2025年北师大版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案VIP

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①“多利”的诞生属无性繁殖②“多利”的诞生采用了核移植技术。

③“多利”的诞生采用了胚胎移植技术④“多利”的诞生采用了细胞融合技术。

⑤动物细胞培养是整个技术的基础⑥“多利”的诞生采用了胚胎分割技术A.①②④⑤⑥B.①②③④⑥C.①②③⑤D.①②③④⑤2、细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下图：将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在已接种被检菌的固体培养基表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈，结果如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.抗生素Ⅲ的效果大于抗生素ⅠB.为了获得上述结果，应使用稀释涂布平板法C.抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素Ⅳ的抗性越强D.抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株3、转基因食品存在“是否安全”的争议，有人认为转基因食品是有害的，比如抗“草甘膦（除草剂）”转基因农作物的种植，使喷洒除草剂的人患癌症。请用已学知识判断，下列说法正确的是（）A.用抗除草剂植物生产的食品会导致人患癌症B.食用转基因大米一定会对人的健康造成危害C.严格管理和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障D.食用转基因食品，其中的基因会整合到人的基因组中4、下图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述正确的是（）

A.由于动物细胞间存在粘连蛋白，故甲→乙和丙→丁过程需要用胃蛋白酶处理B.丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基进行培养C.丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，而丁过程则不会出现此现象D.为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气5、腐乳是我国民间的传统发酵食品，营养丰富，味道鲜美。下列有关叙述正确的是（）A.有多种微生物参与，发酵过程需要隔绝氧气B.卤汤中酒的含量一般控制在21%左右，加酒过少，酶会变性失活C.现代腐乳生产需要在严格无菌条件下，避免其他菌种污染，影响产品质量D.腐乳装瓶时，动作要慢且小心，整齐摆好豆腐、加入卤汤后密封6、下列关于动物体细胞培养过程中细胞的活动或特性的表述，错误的是（）A.细胞通常贴壁生长B.细胞进行有丝分裂C.细胞之间一定会出现接触抑制现象D.有些细胞可以悬浮培养7、图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。下列有关叙述正确的是（）

A.“中中”不受卵子b的基因控制B.图中利用了干细胞技术C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D.“中中”的染色体数目与a细胞相同评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器9、用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别单独酶切同一种DNA片段；酶切位点及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果如图。以下叙述错误的是（）

A.XhoI和SalI两种酶识别的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物C.泳道②中的酶切产物可用DNA连接酶拼接成一个重组DNA分子D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA10、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充11、筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后；得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是。

A.培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源B.两个菌落中的微生物为同一种微生物C.两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大12、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种13、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上14、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止15、在新冠病毒的核酸检测过程中采用的逆转录PCR（RT—PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的广泛应用。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，进而获得检测的目的基因S。下列关于RT-PCR的叙述错误的是（）A.RT-PCR所用的酶包括逆转录酶和热稳定RNA聚合酶B.RT-PCR所用的两引物序列不同，两者间可进行互补配对C.RT-PCR过程中需添加ATP，反应过程中会有磷酸键断裂D.至少经过2次循环，方可获取与目的基因等长的DNA单链16、北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述不正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其表达评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地说，就是按照_____，把一种生物的_____提取出来，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遗传性状。18、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。19、动物基因工程：______。20、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。21、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。22、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共3题，共18分)24、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误25、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误26、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)27、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基；成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是__________，这种培养基属于__________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”呼吸作用的类型是__________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是____________________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106倍稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________，此对照实验的目的是____________________。28、研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用；两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果29、科研人员进行了土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；实验流程如图1所示。农药；除草剂的长期使用，会使土壤受到严重污染。某科研小组为筛选能分解除草剂草甘膦的微生物，其流程示意图如图2所示。回答下列问题：

(1)图1中，“？”处是__________，纯化培养时采用的接种方法是_______________，该方法可用于菌落数的统计，原因是_________________________。

(2)图1中纯化培养所利用的培养基在营养成分和物理性质上的特点分别是____________________，图1和图2中的两个培养基在用途方面的共同点是____________________。

