需要取___________进行性别鉴定。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

分析题图：图示为胚胎发育过程某一时期示意图；该时期为囊胚期，其中①为透明带；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。

【详解】

A；由以上分析可知；图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；据图分析；图示时期为囊胚时期，该时期细胞已经发生分化，B错误；

C；图示为囊胚期；进行胚胎分割时，应选择图示时期的胚胎或之前的桑椹胚进行，C正确；

D；①为透明带；囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，D正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．实验表明，醋酸菌对氧气的含当量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

AB；酒精发酵是无氧呼吸；应提供无氧环境，因此甲同学的操作有误，其未夹住发酵瓶的充气管，导致发酵液从充气管流出，使发酵液变酸；果酒发酵时，发酵罐中的发酵液不能超过容积的2/3，因此丙同学的操作有误，加入的发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口，导致排气时发酵液从排气管中流出，A正确、B错误；

C；乙同学由于未及时排气；导致发酵瓶中气压过大而冲开瓶塞，C正确；

D；酒精发酵是无氧呼吸；应提供无氧环境，因此甲同学的操作有误，其未夹住发酵瓶的充气管，导致发酵液从充气管流出，使发酵液变酸，因此甲同学实际得到的发酵产品是葡萄醋；乙同学操作正确，其进行果酒发酵得到的是果酒；果丙同学的操作虽然有误，但因为其它操作正确，其得到的是葡萄酒，D正确。

故选B。3、C【分析】1；微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染；故实验室培养时需严格无菌操作对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌接种环用灼烧灭菌实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。

2；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

3；菌落的特征有菌落的形状、大小、隆起程度、和颜色等方面；同种微生物菌落特征相对稳定。

【详解】

A；菌落的特征有菌落的形状、大小、隆起程度、和颜色等方面；同种微生物菌落特征相对稳定一般相同，A错误；

B；在微生物培养的接种过程中；超净工作台不需要在紫外灯照射下进行，B错误；

C；小鼠肺炎病毒的培养过程需要进行灭菌操作；C正确；

D；在统计菌落数目的时候；需要将某以一适宜的稀释度下的各平行组菌落数目相加取其平均值，D错误。

故选C。

【点睛】4、D【分析】【分析】

题图分析：图示为植物体细胞杂交技术流程图；其中①是去除植物细胞壁获得原生质体的过程；②是诱导原生质体融合的过程；③是再生形成新的细胞壁的过程；④是脱分化过程，⑤是再分化过程。

【详解】

A、经①去除植物细胞壁过程获得的a、b称为原生质体；A错误；

B；若只考虑两两融合；则融合的细胞有三种：AA.BB.AABB，B错误；

C；由分析可知；过程④和⑤分别是脱分化和再分化，C错误；

D；通过植物体细胞杂交获得的植物d；因为细胞中有同源染色体存在，在减数分裂时能正常的联会、配对，所以可育，D正确。

故选D。5、A【分析】【分析】

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。

【详解】

A；“中中”和“华华”是利用体细胞核移植技术和胚胎移植等技术获得的克隆猴；A正确；

B；通过此方法获得的克隆猴；与核供体相比，其体细胞的染色体数目不变，B错误；

C；胚胎细胞核移植技术的难度小于体细胞核移植技术；因为胚胎细胞分化程度相对较低，恢复其全能性更容易一些，C错误；

D；哺乳动物细胞核移植技术中；若分别以雌性和雄性个体的体细胞作为核供体，通常得到的两个克隆动物体细胞的常染色体组成相同，性染色体组合不同，D错误。

故选A。6、D【分析】【分析】

1.植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

2.生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素；化学药物或细胞毒素；借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．疗效高，副作用小，位置准确。

【详解】

A；利用杂交瘤细胞培养技术可生产单克隆抗体；可与放射性同位素或化学药物结合，制成”生物导弹”，定向治疗癌症，A正确；

B；利用体外受精技术结合胚胎移植；可实现优质奶牛种群的快速扩大，B正确；

C；利用基因工程技术可以开发生物；如培育超级细菌，进而可降解的新型塑料，维护生态环境，C正确；

D；利用植物体细胞杂交技术；实现了两个物种的全部遗传物质的合并，但是目前还不能让杂种植株完全按人们的要求表现出双亲所有性状，D错误。

故选D。

【点睛】7、B【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。据此答题。

【详解】

基因工程是将符合人们要求的目的基因导入适宜的生物体内；使其高效表达，从中提取人们所需的蛋白质，或表现出某种性状，蛋白质产品仍然是天然存在的蛋白质。蛋白质工程是对控制蛋白质合成的基因进行改造，从而实现对相应蛋白质的改变，所得到的蛋白质已不是天然存在的蛋白质。题干中的操作涉及的基因显然不再是原来的基因，其合成的β﹣干扰素也不是天然的β﹣干扰素，而是经过人工改造的；符合人类需求的蛋白质，因而该生物技术为蛋白质工程，ACD错误，B正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)8、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。9、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性内切核酸酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶；A正确；

B；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键；B错误；

C；质粒上必须有标记基因才可作为载体；便于筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；限制性内切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保护自身DNA的安全，D错误。

故选AC。

【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES可以增殖而不发生分化。ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中能够维持不分化状态。

