2025年外研版三年级起点选择性必修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年外研版三年级起点选择性必修3生物下册月考试卷984考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、2017年，世界上首批体细胞克隆灵长类在我国诞生。科学家将一只流产胎猴的成纤维细胞的细胞核植入去核卵细胞中，获得了79个重组细胞，并最终以“中中和“华华”两只克隆猴的形成成功复活了该流产胎猴，下列有关叙述正确的是（）A.“中中”和“华华”的诞生，证明已经分化的动物体细胞的细胞核具有全能性B.只要培养条件适宜，离体的成纤维细胞可以一直分裂下去C.“中中”和“华华”的成纤维细胞等体细胞是由受精卵经过有丝分裂和细胞分化形成的D.“中中”和“华华”的诞生，说明人类已经攻克死亡难题，可以随意复活生命2、下列有关生物技术的安全性和伦理问题的叙述中，正确的是（）A.种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的基因多样性B.若转基因植物的外源基因来源于自然界，则不会存在安全性问题C.中国政府禁止生殖性克隆人和治疗性克隆D.中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器3、“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（）A.基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒B.在诱变育种中需通过筛选才能得到数量较少的有利变异C.植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需进行筛选D.单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞4、已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。下列相关叙述错误的是（）A.上述对蛋白质P的改造属于蛋白质工程B.可以通过修饰P基因或合成P1基因来获得P1基因C.P1基因通过转录和翻译获得具有专一性的蛋白质P1D.直接对蛋白质P的氨基酸序列进行改造来获得蛋白质P15、下列关于治疗性克隆和生殖性克隆的说法，错误的是（）A.使用病人自己的细胞产生胰岛细胞以治疗糖尿病属于治疗性克隆B.B；将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程属于生殖性克隆。

C.治疗性克隆属于无性生殖，生殖性克隆属于有性生殖D.治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用到动物细胞培养和核移植6、下列有关电泳的叙述，不正确的是（）A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B.待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率C.进行电泳时，带电粒子会向着与其所带电荷相同的电极移动D.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定7、人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列叙述错误的是（）

A.制备抗HCG单克隆抗体的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合B.将纯化HCG注入小鼠是为了从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞C.图中利用HAT培养液具有选择作用，让能合成抗HCG抗体的细胞大量增殖D.腹水中制备抗HCG单克隆抗体时，需要注射免疫抑制剂，使小鼠易于接纳杂交瘤细胞8、下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（）A.家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都不是纯种发酵B.利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵C.酯酸菌是兼性厌氧微生物，是原核生物D.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反9、利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”。我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（）

A.体外培养卵母细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中B.胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应C.甲基化会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达D.“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染11、下列关于动物细胞培养液的叙述，正确的是（）A.为了防止培养过程中出现细菌污染，可以在培养液中添加抗生素B.动物细胞培养液与植物组织培养的培养基相同C.CO2的主要作用是维持培养液的pHD.培养液应该定期更换，以防止代谢物积累对细胞自身造成危害12、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量13、下列有关微生物的分离与培养实验的叙述，正确的是（）A.倒平板前，为了防止杂菌污染，需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰B.倒平板时，应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应立即挑取菌落D.用移液器吸取相应的菌液前，需要将样液充分摇匀14、世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术，即基因编辑时用约为头发二十分之一细的针把Cas9蛋白和特定的RNA引导序列注入受精卵中，对CCR5基因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗人类免疫缺陷病毒，关于该技术的安全性问题，下列说法正确的是（）A.基因编辑时，引导序列可能发生变异，导致剪切错误，造成不可预知的后果B.经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生C.将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德D.只要加强监管、完善法律法规、完善技术手段，不需担心基因编辑技术的安全性15、下列说法中不正确的是（）A.蛋白质工程和基因工程的目的都是获得人类需要的蛋白质，所以两者没有区别B.基因工程是蛋白质工程的关键技术C.通过蛋白质工程改造后的蛋白质仍然是天然的蛋白质D.蛋白质工程是在蛋白质分子水平上直接改造蛋白质评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)16、来源：主要是从______中分离纯化出来的。17、动物基因工程：______。18、大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在_________℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解或破坏_______，食盐能____________细胞膜。19、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）20、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。评卷人得分四、判断题(共1题，共5分)21、蛋白质工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共8分)22、多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员欲应用生物工程技术治疗该病。请回答下面有关问题。

