2025年人民版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人民版选择性必修3生物上册月考试卷976考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同种限制酶切割的末端才能连接，不同限制酶切割的末端不能连接C.基因工程中，直接利用天然质粒上的标记基因进行检测目的基因是否表达D.动植物病毒也可以作为基因工程的载体2、甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）。粉状硫10gK2HPO44gFeSO40．5g蔗糖10g（NH4）2SO40．4gH2O100mlMgSO49．25gCaCl20．5gⅠ++++-+++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++

A.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物3、下列观点支持转基因产品会引发安全性问题的是（）A.生殖隔离使转基因作物与其他植物很难杂交B.花粉的传播距离有限，不会引起安全性问题C.植物花粉存活时间有限，不会散失到其他环境，威胁其他生物D.转基因产品有可能成为“入侵的外来物种”4、下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗抗体的具体操作步骤；相关叙述错误的是（）

①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞将X抗原注入小鼠体内获得能产生抗抗体的B淋巴细胞。

②利用促细胞融合因子促使细胞融合。

③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养。

④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞。

⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞。

⑥从小鼠腹水中提取抗体A.实验顺序应该是①②⑤④③⑥B.③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆C.②过程获得的细胞均可无限增殖D.设计该实验方案的科学家是米尔斯坦和科勒，并因此获得诺贝尔生理学或医学奖5、PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是（）

A.该图表示PCR循环中的变性环节B.dNTP作为扩增的原料会依次连接到5'端C.Taq酶催化相邻的dNTP间形成磷酸二酯键D.用图中引物扩增两个循环后可获得目的产物6、下列有关培养基配制原则的叙述，正确的是（）A.培养基中至少要有一种有机物，除水以外的无机物只提供无机盐B.任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及特殊营养物质C.配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例D.无机碳源和氮源不能为微生物提供能量7、下图为早期胚胎发育过程中的某一时期示意图。下列有关叙述不正确的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.②将来发育成胎儿，③将来发育成胎盘和胎膜8、下列与DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是（）A.兔血和鸡血都可以作为提取DNA的材料B.DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热9、下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，错误的是A.在桑葚胚阶段，胚胎的内部就出现了含有液体的空腔B.胚胎干细胞可以从早期胚胎中分离获得C.桑葚胚的细胞一般都具有全能性D.受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、下列防止生物武器的措施，正确的是（）A.通过立法，禁止生物武器的生产和扩散B.捕杀敌人投放的带菌的小动物C.大力发展生物武器，以牙还牙D.根据生物武器的类型采取相应措施11、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质12、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染13、研究发现；某些致病菌生长繁殖需要外界提供相应的生长因子。将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时，金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象（图甲）为进一步探究流感嗜血杆菌所需生长因子的种类，把其菌悬液与不含生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从血液中提取的V；X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图乙所示。下列叙述正确的是（）

A.图甲中的不同菌落可以通过观察菌落特征进行鉴别B.卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致C.可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养D.图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V或X14、下图为某个基因的部分片段，关于该结构的叙述，错误的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA连接酶作用于②处C.限制酶作用于③处D.解旋酶作用于④处15、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸16、生活垃圾分类就是通过回收有用物质减少生活垃圾的处置量，提高可回收物质的纯度增加其资源化利用价值，减少对环境的污染。目前，各地陆续颁布实施《生活垃圾管理条例》，生活垃圾分类已成为市民的日常生活方式。处理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述正确的是（）