(3)图2中的接种方法需要连续划线，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是_________________。结果有的菌落周围有透明圈而有的没有，原因是________________。30、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分六、综合题(共3题，共24分)31、已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原；在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下，请回答下列问题：

（1）实验步骤①所代表的过程需要__________________酶催化。

（2）步骤②构建重组DNA分子A和重组DNA分子B必须使用限制性核酸内切酶和____________酶，后者的作用是将限制性核酸内切酶切割的______________和________________________________连接起来。

（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导人大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其主要原因是S基因在大肠杆菌中不能_________________，也不能__________________。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用_______________与__________________进行抗原—抗体特异性反应实验；从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________（填“相同”或“不同”），根本原因是_____________________________________。32、MAP30蛋白是一种能使Ⅰ型核酸核糖体失活的蛋白质；存在于苦瓜果实和种子中。实验表明，MAP30蛋白具有抗肿瘤；抗菌、抗病毒等功能，近年来引起人们的广泛关注。现有一科研团队欲培育高效表达该基因的马铃薯新品种。请回答下列问题。

（1）获取MAP30蛋白基因，人们可从_________提取mRNA，再进行逆转录获得。这样得到的基因和从基因组文库中获取的基因的区别主要是其不含____________。

（2）获得目的基因后可利用PCR技术对其进行扩增，所用的缓冲液中除目的基因外，还应包括______________等物质。

（3）构建基因表达载体时，人们常常分别使用两种限制酶剪切目的基因和运载体，这样做是为了避免出现___________________________________________。

（4）将基因表达载体导入马铃薯受体细胞后，可用______________技术得到转基因幼苗。检测MAP30的基因是否成功表达，可用______________技术。33、干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质；若人的干扰素基因在大肠杆菌内表达，产生的抗病毒性较低且保存困难，若将第17位的半胱氨酸改造为丝氨酸，则生产出的干扰素的抗病毒性是原来的100倍，且可在70℃条件下保存半年，下图是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题。

（1）③过程将B导入大肠杆菌，需用_________对大肠杆菌进行处理，使其处于一种能吸收周围环境中_________的生理状态。

（2）要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于__________的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含____________的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。这种改造的干扰素的生产属于_________工程技术。

（3）下面是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），甲、乙表示相关结构或细胞。图中不同限制酶切割基因后将产生不同的末端，甲代表的是重组质粒，乙代表番茄细胞，可用_______酶和_________酶切取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。

参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

【详解】

①克隆动物没有两性生殖细胞的结合；属于无性繁殖，①正确；

②克隆采用了核移植技术；即将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组细胞，②正确；

③克隆绵羊“多利”的培育采用了核移植技术；动物细胞培养和胚胎移植技术；③正确；

④克隆不涉及细胞融合技术；④错误；

⑤动物细胞工程的基础是动物细胞培养；⑤正确；

⑥“多利”的诞生没有采用了胚胎分割技术；⑥错误。

故选C。

【点睛】2、C【分析】【分析】

本实验是利用抗生素抑制细菌的生长来检测细菌对各种抗生素的药敏程度；实验结果可通过抑菌圈的大小来确定杀菌能力，抑菌圈越大表示杀菌能力越强。

【详解】

A；分析图解可知；抗生素Ⅰ的透明圈明显小于抗生素Ⅲ，因此对于该试验所用测试菌而言，抗生素I效果小于抗生素III，A正确；

B；微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；据图可知，图示为稀释涂布平板法的结果，B正确；

C；在抑菌圈中出现的菌落均是对该种抗生素具有抗性的菌株；无法通过题图信息分析判断它们之间抗性的强弱，若要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，C错误；

D；抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株；能够抵抗抗生素作用，D正确。

故选C。3、C【分析】【分析】

转基因食品；即利用生物技术，将某些生物的基因转移到其他物种中去，改造生物的遗传物质，获得的转基因生物，再以转基因生物为直接食品或为原料加工生产的食品就是转基因食品。

