2025年冀教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶B.终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来C.构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代D.抗生素抗性基因作为标记基因5、对“DNA的粗提取与鉴定”实验中的三次过滤的叙述中，不正确的是（）A.第一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物中B.第二次过滤后，使用多层纱布，DNA存在于纱布上的黏稠物中C.第三次过滤后，DNA存在于滤液中，可进一步除去非DNA物质D.上述C均正确评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)6、下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.培养基一般为固体培养基B.培养结果只能获得大量细胞及生物制品，而不能获得生物体C.需要氧气来满足细胞代谢的需要，不需要二氧化碳D.通过细胞培养可以检测有毒物质，判断某物质的毒性7、大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随着发育进程逐渐减弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说法正确的是（）A.桑椹胚的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能B.桑椹胚不同部位的细胞致密化程度不同C.胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴D.胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植8、下列关于转基因生物安全性的叙述，正确的是（）A.重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染B.种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对环境没有任何负面影响C.如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内D.转基因生物所带来的安全性问题是可以解决的9、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基10、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程11、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)12、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。13、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。14、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________15、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。16、应用：______（微型繁殖、作物脱毒、神奇的人工种子）、______、细胞产物的工厂化生产。17、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。18、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、实验题(共3题，共24分)19、《本草纲目》记载；“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。

(1)制备培养基：

①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，琼脂20g，用蒸馏水定容至1000mL，自然pH，培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____等营养成分（至少写出2种），该培养基的自然pH为______性范围。

②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生长。该培养基从功能上分类属于______培养基。

③配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_______。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____。

(2)蝉拟青霉的分离纯化：取新鲜蝉花，挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______法接种至PDA培养基上进行培养。

(3)发酵生产：发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果，据表判断_______（填“能”或“不能”）用发酵菌丝体替代天然蝉花，判断的理由是_______。粗蛋白（%）粗纤维（%）灰份（%）水分（%）虫草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）发酵菌丝体25．388．327．878．9233．278．9天然蝉花19．653．127．849．8128．553．620、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。21、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分五、综合题(共4题，共24分)22、玉米是世界上的第三大粮食作物；广泛种植于世界各地。研究表明，转基因抗虫玉米中的细菌BT基因能表达一种毒蛋白，这种毒蛋白能有效杀死玉米螟（一种农业害虫）请回答下列问题：

（1）BT基因在基因工程中称为______________。在基因表达载体中，除了要有BT基因外，还必须有启动子、终止子和______________若将BT基因插入到Ti质粒的______________上；通过农杆菌的转化作用，就可以使其导入玉米细胞并将其插入到玉米细胞中的染色体上。

（2）BT基因与载体结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。若某限制酶的识别序列和切点是请画出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端_______。DNA连接酶对所连接的两端碱基序列______________（填“有”或“没有”）专一性要求。

（3）为了防止抗虫玉米通过花粉传播带来的生态学问题，科研小组考虑将抗虫基因导入到玉米根尖细胞的______________中以防止基因污染，同时在大规模种植的抗虫玉米田中设置一个或多个避难所种植普通玉米，目的是______________。

（4）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是______________。23、在生活中；人们可以利用微生物来生产多滋多味的发酵产品，如果醋；果酒、腐乳和泡菜等。回答下列相关问题：

（1）酵母菌是兼性厌氧型微生物，在___________(填“有氧”或“无氧”)条件下，酵母菌会迅速大量繁殖。20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时，一般将温度控制在___________℃。发酵一段时间后，观察到发酵罐内液面不再有___________；说明发酵完毕。

（2）与果酒发酵相比，果醋发酵需要控制的条件是______________________。

（3）泡菜的制作离不开乳酸菌，常见的乳酸菌有___________和___________。泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐，影响亚硝酸盐含量的因素有___________(答出2个)。24、小豆起源于中国。栽培小豆种皮多为红色；此外还有白色；绿色、褐色等各种类型。

(1)为探究种皮颜色的遗传规律；用4个不同种皮颜色的小豆品种进行如下杂交实验。

①根据杂交实验Ⅰ结果推测，小豆种皮的颜色（红色、绿色和褐色）是由___________对等位基因控制。杂交实验Ⅱ的F2白色种皮个体中杂合子的比例为___________。