A.剩余饭菜、玻璃碎片、果皮果壳属于湿垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对碘液分解能力不同C.若垃圾分类不当混入过期的抗生素或电池等会抑制微生物生长D.图中将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法17、利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素原。下列相关叙述中，错误的是（）A.人和大肠杆菌在合成胰岛素原时，转录和翻译的场所是相同的B.DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖形成化学键C.通过检测发现大肠杆菌中没有胰岛素原产生，则可判断重组质粒未导入受体菌D.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有较高的生物活性评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)18、生化武器散布途径：将病原体_____或者通过_____、_____等散布到敌方，会对军队和平民造成大规模杀伤后果。19、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。20、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。21、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。22、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。23、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____24、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。25、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共2题，共20分)26、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误27、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共24分)28、［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基；灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。29、鉴江是粤西沿海最大的河流，沿河两岸的居民生活用水基本来源于鉴江。但若生活污水未经处理排放到鉴江中，会导致大肠杆菌超标，进而引发细菌性痢疾等肠道疾病。研究发现，大肠杆菌能分解乳糖，产生酸性物质和气体。某研究小组拟对鉴江中的大肠杆菌进行鉴别和统计。用到的两种培养基配方和滤膜法步骤如下：。培养基名称配方（L-1）pH乳糖蛋白胨培养基蛋白胨10g，牛肉膏5g，乳糖5g，NaCl5g，溴甲酚紫0．016g（溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时呈紫色）7．4牛肉膏蛋白胨培养基蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g7．4

滤膜法具体步骤：

（一）用无菌的三角瓶接取1000毫升水样；盖好瓶塞。

（二）将漏斗和抽滤瓶固定好；用镊子夹住滤膜边缘，将水样倒入漏斗中，边抽滤；边加水。

（三）用镊子将滤膜取出；放在无菌平板上进行培养；观察并记录实验结果。

回答下列问题：

(1)在乳糖蛋白胨培养基中，提供氮源的物质有______________________。

(2)高压灭菌条件常为121℃，15min，但乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，因为乳糖在121℃会被破坏，而选用了115℃，为了达到相同灭菌效果可以______________________；

(3)研究小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1ml待测水样，B管不做处理，然后都放人培养箱中培养24h。若A试管产生气体，同时出现______________________（填颜色）时；则提示水样被大肠杆菌污染。

(4)制作滤膜法中所用的无菌平板时，在牛肉膏蛋白胨培养基的基础上还应加入______________________，便于统计菌落。按上述滤膜法步骤制作的3个样品平板上的菌落初步从______________________（答出两点）等方面进行形态学鉴定。然后统计三个平板上所有的菌落数分别为49、51、47，能否据此得出每升水样中大肠杆菌数约为49的结论?______________________。理由是_________________________________________。30、某些老陈醋会出现产气现象；原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：

(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________。

(2)实验小组初步筛选出了A1；A2和A3三株疑似的产气细菌；筛选过程如下图所示。

①过程a的接种方法是__________，判断依据是__________。

②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________，或培养时间太长导致__________。

③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路：__________。

(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：。细菌不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm5/（μg·mL-1）7.5/（μg·mL-1）10/（μg·mL-1）15/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）A10.2281317A2710121516A356566

该实验的目的是__________。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是__________、__________。评卷人得分六、综合题(共4题，共32分)31、现代生物科技技术在农畜牧业等领域应用广泛；试管牛；克隆牛、含人乳铁蛋白转基因奶牛相继诞生，请回答相关问题：

（1）试管牛培育过程中，首先要用__________激素处理良种母牛，让其超数排卵，但只有发育到___________时期的卵子才具有受精作用。同时，在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行______。

（2）克隆牛培育过程中，体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是____________。

（3）培育含人乳铁蛋白转基因奶牛过程中，所构建的基因表达载体必须包括：人乳铁蛋白基因启动子、终止子、________和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的_____________。

（4）培育试管牛、克隆牛和转基因牛三者共有的技术是____________、______________。32、葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣）。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料；同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：

（1）为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0．1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量大约为__________个。

（2）皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，培养基的基本营养成分有水、碳源、_____________________，为了达到初步筛选醋酸菌的目的，培养基中还需加入碳酸钙，加入碳酸钙的作用是______________________________。

（3）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌_________。（写出实验设计思路）33、科研人员通过敲除里氏木霉基因组中去乙酰化酶基因（HDAC）；探究组蛋白乙酰化对纤维素酶基因表达的影响，其主要过程如下图。请据图回答问题。