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；用抗除草剂植物生产的食品不一定会导致人患癌症；癌变是原癌基因和抑癌基因发生突变导致的，A错误；

B；食用转基因大米不一定会对人的健康造成危害；转基因大米中含有益成分，是否有危害不能一概而论，B错误；

C；严格管理和控制好目的基因的表达部位；则转基因食品安全性可以得到保障，C正确；

D；食用转基因食品；其中的基因会被消化分解，不会整合到人的基因组中，D错误。

故选C。4、B【分析】【分析】

1；图示为上皮细胞培养过程示意图；图中甲表示剪碎组织块，乙表示制成细胞悬液，丙表示原代培养，丁表示传代培养。

2；动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；由于动物细胞间存在粘连蛋白；故甲→乙和丙→丁过程需要用用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，A错误；

B；丙为原代培养；丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基进行培养，B正确；

C；丙原代培养过程和丁传代培养过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象；C错误；

D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养；D错误。

故选B。5、C【分析】多种微生物参与了豆腐的发酵；起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；腐乳制作需要多种微生物的参与；需要在有氧条件下进行，A错误；

B；卤汤中酒的含量一般控制在12%左右；B错误；

C；现代腐乳生产需要在严格无菌条件下；避免其他菌种污染，影响产品质量，C正确；

D；腐乳装瓶时；动作要快，D错误。

故选C。

【点睛】6、C【分析】【分析】

动物细胞培养的特点：贴壁生长；有接触抑制现象。

【详解】

A；动物细胞培养过程中；悬液中分散的细胞很快贴壁生长，A正确；

B；动物细胞培养是细胞增多的过程；细胞增殖的方式为有丝分裂，B正确；

C；动物细胞在培养过程中；当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞才会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，C错误；

D；动物细胞培养时；可将组织分散成单个细胞进行悬浮培养，D正确。

故选C。7、D【分析】【分析】

核移植是指将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

【详解】

A、“中中”也会受到卵子b细胞质遗传物质的影响；A错误；

B；据图可知；图中利用了体细胞核移植技术，没有用到干细胞技术，B错误；

C；d为受体动物；能为胚胎发育提供发育环境，但不提供遗传物质，C错误；

D；a是成纤维细胞；“中中”的细胞核中的染色体来自于a细胞，故“中中”的染色体数目与a细胞相同，D正确。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)8、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。9、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列；并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。

2；图1中SaLl有3个识别位点；能将DNA片段切成4段，Xhol有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。

【详解】

A；限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列；不同的限制酶能识别不同的脱氧核苷酸序列，A错误；

B；Sall将DNA片段切成4段；Xhol将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sall，泳道②为XhoⅠ，B正确；

C；同种限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，C正确；

D；限制酶切割双链DNA；酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。

故选AD。10、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】11、C:D【分析】【分析】

该选择培养基中的唯一碳源是淀粉；只有能利用淀粉的微生物才能存活。利用淀粉的微生物分解淀粉后，会产生以菌落为中心的透明圈。

【详解】

A.淀粉只含有C；H、O三种元素；因此培养基中的淀粉不能为微生物提供氮源，A错误；

B.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定为同一种微生物，B错误；

C.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；

D.透明圈是由于培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的；因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大，D正确。

故选CD。12、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。13、C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成；B正确；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，D错误。

故选CD。14、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

分析题干信息；在RT—PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，由此可知该过程需要逆转录酶和热稳定DNA聚合酶的催化。DNA解旋过程不需要解旋酶参与，反应过程中高温即可解旋。

【详解】

A；RT-PCR过程需要逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶；A错误；

B；引物之间不能相互配对；否则不能正常发挥作用，B错误；

C；RT-PCR过程中需添加的原料是dNTP；不需添加ATP，反应过程中会有特殊化学键断裂，C错误；

D；至少经过2次循环；方可获取与目的基因等长的DNA单链，D正确。

故选ABC。16、A:C:D【分析】【分析】

分析题图：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。基因表达载体通常由启动子；目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞。