②有人根据以上杂交实验结果推测小豆种皮相关色素的代谢途径；如图1。

为探究R/r基因与B/b基因之间的位置关系，利用上述4个品种中的白色和绿色品种进行杂交实验，F1自交获得F2。在上述推测成立的情况下，若F2小豆的种皮颜色及比例为___________，则说明R/r基因与B/b基因位于同源染色体上；且减数分裂时不发生交换。

(2)小豆种皮颜色与花青素等物质的种类有关；蛋白M1和M2调控花青素合成相关基因的表达。

①分别用带有M1和M2基因的质粒转化植株，得到M1和M2过表达植株，检测其花青素的含量，结果如图2。根据实验结果推测，M1基因________。

②研究发现，M2基因过表达植株的一些组织中M1的表达量升高。为研究M2与M1基因的关系，将M2蛋白与用M1基因的启动子部分片段制作的探针混合并电泳，结果如图3（生物素越多则条带颜色越深）。图3结果表明____。

③综合以上研究，请补充完善M1、M2、花青素合成的关系图（括号内填写“促进”或“抑制”），并从物质和能量的角度解释这种关系的意义____。

25、人胰岛素由A；B两条肽链构成。研究人员用大肠杆菌作生产菌；利用基因工程TTA号冻技术分别生产两条肽链，并在体外将两条肽链加工成胰岛素。请回答下列问题：

（1）由A、B两条肽链可推导出A、B基因的碱基序列，依据是______。因为A、B基因中的脱氧核苷酸数较少，因此常用______的方法获取目的基因。

（2）在基因表达载体中，标记基因的作用是______。基因工程中不能将A、B基因直接导入大肠杆菌的原因是______。

（3）检测A、B基因是否导入受体菌时，常用______作探针。若A、B基因表达的肽链售中氨基酸数目增多，肽链后延，则需对A、B基因进行改造，这个改造是______。

（4）引导肽是由引导肽基因控制合成的段多肽序列，若在A、B肽链的前端加上引导肽序列后，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，便于A、B肽链提取。为实现上述目的，在基因层面的操作是______参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

诱导植物细胞融合前；先要采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，获得原生质体；诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激；振动等）和化学方法（聚乙二醇）；若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞，杂种细胞。可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体。

【详解】

A；植物体细胞杂交技术能克服远源杂交不亲和的障碍；因此获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题，A正确；

B；诱导植物原生质体融合时不能用灭活的病毒作为诱导剂；B错误；

C；显微镜下可以观察到染色体；因此可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体，C正确；

D；若原生质体均为两两融合；则有三种情况，即矮牵牛细胞自身融合、枸杞细胞自身融合、矮牵牛细胞和枸杞细胞融合，因此融合后的细胞中染色体数目可能为28、96或62条，D正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

根据分化潜能分类：

(1)全能干细胞：具有自我更新和分化形成任何类型细胞的能力；如胚胎干细胞。

(2)多能干细胞：具有产生多种类型细胞的能力；但却失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制；如造血干细胞。

(3)单能干细胞（也称专能干细胞）：只能分化为成体组织；器官中的细胞。

【详解】

A；体外培养成纤维细胞时；培养代数应控制在10代以内，以保持正常的二倍体核型，A正确；

B；iPS细胞的形态类似胚胎干细胞；在形态上应表现出体积小、细胞核大、核仁明显的特点，B错误；

C；iPS细胞的功能均类似胚胎干细胞；所以iPS细胞具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞，C正确；

D；是用患者自己的体细胞通过体外诱导成iPS细胞；所以将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。

故选B。3、A【分析】【分析】

1；DNA粗提取的实验材料选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑；但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。

2；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

3；DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，故在含DNA的滤液中加入冷却的酒精，可使蛋白质与DNA分开，A正确；

B；肝脏细胞没有分散开；在烧杯中加入肝脏和蒸馏水并进行搅拌，不能使细胞破裂，烧杯中的肝脏应进行研磨，B错误；

C；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低；过滤后DNA不在滤液中，存在于析出物中，过滤后取析出物进行后续步骤的操作，C错误；

