DB2201T 70-2024非洲猪瘟病毒环境监测采样技术规范

ICS65.020.30CCSB412201TechnicalspecificationforenvironmentalmonitoringsamplingofAfricanswine2024-12-30发布ⅠDB2201/T70—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由长春市畜牧业管理局提出并归口。本文件起草单位：长春市动物疫病预防控制中心。本文件主要起草人：张寰波、于丹、马由诏、董玉光、胡诗悦、岳洋、蒋苹苹、王建超、唐荧、邹娟、徐莉。1DB2201/T70—2024非洲猪瘟病毒环境监测采样技术规范本文件规定了非洲猪瘟病毒环境监测采样的对象、物资和人员、场点与数量、样品采集、样品保存、包装及运输、废弃物处理的相关要求。本文件适用于非洲猪瘟病毒环境监测样品的采集、运输和保存。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4采样对象养殖场（户）、屠宰场、无害化处理厂、运输车辆、农贸（集贸）市场以及相关从业人员。5物资和人员要求5.1物资5.1.1材料类的应包括采样单、笔和记号笔、拭子（推荐使用聚丙烯材质拭子或尼龙材质拭子）、离心管、高压灭菌袋、样品袋、冰袋、冷藏运输箱、生物安全垃圾袋等。5.1.2防护类的应包括生物安全防护服、防护镜、口罩、一次性乳胶手套、防护靴等。5.1.3保存液应使用0.01mol/L(pH：7.2～7.4)PBS保存液。5.2人员5.2.1采样人员14日内未曾去过非洲猪瘟疫情场。5.2.2采样人员要具有专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。5.2.3现场采样至少由两名工作人员完成，同一时段不同场点安排不同的采样人员，避免交叉污染。5.2.4人员进场顺序从净区到污区，不应逆流。5.2.5采样人员应穿防护服、鞋套，佩戴手套、口罩等防护用品，必要时戴护目镜或面罩，做好个人6采样场点与数量2DB2201/T70—20246.1养殖场（户）6.1.1场外环境样品场外环境样品采集包括但不限于表1的规定。表1场外环境样品采集点、采样数量6.1.2舍内环境样品舍内环境样品采集包括但不限于表2的规定。表2舍内环境样品采集点、采样数量机采集1份~猪舍入口处、过道中凸凹不平不易清洗处，随机选3个～5个点6.1.3舍外环境样品舍外环境样品采集包括但不限于表3的规定。表3舍外环境样品采集点、采样数量尤其坑洼不平不易清洁消毒处，净道随机选机采集3份~3DB2201/T70—20246.1.4场内运输车辆环境运猪车、运料车、铲车、垃圾车：车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中央、车厢挡板、轮胎及轮胎缝隙、铲车铲斗的正面和背面等，随机多点采样。6.1.5水源采样水塔、水箱、水井或其他水源，分别取样1mL。6.1.6餐厨垃圾餐厨垃圾桶中有肉一定取肉，垃圾桶中随机多点采样，液体垃圾每个点位取样1mL。6.1.7环境中的虫媒捕捉猪场中的虫媒，将其放入刺有透气孔的自封袋中。6.2屠宰场6.2.1屠宰场外屠宰场外环境样品采集按表1执行。6.2.2屠宰场内6.2.2.1待宰圈内墙、过道、猪栏地面及栏杆环境样品采集待宰圈内墙、过道、猪栏地面及栏杆环境样品采集按表2执行。6.2.2.2屠宰、生产车间及产品仓库环境样品采集屠宰、生产车间及产品仓库样品采集包括但不限于表4的规定。表4屠宰、生产车间及产品仓库采样点、采样数量6.3无害化处理厂6.3.1厂门口路面、车辆入厂处、无害化处理车辆往来路面上的环境样品采集按表1执行。6.3.2运送车辆环境样品采集包括但不限于：车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中央、车厢挡板、铲车铲斗的正面和背面，每个采样点随机采集3份～5份样品。6.3.3无害化处理车间环境样品采集包括但不限于：地面、冷库地面、处理设备表面，每个采样点随机采集3份～5份样品。6.4农贸（集贸）市场农贸（集贸）市场环境样品采集包括但不限于表5的规定。4DB2201/T70—2024表5农贸（集贸）市场环境样品采样点、采样数量6.5生猪运输车辆环境样品采集包括但不限于：车门把手、车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中央、车厢挡板、轮胎及轮胎缝隙，多点采样。每个采样点随机采集3份～5份样品。6.6人员各类人员样品采集包括但不限于表6的规定。表6各类人员样品采样点、采样数量手心、手背、头发、指甲缝等身体部位，所穿的衣服、帽子、手套、鞋底及随身携带的手机、眼镜、7样品采集7.1方法7.1.1环境拭子样品戴一次性的乳胶手套，用灭菌的PBS保存液，将2个无菌采样拭子头完全浸湿，在采样部位均匀涂抹3次～5次后，将拭子头放入含有1mL～2mL的灭菌PBS保存液离心管中。7.1.2环境液体样品用无菌吸管吸取被检液体1mL，放入灭菌离心管中。7.1.3环境固体样品餐厨垃圾中的肉，采集2.0g～5.0g大小的样品装入灭菌离心管中。7.2操作要求与记录DB2201/T70—20247.2.1采样操作要求拭子样本采样过程中，拭子只能接触当前采集的物体，避免碰触到其他物体。采样结束后，按照生物安全要求脱去防护服等个人防护装备，清理好废弃物，做好场地、物品消毒和无害化处理后离场。7.2.2采样记录样品采集过程中应填写表A.1。8样品保存、包装及运输按照《高致病性动物病原微生物菌(毒)种运输包装规范》规定执行。9废弃物处理按NY/T541规定执行。6DB2201/T70—2024非洲猪瘟环境监测样品采样记录表非洲猪瘟环境监测样品采样记录表见表A.1。表A.1非洲猪瘟环境监测样品采样记录表市（州）县（市、区）乡（镇）村备注注1：场户名称一栏不仅限于规模养猪场户也可填写屠宰场/无害化处理厂/注2：户主姓名一栏填写的内容可以是