2025年外研版2024选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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①《齐民要术》中记载：“作盐水；令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”

②《北山酒经》中记载：“每坛加蜡三钱；竹叶五片，隔水煮开，乘热灌封坛口。”

③《齐民要术》中记载了二十三种利用谷物酿制食醋的工艺。其经历的三个主要发酵过程为：糖化→酒化→醋化。

④《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”A.①介绍的是泡菜制作，配制盐水要煮沸冷却后使用，且盐度不宜过大B.②中每坛加蜡隔水煮开，乘热灌封坛口有助于陈酒的储藏C.③中从酒化到醋化的过程需要移至温度较低的环境中进行D.④中发酵产腐乳用的豆腐坯属固体培养基，不需对其进行严格灭菌4、下列关于哺乳动物精子和卵子的发生正确的是（）A.精子形成过程是连续的，一个精原细胞经过减数分裂可直接产生四个精子B.哺乳动物进入初情期后，在其卵巢中开始出现大大小小的卵泡C.卵子发生的减数第二次分裂和精卵结合的场所是相同的D.精子的头部主要含细胞核，中心体发育成它的顶体5、下列有关微生物培养或纯化的叙述，错误的是（）A.微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B.培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C.分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基进行培养D.分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法6、辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健，医药工业等领域，其获得途径如图所示。下列叙述错误的是（）

A.图中愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性B.图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程C.②过程中需要用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理D.用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶7、广式高盐稀态酱油发酵工艺中盐分含量对于发酵过程和产品风味至关重要，其作用之一是防腐抑菌，淘汰非耐盐野生杂菌或有害微生物。随着健康中国建设的推进，酱油的减盐成为一种趋势。科研人员研究了不同盐分条件下不同发酵阶段微生物群落结构的变化，结果如下表所示。下列说法错误的是（）

不同盐分杂件下不同发酵阶段各类微生物菌落总数。样品菌落总数/（1gCFU/mL）细菌真菌乳酸菌乳酸菌LI6.954.876.18LⅡ6、656.466.37LⅢ5.874.724.60MI6.934.034.70MⅡ6.416.325.52MⅢ5.574.075.11HI6.823.484.60HⅡ6.155.785.84HⅢ5.392.434.93

注，L、M、H分别表示低盐组（120g/L）、中盐组（150g/L）、高盐组（170g/L），I、Ⅱ、Ⅲ分别表示发酵第5天、发酵第25天、发酵第55天A.高浓度盐分能通过提高培养液的渗透压来实现防腐抑菌B.在发酵初期，盐浓度的提高对真菌及乳酸菌形成有效抑C.在发酵过程中，细菌、真菌、乳酸菌的数量的显现降低趋势D.随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)8、近年来；全人源化单克隆抗体技术发展迅速，利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体的制备流程如图所示，下列说法正确的是（）

A.该技术能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应B.过程①②采用核移植技术，体现了动物细胞核的全能性C.过程⑧要经过选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测等过程D.体外培养B细胞也可以大量获得针对该抗原的单克隆抗体9、MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素I~IV的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上，进行药敏试验以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验器材，图2为实验结果。下列叙述正确的是（）

A.为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①②③B.据图2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素IV的突变株D.图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素IV的抗性越强10、聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列叙述错误的是（）

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上B.步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利C.步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量11、某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（）

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生4个游离的磷酸基团B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化12、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)13、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。14、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。15、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。16、来源：主要是从______中分离纯化出来的。17、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。18、大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在_________℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解或破坏_______，食盐能____________细胞膜。19、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。20、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____21、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____评卷人得分四、判断题(共3题，共6分)22、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误23、转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中。()A.正确B.错误24、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共28分)25、铁皮石斛是我国名贵中药；生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：

在固体培养基上；PLBs的重量；生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

⑴选用新生营养芽为外植体的原因是_____，诱导外植体形成PLBs的过程称______。

⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在_______，_______，____。

⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量；但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：

①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为______。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的_____时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。26、某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞；需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过___________次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。

（3）杂交瘤细胞中有______个细胞核，染色体数目最多是_________条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_____________________。27、酵母菌与人们的日常生活密切相关；也是现代生物技术研究常用的生物。

