2025年上教版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年上教版选择性必修3生物上册月考试卷710考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、与常规武器相比；生物武器具有。

①传染性强

②污染面积广；不易被发现

③有一定的潜伏期

④像核武器一样破坏建筑物

⑤自然条件下的大雪、低温、干燥、日晒等不影响生物武器的杀伤力A.①②③B.②③④⑤C.①②③④⑤D.①②③④2、用于核移植的供体细胞一般都选用（）A.受精卵B.10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞3、下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是（）A.绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性B.卵裂期每个细胞的体积随分裂次数增加而不断增大C.囊胚的滋养层细胞将来发育成胎儿的各种组织D.桑椹胚时发育分化形成内外两个胚层4、下图表示高等动物的个体发育过程；下列说法正确的是（）

A.图中①过程表示胚胎发育B.受精卵卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大C.原肠胚已分化成三个胚层，DNA总量增加D.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于原肠胚期，终止于生命结束5、某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究；操作如下:2021年1月4日下午选取1；2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的盐水，将坛密封，置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，后来定时测定，结果如图。

下列对该实验的分析错误的是（）A.泡菜制作过程中盐水需煮沸的目的是为了杀灭杂菌，冷却后再用是为了防止温度过高杀死所需菌种B.在腌制过程中泡菜坛中的溶液会增加，这是由于盐水浓度大于细胞液浓度，植物细胞会通过渗透作用失水C.腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是兼性厌氧菌，用水封坛的目的是为乳酸菌提供无氧环境D.由题图知，该小组对每个坛中的数据分别画出曲线，这是不科学的，设置三个泡菜坛目的是进行平行重复实验，取平均值，使实验数据更真实6、动物细胞体外培养时；通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是。

A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B.有无血清对正常细胞培养的影响不同C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大7、DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是（）A.E.coliDNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，也能连接平末端B.DNA连接酶连接的是两条单链上的磷酸和脱氧核糖C.DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键D.DNA连接酶可以将单个的脱氧核苷酸连接到主链8、GUS基因作为一种报告基因，编码β-葡萄糖苷酸酶，该酶可催化特定底物水解，产生蓝色化合物，借此用来观察转基因植物中外源基因的表达情况，鉴定转基因植株。下列说法错误的是（）A.GUS基因是有遗传效应的DNA片段，由多个核糖核苷酸构成B.GUS基因编码β-葡萄糖苷酸酶合成的过程包括转录和翻译C.应将GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞以观察表达情况D.蓝色的深浅可表示外源基因表达量的多少9、绿叶海天牛（简称甲）吸食滨海无隔藻（简称乙）后，身体就逐渐变绿，这些“夺来”的叶绿体能够在甲体内长期稳定存在，有科学家推测其原因是在甲的染色体DNA上可能存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因。为证实上述推测，以这种变绿的甲为材料进行实验，方法和结果最能支持上述推测的是（）A.给甲提供14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性B.用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交，结果显示出杂交带C.通过PCR技术能从甲消化道内获得的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因D.通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNA评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-）；在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（）

A.可用灭活病毒诱导细胞融合B.未融合的细胞和融合的同种核细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的选择透过性是细胞融合的基础11、茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序，发酵前要下“诱水”，下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上。发花可使砖茶原料在加工过程中形成“金花”，学名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是国家茶业界二级机密保护菌种。下列相关叙述错误的是（）A.茯砖茶的制作需利用酵母菌等多种细菌进行发酵B.下“诱水”相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热C.发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收D.茯砖茶发酵完成后要灭菌并密封，有利于长期保存12、iPS细胞被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导成该类细胞。下列说法正确的是（）A.导入的物质可以是DN蛋白质，还可用小分子物质来诱导B.iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行C.T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的D.与胚胎干细胞相比，iPS细胞的优点是分裂能力强，分化程度低13、某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（）

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生4个游离的磷酸基团B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化14、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源15、图甲为培育转基因生物时选用的载体，图乙是含有目的基因的一段DNA序列，图中标注了相关限制酶的酶切位点。下列叙述错误的是（）

A.若通过PCR技术提取该目的基因，应该选用引物a和引物cB.构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅡ这两种限制酶C.图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制得到所需目的基因的分子数为8个D.只利用含四环素的培养基就可以直接筛选出成功导入表达载体的受体细胞评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)16、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。17、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。18、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。19、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。20、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

21、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。22、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。23、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。评卷人得分四、实验题(共4题，共12分)24、某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究；操作如下：1月4日下午选取1；2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg，再分别倒入等量煮沸并冷却的10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，后来定时测定，结果如下图。