(1)PCR反应体系中，除加入引物和模板DNA外，一般还需要加入_____。在最后一个循环结束后通常还需要维持72℃7min，其目的是_____。

(2)引物设计是PCR的关键，本研究中引物R1的5'端添加与引物Fc互补的序列，其目的是_____。在PCR5中加入的引物是_____。

(3)在原生质体转化过程中，加入适量的CaCl2和PEG溶液，其目的是_____。涂布时，涂布器用_____法灭菌后将原生质体接种到含_____的固体培养基上筛选。

(4)为探究敲除基因HDAG后对纤维素酶基因（CBHI、EGLI）和纤维素酶基因激活因子基因XYR1转录的影响，研究中先提取_____，再利用荧光RT-PCR技术检测，结果如下图。依据结果可以得出的结论是_____。

34、非人灵长类与人类具有较高的相似性；是用来开展人类发育生理学和疾病治疗研究的理想生物医学模型。非人灵长类，如恒河猴胚胎工程技术的发展和应用对拓展非人灵长类动物模型的应用前景具有重要价值。回答下列相关问题：

(1)从雌性恒河猴体内采集卵母细胞前，需要连续6d对母体注射__________，其目的是___________。一般将收集到的卵母细胞置于含10%胎牛血清的成熟培养基中，该培养基中的CO2/NaHCO3可以起到__________作用。

(2)收集到的运动性能良好的恒河猴精子__________（填“能”或“不能”）与采集到的卵母细胞直接完成体外受精，原因是__________。

(3)目前获得恒河猴胚胎的途径有三种。一是体外受精，将精子与卵子共培养后，4~24h后如果观察到__________则判断受精成功；二是利用显微操作仪辅助精子进入成熟的卵母细胞中完成精卵结合，该操作方法叫作__________；三是通过腹部切口冲洗输卵管或子宫来收集胚胎，该步骤叫作____________。以上方法获得的胚胎均要移植进受体子宫内才能继续发育，胚胎移植后其能存活的生理基础是__________。

(4)科研人员通过将携带绿色荧光蛋白（ECFP）基因的人免疫缺陷病毒载体注入恒河猴胚胎囊胚腔，从而实现了对非人灵长类动物的基因修饰。上述操作程序中最关键的步骤是__________（写具体）。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶大多来自于原核生物；只能识别DNA分子的特定核苷酸序列，A错误；

B；不同限制酶切割的粘性末端相同也能连接；B错误；

C；天然的质粒不能直接作为载体；基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的；检测目的基因是否表达出蛋白质，可采用抗原一抗体杂交法，C错误；

D；动植物病毒也可以作为基因工程的载体；D正确。

故选D。2、C【分析】【分析】

根据表格分析；乙能在Ⅰ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，而Ⅰ培养基缺氮，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；丙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和乙都不能，Ⅱ培养基中没有有机碳源，说明丙能够合成有机物，属于自养微生物；而甲不能在Ⅰ培养基中生长，说明不能固氮；又不能在Ⅱ培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在Ⅲ培养基中生长，说明属于异养微生物。

【详解】

A；根据以上分析可知；丙属于自养型微生物，A错误；

B；乙能够在Ⅰ中正常生长繁殖；但是不能在Ⅱ培养基中生长繁殖，说明其为异养微生物，同理可推知，甲仅能在Ⅲ培养基中生长，甲也为异养微生物，根据分析，丙为自养型微生物，B错误；

C；根据以上分析可知；甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物，C正确；

D；根据上述分析；乙是固氮微生物，甲、丙是异养微生物，D错误。

故选C。3、D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；生殖隔离使转基因植物与其他植物很难杂交；支持转基因生物不引发生物安全性问题，A错误；

B；花粉的传播距离有限；不会引起生物安全，支持转基因生物不引发生物安全性问题，B错误；

C；植物花粉存活时间有限；不会散失到其他环境，威胁其他生物，支持转基因生物不引发生物安全性问题，C错误；

D；转基因植物有可能像“入侵的外来物种”而引发生物安全问题；不支持转基因生物不引发生物安全性问题，D正确。

故选D。

【点睛】4、C【分析】【分析】

1；单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2；单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症；可制成“生物导弹”。