（1）研究人员将纤维蛋白作为_________注射到小鼠体内，激活了小鼠的________免疫，进而制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术属于_______范畴（填写下面正确选项）。

A．基因工程B．细胞工程C．胚胎工程D．蛋白质工程。

（2）制备5B8的基本流程如下：从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取________，与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合。然后用特定的__________筛选符合要求的杂交瘤细胞后；再通过克隆；检测、筛选、培养等环节，最终从小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；当吞噬细胞中大量产生ROS并释放时，会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究5B8的作用机制，研究者检测了经5B8处理后吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，结果如图一；图二。

①作为标准参照的GADPH蛋白表达量稳定且含量丰富，可排除_________对实验结果的影响。

②综合两幅图的检测结果，通过对比_______组可知，纤维蛋白可以______________，使其对神经元产生毒害；而通过对比______组结果发现:5B8能_________。

③经临床实验证实，单克隆抗体5B8确实对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________________。23、鼠伤寒沙门氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培养基（含微量组氨酸）上生长形成菌落，而突变型的组氨酸营养缺陷型菌株（his-）不能合成组氨酸；无法在基本培养基上形成菌落。利用his菌株可检测环境或食品中是否存在化学致癌剂（诱发his-菌株突变）。回答下列问题：

(1).基本培养基的成分主要包括_____。制备基本固体培养基的操作：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时应注意：_____。

(2).检测是否存在化学致癌剂时，用_____法将his-菌株接种于基本培养基上，使其密集均匀分布在平板上，将浸泡过待测化合物的滤纸片贴于平板中央。若培养基灭菌合格，则可能影响该检测结果的两个重要因素是_____。若图A为对照组，B为实验组，则A组滤纸片的处理方法是_____。经正确检验后，结果如B所示，则实验结果和结论为_____。

(3).使用过的培养基在丢弃之前应做的处理及目的是_____。24、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基；成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是__________，这种培养基属于__________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”呼吸作用的类型是__________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是____________________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106倍稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________，此对照实验的目的是____________________。25、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。评卷人得分六、综合题(共4题，共16分)26、现有两份培养基的营养构成如下表：。编号成分AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水B牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水

回答下列相关问题。

（1）各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，从细胞中元素组成的角度考虑，提供氮源可以合成的物质是_______至少写出三种）。B培养基中氮源是_______；A培养基只有能合成_______的细菌才能在该培养基上生长；因此该培养基属于选择培养基。

（2）B培养基可以培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑_______、_______和渗透压等条件。在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____________________灭菌。

（3）用稀释涂布平板法可以用来统计样品中活菌的数目，其原理是____________________。27、扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一；其次级代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处，取样分离的5个部分分别为①号部位；②号部位、③号部位、④号部位、⑤号部位。

(1)苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外，还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是________。

(2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如表所示，该培养基根据物理性质属于________培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是________。蔗糖NaNO3MgSO4KCIFeSO4KH2PO4蒸馏水30g2g0.5g0.5g0.01g1g1000mL

(3)用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是________。接种扩展青霉前，应对苹果进行________（填“消毒”或“灭菌”）。研究人员测定了病斑直径为1；2、3cm的苹果中①～⑤号部位的Pat含量；结果如图。

(4)根据图分析，下列说法正确的是____。A．腐烂部位中的Pat含量最高B．病斑越大，腐烂部位的Pat含量越高C．离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低D．1cm和2cm病斑苹果中，从①号到②号部位的Pat含量下降幅度较大(5)腐烂苹果去除腐烂部位后是否仍可放心食用？请判断并结合图中信息阐述理由：_________。28、异丁醇具有燃值高；能量密度高等优点；其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的战略意义。基于酿酒酵母的发酵途径（图甲）和图乙的质粒，研究者构建了一种表达载体pUC18，用于过表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以实现异丁醇的大规模生产。已知氨苄青霉素能抑制细菌细胞壁的形成。据此回答下列问题：