（1）测定亚硝酸盐含量的方法是_______；其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）实验中；盐水加热煮沸是为了______；冷却之后再使用是为了保证_______等微生物的生命活动不受影响。

（3）在腌制过程中；坛中溶液量会增加，原因是_____。

（4）图中数据表明；泡菜在腌制的第_____天亚硝酸盐含量达到最大值，腌制到第______天以后再食用可以较好地避免亚硝酸盐对人体健康的危害。

（5）实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异；最可能的原因是__________。

（6）为了让实验数据更好地表明泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化，对该实验所获得的3组数据应进行怎样的处理才更合理？_________________。25、人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大；通常从人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重，如果应用基因工程等技术，将人的血消白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：

I．采用良种供体奶牛的卵母细胞和精子；通过体外受精，形成受精卵；

II．将人血消白蛋白基因导入奶牛受精卵；形成重组细胞；

III．电脉冲刺激重组细胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）实验步骤Ⅰ中，受精时，防止多精入卵的生理反应包括____________________。

（2）实验步骤Ⅱ中，需先构建基因表达载体，将HSA基因与__________等调控组件重组在一起；再导入奶牛受精卵。

（3）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加__________。培养过程需要定期更换培养液，目的是__________。

（4）实验步骤Ⅳ中，应选择性别为__________的奶牛胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是____________________。移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，检测方法是采用__________技术。26、餐厨垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。为探究用圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液时，单独接种和混合接种的效果差异及最佳接种量比，以制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

（1）将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌1：00：11：12：1

将上表菌液分别接种于l00mL________________中进行振荡培养。本实验还需设置空白对照，对照组接种________________。

（2）培养3天后测定活菌数，取一定量菌液用_____________法接种于基本培养基中培养，该方法包括_____________和____________两个操作。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在__________内的平板。实验结果如下图所示，由实验结果可知___________________。

27、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分五、综合题(共4题，共8分)28、腐乳是我国古代劳动人民创造出的一-种经过微生物发酵的大豆食品。它“闻着臭；吃着香”且易于消化吸收，深受大众喜爱，其制作方法广为流传。腐乳的生产过程一般分为前酵期（培菌）和后酵期（装瓶后常温条件下放置，自然发酵3个月），采集各时段腐乳坯样品，测定相关物质含量如图1所示。请回答下列有关问题：

(1)民间制作腐乳时_________（填“需要”或“不需要”）灭菌，发酵好的豆腐上布满了菌落，这些菌落_________（填“属于”或“不属于”）同一物种。

(2)吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，这层“皮”是________，它对人体______（填“有”或“无”）害。

(3)由图1可知，加盐腌制（腌坯）前，腐乳坯中的游离氨基酸含量______，原因是______。加盐腌制（腌坯）之后，腐乳坯中的游离氨基酸含量下降的原因是______（答出两点）。在用盐腌制腐乳的过程中，若盐的浓度过低易造成____________。以下关于盐在腐乳制作中的作用正确的是____________（填序号）

①作为反应物②防腐杀菌③调节口味④析出豆腐中水分。

(4)现代工艺生产腐乳是在严格_______的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上。某研发小组将毛霉置于试管斜面培养基中进行培养，制作斜面培养基时，对培养基灭菌的常用方法是__________，将试管倾斜的目的是______________。29、科研工作者将柽柳匙叶草液泡膜IIa+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内；获得了耐盐新品种。图1是含有目的基因的DNA片段，Sau3AI；EcoRI、BamHI为三种限制酶（Sau3AI、BamHI切割形成的黏性末端相同）；图2是农杆菌Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：

(1)目前常用_____方法从柽柳叶草基因组中获取TaNHX2基因，该方法需有分别与两条模板链结合的2种引物，引物是_____。

(2)计划用EcoR1分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒；以构建基因表达载体。

①构建表达载体的目的是_____需要的工具酶是_____。

②本方案的缺陷是：可能导致_____以及目的基因与质粒的反向连接。

③为避免上述缺陷，最佳方案是用_____切割图1的DNA，用_____切割图2质粒。

(3)目的基因成功导入受体细胞后，还需要利用_____技术才能得到转基因棉花苗，这一技术的原理是_____。

(4)要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是_____。30、酯酶结合荧光分析法可对有机磷和氨基甲酸酯类农药进行检测；某研究院利用转基因技术获得一种催化效率高；农药敏感性强的微生物酯酶。请分析回答：

