2025年人教A新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.按物理性质该培养基属于固体培养基B.按用途该培养基属于选择培养基C.按培养基成分该培养基属于合成培养基，所培养微生物的同化类型为异养型D.该培养基可以用于筛选大肠杆菌4、下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（）A.酿制果酒可以选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精B.制酸奶时加入抗生素可以避免杂菌污染C.在腐乳制作过程中毛霉等微生物可以产生蛋白酶和脂肪酶D.泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量会一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用5、玉帘和石蒜为二倍体，将二者的花粉用一定的方法诱导融合后，再通过植物组织培养可使融合细胞长成植株，已知培养过程中未进行融合细胞的筛选。下列说法正确的是（）A.融合细胞进行植物组织培养后形成的植株均不可育B.植物组织培养的脱分化和再分化培养基均要含有碳源C.得到杂种植株过程中需要用秋水仙素处理萌发的种子D.所用培养基及花粉粒都要进行严格的灭菌处理6、下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，正确的是（）A.受精卵形成后在卵巢内进行有丝分裂B.胚胎发育早期细胞数量增加但胚胎总体积并不增加C.受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段D.胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层7、下列过程不属于克隆的是（）A.单个大肠杆菌形成单菌落B.壁虎断尾后长出新尾巴C.PCR扩增抗除草剂基因D.植物组织培养技术扩繁兰花8、蛋白质工程可以说是基因工程的延伸。下列相关表述正确的是（）A.基因工程需要对基因进行操作，蛋白质工程不需要对基因进行操作B.蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列C.蛋白质工程可以改造酶，但不能提高酶的热稳定性D.蛋白质工程最终达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质9、FⅧ基因主要在肝脏中表达，控制合成凝血因子（FⅧ）。若使FⅧ第309位的丙氨酸替换为丝氨酸，可增加FⅧ的分泌。A型血友病是由于FⅧ基因突变导致FⅧ含量降低或功能异常的疾病。下列叙述错误的是（）A.上述得到高分泌量的FⅧ的操作过程属于蛋白质工程B.构建基因表达载体时应将编辑后的FⅧ基因连接于肝脏细胞特异性启动子下游C.以腺病毒为载体将编辑后的FⅧ基因插入到肝细胞核基因组可对A型血友病患者进行治疗D.为了检测编辑后的FⅧ基因是否成功表达，不能从血液中提取蛋白质进行抗原-抗体杂交评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究11、下列有关动物细胞培养的叙述正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胃蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部衰老死亡12、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养13、茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序，发酵前要下“诱水”，下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上。发花可使砖茶原料在加工过程中形成“金花”，学名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是国家茶业界二级机密保护菌种。下列相关叙述错误的是（）A.茯砖茶的制作需利用酵母菌等多种细菌进行发酵B.下“诱水”相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热C.发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收D.茯砖茶发酵完成后要灭菌并密封，有利于长期保存14、淀粉经淀粉酶水解后得到的产物是重要的工业原料；但工业化生产常需在高温条件下进行，而现有的淀粉酶耐热性不强，科研人员发现将淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替换为天冬氨酸能产生耐热性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，将其导入芽孢杆菌内，具体过程如下图所示。最终结果表明，与导入质粒B相比，导入质粒C的芽孢杆菌培养液中更易获得并提纯AmyS2．下列说法错误的是（）

A.获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过基因工程实现的B.构建质粒C时需用限制酶Eco52I和BamHI同时切割质粒B和信号肽基因C.信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网和高尔基体D.可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)15、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。16、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。17、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。18、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。19、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。20、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。21、我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家。我国政府对生物武器的态度是什么？我们为什么认同这种态度？__________22、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共1题，共7分)23、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共36分)24、物质W是一种含氮有机物；会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。

（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。

（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。

（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌；使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________；三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。25、丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化；部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：

(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______。融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是____

(2)诱导细跑融合时利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能够与细胞膜上的______（填化学本质）发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的______重新排布，细胞发生融合。筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_______来完成。