(1)图乙质粒上有多个限制酶切位点，作用是____________。研究人员先用pUC18转化经_________（处理方法）的大肠杆菌，以便筛选、鉴定扩增重组质粒。重组质粒上有_________；所以能在大肠杆菌中扩增。

(2)将环状载体pUC18导入酿酒酵母时，一般会将其进行酶切得到线性化载体，随后再将其导入受体细胞。根据所学的知识推测酶切得到线性化载体的目的是______________。

(3)提取成功构建的表达载体并导入不能合成组氨酸的酿酒酵母菌株，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，该过程称为微生物的______培养。培养基中需要添加的物质有_____（用下列字母填写：a．组氨酸、b．氨苄青霉素；c琼脂）。

(4)异丁醇的大量积累会伤害细胞；研究人员给该工程菌导入一个经改造的光敏蛋白基因，使工程菌对特定的蓝光敏感。进行不同的光照处理，使其在异丁酵产生阶段和生长繁殖阶段进行切换，结果如下图丙所示。

注：5/10/20hpulse分别代表在黑暗条件下每隔5；10、20h发出15s和65s的蓝光脉冲30min

①对照组的酵母菌需要导入________________。

②以葡萄糖为碳源，利用该转基因酿酒酵母进行发酵时，若想进一步提高其异丁醇产量，综合图甲和图乙信息，分别写出进一步优化菌株和工艺的措施（各一点）___________。29、人工栽培的马铃薯易感染病菌而出现青枯病导致产量降低。某研究小组采用农杆菌转化法将抗菌肽基因转入马铃薯中提高其抗性；具体步骤如下：基因表达载体的构建（含抗菌肽基因与青霉素抗性基因）；重组DNA分子导入农杆菌、转化细胞的筛选、农杆菌侵染外植体、愈伤组织的诱导与分化。请回答下列有关问题：

(1)农杆菌转化法利用的原理是其Ti质粒的T-DNA片段具有_________的特点。本实验中基因表达载体的组成除了有抗菌肽基因与青霉素抗性基因外，还有启动子、终止子和__________等。

(2)将重组DNA分子导入农杆菌时可用_________对农杆菌进行处理；提高其吸收外源DNA的能力。

(3)将本实验中农杆菌转入含有_________的培养基中培养；可以筛选出成功导入抗菌肽基因的细胞。

(4)使用不同种类农杆菌对马铃薯外植体侵染后的转化成功率不同。某研究小组为了寻找较高转化效率的侵染方法；测定了不同种类农杆菌侵染马铃薯外植体后的转化效率，结果如下图甲。

由图甲可知，进行马铃薯农杆菌转化时应该选择_________农杆菌菌种。实验中农杆菌过度繁殖可能会使外植体细胞坏死，判断依据是___________________________。

(5)为避免农杆菌过度繁殖，被侵染后的外植体在培养一段时间后还需要进行脱菌处理，研究小组测定了不同抗生素对未导入质粒的不同种农杆菌抑菌率如图乙。根据图甲和图乙分析，本实验中导入了抗菌肽基因的农杆菌与外植体共培养一段时间后，选择_________作为抑菌抗生素能起到最佳脱菌效果。

(6)调查发现，抑菌抗生素在对农杆菌生长起抑制作用的同时，对马铃薯愈伤组织的诱导与分化也可能产生抑制作用，为探究是否存在这种毒副作用，还需要进行的实验是__________________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】【分析】

根据题意；我国克隆猴利用的是流产胎猴的成纤维细胞，该细胞是已分化的体细胞，利用该体细胞的细胞核移入一个去核的卵细胞中，形成新的重组细胞，经过早期胚胎培养和胚胎移植到代孕母体中发育成新个体，即为克隆猴。该过程体现了成纤维细胞核的全能性。

【详解】

A；根据以上分析可知；“中中”和“华华”的诞生，利用了成纤维细胞的细胞核，成纤维细胞属于已分化的动物体细胞，因此通过该过程说了已分化的动物细胞的细胞核具有全能性，A正确；