D；向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后需水浴加热溶液才能呈蓝色；D错误。

故选A。

【点睛】4、B【分析】【分析】

基因表达载体的构建〈即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步；也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

【详解】

A；首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体；再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子，A正确；

B；终止子位于基因的下游；作用是使转录在相应的地方停止，不是使翻译在所需要的地方停止下来，B错误；

C；基因表达载体的构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在；并且可以遗传给下一代，C正确；

D；抗生素抗性基因作为标记基因；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。

故选B。5、A【分析】【分析】

三次过滤的目的是不同的：第一次过滤是为了滤出膜碎片等大量杂质；留下核物质于滤液中．第二次过滤是为了分离DNA和蛋白质，留下DNA于纱布上．第三次过滤是为了进一步除去溶解度较低的蛋白质，留下DNA于滤液中．随着三次过滤，DNA纯度越来越高。

【详解】

A；在鸡血细胞中加入蒸馏水；使得血细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，然后用纱布过滤取其滤液，A错误；

B；在2mol/L的NaCl溶液加蒸馏水并搅拌；由于DNA溶解度下降而析出白色丝状黏稠物，用多层纱布过滤取其黏稠物，B正确；

C；第三次过滤后；DNA存在于滤液中，能除去高浓度盐中不能溶解的杂质，C正确；

D；由BC选项可知；上述B、C均正确，D正确。

故选A。

【点睛】二、多选题(共6题，共12分)6、A:C【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A；动物细胞一般用液体培养基来培养；需要无菌、无毒的环境、基本营养物质、适宜的温度和pH、一定量的氧气和二氧化碳等，A错误；

B；由于动物细胞分化程度高；虽然细胞核内具有该物种的全套遗传物质，但单个细胞不能形成完整生物体，所以目前还不能通过动物细胞培养获得生物体，B正确；

C；动物细胞培养过程中；需要氧气满足细胞代谢，需要二氧化碳维持培养液的pH，C错误；

D；通过动物细胞培养可以生产生物制品；可以培养皮肤移植的材料，还可以检测有毒物质等，D正确。

故选AC。7、A:C【分析】【分析】

当胚胎细胞数目达到32个左右时；胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，叫做桑椹胚；实验证实，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞，这些细胞都是由受精卵经有丝分裂产生的。

【详解】

A；桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属于全能细胞，A正确；

B；囊胚期细胞可分化内细胞团和滋养层两部分；不同部位的细胞致密化程度有差异，桑椹胚不同部位的细胞致密化程度相同，B错误；

C；胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；经移植获得同卵双胚或多胚的技术，胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴，C正确；

D；胚胎移植一般选择桑椹胚或囊胚期进行；D错误。

故选AC。8、A:C:D【分析】【分析】

转基因植物可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁理由：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体，④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”。

【详解】

A；重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染；造成环境安全问题，A正确；

B；种植抗虫棉可以减少农药的使用量；保护环境，但转基因植物可能会与野生植物杂交，造成基因污染，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁，B错误；

C；转基因花粉中若有毒蛋白或过敏蛋白；可能会通过食物链传递到人体内，转基因作物可通过花粉散落到它的近亲作物上，从而污染生物基因库，C正确；

D；对待转基因技术；应趋利避害，可以避免转基因生物引发的安全性问题，转基因生物所带来的环境安全问题在今后有可能得到解决，D正确。

故选ACD。9、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。10、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。三、填空题(共7题，共14分)12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】植物繁殖的新途径作物新品种的培育（单倍体育种、突变体利用）17、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、实验题(共3题，共24分)19、略

【分析】【分析】

为了杀灭培养基中的微生物；实验所配制的培养基必须进行灭菌处理；可将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，以检测培养基的灭菌效果，若培养基中无菌落长出，说明培养基的灭菌是合格的；在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

【详解】

（1）①马铃薯中含有淀粉；蛋白质和无机盐等物质；故培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供碳源、氮源、无机盐等营养成分；

培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，即培养蝉拟青霉的培养基的自然pH为酸性范围。

②氯霉素等抗生素可以通过抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成来抑制细菌的生长；而对真菌的生长无影响。为了便于筛选蝉拟青霉（真菌）菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制细菌的生长，该培养基从功能上分类属于选择培养基。