【详解】

A；由分析可知：该实验的顺序应该是①②⑤①③⑥；A正确；

B；③过程产生多个杂交瘤细胞的过程为有丝分裂；称为克隆，B正确；

C；利用促细胞融合因子促使细胞融合；可获得多种融合细胞，其中B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的细胞不能无限增殖，C错误；

D；设计该实验方案的科学家是米尔斯坦和科勒；并因此获得诺贝尔生理学或医学奖，D正确。

故选C。5、C【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

4；过程：高温变性、低温复性、中温延伸。

【详解】

A；图中引物与模板链碱基互补配对；该图表示PCR循环中的复性环节，A错误；

B；脱氧核苷酸只能连接在3'端；所以dNTP作为扩增的原料会依次连接到3'端，B错误；

C；延伸时；在Taq酶催化下，相邻的dNTP间形成磷酸二酯键，C正确；

D；由于两个引物均不在该片段的端点；因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长；通过绘图可推知，第二轮中亦不会出现等长的引物，在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，所以增3个循环后可获得目的产物，D错误。

故选C。6、C【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质；

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；自养微生物培养基中不一定需要有机物；无机物还可充当碳源和氮源，A错误；

B、不同微生物的营养需求不同，如自生固氮菌能以空气中的N2为氮源；因此培养自生固氮菌的培养基中不需要含有氮源，B错误；

C；配制培养基时；要注意各种营养物质的浓度和比例，从而能为微生物的生长提供合适的营养，同时也可保证营养液的渗透压，C正确；

D、NH3既是硝化细菌的氮源；又能为其提供能量，D错误。

故选C。7、D【分析】【分析】

分析题图：图示为胚胎发育过程某一时期示意图；该时期为囊胚期，其中①为透明层；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。

【详解】

AD；该时期为囊胚期；其中①为透明层；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，A正确，D错误；

B；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期；终止于生命结束，B正确；

C；孵化发生在囊胚后期；早期胚胎从①透明带中伸展出来的现象称为“孵化”，C正确。

故选D。8、A【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；兔属于哺乳动物；其成熟的红细胞没有细胞核及各种细胞器，提取不到DNA，而鸡属于鸟类，其红细胞内含有细胞核与各种细胞器，DNA含量较多，A错误；

B；由于DNA在不同氯化钠溶液中的溶解度不同；因此可以采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法去除部分杂质，B正确；

C；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低；DNA的沉淀量最大，故预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA，C正确；

D；将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中；加入二苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色，D正确。

故选A。9、A【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能，属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；在囊胚阶段；胚胎的内部就出现了含有液体的空腔，A错误；

B；胚胎干细胞是一类未分化的细胞；可以从早期胚胎或原始性腺中分离获得，B正确；

C；桑葚胚的细胞一般都具有全能性；囊胚的细胞逐渐分化，C正确；

D；受精卵早期分裂时；胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，D正确。

故选A。二、多选题(共8题，共16分)10、A:B:D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件（如温度）的影响。2、还受地形、风向等多种条件影响。3、生物武器使用时不易控制，使用不当可危害本方安全。

【详解】

生物武器是多种多样的；对于不同的生物武器应用不同的防治方法，但总的原则是禁止生物武器的生产和扩散，因此ABD正确，C错误。

故选ABD。11、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。12、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。13、A:B:C【分析】【分析】

据图分析可知；流感嗜血杆菌的菌落主要分布于添加了X和V的区域的交界处，说明该菌生长需要的生长因子是X和V。

菌落的特征：形状；大小、颜色、隆起程度、质地、边缘等。

培养基的营养组成：碳源；氮源、水、无机盐、特殊生长因子。

【详解】

A；鉴定不同种的菌落可以观察菌落的特征；比如形态、颜色、隆起程度等，A正确；

B；流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时；金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，由此推测卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致，B正确；

C；分析题干信息可知；可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养，C正确；

D、图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V和X，不是V或X，D错误。14、A:C:D【分析】【分析】