B；根据分析可知；成纤维细胞属于已分化的细胞，具有一定的分裂能力，在培养条件适宜的情况下，离体的成纤维细胞可以进行分裂，一般最多不超过50代，B错误；

C；根据题意可知；“中中”和“华华”的成纤维细胞等体细胞是由重组细胞经过有丝分裂和细胞分化形成的，C错误；

D；“中中”和“华华”的诞生；说明体细胞核移植技术在动物中获得成功，但是成功率非常低，此外获得的克隆动物还存在健康问题，总之，体细胞核移植技术的研究仍在继续深入，人类对克隆技术的应用还有许多问题需要解决，D错误。

故选A。2、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；种植转基因植物有可能因基因扩散而导致外源基因进入野生植物中；影响野生植物的基因多样性，A正确；

B；无论转基因植物的外源基因是否来源于自然界；都会存在安全性问题，B错误；

C；中国政府禁止生殖性克隆人；但不反对治疗性克隆，C错误；

D；中国在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，D错误。

故选A。3、D【分析】【分析】

1；标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因；从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

2；基因突变的特点：基因突变具有普遍性、低频性（个体的基因突变率低；但种群中个体数，其突变率较高）、随机性、不定向性、多害少利性。

3；单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

【详解】

A；标记基因位于质粒上；基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定都含有重组质粒，也可能只含有普通质粒，A正确；

B；诱变育种的原理是基因突变；而基因突变具有不定向性和多害少利性，因此在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异，B正确；

C；植物体细胞杂交过程中；诱导原生质体融合后，可获得多种融合细胞，因此需要对获得的细胞进行筛选，C正确；

D；单克隆抗体制备过程中；第一次筛选出的是杂交瘤细胞，第二次筛选出的是既能迅速大量增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。

故选D。4、D【分析】【分析】

蛋白质工程的过程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）.蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。

【详解】

A；根据上述分析可知题干中对蛋白质P的改造属于蛋白质工程；A正确；

B；以P基因序列为基础；获得P1基因途进有两个：修饰P基因，合成P1基因，B正确；

C；根据P1基因特定的碱基对的排列顺序；经过转录和翻译会获得具有专一性的蛋白质P1，C正确；

D；不能直接对蛋白质P的氨基酸序列进行改造来获得蛋白质P1；蛋白质工程属于第二代基因工程，通过基因改造或基因修饰来完成，D错误。

故选D。5、C【分析】【分析】

1.“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。

2.生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆。即用生殖技术制造完整的克隆人。目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是研究性克隆或医学性克隆；指的是产生研究所用的克隆细胞。不产生可独立生存的个体。

【详解】

A、把病人的胚胎干细胞在一定的条件下，通过离体培养和诱导分化形成胰岛细胞以治疗糖尿病，属于治疗性克隆，A正确；

B、生殖性克隆就是以产生新个体为目的进行克隆。即用生殖技术将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育成婴儿的过程，B正确；

C、克隆是无性生殖，C错误；

D、治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用到动物细胞培养和核移植，D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质；电量、形状和大小不同；在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

【详解】

A；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程；A正确；

B；待测样品中各种分子的形状、大小及带电性质的差异等会影响其在电泳中的迁移速度；B正确；

C；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，C错误；

D；常用的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；D正确。

故选C。

【点睛】7、C【分析】【分析】

据图分析；给动物注射抗原HCG，产生已免疫的B淋巴细胞，加促融剂，与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基进行筛选，筛选出杂交瘤细胞，再进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，再进行大规模培养。

【详解】

A；制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养技术培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞；动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，A正确；

B；在制备单克隆抗体过程中；首先要将纯化HCG注入小鼠体内，其目的是从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞，B正确；

C；图中利用HAT培养液目的是筛选出杂交瘤细胞；但筛选的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体，C错误；

D；可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；从小鼠腹水中制备抗HCG单克隆抗体，此过程需要注射免疫抑制剂，降低小鼠的免疫能力，使小鼠易于接纳杂交瘤细胞，D正确。

故选C。8、A【分析】【分析】

果酒制作原理是利用酵母菌无氧呼吸生成酒精和CO2。果醋制作原理是利用醋酸菌有氧呼吸生成醋酸。酸奶制作原理是利用乳酸菌无氧呼吸生产乳酸。制作果酒时；应该先通气后密封，先通气的目的是让酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，再密封的目的是让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。

