2024年沪教版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年沪教版选择性必修3生物上册月考试卷393考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列关于植物体细胞杂交的叙述，正确的是（）A.去掉细胞壁获得有活力的原生质体的唯一方法是酶解法B.因基因选择性表达导致原生质体和植物细胞形态不同C.杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关D.有丝分裂和减数分裂是植物体细胞杂交过程中细胞分裂的主要方式2、苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白（Bt）与豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）杀虫机理不同。在转基因作物种植区，发现棉铃虫种群抗性基因频率显著上升。科学家尝试用转双基因烟草对⒉龄幼虫进行多代抗性筛选。以下叙述不正确的是（）A.利用PCR技术不能检测烟草植株的抗虫性状B.单基因抗性筛选与双基因抗性筛选导致棉铃虫种群基因库不同C.种植转双基因的烟草可避免棉铃虫产生抗性基因D.转基因植物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险3、百合中含有甾体皂苷等多种药用成分。以兰州百合不同部位进行组织培养，探究外植体对丛芽诱导的影响（如表）。下列叙述正确的是（）。外植体外植体数（个）诱导数（个）鳞茎10083茎1001叶片1000

A.配制植物组织培养的培养基应先灭菌再倒平板B.在外植体接种和培养过程中都要预防杂菌污染C.外植体用75%酒精消毒后需用蒸馏水漂洗多次D.表中数据表明兰州百合叶片细胞不具有全能性4、下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，正确的是（）A.受精卵形成后在卵巢内进行有丝分裂B.胚胎发育早期细胞数量增加但胚胎总体积并不增加C.受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段D.胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层5、下列与传统发酵有关的微生物的比较中，正确的是。选项ABCD微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类原核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养厌氧异养需氧异养厌氧适宜温度20℃左右30～35℃30℃左右室温主要用途酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜

A.AB.BC.CD.D6、是利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是（）

A.可以用灭活的病毒代替PEG诱导形成bB.由b形成愈伤组织的过程发生了基因的选择性表达C.0.6%的钠盐起到了选择作用D.图示过程体现了植物细胞具有全能性7、美国华裔科学家钱永健先生因研究绿色荧光蛋白的成果而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（）A.该过程运用了基因突变原理B.绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达C.该生物与水母有很近的亲缘关系D.改变绿色荧光蛋白基因的1个碱基对，就不能检测到绿色荧光评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图；有关叙述正确的是（）

A.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力D.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落9、下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图；图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（）

A.利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶B.引物是子链合成延伸基础，子链沿着模板链的3’→5’方向延伸C.从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16D.在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/210、下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物11、长春花是野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。研究人员利用已免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞通过杂交技术生产出能够同时特异性识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体，制备过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.①过程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠产生更多的抗体B.经③过程获得的杂交瘤细胞都能产生抗癌胚抗原的特异性抗体C.图中“?”处只能使用PEG融合法和电融合法来诱导细胞融合D.制备双特异性抗体的目的是使长春碱能定向地作用于癌细胞12、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中13、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上14、荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针；与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下列说法正确的是（）

A.由图1可知，DNA探针的本质是荧光标记的DNA片段，其基本单位是脱氧核苷酸B.由图2可知，高温可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链C.图2中两条姐妹染色单体中最多可有2条荧光标记的DNA片段D.若C分别代表不同来源的一个染色体组，已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则F1有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点15、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质16、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。18、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物质)、_________________(提供氮元素的物质)和__________________。19、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。20、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。21、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。22、什么是生物武器？简述生物武器的危害。__________23、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()评卷人得分四、判断题(共1题，共5分)24、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共21分)25、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度；OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200请回答下列问题。

（1）与常温下研磨相比，液氮中研磨的优点是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿一异戊醇，实验过程中加入氯仿一异戊醇离心后，应取①______加异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是________。

（3）两种方法中，________法提取的DNA较多，其可能原因是_______。

II：某研究组对玉米开展了组织培养及相关研究；A；B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，请据图回答下列问题：