【详解】

A；试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式属于无性生殖，A错误；

B；胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态；B正确；

C；受精时防止多精入卵的两屏障是透明带反应和卵细胞膜反应；C错误；

D；囊胚期的滋养层细胞可用于性别鉴定；将来可以发育成胎膜和胎盘，D错误。

故选ACD。11、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。12、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。13、A:C【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞；并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

【详解】

A；获得的融合原生质体需放在等渗的无菌溶液中；不能放在无菌水中，否则会吸水涨破，A错误；

B；流程中A为去除细胞壁；可使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，B过程为诱导原生质体融合，需要用聚乙二醇进行诱导，B正确；

C；形成愈伤组织的脱分化培养基和再分化形成植株的再分化培养基中细胞分裂素和生长素比例不同；C错误；

D；甲品种控制多种优良性状的基因；为核基因，杂种植物细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具有一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。

故选AC。14、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时；主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。

【详解】

A；以尿素作为唯一氮源的培养基为选择培养基；可从土壤中分离出分解尿素的细菌，A正确；

B；平板划线法能将单个微生物分散到培养基上；从而分离得到单菌落，但是不可以用来测定样品中的活菌数，稀释涂布平板法可以计数，B错误；

C；样品的稀释度太大；会导致微生物数量太少，一般要求稀释后平板上的菌落数在30到300之间比较合适，C错误；

D；利用显微镜进行直接计数；可快速直观地测定样品中的活菌数和死菌数，D错误。

故选BCD。15、B:C【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。

【详解】

A；无菌技术包括消毒和灭菌；植物组织培养需要无菌操作，防止杂菌污染，所用器械需灭菌，实验人员和外植体需消毒操作，A错误；

B；菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min；用流水冲洗干净后，在70%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用无菌水多次冲洗，B正确；

C；诱导培养愈伤组织期间一般不需要照光；在后续培养过程中，每日需要给予光照，目的是诱导叶绿素的形成，进一步形成叶绿体进行光合作用，C正确；

D；诱导愈伤组织形成试管苗的过程；需要将生长良好的愈份组织先转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导生根，D错误。

故选BC。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存17、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】322、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性23、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。24、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共4题，共12分)25、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。26、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。27、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。28、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质区别；最重要的体现在目的不同。

【详解】

治疗性克隆：是指把克隆出来的组织和器官用于治疗疾病，这种用于医疗目的的使用克隆技术制造胚胎称为治疗性克隆。生殖性克隆：处于生殖的目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎。治疗性克隆和生殖性克隆最重要的差别是目的不同。五、综合题(共4题，共8分)29、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。(1)

获取EPO基因（目的基因）；可从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到cDNA，再经PCR技术扩增。

(2)

为使供体母鼠超数排卵；需注射促性腺激素。采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期才具备受精能力。当卵子与获能的精子相遇时，精子首先发生顶体反应，穿越放射冠和透明带，完成体外受精。

(3)

基因表达载体的组成部分中；能驱动基因转录的是启动子。

(4)

将重组表达载体导入小鼠受精卵中；通常采用显微注射技术。发育培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素；激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清（血浆）等物质。

(5)

胚胎移植时；应选择发育到桑椹胚或囊胚阶段的胚胎。借助胚胎分割技术可获得更多的转基因胚胎，胚胎分割时，需要将内细胞团进行均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。依题意“采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物”可推知，在胚胎移植前，需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。

(6)

若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO；可以采用抗原-抗体杂交技术对血液来进行检测。

【点睛】

本题以“促红细胞生成素”的合成为题材，考查基因工程胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，识记胚胎移植的原理及应用，能结合题中信息准确答题。【解析】(1)①.cDNA②.PCR技术。

(2)①.促性腺②.减数第二次分裂中期③.顶体。

(3)启动子。

(4)①.显微注射②.血清##血浆。

(5)①.桑椹胚或囊胚②.内细胞团③.性别鉴定。

(6)抗原-抗体杂交30、略

【分析】【分析】

PCR原理：在DNA复制中；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以四种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物的作用下，DNA聚合酶从引物3’端开始延伸DNA链。

【详解】

（1）由于DNA合成的方向是从子链的5’端到3’端延伸的；根据PCR1的产物，可知引物是引物A；引物C。根据PCR2的产物，PCR2的引物为引物B、引物C，将DNA分子②④混合后退火可得到③⑤，PCR3获得DNA⑥，DNA⑥分子的3’端与引物D互补配对，5’端与引物C互补配对，所以PCR4的引物为引物C、引物D；PCR3为了获得重叠链，模板DNA不能选择DNA分子③的原因是子链的延伸方向只能从5’→3'，以DNA分子③作模板时子链不能延伸。

（2）为使重叠延伸PCR技术改造后的目的基因能与载体正确连接；PCR4时，应在基因上；下游引物的5'端分别添加限制酶，因为子链的延伸是从3'端开始的。目的基因应插在启动子和终止子之间，由于pstI靠近终止子，所以应在基因上、下游引物的5'端分别添加限制酶Kpnl、EcoRl。

（3）目的基因、质粒及大肠杆菌混合，可能有一些质粒与目的基因成功连接，可能也有些质粒没有与目的基因连接，这些质粒若成功导入大肠杆菌，由