限制酶识别序列与切割位点限制酶识别序列与切割位点PstⅠ5′－CTGCA↓G－3′NdeⅡ5′－↓GATC－3′HindⅢ5′－A↓AGCTT－3′EcoRⅠ5′－G↓AATTC－3′DpnⅡ5′－↓GATC－3′AluⅠ5′－AG↓CT－3′

(1)人工合成酯酶基因后通过PCR技术可实现扩增，为该过程提供原料的是________；还需要设计两种引物，设计引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的_______端开始连接脱氧核苷酸。某质粒图谱和目的基因的序列如图所示，应选择引物________（填下列数字）（①～④中加框表示识别序列前的保护碱基，增强上述酶与目的基因的结合。）。在PCR扩增仪中加入所选择的引物，需扩增________代后才会得到等长的8条DNA片段。

①5′－CCGGAATTCATGCTTGATATGCCAATC－3′

②5′－CCCAAGCTTATGCTTGATATGCCAATC－3′

③5′－CCCAAGCTTCTAGTCGAACACAAGAAG－3′

④5′－CCGGAATTCCTAGTCGAACACAAGAAG－3′

(2)若提取高产酯酶野生菌的基因组DNA，用设计好的两种引物和合适的条件进行PCR，其产物可以通过________来鉴定。结果发现有目的基因以外的杂带存在，分析可能原因是________。解决措施是在目的基因的________（填“内部”或“上；下游”）重新设计引物进行PCR。

(3)将PCR产物和质粒用限制酶酶切，酶切产物纯化后，用_______连接，连接产物导入大肠杆菌前需用________处理大肠杆菌；使其处于感受态。

(4)将目的蛋白与某些标签融合表达形成含标签的融合蛋白，实现增溶、防降解、促进分泌、便于纯化和检测等功能。6×His-Tag（组氨酸标签）含有的咪唑基团选择性地结合在已固定于层析介质的Ni2＋、Co2＋等金属离子上。高浓度的咪唑缓冲液可以竞争性洗脱结合在介质上的His标签蛋白。据此推测，6×His-Tag的作用之一是________。31、为筛选出高效分解石油的微生物；研究人员取石油污泥10g加入到100mL基础培养基中，适宜条件下培养2周，获得富集培养液。将富集培养液进行梯度稀释并涂布于筛选平板上，适宜条件下培养后，筛选出分解石油效果较好的两种菌株A和B。回答下列问题。

(1)在实验前需对基础培养基进行灭菌，常用的方法是_________。涂布于筛选平板前，稀释富集培养液的目的是__________。

(2)为了检测A菌和B菌对石油污泥的实际分解石油效果，研究人员以石油污泥为底物进行摇瓶实验，实验条件和结果如表所示。组别1234基础物质10g石油污泥、100mL基础培养基10g石油污泥、100mL基础培养基10g石油污泥、100mL基础培养基10g石油污泥、100mL基础培养基培养液种类无菌培养液1mLA菌液1mLB菌液1mLA菌液和B菌液各0.5mL7天后石油分解率17%86%70%92%

组别1中石油被分解的主要原因是___________。由表可知A菌和B菌在分解石油过程中具有一定的协同作用，判断的依据是__________。

(3)为了确定A菌和B菌的种类，研究人员预利用PCR扩增两种菌的部分DNA片段，测定碱基排列顺序后与已知序列对比。PCR的原理是_________，在PCR前需要设计特异性引物，引物的作用是___________，PCR每次循环一般分为_________三步。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】试题分析：生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。特点是①传染性强②污染面积广，不易被发现③有一定的潜伏期；自然条件会影响微生物的活性，进而影响杀伤力；故选A。

考点：生物武器的特点。

点评：试题相对简单，直接考查了生物武器的特点，注重基础知识的考查。2、B【分析】【分析】

1；动物细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

【详解】

A；核移植的供体细胞一般为体细胞；A错误；

B；传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；适宜作为核移植的供体细胞，B正确；

C；传代10～50代以内的细胞；绝大多数细胞已死亡，存活的部分细胞的核型发生变化，所以不适宜用于核移植的供体细胞，C错误。

D；处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞；D错误。

故选B。

【点睛】

本题考查动物体细胞核移植、动物细胞培养等知识，明确核移植的供体细胞是体细胞、受体细胞是去核卵母细胞是解决本题的关键。3、A【分析】【分析】

卵裂即为受精卵的有丝分裂；该过程中细胞数目增多；DNA总量增多，但是细胞总体积基本不变或略有减小，并且有机物总量减少。受精卵发育为囊胚的过程发生在输卵管中，而后转移到子宫中进一步发育。囊胚包括内细胞团和滋养层，其中内细胞团将发育成各组织、器官，而滋养层细胞能发育成胎儿的胎膜和胎盘。