（1）植物组织培养过程中，外植体需要进行消毒处理。利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用________消毒30s后；用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈伤组织的诱导，对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加____________；以促进苗形成。

（3）研究中用显微镜可以观察到的现象是_______（填下列序号）。

①绿色芽点细胞排列松散②刚融合的杂交细胞发生质壁分离。

③胚状体细胞中有叶绿体④分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致26、某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞；需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过___________次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。

（3）杂交瘤细胞中有______个细胞核，染色体数目最多是_________条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_____________________。27、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)28、甘蔗田中喷洒含草铵膦的除草剂，除去杂草的同时也会损伤甘蔗植株。为解决这一难题，某科研团队利用农杆菌转化法将抗草铵膦基因Bar导入甘蔗细胞；获得转基因甘蔗植株，主要过程如下图所示。

Bar基因Ti质粒重组质粒农杆菌甘蔗愈伤组织转基因甘蔗植株。

回答下列问题：

(1)③过程中筛选后的农杆菌需接种到液体培养基振荡培养一段时间，其目的是___

(2)选用生长良好的甘蔗顶端幼叶作为外植体，经____（填“灭菌”或“消毒”）后，切成薄片接种于培养基上诱导出愈伤组织。通过调节培养基中_________诱导愈伤组织生芽；生根；获得甘蔗幼苗。

(3)可以用PCR技术检测甘蔗幼苗中是否成功导入了Bar基因。提取甘蔗幼苗的DNA进行PCR扩增，扩增结果用_________鉴定，结果如下图所示。推测阳性对照组（CK+)和阴性对照组（CK-)PCR反应体系的区别是_________。有同学认为除了4、11和16号植株外其他植株都是抗草铵膦植株，你是否同意该观点，请说明理由__________________。

29、阅读以下材料；回答（1）-（4）题。

水平基因转移。

2021年；《细胞（Cell）》以封面论文的形式发表了中国农科院张友军团队的最新研究成果。此成果在国际上首次揭示了烟粉虱通过水平基因转移方式“偷窃”植物源解毒基因，进而分解掉植物的防御性物质，使自身可直接取食600多种植物。国内其他学者在近年对烟粉虱水平基因转移研究中，也发现其他植物基因向昆虫烟粉虱水平转移的事实。例如，果胶甲酯酶（PME）基因。

水平基因转移；是相对于亲代到子代的垂直基因转移而提出的，是物种间不通过生殖而进行的基因转移或是胞内遗传物质的交流。这种现象在原核生物中以转化；转染等方式频繁发生，有助于细菌等生物获得逆境抗性、毒性和固氮等方面的性状。

研究表明；在真核细胞结构的进化过程中，水平基因转移现象也具有举足轻重的地位。例如，一个细菌吞噬另外一个细菌，被吞噬细菌因其基因组在吞噬细菌内被保留下来变为新的独立功能的结构。真核生物基因水平转移多见于昆虫体内共生菌与宿主之间，植物细胞可通过特定细菌的感染而实现细菌基因序列向本身基因组的转化。

PME是降解果胶的关键酶；能够催化果胶生成果胶酸和甲醇，从而加速细胞壁的降解。这有利于植物的生长和构建含有甲醇等毒性物质的防御体系。科学家对烟粉虱进行了PME基因的干扰沉默，并分析了基因沉默后的烟粉虱对烟草的取食行为，结果显示，基因沉默后烟粉虱增加了对烟草韧皮部的非刺探时间和水样唾液分泌时间，并显著缩短了持续取食的时间，进而降低了烟粉虱从韧皮部取食的能力。科学家还对上述实验取食过程中烟草的防御信号进行了分析，SA（水杨酸）信号通路和JA（茉莉酸）信号通路是植物的两条主要防御途径，二者之间有着协同或拮抗的关系。SA途径主要防御病原菌，JA途径主要防御昆虫取食。实验检测到烟草被PME基因沉默的烟粉虱取食过程中，细胞内SA含量和SA信号通路相关基因表达水平均降低，而JA含量和JA信号通路相关基因表达水平均升高。