(1)利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是_____。

(2)利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为_____。

(3)虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有四大营养成分，即_____、_____、_____和碳源。培养基灭菌的常用方法为_____。

(4)接种微生物常用的两种方法是_____、_____。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是_____。28、两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴；这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答下列问题：

(1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是_____。

(2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。形成的重构胚具有_____的能力。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出2点）。

(3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为_____。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，选用“模型猴”更优于“模型鼠”的原因是_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共32分)29、（1）为扩大可耕地面积；增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

①获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于上图中的____(填“a”或“b”)处，DNA连接酶作用于____(填“a”或“b”)处。

②将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法、_____法和花粉管通道法。

③为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_____作探针进行分子杂交检测；又要用一定浓度盐水浇灌的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

（2）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点；图1；图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

④一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，质粒分子含有_____个游离的磷酸基团。

⑤若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越____。

⑥重组质粒中抗生素抗性基因的作用是____。

⑦与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于___。30、下图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究；请分析回答下列问题。

（1）图中的ES细胞除了从早期胚胎中分离出来还可以来自___________，该细胞在形态上表现________________________________________，在功能上具有_________________________。

（2）将基因表达载体导入ES细胞的方法是__________，为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________技术。

（3）b过程ES细胞在饲养层细胞上可以维持_______________状态，若要诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化就需要加入_______________________。

（4）完成c、d过程的胚胎工程技术分别是早期胚胎培养和胚胎移植。胚胎移植的实质是_________________________。胚胎移植时胚胎在受体内存活的的生理学基础是__________________，若要培养试管动物，除以上两种技术外还需要运用_____________________技术。31、接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一；新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。如图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示NcoⅠ，SphI，NheⅠ，BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表）。回答下列问题：

识别序列和切割位点限制酶NcoISphINheIBamHIC↓CATGGCCATG↓CG↓GATCCG↓CTAGC

(1)新冠病毒是RNA病毒，一般先通过逆转录得到_____，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR技术扩增S蛋白基因依据的原理是_____。

(2)根据图表可知，构建重组质粒时，需要选择的限制酶是_____。将重组质粒导入受体细胞后，需要用_____技术检测S蛋白是否成功合成。合成的S蛋白多次注射到实验鼠体内后，在实验鼠的脾脏中分离出浆细胞，利用_____（答出两种）技术，至少经过_____次筛选，就能得到_____的杂交瘤细胞；该细胞经体外培养后就能得到大量的单克隆抗体，用于治疗新冠肺炎。

(3)腺病毒是DNA病毒，对人体危害较小，利用腺病毒制备的重组腺病毒疫苗只需注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA．请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是_____。32、鱼鳞病是一种遗传所致的皮肤疾病；临床表现为皮肤干燥；伴有鱼鳞状脱屑。

(1)下图为某鱼鳞病家族系谱图。据图分析该遗传病的遗传方式最可能是_______，判断依据是________。

(2)Ⅲ-14为该家族发现的一位鱼鳞病女性患者，通过对患者细胞学鉴定，发现该患者核型为45，XO，推测该女性患者鱼鳞病致病基因来自于_______________。

(3)鱼鳞病的病因是由于患者体内缺乏类固醇硫酸酯酶（STS）所致，已知编码STS的基因含有10个外显子，根据STS基因的编码区外显子1及外显子10序列设计引物，对该家系中相关成员的基因进行PCR检测，结果如下图所示（a~e分别是III-14、II-6、II-7、正常女性和正常男性；M是标准DNA片段）。同时在患者细胞中不能检测到STS蛋白，由此推测患者基因发生了碱基对的_________（填“增添”；“缺失”或“替换”）。

(4)鱼鳞病目前还没有较好的治疗方法，最常用的方法是加强皮肤保湿和护理。通过遗传咨询和_________可对该病进行预防和监测，进而降低该病的发病率。请结合本研究，提出可能根治鱼鳞病的思路_________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、D【分析】【分析】