【详解】

A；细胞膜表面均有糖蛋白；糖蛋白具有细胞识别功能，精子、卵细胞的相互识别保证了同种精卵结合，A正确；

B；受精卵在卵裂过程中；细胞的总体积基本不变或略有减小，而单个细胞的体积不断减小，B错误；

C；滋养层将发育成胎盘和胎膜；而内细胞团将来发育成胎儿各种组织，具有发育的全能性，C错误；

D；原肠胚发育分化形成内中外三个胚层和一个原肠腔；桑椹胚时没有胚层，D错误。

故选A。4、C【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；个体发育包括胚胎发育和胚后发育；胚胎发育从受精卵到幼体，图中①只能属于早期胚胎发育，A错误；

B；受精卵形成囊胚的过程中；胚胎总体积基本不变，细胞数目增多，因此每个细胞体积减小，B错误；

C；原肠胚期开始出现内、外胚层的分化；胚胎中DNA总量增加，C正确；

D；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期；终止于生命结束，D错误。

故选C。

【点睛】5、C【分析】【分析】

分析题图：在1；2、3号坛中；亚硝酸盐的含量变化都表现为先增加后下降的趋势，其中在1月7日亚硝酸盐含量最高，到1月14日亚硝酸盐的含量下降到最低水平，之后亚硝酸盐的含量基本保持不变。在泡菜腌制的初期，坛内环境有利于硝酸盐还原菌的繁殖，这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随着腌制时间的增加，乳酸菌也大量繁殖，对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受影响，造成泡菜中亚硝酸盐含量又有所下降。

【详解】

A；泡菜制作过程中需要消毒；盐水需煮沸的目的是为了杀灭杂菌，冷却后再用是为了防止温度过高杀死所需菌种，A正确；

B；在腌制过程中由于加入盐水；由于盐水浓度大于细胞液浓度，植物细胞会通过渗透作用失水，泡菜坛中的溶液会增加，B正确；

C；腌制泡菜的过程中；起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，C错误；

D；由题图知；每个坛亚硝酸盐含量测定间隔时间不同，该小组对每个坛中的数据分别画出曲线，这是不科学的，设置三个泡菜坛目的是进行平行重复实验，取平均值，使实验数据更真实，D正确。

故选C。

【点睛】6、A【分析】【分析】

分析曲线图：正常细胞在有血清和无血清培养时；同一培养时间下细胞数目不同；癌细胞在有血清和无血清培养时，同一培养时间下细胞数目变化趋势一致；正常细胞与癌细胞在有血清（或无血清）的条件下培养，同一培养时间下细胞数目不同。

【详解】

A；正常细胞与癌细胞在有血清和无血清时曲线均不重叠；说明正常细胞与癌细胞的增殖速率不同，A错误；

B；正常细胞在有血清和无血清培养时；同一培养时间下细胞数目不同，说明有无血清对正常细胞培养的影响不同，B正确；

C；正常细胞与癌细胞在有血清的条件下培养；同一培养时间下细胞数目均比无血清时多，说明培养基中补充血清有助于正常细胞的培养，C正确；

D；癌细胞在有血清和无血清培养时；同一培养时间下细胞数目变化趋势一致，说明培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大，D正确。

故选A。7、B【分析】【分析】

基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）；DNA连接酶、运载体。

【详解】

A；E.coliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来；不能连接具有平末端的DNA片段，而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，A错误；

BC；DNA连接酶是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键；而不是氢键，B正确，C错误；

D；DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；DNA连接酶不能将单个的脱氧核苷酸连接到主链上，D错误。

故选B。8、A【分析】【分析】

基因表达包括转录和翻译两个过程；其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要解旋酶和RNA聚合酶参与；翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，该过程发生在核糖体上，需要以氨基酸为原料，还需要酶；能量和tRNA等。

【详解】

A；GUS基因是有遗传效应的DNA片段；DNA的基本单位是脱氧核苷酸，A错误；

B；β-葡萄糖苷酸酶的本质是蛋白质；GUS基因编码β-葡萄糖苷酸酶合成的过程包括转录（以基因的一条链为模板合成RNA）和翻译（以mRNA为模板合成蛋白质），B正确；