(1)基因通常是具有_____________的核酸片段。烟粉虱通过水平基因转移获得植物源解毒基因的过程中，基因的传递_____________（遵循/不遵循）孟德尔遗传定律。

(2)鉴定烟粉虱PME基因是否通过水平基因转移从植物而来，需要对两类生物的相关物质进行比对分析，判断下列物质是否可作为鉴定比对分析的对象。在相应物质下面对应的空白表格中填入“√”或“×”。“√”和“×”分别表示是否可以作为鉴定比对分析的物质。_____________。相关物质PME果胶酸和甲醇PME基因PME基因的mRNA判断结果

(3)根据文中信息，列举1例在教材中学习过的“水平基因转移”现象。_____________

(4)简述在烟粉虱取食烟草的实验中PME基因帮助烟粉虱增加取食烟草韧皮部的机制。_____________30、新型冠状病凝肺炎（COVID-19）的病原体严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）是一种RNA病毒。回答下列问题。

（1）SARS-CoV-2的基因组测序工作由我国科学家率先完成。为提高准确率，检测样本中是否含有SARS-CoV-2，应选择其基因组中特有的_______（多选）的基因。

A.单个B.多个C.碱基序列稳定D.碱基序列易变。

（2）检测采集的样本中是否含有SARS-CoV-2的步骤如下：

①利用样本中获取的RNA得到cDNA.该过程需要使用________酶。

②利用PCR技术对上述cDNA进行扩增。PCR过程的原理是______，该过程需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA聚合酶、引物、______，同时通过控制温度使该过程在体外反复进行。扩增的过程包括______。

③对扩增后的cDNA进行荧光检测；过程如下图所示。DNA探针只能与特有的SARS-CoV-2基因中部分序列结合，DNA探针中R基团发出的荧光会被距离很近的Q基团吸收，不能发出荧光。在对结合有探针的cDNA扩增过程中，DNA聚合酶会将遇到的探针水解，使DNA探针上R基团与Q基团分离，R基团发出荧光。释放到溶液中的R基团达到一定量时，才能检测到发出的荧光。

样本中不含病毒时，检测不到荧光的原因是____________。当样本中病毒含量较少时，能检测到荧光值所需的扩增次数比病毒含量较多时___________（填“多”或“少”）。31、2019年1月24日；《国家科学评论》发表了上海科学家团队的一项重要成果，即先通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因BMAL1，再利用体细胞克隆技术，求得了五只BMAL1基因敲除的克隆猴，这是国际上首次成功构建出的一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型。基因编辑技术是上述研究中的核心技术，该技术中的基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA和Cas9蛋白组成，向导RNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。

（1）CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌体内，推测该系统在细菌体内的作用是______。由于Cas9蛋白没有特异性，用CRISPR/Cas9系统切割BMAL1基因，向导RNA的识别序列应具有的特点是______。

（2）为了获得更多的受精卵，可对母猕猴注射______激素，使其超数排卵，卵细胞受精的标志是______。在个体水平鉴定BMAL1基因敲除是否成功的方法是______。

（3）在人类生物节律紊乱机理研究方面，猕猴模型比小鼠、果蝇等传统模型动物更加理想，理由是______。基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMAL1缺失猕猴（A组），与通过基因编辑受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴（B组）比较，更适合做疾病研究的模型动物是______（填“A组”或“B组”），理由是______。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交的步骤及方法：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞；具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。

①通过酶解法去除细胞壁获得原生质体；植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；

②通过物理或化学方法诱导原生质体融合；原生质体融合所用的方法有物理法和化学法，物理法包括离心；振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；