题图分析：该图为某个基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．还包括侧链上的磷酸的脱氧核糖，为腺嘌呤脱氧核苷酸；②是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键；③是碱基之间的氢键；④是含氮碱基和脱氧核糖之间的化学键。

【详解】

A；图示为DNA结构模式图；图中①所圈定的部位是腺嘌呤脱氧核苷酸，A错误；

B；DNA连接酶能使两个脱氧核苷酸之间的化学键②磷酸二酯键形成；B正确；

C；删去；图中没有⑤，限制酶作用于磷酸二酯键。

D；解旋酶作用于碱基对之间的氢键③处；使氢键断开，D错误。

故选ACD。

【点睛】15、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。16、C:D【分析】【分析】

1；根据《上海市生活垃圾管理条例》第四条本市生活垃圾按照以下标准分类规定：湿垃圾；即易腐垃圾，是指食材废料、剩菜剩饭、过期食品、瓜皮果核、花卉绿植、中药药渣等易腐的生物质生活废弃物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、湿垃圾以外的其它生活废弃物。

2；由题图信息分析可知；该实验的目的是为了筛选获得高效降解淀粉的菌种，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，属于选择培养基，接种方法是稀释涂布平板法。

【详解】

A；剩余饭菜、果皮果壳属于湿垃圾；玻璃碎片属于干垃圾，A错误；

B；菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力强，B错误；

C；抗生素或电池等会抑制微生物生长；不利于微生物的分解，C正确；

D；图中出现透明圈；因此将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法，D正确。

故选CD。17、A:C:D【分析】【分析】

大肠杆菌是原核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜；核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行。

【详解】

A；人体胰岛细胞是真核细胞；在合成胰岛素原时，转录在细胞核中进行，翻译在细胞质的核糖体上进行，原核细胞没有细胞核，A错误；

B；DNA连接酶能在两个相同黏性末端配对后的磷酸与脱氧核糖之间形成化学键（磷酸二酯键）；B正确；

C；通过检测；大肠杆菌中没有胰岛素原产生，不能判断重组质粒未导入受体菌，也可能是导入后没有表达，C错误；

D；大肠杆菌是原核生物；没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，D错误。

故选ACD。三、填空题(共8题，共16分)18、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】①.直接②.食物③.生活必需品19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色222、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖23、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药24、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。25、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共2题，共20分)26、A【分析】【详解】

胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故该表述正确。27、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共3题，共24分)28、略

【分析】【详解】

微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要生长因子；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用蒸馏水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。【解析】氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基29、略

【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。(1)

由配方表分析可知；在乳糖蛋白胨培养基中，提供氮源的物质有蛋白胨和牛肉膏。

(2)

高压灭菌条件常为121℃；15min；但乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，因为乳糖在121℃会被破坏，而选用了115℃，为了达到相同灭菌效果可以适当延长灭菌时间。

(3)

研究小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B；A管中加入1mL待测水样，B管不做处理，然后都放入培养箱中培养24h。若A试管产生气体，还不可以提示水样可能被大肠杆菌污染，这时还需要再观察试管中的颜色变化，由于大肠杆菌能产生酸性物质和气体，同时培养基中的溴甲酚紫在酸性时呈黄色，故若A试管出现黄色时，则提示水样被大肠杆菌污染。

(4)

制作滤膜法中所用的无菌平板时；在牛肉膏蛋白胨培养基的基础上还应加入琼脂形成固体培养基，便于统计菌落。按上述滤膜法步骤制作的3个样品平板上的菌落初步从形态；大小、颜色和透明度等方面进行形态学鉴定。该培养基为鉴别培养基，在平板上生长的菌落，只有部分是大肠杆菌形成的菌落，因此大肠杆菌实际数值应该小于49。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类和作用，掌握菌落计数的方法和具体操作等知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题干信息准确答题。【解析】(1)牛肉膏；蛋白胨##蛋白胨、牛肉膏。