C；GUS基因作为一种报告基因；能够在适宜条件下产生蓝色物质，故GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞，可通过蓝色的产生情况观察表达情况，C正确；

D；GUS基因可编码β-葡萄糖苷酸酶；β-葡萄糖苷酸酶可催化特定底物水解，产生蓝色化合物，将GUS基因和外源基因融合后导入受体细胞，理论上蓝色的深浅可表示外源基因表达量的多少，D正确。

故选A。9、B【分析】【分析】

目的基因的检测与鉴定：

1；分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

2；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A、给甲提供14CO2；一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性，这说明甲中含有叶绿体，但不能说明的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，A错误；

B；用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交；结果显示出杂交带，这说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，B正确；

C；通过PCR技术从甲体内的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因；这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，C错误；

D；通过核酸分子杂交技术；在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNA，这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，D错误。

故选B。

【点睛】二、多选题(共6题，共12分)10、A:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等；A正确；

B；两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步通过专一抗体阳性检测，把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的；D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:D【分析】【分析】

根据题意分析：茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序；发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收。

【详解】

A；酵母菌是真菌；不是细菌，A错误；

B；下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上；相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热，B正确；

C；发酵过程涉及多种酶催化；发酵后富含多种小分子营养物质，因此发酵后饮用有利于营养物质的吸收，C正确；

D；茯砖茶在储藏过程中仍然继续自然发酵；因此灭菌并密封处理，不利于长期保存，D错误。

故选AD。12、A:B【分析】【分析】

iPS细胞被称为诱导多能干细胞；具有分裂和分化的能力。

【详解】

A；目前已采用多种方法来制备iPS细胞；包括借助载体将特定的基因导入细胞中，直接将特定的蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞，A正确；

B、iPS细胞的体外培养是利用动物细胞培养技术，需要在无菌的CO2培养箱中进行培养；B正确；

C；T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞；说明离体的已分化的细胞经过诱导可转化为能分化的状态，C错误；

D；胚胎干细胞和iPS细胞均具有分裂能力强；分化程度低的特点，D错误。

故选AB。13、A:D【分析】【分析】

分析题图：图中质粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的识别序列和切割位点；若用酶A切割会同时破坏质粒上的两个抗性基因。

【详解】

A；质粒中含有2个酶A的酶切位点；所以切割后会产生4个游离的磷酸基团，A正确；

B；如果用酶A和酶C同时切割质粒；会破坏质粒的标记基因，B错误；

C；根据B项分析；需要用酶B和酶C切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四环素的培养基中生长，C错误；

D；若用酶B和酶C切割；产生不同的黏性末端，可避免质粒自身环化，D正确。

故选AD。14、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。15、B:D【分析】【分析】

分析题图：构建表达载体时；不能选用限制酶BamHⅠ，否则会导致两种抗性基因都被破坏，因此应该选择Bc1I和HindⅢ这两种限制酶，根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c。

【详解】

A；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合；根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c，A正确；

B；根据图甲可知；BamHⅠ会导致两种抗性基因都被破坏，同时为防止目的基因自身环化，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割，B错误；

C；图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制可得到16个DNA片段；其中所需目的基因的分子数为8个，C正确；

D；由于选择BclI和HindⅢ这两种限制酶；破坏了氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此应该先用含四环素的培养基筛选出含有基因表达载体和普通质粒的大肠杆菌，再用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养基加氨苄青霉素含普通质粒的大肠杆菌能生存，而含重组质粒的不能生存，从而筛选出成功导入表达载体的受体细胞，D错误。

故选BD。三、填空题(共8题，共16分)16、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代22、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。23、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复四、实验题(共4题，共12分)24、略

【分析】试题分析：本题考查泡菜的制作；考查对泡菜制作原理；亚硝酸盐含量检测原理的理解和识记。解答此题，可根据图中曲线升降规律判断泡菜制作过程中亚硝酸盐含量变化趋势，分析其升降原因，确定适合食用的发酵时间。

（1）测定亚硝酸盐含量可用比色法；其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）高温可使微生物中的蛋白质变性；杀死微生物，实验中盐水加热煮沸可杀灭杂菌；冷却之后再使用是为了避免高温使乳酸菌死亡。