③再生细胞壁形成杂种细胞；

④先脱分化过程形成愈伤组织；再分化生成完整植株。

【详解】

A；去掉细胞壁获得有活力的原生质体的常用方法是酶解法；A错误；

B；原生质体和植物细胞形态不同是因为原生质体无细胞壁；B错误；

C；高尔基体与植物细胞壁的形成有关；因此杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关，C正确；

D；植物体细胞杂交过程中细胞分裂的方式为有丝分裂；D错误。

故选C。2、C【分析】【分析】

基因工程的基本步骤是：目的基因的获取；构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；利用DNA分子杂交技术可以检测目的基因；但是不能检测烟草植株的抗虫性状，A正确；

B；单基因抗性筛选与双基因抗性筛选导致棉铃虫种群基因库不同；B正确；

C；棉铃虫产生抗性基因是自然产生的；而种植转双基因烟草可淘汰该基因控制的性状，C错误；

D；转基因植物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险；以防止产生不必要的后果，D正确。

故选C。3、B【分析】【分析】

植物组织培养技术的过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。

【详解】

A；配制好的培养基用三角瓶分装后再灭菌；植物组织培养不用培养皿，A错误；

B；植物组织培养过程应注意无菌操作；故在外植体接种和培养过程中都要预防杂菌污染，B正确；

C；外植体用75%酒精消毒后需用无菌水漂洗多次；C错误；

D；全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的能力；表中数据不能确定兰州百合叶片细胞是否具有全能性，D错误。

故选B。4、B【分析】【分析】

1；卵细胞形成过程；其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。

2；受精作用的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体；还有一个是第二极体）。

【详解】

A；受精卵形成后在输卵管内进行有丝分裂；A错误；

B；形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂；卵裂过程中每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；

C；孵化是指囊胚从透明带出来；孵化后进入原肠胚阶段，C错误；

D；细胞分化开始于囊胚时期；D错误。

故选B。5、D【分析】【详解】

酵母菌属于真核生物，代谢类型为异养兼性厌氧型，生存的适宜温度为18～25℃，可用于酿酒等，A错误；醋酸菌属于原核生物，代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为30～35℃，可用于酿醋，B错误；毛霉属于真核生物，代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为15～18℃，可用于制作腐乳，C错误；乳酸菌属于原核生物，代谢类型为异养厌氧型，生存于室温下，可用于制作泡菜，D正确。6、A【分析】【分析】

题图分析：图示为培育高产耐盐的杂种植株的培育过程，其中a表示酶解法去除细胞壁，b表示杂种细胞；c为胚状体，d为筛选获得的钠盐植株。

【详解】

A、不可以用灭活的病毒代替PEG诱导形成b杂种细胞；灭活病毒诱导融合方法适用的对象是动物细胞，A错误；

B、由b形成愈伤组织的过程为脱分化；该过程中发生了基因的选择性表达，B正确；

C；0.6%的钠盐起到了选择作用；进而可以获得耐盐的细胞而后得到耐盐的植株，C正确；

D；图示过程包含的技术为植物体细胞杂交；该技术的原理包含植物细胞的全能性株，D正确。

故选A。7、B【分析】【分析】

某种生物中检测不到绿色荧光；将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光，说明绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达。

【详解】

A；将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内属于基因工程技术；原理是基因重组，A错误；

B；绿色荧光蛋白基因表达产生了绿色荧光蛋白；就可以检测到绿色荧光，B正确；

C；所有生物共用一套密码子；因此水母的基因能在该生物体内表达，但不能证明二者的亲缘关系，C错误；

D；改变基因中的1个碱基对；基因的分子结构发生了改变，由于密码子的简并性，改变后转录形成的密码子决定的氨基酸种类可能相同，其基因控制合成的蛋白质可能相同，可能可以检测到绿色荧光，D错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)8、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，A正确；

B；要筛选出能高效分解尿素细菌；所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；

C；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种；形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；

D；步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散；可以获得单细胞菌落，D正确。

故选ACD。9、C:D【分析】【分析】

聚酶链式反应扩增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2.PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶；该过程中氢键的断裂是通过高温完成的，而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶，A正确；