【详解】

A；家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都是利用天然的微生物进行发酵；不是纯种发酵，A正确；

B；利用乳酸菌制作酸奶过程中；由于乳酸菌是厌氧型微生物，需要密封发酵，B错误；

C；醋酸菌是耗氧微生物；是原核生物，C错误；

D、果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中由于产生CO2；发酵液pH也逐渐降低，D错误。

故选A。9、C【分析】【分析】

分析图示；从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养；胚胎移植等获得孤雌小鼠。

【详解】

A；动物细胞培养过程中；为防止杂菌污染，需要加入抗生素，A错误；

B；胚胎移植不会发生免疫排斥；B错误；

C；DNA分子甲基化会影响基因的表达；从而关闭基因的活性，而对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达，C正确；

D、孤雌小鼠是由次级卵母细胞发育而来，如果提供卵细胞的基因型是AaBb；经过减数分裂形成的次级卵母细胞基因型可以是AABB，所以二者基因型可能不同，D错误。

故选C。二、多选题(共6题，共12分)10、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

2；由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚；所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。

3；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理；通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

（2）营养物质：无机物（无机盐；微量元素等）；有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）、血清和血浆(提供细胞生长必须的营养成份)。

（3）温度和pH（36.5±0.5℃；7.2～7.4）。

（4）气体环境（95%的空气+5%CO2的混合气体），其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。

【详解】

A；抗生素可以抑制细菌的生长；所以在进行动物细胞培养过程中可以在培养液中添加抗生素，用以防治细菌的污染，A正确；

B；动物细胞培养液与植物组织培养的培养基不同；动物细胞培养液通常需要加入动物血清、血浆，B错误；

C；在动物细胞培养过程中；气体环境是95%的空气+5%CO₂的混合气体，其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定，C正确；

D；代谢产物积累会对细胞自身造成危害；营养物质减少不利于细胞的培养，所以动物细胞培养过程中需要定期更换培养液，为细胞提供充足营养并防治代谢产物积累危害细胞，D正确。

故选ACD。12、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。13、A:D【分析】【分析】

平板划线的操作的基本步骤是：(1)右手持接种环；经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。(3)烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。(4)将平板倒置，放入培养箱中培养。

【详解】

A；倒平板前；需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰，通过灼烧灭菌防止杂菌污染，A正确；

B；倒平板时；应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免杂菌进入，而不是为了防溅，B错误；

C；接种环经灼烧灭菌后应等到冷却后再挑取菌落；否则高温会使菌落死亡，C错误；

D；用移液器吸取相应的菌液前；需要将样液充分摇匀，保证菌液中微生物均匀分布，提高实验的准确性，D正确。

故选AD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因编辑技术是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造；实现特定DNA的定点敲除；敲入以及突变等，最终下调或上调基因的表达，以使细胞获得新表型的一种新型技术。

【详解】

A；基因编辑时的引导序列是RNA；RNA的碱基序列改变可能导致识别错误，导致剪切错误，造成不可预知的后果，A正确；

B；基因编辑后；基因的序列发生改变，基因的表达具有选择性，可以相互影响，基因选择性表达受干扰后，容易导致某些疾病的产生，B正确；

C；依据我国法律；生殖性克隆不符合人类伦理道德，治疗性克隆符合人类伦理道德，C正确；

D；加强监管、完善法律法规、完善技术手段；但基因编辑技术仍存在一定的安全性，所以要理性看待，D错误。

故选ABC。15、A:C:D【分析】【分析】

蛋白质工程和基因工程的区别。

【详解】

A；蛋白质工程和基因工程的目的都是获得人类需要的蛋白质；但是二者有区别，蛋白质工程可以获得自然界中不存在的蛋白质，而基因工程获得的蛋白质是自然界中已有的，A错误；

B；蛋白质工程可以看做是第二代基因工程；因此，基因工程是蛋白质工程的关键技术，B正确；

C；通过蛋白质工程改造后的蛋白质不再是天然的蛋白质；C错误；

D；蛋白质工程改造的是蛋白质；但对蛋白质的改造需要通过改造相应基因的结构来实现，D错误。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80细胞膜溶解19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代四、判断题(共1题，共5分)21、B【分析】【详解】