③为了杀灭培养基中的微生物；配制的培养基必须进行灭菌处理；将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，若培养基中无菌落长出，说明固体培养基的灭菌是合格的。

（2）蝉拟青霉的分离纯化：由（1）的题干信息可知；PDA为固体培养基，在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）根据题意“蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并结合表格信息可知，发酵菌丝体中各种活性成分的含量明显高于天然蝉花，故能用发酵菌丝体来替代天然蝉花。【解析】(1)碳源；氮源、无机盐酸细菌选择杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间；观察是否长出菌落。

(2)平板划线（稀释涂布平板）

(3)能发酵菌丝体活性成分的含量明显高于天然蝉花20、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因21、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气五、综合题(共4题，共24分)22、略

【分析】【分析】

将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等；

基因表达载体的构建：

①过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。

②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。

③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

（1）启动子在基因的首段；它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；

（2）终止子在基因的尾端；它控制着转录的结束；

（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

【详解】

（1）根据题干意思；BT基因为目的基因；基因表达载体，需要目的基因；启动子、终止子以及标记基因；若将BT基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使其导入玉米细胞并将其插入到玉米细胞中的染色体上；

（2）根据碱基互补配对原则，目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端为DNA连接酶作用位点是磷酸二酯键，故没有专一性；

（3）为了防止抗虫玉米通过花粉传播带来的生态学问题；科研小组考虑将抗虫基因导入到玉米根尖细胞的线粒体中以防止基因污染，同时在大规模种植的抗虫玉米田中设置一个或多个避难所种植普通玉米，目的是延缓抗毒蛋白的玉米螟出现（或减缓害虫抗性基因频率增加的速度）；

（4）艾弗里等人的肺炎双球菌体外转化实验为证明DNA是遗传物质；这给其他人的启示为：DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物体。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用，掌握各步骤中的相关细节，能运用所学的知识准确解答，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】目的基因标记基因T－DNA没有线粒体延缓抗毒蛋白的玉米螟出现（或减缓害虫抗性基因频率增加的速度）DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物体23、略

【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧型细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

（1）

酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下将葡萄糖彻底氧化分解，释放大量能量用于酵母菌自身繁殖。酵母菌酒精发酵时，一般将温度控制在在18℃～25℃。该发酵产生酒精的过程中，会产生CO2；当发酵液不再有气泡冒出时说明发酵结束。

（2）

醋酸菌是好氧型细菌，生长的最适温度为30~35℃，酵母菌是兼性厌氧型真菌，与果酒发酵相比，果醋发酵时需要提供充足的O2；发酵温度更高。

（3）

泡菜的制作离不开乳酸菌；常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌，代谢类型均为异养厌氧型。泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐，影响亚硝酸盐含量的因素有温度；腌制时间和食盐用量等。

【点睛】

本题以微生物发酵为背景，主要考查果酒、果醋与泡菜的制作，要求考生理解传统发酵技术的原理，识记相关流程，具有一定的实验与探究能力。【解析】（1）有氧18~25气泡冒出。

（2）O2充足；发酵温度高。

（3）乳酸链球菌乳酸杆菌温度、腌制时间、食盐用量24、略

【分析】【分析】

基因自由组合定律：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂过程中；同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。

启动子：是RNA聚合酶识别和结合的位点；用于驱动RNA转录。

【详解】

（1）①杂交实验Ⅰ结果中F2总和为16，性状分离比为9:3:4，为9:3:3:1的变式，可推测小豆种皮的颜色（红色、绿色和褐色）是由2对或2对以上等位基因控制。杂交实验Ⅱ的F2的结果总和为16，也为9:3:3:1的变式，F2白色种皮个体中杂合子的比例为2/16÷4/16=1/2。

②根据图1可知，白色个体基因型为rr____，红色个体基因型为R_gg__，绿色个体基因型为R_G_bb，褐色个体基因型为R_G_B_。在杂交实验Ⅰ中，根据F2的性状分离比可推出F1褐色基因型为RRGgBb，亲本红色和绿色个体只