(3)得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_______。26、进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间；降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭；骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答：

(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是；计算→称量→溶化→__________→__________。接种微生物最常用的方法是__________。

(2)获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是______________________________。

(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________（填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________。

(4)在微生物分解处理垃圾的过程中，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成，其中__________酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。27、科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接种预防，简要过程如图所示。回答下列问题：

(1)新冠病毒是一种RNA病毒，一般先通过_____________________得到cDNA，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR的中文全称是_____________________。

(2)PCR技术还需用到_____________________酶，该酶能够使脱氧核苷酸从引物的_____________________端开始连接，据下图分析，可选择的引物是_____________________。

(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性；请设计简单的检测方案并预期检测结果。

方案:_________________________________。

结果:_________________________________。评卷人得分六、综合题(共2题，共10分)28、水果可以用来加工制作果汁；果酒和果醋等。回答下列问题：

（1）制作果汁时，可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、________（答出2种即可）。纤维素酶可以分解植物______________（填细胞膜或细胞壁）中的纤维素。

（2）用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是__________________。

（3）现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____________来表示。

（4）获得的果汁（如苹果汁）可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要__________________菌，这一过程中也需要O2，O2的作用是__________________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于_____________（填好氧或厌氧）细菌。29、金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物；可引起人类肺炎；肠炎等疾病。某校生物兴趣小组利用显色培养基M1837（金黄色葡萄球菌菌落在其中显蓝色）对某食堂食品留样进行金黄色葡萄球菌的检测。回答下列问题：

（1）从物理性质来看，M1837培养基属于______培养基。培养基成分中含有较高浓度的氯化钠，推测其作用是______。

（2）配制好的M1837培养基需要置于______中灭菌20分钟；在酒精灯附近倒平板，平板冷却后将平板倒置的目的是______。

（3）兴趣小组决定采用稀释涂布平板法检测食堂食品留样中金黄色葡萄球菌的数量，并提前将空平板放置在培养箱内24小时，目的是______。

（4）小组成员取10g样品加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中定容为100mL，将成分摇匀；在3个平板上分别接种0．1mL稀释液，适当培养一段时间后，计算颜色为______的菌落个数，分别为34、36、32。据此可知，每克样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为______个。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】1；卵细胞形成过程；其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。

2；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵细胞膜作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

3；受精作用的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体；还有一个是第二极体）。

【详解】

A；在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体；说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，不是判断开始发育的标志，A错误；

B；形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂；卵裂过程中，每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；

C；孵化是指囊胚从透明带出来；孵化后进入原肠胚阶段，C错误；

D；细胞分化开始于囊胚时期；D错误。

故选B。2、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等；

【详解】

A；PCR技术可在体外大量扩增目的基因；A正确；

B；改变后的NR2B基因作为目的基因；需要与载体结合后才可导入小鼠受精卵内，B错误；

C；将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术；C正确；

D；可采用基因探针检测改变后的NR2B基因是否导入小鼠体内；D正确。

故选B。3、D【分析】【分析】

培养基：为微生物的生长繁殖提供营养基质的是培养基。虽然各种微生物培养基的配方不同；但一般都含有水；碳源、氮源和无机盐等营养物质。培养基按物理性质划分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。液体培养基呈液体状态，主要用于工业生产；固体培养基呈固体状态，主要用于微生物的分离鉴定等。

【详解】

A；该培养基中加入琼脂；按物理性质该培养基属于固体培养基，A正确；

B；青霉素可抑制细菌等原核生物的生长繁殖；属于选择培养基，B正确；

C、该培养基中成分明确，为合成培养基，又加入(CH2O)等糖类作为碳源；可用来培养异养型微生物，C正确；

D；培养基中有青霉素；大肠杆菌不能生长繁殖，不能用于筛选大肠杆菌，D错误。

故选D。4、C【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；用酵母菌发酵酿制果酒；选择溴麝香草酚蓝水检测产生的二氧化碳，用酸性重铬酸钾溶液鉴定酒精，A错误；