B；引物是子链合成延伸基础；即DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，也可以说子链沿着模板链的3’→5’方向延伸，B正确；

C、从理论上推测，第四轮循环产物共有24=16个DNA分子；其中有2个是模板链，只含有引物A的DNA片段即为与其中的一个模板链形成的1个DNA分子，因此，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，C错误；

D、DNA复制为半保留复制，DNA复制n次，共形成2n个DNA，其中两个DNA含有母链和子链（引物A或引物B），（2n-2）个DNA都含有子链（含有引物A和引物B）。第三轮循环即DNA复制3次；共形成8个DNA，其中2个DNA含有引物A或引物B，6个DNA含有引物A和引物B，其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，含量为1/4，D错误。

故选CD。

【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养和动物细胞培养的比较。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无

【详解】

A；动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同；如动物细胞培养需要加血清，植物细胞培养不需要添加血清，A正确；

B；植物组织培养不需要胰蛋白酶；B错误；

C；动物细胞培养可用于检测有毒物质；茎尖组织培养可获得脱毒植株，C正确；

D；烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物，D正确。

故选ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融台，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基坮养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；①过程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞，A错误；

B；③为选择培养基；经选择培养基获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，要产生所需抗体还要进行抗体检测阳性和克隆化培养，B错误；

C；诱导动物细胞融合可以使用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等；C错误；

D；双特异性抗体中的癌胚抗原抗体能将药物定向引导至和癌细胞结合；从而避免对其他细胞的破坏，D正确。

故选ABC。12、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。13、B:C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的；若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成；B错误；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，D错误。

故选BCD。14、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针；原理是DNA分子杂交。

2；DNA分子是一个独特的双螺旋结构；是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。

3；目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图1可知；DNA探针是用荧光分子标记的DNA分子，DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸，因此荧光标记的DNA探针的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A正确；

B；由图2可知；高温（煮沸）可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链，B正确；

C；图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链；所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误；

D、由于AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记，若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则其F1（AABC）含有3个荧光点；经间期复制加倍，有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点，D正确。

故选ABD。15、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。16、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。三、填空题(共7题，共14分)17、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法18、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.无机盐19、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制22、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物，若用与战争，则可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物。23、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误四、判断题(共1题，共5分)24、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。五、实验题(共3题，共21分)25、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有机体中的重要成分；在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类，在真核细胞中，前者主要存在于细胞核中，后者主要存在于细胞质及核仁里。在制备核酸时，通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，使核蛋白被释放出来。提取DNA有有多种方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有区别又有联系。

II：题图分析：A表示利用生殖细胞得到单倍体植株；B表示通过胚状体进行无性繁殖；其中①为脱分化；再分化；C为植物组织培养；D表示植物体细胞杂交，其中②是诱导原生质体融合。

【详解】

I：（1）液氮温度低，液氮中研磨会研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量。

（2）氯仿-异戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-异戊醇，离心后，氯仿-异戊醇位于试管的底部，DNA溶于上清液中，所以离心后应该取上清液；含DNA的上清液中加异丙醇离心后取的是沉淀物，说明DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇。

（3）从表中数据可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA较多，根据CTAB和SDS两种试剂作用的区别，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物组织培养过程中；整个过程应严格无菌无毒，利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）为促进愈伤组织再分化；在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加适量的生长素，以促进苗形成。

（3）①芽是植物体中具有分生能力的组织；细胞排列紧密，①错误；

②刚融合的植物体细胞没有成熟的大液泡；无法构成渗透系统，不能发生质壁分离现象，②错误；

③胚状体细胞出现具有分生能力的绿色芽；因此其细胞内有叶绿体，③正确；

④分化的愈伤组织的结果形成了具有根和芽的胚状体；细胞的形态发生了变化，④错误。

故选③。

【点睛】

本题主要考查DNA提取原理、操作过程及实验结果的分析以及植物组织培养技术，意在考查学生读图能力和分析应用能力。【解析】研磨充分，低温抑制酶活性抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量上清液DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而能提取出更多的DNA（体积分数为70-75%）酒精降低（适量的）生长素③26、略