（3）在腌制过程中；由于盐水溶液浓度过高，细胞渗透失水，使坛中溶液量会增加。

（4）据图可知；1；2、3号泡菜坛中，在腌制的第7天亚硝酸盐含量均达到最大值，腌制到第14天以后亚硝酸盐含量降到较低水平，可以避免亚硝酸盐对人体健康的危害。

（5）泡菜制作过程中亚硝酸盐含量变化与微生物的数量和代谢强度有关；实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异，最可能的原因是各坛中微生物种类和数量可能存在差异。

（6）为让实验数据更好的表明泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化，避免偶然因素造成的数据误差，应对该实验所获得的三组数据先求平均值，再绘制一条曲线(将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录，求出平均值，然后以日期为横坐标，亚硝酸盐的平均含量为纵坐标画出一条曲线)。【解析】比色法玫瑰红色染料杀灭杂菌乳酸菌外界溶液浓度过高使细胞渗透失水814各坛中微生物种类和数量可能存在差异(或其他合理答案)先求平均值，再绘制一条曲线（将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录，求出平均值，然后以日期为横坐标，亚硝酸盐的平均含量为纵坐标画出一条曲线）25、略

【分析】1；体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精；其中卵母细胞的采集和培养的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。

（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。

（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞；叫活体采卵。

2；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

（1）受精时；往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵细胞膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）该实验是利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白；因此实验步骤Ⅱ中构建基因表达载体时，需要先将HSA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，再导入奶牛受精卵。

（3）动物早期胚胎的体外培养时；培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清。培养过程需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要从乳汁中提取；只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析；移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，通常采用DNA分子杂交技术进行检测。

【点睛】

解答本题的关键是掌握体外受精、受精过程、基因工程等知识，要求考生识记体外受精技术的过程及方法、受精作用的过程、基因工程的操作步骤及应用，并能够联系实际答题。【解析】透明带反应和卵细胞膜反应乳腺蛋白基因的启动子激素和动物血清清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害雌性取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析DNA分子杂交26、略

【分析】微生物实验室培养的实验操作：1；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程为：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。2、纯化大肠杆菌：（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞；使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。（2）微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在-起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）将上表菌液分别接种于100mL餐厨垃圾废液中进行振荡培养；振荡处理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌与溶液充分接触；本实验还需设置对照组为接种等量无菌水。

（2）测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据菌落的特征对两种菌进行区分，并选取菌落数在30-300内的平板。由实验结果可知：两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

【点睛】

本题结合图表，考查微生物的分离和培养，要求考生识记制备培养基的过程;识记接种微生物常用的两种方法及微生物的计数方法，能结合柱形图中信息准确答题。【解析】某餐厨垃圾废液等量无菌水稀释涂布平板系列（梯度）稀释涂布平板菌落特征30~300两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化27、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异五、综合题(共4题，共8分)28、略

【分析】【分析】

1；腐乳的制作原理：（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型；（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。2、培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

(1)

民间制作腐乳是不需要严格灭菌的；发酵时主要利用的是空气中的毛霉孢子，空气中还存在其他微生物，因此发酵好的豆腐上布满的菌落，这些菌落不属于同一物种。

(2)

腐乳外部一层致密的皮是毛霉的匍匐菌丝形成的；对人体无害，可以食用。

(3)

加盐腌制前；豆腐经历从“白块”到“晾晒2d”，该过程中毛霉等微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，使氨基酸含量增加；加盐腌制后，一方面食盐使毛霉的酶活性降低，另一方面加盐使豆腐中的水分析出，部分氨基酸随之析出，所以，腐乳坯中的游离氨基酸含量下降；盐浓度过低，不足以抑制微生物的生长，导致腐乳腐烂变质；加盐能析出豆腐中水分，使豆腐块变硬，能抑制微生物的生长，防腐杀菌，还能调节口味。

(4)

为了保证腐乳的品质；能延长储存时间，现代工艺生产腐乳是在严格灭菌的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上；灭菌方法包括灼烧灭菌法；干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法，其中制作斜面培养基时对培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法，将试管倾斜的目的是增大接种面积。

【点睛】

本题考查腐乳的制作等相关知识，要求考生识记参与腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握腐乳制作的原理、条件及操作要点等基础知识，能结合曲线图作出准确的分析。【解析】(1)（1）不需要不属于。

(2)发酵时豆腐表面上匍匐的菌丝（匍匐菌丝）无。

(3)上升/增多/增加毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成氨基酸加盐使毛霉的酶活性降低；加盐使豆腐中的水分析出；部分氨基酸随之析出豆腐腐烂变质②③④

(4)灭菌高压蒸汽灭菌法增大接种面积29、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】