B；由于抗生素会杀死乳酸菌；故制酸奶时不能加入抗生素，B错误；

C；腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵；C正确；

D；泡菜制作过程中；亚硝酸盐含量先升高后降低，发酵10天以上的泡菜中亚硝酸盐含量相对较低，可以食用，D错误。

故选C。5、B【分析】【分析】

将二者的花粉用一定的方法诱导融合后；花粉间的融合是随机的，仅考虑两两融合，可得到三种不同的融合细胞。

【详解】

A；培养过程中未进行融合细胞的筛选；同种植物的花粉融合后经组织培养形成的是同源二倍体，是可育的，A错误；

B；植物组织培养的脱分化和再分化培养基均以蔗糖作为碳源；B正确；

C；杂种细胞经组织培养即可得到杂种植株；C错误；

D；所用培养基要进行严格的灭菌处理；花粉粒经消毒即可，D错误。

故选B。6、B【分析】【分析】

1；卵细胞形成过程；其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。

2；受精作用的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体；还有一个是第二极体）。

【详解】

A；受精卵形成后在输卵管内进行有丝分裂；A错误；

B；形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂；卵裂过程中每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；

C；孵化是指囊胚从透明带出来；孵化后进入原肠胚阶段，C错误；

D；细胞分化开始于囊胚时期；D错误。

故选B。7、B【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因后代的过程。

【详解】

A；单个大肠杆菌通过二分裂增殖逐渐形成大肠杆菌单菌落；二分裂是无性生殖，属于克隆，A正确；

B；壁虎短尾后长出新尾巴是细胞分裂、分化的结果；不属于克隆，B错误；

C；PCR技术的原理是DNA复制；其扩增基因的过程即DNA的复制，属于分子水平上的克隆，C正确；

D；利用植物组织培养技术扩繁兰花属于无性生殖；相当于个体水平上的克隆，D正确。

故选B。8、D【分析】【分析】

1；基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内；产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状，但只能生产自然界已存在的蛋白质；

2；蛋白质工程是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达形状；合成新的蛋白质，蛋白质工程从属于基因工程，蛋白质工程是第二代基因工程。

【详解】

A；基因控制蛋白质的合成；蛋白质工程也需要对基因进行操作，A错误；

B；蛋白质工程改变的是蛋白质分子的少数氨基酸；B错误；

C；蛋白质工程可以改造酶；提高酶的热稳定性，C错误；

D；蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的；它最终要达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求，D正确。

故选D。9、D【分析】【分析】

1；基因突变：（1）DNA分子中发生碱基的替换、增添或缺失；而引起的基因碱基序列的改变，叫作基因突变。（2）基因突变的特点：具有普遍性、随机性、低频性、不定向性等。

2；基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞；以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。基因治疗的靶细胞主要分为两大类：体细胞和生殖细胞。

【详解】

A；上述通过基因工程手段改造已有的编码蛋白质的基因得到高表达凝血因子Ⅷ的操作过程属于蛋白质工程；A正确；

B；选择肝细胞特异性的启动子；可使FⅧ基因表达严格限于肝细胞，B正确；

C；将编辑后的FⅧ基因插入到肝细胞基因组并成功表达属于体内基因治疗；C正确；

D；编辑后的FⅧ基因表达的凝血因子与患者体内遗传凝血因子不同；所以可以从血液中提取蛋白质进行抗原-抗体杂交，检测编辑后的FⅧ基因是否成功表达，D错误。

故选D。二、多选题(共5题，共10分)10、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】11、A:C【分析】【分析】

动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A；用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；

B；动物细胞培养中需先用胰蛋白酶使所取的组织分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH值呈酸性，而细胞培养液的pH大多数是7.2-7.4，B错误；

C；细胞存在接触抑制；因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；

D；动物细胞培养传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，D错误。

故选AC。

【点睛】12、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确。

故选ABC。13、A:D【分析】【分析】

根据题意分析：茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序；发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收。