【分析】【详解】

本题以杂交瘤细胞为背景；考查了动物细胞融合；细胞分裂和细胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗体效价大于16000，所以最少需要经过四次免疫.由图可知，血清抗体效价均达到16000以上时，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞。

（2）B细胞与骨髓瘤细胞在一起融合时；可能发生B细胞与骨髓瘤细胞融合，B细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和B细胞与骨髓瘤细胞融合。由于细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故体系中会出现多种类型的细胞。

（3）由于核膜也具有流动性；故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。B细胞有40条染色体，骨髓瘤细胞有60条染色体，融合后的杂交瘤细胞有100条染色体。

（4）未融合的B淋巴细胞是已分化的细胞；不能无限增殖，所以多次培养后不能存活。

【点睛】

本题考查动物细胞工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%1100不能无限增殖27、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原一抗体杂交技术。

④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；图1中①-④依次为目的基因的获取、表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测。

（1）

PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，需要Taq酶，但Taq酶不能从头开始合成DNA，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，因此需要根据目的基因fabV基因的两端按碱基互补配对原则设计引物。至少需要经过4次扩增才能获的8个双链等长的目的基因。

（2）

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，题干信息显示C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，说明P2启动子在高温下可以启动转录；P1启动子在低温下可以启动转录。题目显示高温下只表达lacz蛋白，则lacZ基因要插在“高温下不被抑制”的启动子的后面，即P2→T2之间；GFP基因要低温下表达，则插入位置要在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

（3）

因为fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生；大肠杆菌能在含三氯生的培养基上生长，说明大肠杆菌插入重组质粒，且依据是低温下有绿色荧光高温下无绿色荧光。

【点睛】

本题考查基因工程相关知识点，要求学生熟练掌握基因工程的原理、步骤及相关的目的，形成知识网络，结合题目要求解决相关问题。【解析】(1)目的基因（fabV基因）两端碱基序列4

(2)基因表达载体的构建P2→T2插在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

(3)三氯生低温下有绿色荧光，高温下无绿色荧光六、综合题(共4题，共20分)28、略

【分析】【分析】

影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素。植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂；脱分化和再分化的关键性激素。生长素和细胞分裂素的比值高时；有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。

【详解】

（1）振荡培养可以增加培养液中的溶氧量；并且增大农杆菌与培养液的接触面积。

（2）选用生长良好的甘蔗顶端幼叶作为外植体；消毒后接种到培养基中形成愈伤组织，之后将生长状态良好的愈伤组织转移到新的培养基进行继代培养以得到生长快速且稳定的愈伤组织。生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化；抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。故通过调节培养基中生长素和细胞分裂素的比值诱导愈伤组织生芽、生根，获得甘蔗幼苗。

（3）提取甘蔗幼苗的DNA进行PCR扩增，扩增结果用电泳法鉴定。推测阳性对照组（CK+）和阴性对照组（CK-）PCR反应体系的区别是是否加入Bar基因作为模板。分析题图可知，除4、11和16号植株外其他植株到成功导入了Bar基因，但导入的目的基因不一定能成功表达，故除了4、11和16号植株外其他植株不一定是抗草铵膦植株。【解析】(1)增加培养液中的溶氧量；并且增大农杆菌与培养液的接触面积。

(2)消毒生长素和细胞分裂素的比值。

(3)电泳法是否加入Bar基因作为模板不认同，除4、11和16号植株外其他植株到成功导入了Bar基因，但导入的Bar基因不一定表达29、略

【分析】【分析】

1；基因的概念：基因通常是具有遗传效应的DNA片段；是决定生物性状的基本单位。

2；基因和染色体的关系：基因在染色体上；并且在染色体上呈线性排列，染色体是基因的主要载体。

(1)

基因通常是具有遗传效应的核酸片段。遵循孟德尔遗传定律的基因是有性生殖的生物的