基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，通过改造和合成基因来改造现有的蛋白质或制造出一种新的蛋白质，可见蛋白质工程可以制造出自然界不存在的、但是能符合人类生产和生活需求的蛋白质，故说法错误。五、实验题(共4题，共8分)22、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

【详解】

（1）抗体参与体液免疫；科研人员将纤维蛋白作为抗原注射到小鼠体内，激活体液免疫过程，制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术为单克隆抗体的制备，属于细胞工程范畴，即B正确，ACD错误。

故选B。

（2）制备抗纤维蛋白的单克隆抗体5B8的基本技术流程为：先从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取的相应的B细胞（能产生特定的抗体）与小鼠的骨髓瘤细胞融合获得杂交细胞；用特定的选择培养基进行筛选；获得杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行克隆和抗体检测，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞；获得的杂交瘤细胞在体外环境或小鼠腹腔内培养；然后从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。由于细胞中GAPDH蛋白表达量稳定且含量丰富，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比1和2组检测结果；细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，说明纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。通过对比1；2、3组结果发现，经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明5B8能减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS的含量的影响，使两种物质含量下降。

③由第②题可知；经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明单克隆抗体588与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，因此单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）的作用机理，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力。【解析】抗原体液B相应的B淋巴细胞；选择培养基无关变量（如实验操作等）1和2提高吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3组（2、3组）减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS含量的影响，使两种物质含量下降单克隆抗体5B8与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，起到治疗多发性硬化症的作用。23、略

【分析】【分析】

培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节pH→分装→灭菌→倒平板→（冷却后）倒置平板。微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分离纯化。具体来说，就是在无菌条件下，用接种环或接种针等专用工具，从一个培养皿（上面可能存在各种杂菌落）挑取所需的微生物，转接到另一个培养基中进行培养的方法。【小问1】

培养基的组成成分包括碳源；氮源、水、无机盐、生长因子等。倒平板时；应待培养基冷却到50℃左右倒平板，平板冷凝后要将平板倒置，倒平板过程中应在酒精灯火焰附近进行，以防止杂菌污染。【小问2】

题干中表明菌体密集均匀分布在平板上；所以是稀释涂布平板法接种。培养基灭菌合格，影响因素应为除培养基灭菌以外可能的影响因素，因此，可能操作过程中是否无菌操作，以及使用的滤纸条是否灭菌合格等。A为对照组，应除自变量以外，其他条件都相同，因此，处理方法为浸泡在无菌水中处理后贴于平板中央；实验中能观察到出现野生型菌株菌落，说明环境中存在化学致癌剂导致突变型菌株突变成野生型菌株。【小问3】

使用过的培养基应灭菌后再丢弃；以防止培养基中的有害物质污染环境或感染实验操作者。

【点睛】

本题考查培养基的成分、制备过程以及微生物的接种方法等相关知识，意在考查考生对所学知识的识记和理解能力。【解析】【小题1】①.碳源；氮源、水和无机盐②.待培养基冷却至50℃左右时；在酒精灯火焰旁附近倒平板。

【小题2】①.稀释涂布平板②.滤纸片是否灭菌彻底和待测化合物是否含有杂菌③.（滤纸片）用无菌水浸泡④.his-菌株在培养基上突变为his+菌株；说明待测化合物中存在致癌剂（或待测化合物中存在化学诱变剂，这些化学物质具有致癌性，叙述合理即可）

【小题3】灭菌，避免对环境造成污染24、略

【分析】【分析】

微生物的培养；培养基的成分必须含有碳源；氮源、水和无机盐。获取纯净微生物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

【详解】

（1）本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种；所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）分析培养基的配方可知；该培养基由化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，其他成分中为体现出提供碳源和氮源，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的类型是有氧呼吸。

（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术；防止外来杂菌入侵。

（4）平板划线操作的工具是接种环；对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（5））实验结束后；使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以杀死培养基上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