【详解】

A；酵母菌是真菌；不是细菌，A错误；

B；下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上；相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热，B正确；

C；发酵过程涉及多种酶催化；发酵后富含多种小分子营养物质，因此发酵后饮用有利于营养物质的吸收，C正确；

D；茯砖茶在储藏过程中仍然继续自然发酵；因此灭菌并密封处理，不利于长期保存，D错误。

故选AD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的筛选与获取；构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

分泌蛋白的合成：首先；在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工；折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体融合，高尔基体对蛋白质做进一步的加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合。

【详解】

A；科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因；因此获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程和基因工程实现的，A错误；

B；BamHI会破坏AmyS2基因；B错误；

C；在分泌蛋白的合成过程中；信号肽序列可帮助肽链进入内质网，在内质网被切割，因此信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网，但不能引导其进入高尔基体，C错误；

D；可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果经过PCR扩增，不出现扩增产物，说明没有插入基因，反之，则成功插入，D正确。

故选ABC。三、填空题(共8题，共16分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－218、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性19、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡20、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖21、略

【分析】【详解】

我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家，如在抗日战争中就遭受到了日军发动的细菌战的伤害，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，因而我们深知生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】我国是一个爱好和平的国家，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为：

在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。22、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共1题，共7分)23、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。五、实验题(共4题，共36分)24、略

【分析】【分析】

筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学；物理因素的抗性而设计的；能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。

【详解】

（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌；而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。

（2）研究小组的目标菌；是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。

（3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源；故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲；乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。

（4）①C处作为空白对照；要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同；②培养基中的透明圈表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A；B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。

【点睛】

本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。【解析】①.W②.乙③.乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W④.将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源⑤.缓冲液⑥.缓冲液不能降解W⑦.酶E与天然酶降解W的能力相近25、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

（1）用丙肝病毒对小鼠进行免疫后；小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。

（2）诱导细胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜具有一定的流动性，在灭活病毒的诱导下，其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜会发生融合。细胞融合后产生的融合细胞有B细胞间的融合；骨髓瘤细胞间的融合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合，会产生三类细胞。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行多次的克隆化培养和专一性抗体检测，以得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

（3）实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量，因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验思路为：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量。【解析】(1)给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应骨髓瘤细胞。

(2)糖蛋白蛋白质分子和脂质分子选择培养基克隆化培养和抗体检测。

(3)将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量26、略

【分析】【分析】

分析图1可知，菌株A的细胞密度增殖速率低于菌株B，脂肪剩余量菌株A高于菌株B。

从图2中可知，ABC三种菌株中，BC菌落周围出现透明圈，而A菌落周围未出现透明圈。

【详解】

（1）科研小组从土壤中筛选出产脂肪酶的菌株时，需设置只利于产脂肪酶的菌株生长，而其他杂菌生长受抑制的培养基，因此配制的培养基需要以脂肪为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其次还有穿刺接种和斜面接种。

（2）据图1分析可知，菌株B增殖速度快，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强，故应选择菌株B进行后续相关研究。

（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落，淀粉遇碘液会变蓝，而淀粉酶能够分解淀粉，则不同产酶活力的菌株周围会形成不同直径的透明圈，淀粉酶活力越强的菌株周围的透明圈越大，因此若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择C菌落进一步纯化，这是因为C菌株的透明圈直径与菌落直径比值最大。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

（4）纤维素酶由三种复合酶组成，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记相关知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题图信息准确答题。【解析】(1)脂肪灭菌倒平板稀释涂布平板法和平板划线法。

(2)B该菌株增殖速度快；且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强。

(3)C硝化细菌为自养细菌；能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

(4)葡萄糖苷27、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。

【详解】

（1）利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录；起作用的酶为逆转录酶。在体外将DNA扩增的技术是PCR，中文名称为多聚酶链式反应。

（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；该