【详解】

A；过程①是通过人工合成法获取的目的基因；由于真核生物体内的基因含有不能编码蛋白质的序列（内含子），导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，因此人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多；抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，可以通过DNA分子杂交或PCR技术检测受体细胞是否含有目的基因，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；但表达的产物通常是蛋白质，可利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因重组基因拼接技术DNA重组技术人们意愿某种基因修饰改造另一种生物细胞里定向18、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐21、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。23、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共3题，共18分)24、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。25、A【分析】【详解】

内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。

正确。26、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。五、实验题(共4题，共12分)27、略

【分析】【分析】

微生物的培养；培养基的成分必须含有碳源；氮源、水和无机盐。获取纯净微生物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

【详解】

（1）本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种；所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）分析培养基的配方可知；该培养基由化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，其他成分中为体现出提供碳源和氮源，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的类型是有氧呼吸。

（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术；防止外来杂菌入侵。

（4）平板划线操作的工具是接种环；对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（5））实验结束后；使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以杀死培养基上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

（6）实验设计过程应遵循对照原则；该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染，检验培养基是否灭菌合格。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术操作方法及接种微生物接种常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】筛选目的菌选择化合物A有氧呼吸防止外来杂菌入侵接种环灼烧防止造成环境污染不接种的空白培养基检验培养基是否灭菌合格28、略

【分析】【详解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。

(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染，需对器具培养基等进行消毒灭菌处理，培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。

(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速度越慢。

(4)抑菌实验时；在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【点睛】【解析】①.压榨②.过滤③.稀释涂布平板法(或：稀释混合平板法)④.高压蒸汽灭菌锅⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直径(或：大小)29、略

【分析】【分析】

将微生物接种到固体培养基常用稀释涂布平板法；接种前先要将菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一定的稀释度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成单个细胞，在适宜的条件下培养让菌体进行繁殖，能够在培养基表面形成单个菌落。稀释涂布平板操作：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽。②取少量菌液，滴加到培养基表面。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽冷却8-10s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基上，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。

【详解】

（1）图1中是将土壤悬浮液取1mL；加入9mL无菌水进行稀释10倍。图1中微生物接种方式为稀释涂布平板法。该方法可以用于对菌落数进行计数，因为当样品的稀释度足够高时，培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

（2）土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；培养基需要采用固体培养基，才可用于稀释涂布平板法，且因为是分离固氮菌，所以培养基中不加氮源。图1和图2中的两个培养基都是用于从多种微生物中分离目的菌种。

（3）图2中接种方法为平板划线法，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果。图2中培养基时为了筛选出能分解除草剂草甘膦的微生物，所以有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈。【解析】(1)无菌水稀释涂布平板法当样品的稀释度足够高时；培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

(2)没有氮源；属于固体培养基从多种微生物中分离出目的菌。

(3)将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈30、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体六、综合题(共3题，共24分)31、略

【分析】【分析】

识图分析可知；图中从SARS病毒中提取核酸RNA后，以RNA为模板合成了DNA，即图中①为逆转录的过程，通过选择性扩增后获取S基因，然后构建基因表达载体，即图中的②过程，分别形成携带S基因的重组DNA分子A和B，图中③过程为将携带S基因的重组DNA分子A导入大肠杆菌的过程，一般采用钙离子转化法，图中④为原核细胞中目的基因的表达，图中⑤为将携带S基因的重组DNA分子B导入动物细胞，一般采用显微注射法，⑥为真核细胞中目的基因的表达。

【详解】

（1）根据以上分析可知；图中①为以RNA为模板合成DNA的过程，即逆转录，该过程的进行需要逆转录酶的催化作用。

（2）构建目的基因表达载体要用限制酶切割载体；使之具有与目的基因相同的末端，再用DNA连接酶将切割的载体和含有S目的基因的片段连接为重组DNA分子。

（3）如果直接将目的基因导入受体细胞；会被分解，不能保存；复制和转录（表达）。

（4）由于抗原和抗体可以特异性结