（6）实验设计过程应遵循对照原则；该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染，检验培养基是否灭菌合格。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术操作方法及接种微生物接种常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】筛选目的菌选择化合物A有氧呼吸防止外来杂菌入侵接种环灼烧防止造成环境污染不接种的空白培养基检验培养基是否灭菌合格25、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。六、综合题(共4题，共16分)26、略

【分析】【分析】

据表分析：甲培养基以尿素为唯一氮源；主要用于尿素分解菌的培养，属于选择培养基，用于微生物的筛选，乙培养基中是普通的培养基，各种微生物都可以培养。

【详解】

（1）蛋白质；核酸、ATP和磷脂等物质都含有N元素；提供的氮源，可用于合成这些物质，B培养基中的牛肉膏和蛋白胨都含有N元素，都可以作为氮源，A培养基以尿素为唯一氮源，只有尿素分解菌也就是能合成脲酶的细菌才能在这个培养基上生存。

（2）B培养基在培养大肠杆菌时；除考虑营养条件之外，还要考虑温度；酸碱度和渗透压等条件，培养基和培养皿都可以采用高压蒸汽灭菌。

（3）一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；通过统计平板上的菌落数；就能推测出样品中的活菌数，这是用稀释涂布平板法可以用来统计样品中活菌的数目的原理。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关内容，意在强化对选择培养基的认识和理解。【解析】蛋白质、核酸、ATP、磷脂牛肉膏和蛋白胨脲酶温度酸碱度高压蒸汽一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中的活菌数27、略

【分析】【分析】

1；据图分析可知；①号部位为病斑区域，即腐烂部位，①与②交界处为“病键交界处”，是腐烂部位与未腐烂部位交界的地方，②③④⑤均为未腐烂部位，且距离腐烂部位依次边远。

2；在曲线图中；病斑部位的Pat含量最高，而距离病斑部位越来越远，Pat含量就会越来越少。

(1)

青霉是真菌；属于真核生物，枯草杆菌属于原核生物。二者在结构上的主要区别是青霉有以核膜为界限的细胞核，即有成形的细胞核，而枯草杆菌没有以核膜为界限的细胞核；

(2)

据表格可知；培养基中没有凝固剂，属于液体培养基。培养基成分中只有蔗糖是有机物，其属于糖类，糖类是主要的能源物质，故能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是蔗糖；

(3)

第一区域划线结束；接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始，都会导致培养基上第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。接种扩展青霉前，为了避免苹果上其他杂菌；病原微生物的污染，应对苹果进行消毒处理；

(4)

A；由图可知；①号为腐烂部位，曲线图中每条曲线①号部位的Pat含量都是最高的，A正确；

B；在曲线图中；3cm的①部位比2cm的①部位Pat含量要稍低，故病斑越大腐烂部位的Pat含量不一定越高，B错误；

C；①为腐烂部位；②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远，而曲线图中从①到⑤Pat含量逐渐降低，故离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低，C正确；

D；由曲线图可知；1cm和2cm病斑苹果中，从①号到②号部位的Pat含量下降0.9—1.2左右，故下降幅度较大，D正确。

故选ACD；

(5)

腐烂苹果去除腐烂部位后不能食用。已知Pat是一种具有致突变作用的毒素；从曲线图中可看出，腐烂部位Pat含量较高，而未腐烂部位也存在少量Pat，如果只去除腐烂部位，那么未腐烂部位中的Pat仍然会对人体造成伤害，存在健康风险，故腐烂苹果去除腐烂部位后不能食用。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，意在考查考生分析图解的能力，能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力，具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析、处理的解答本题的关键。【解析】(1)扩展青霉有以核膜为界限的细胞核；枯草杆菌无。

(2)液体蔗糖。

(3)第一区域划线结束；接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始消毒。

(4)ACD

(5)否，Pat是一种具有致突变作用的毒素，将腐烂苹果的腐烂部位去除后，未腐烂部位仍含一定量的Pat，食用仍存在健康风险28、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。

（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

（1）图中质粒作为载体将ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因送入受体细胞中，所以质粒DNA分子上多个限制酶切位点，其作用是供外源DNA片段（基因）插入；受体细胞不同，目的基因导入的方