(2)适当延长灭菌时间。

(3)黄色。

(4)①.琼脂②.形态、大小、颜色和透明度③.否#不能④.培养基表面的菌落，只有部分是大肠杆菌形成的菌落30、略

【分析】【分析】

题中用瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料；经过分离、纯化、并初步筛选出A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，进一步探究了不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中数据所示的清晰区直径（抑菌圈）越大，代表该菌种生长受到的抑制作用越强。

【详解】

（1）为了筛选产气细菌；实验人员设置了甲；乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种等量的变质老陈醋，对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落，可以从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株。

（2）①过程a所得待测培养基中菌落的分布较为均匀；据此判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。

②区分菌落种类的依据是菌落的形态；大小、隆起程度和颜色等特征；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，能有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。

③因为老陈醋中的产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌；若有5%的过氧化氢溶液，A1；A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材，可以将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，观察是否产生气泡，若产生气泡则为产气细菌。

（3）根据题意和表格信息分析可知，该实验的目的是探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。【解析】(1)等量的变质老陈醋对比乙和丙培养基上的菌落形态；从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落。

(2)稀释涂布平板法培养基中长出的菌落是均匀分布的遗漏菌落的种类和数目菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水）将A1；A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上；若产生气泡则为产气细菌。

(3)探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大六、综合题(共4题，共32分)31、略

【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序：

①对供；受体的选择和处理；

②配种或人工授精；

③对胚胎的收集；检查、培养或保存；

④对胚胎进行移植；

⑤移植后的检查；即对受体母牛进行是否妊娠的检查。

（1）

对供体母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵。卵子需要发育到MII中时期才具有受精作用。在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行同期发情处理。

（2）

体细胞分化程度高；不容易恢复全能性，因此体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

（3）

基因工程中构建的基因表达载体必须包括：目的基因；启动子、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的受精卵。

（4）

试管牛的培育主要采用了体外受精；早期胚胎培养和胚胎移植技术；克隆牛技术主要包括核移植技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术；转基因牛技术主要包括基因工程技术、移植技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术。因此培育试管牛、克隆牛和转基因牛三者共有的技术是早期胚胎培养、胚胎移植。

【点睛】

解答本题的关键是掌握胚胎移植的过程及其每个过程的注意事项，同时要善于将不同的过程进行归纳整理。【解析】（1）促性腺MII中同期发情处理。

（2）体细胞分化程度高；不容易恢复全能性。

（3）标记基因受精卵。

（4）早期胚胎培养胚胎移植32、略

【分析】【分析】

1；用稀释涂布平板法计数时用菌落数估算菌数；其公式为：菌数=菌落数÷接种液体积×稀释倍数。

2；在微生物学中；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

3；果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌；醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。

【详解】

（1）为了解皮渣中微生物的数量,取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上，104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为(78+91+95)÷3÷0.1×104=8.8×106个。

（2）醋酸菌代谢类型属于异养需氧型；培养醋酸菌的培养基中需含有水；碳源、氮源和无机盐。醋酸菌属于细菌，制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至中性或微碱性，灭菌后在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后加入碳酸钙的目的是使培养基不透明，从而使醋酸菌菌落周围出现透明圈，这是因为醋酸菌产生的醋酸可分解碳酸钙，产生透明圈。

（3）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时；乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似，由于醋酸菌是好氧菌，而乳酸菌是厌氧菌，为将醋酸菌和乳酸菌进行分析，可先将平板置于无氧环境下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小。若菌落继续生长，且透明圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落；若菌落不能继续生长，透明圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。

故实验设计思路为：将平板置于无氧环境下继续培养；观察菌落生长情况和透明圈大小。

预期结果：若菌落不能继续生长且透明圈不再扩大的是醋酸菌菌落；若菌落能继续生长且透明圈增大的是兼性厌氧型的乳酸菌菌落。

【点睛】

本题考查生物技术实践的应用，要求考生识记微生物培养、分离、计数方法，以及醋酸菌和乳酸菌的代谢方式等知识，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】8.8×106水、无机盐、碳源、氮源使培养基不透明，从而使醋酸菌菌落周围出现透明圈将平