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。利用体细胞克隆技术可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；可用于保护濒危物种，有选择地繁殖某一性别的家畜，克隆技术属于无性繁殖，克隆动物的基因型与供核动物相同，不能改变动物的基因型。

【详解】

A；克隆可以有选择地繁殖某一性别的家畜；A不符题意；

B；克隆技术可以促进优良畜群繁育；B不符题意；

C；克隆动物可应用于濒危物种的保护；C不符题意；

D；克隆动物的基因型与核供体相同；故不能改变动物的细胞核基因型，D正确。

故选D。2、C【分析】【分析】

1.中国政府对于“克隆人”的态度是禁止生殖性克隆人（不赞成；不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验）；中国不反对治疗性克隆。

2；《禁止生物武器公约》共15条；主要内容是：缔约国在任何情况下不发展、不生产、不储存、不取得除和平用途外的微生物制剂、毒素及其武器；也不协助、鼓励或引导他国取得这类制剂、毒素及其武器；缔约国在公约生效后9个月内销毁一切这类制剂、毒素及其武器；缔约国可向联合国安理会控诉其他国家违反该公约的行为。

【详解】

A；我国已要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注；以方便消费者自主选择，体现对消费者的尊重，A正确；

B；我国对试管婴儿技术有严格的规范。我国卫生部在《体外受精-胚胎移植及其衍生技术规范》中规定：“实施体外受精一胚胎移植及其衍生技术规范必须获得卫生部的批准证书”；B正确；

C；我国禁止生殖性克隆人的实验；但不反对治疗性克隆，C错误；

D；《禁止生物武器公约》中强调在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器；D正确。

故选C。

【点睛】3、C【分析】【分析】

1；用谷物酿制食醋经历的三个主要发酵过程为：糖化→酒化→醋化。分别是淀粉在微生物的作用下水解成葡萄糖；葡萄糖在微生物的作用下分解成乙醇和二氧化碳（在无氧的条件下），乙醇被微生物在有氧的环境下氧化成乙酸。

2；在制作泡菜时所配制的泡菜盐水要煮沸；以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染。泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短、容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

3；采用较低温度（一般在60～82℃）；在规定的时间内，对食品进行加热处理，达到杀死微生物营养体的目的，是一种既能达到消毒目的又不损害食品品质的方法。由法国微生物学家巴斯德发明而得名。巴氏杀菌热处理程度比较低，一般在低于水沸点温度下进行加热，加热的介质为热水。《北山酒经》中记载：“每坛加蜡三钱，竹叶五片，隔水煮开，乘热灌封坛口。”这种用加热杀菌保存酒液的原理和方法，与酿酒中普遍使用的巴氏杀菌法基本相同。

4；腐乳发酵过程中；豆腐就是毛霉的固体培养基；现代腐乳生产是在严格无菌条件下将优良的毛霉菌种接种在豆腐上；味咸是因为加了盐，加盐的目的除了调味外，还有抑制微生物的生长，避免腐败变质以及具有析出豆腐中的水分、使豆腐变硬的作用，酒的含量一般控制在12%左右，目的是抑制微生物生长，同时使腐乳具有独特的香味。

【详解】

A；根据以上分析可知；①介绍的是泡菜制作技术，配制的盐水要煮沸冷却后使用，以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染，同时盐水的盐度不宜过大，避免使发酵过程中的乳酸菌大量失水而死亡，A正确；

B；蜡封坛口可以创造无氧环境；有助于陈酒的储藏；另外隔水煮开即加热可以杀菌，B正确；

C；酵母菌发酵的适宜温度为18~25℃；而醋酸菌发酵的适宜温度为30~35℃，所以③中从酒化到醋化的过程需要移至温度较高的环境中进行，同时需要通氧，C错误；

D；从微生物培养的角度看；豆腐是固体培养基，腐乳制作时主要利用的是空气中的毛霉，接种时不需要对其进行严格灭菌，D正确。

故选C。4、C【分析】【分析】

哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一。（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。

【详解】

A；一个精原细胞经过减数分裂后可直接产生4个精细胞；精细胞还需要经过变形才能成为精子，A错误；

B；卵泡的形成和在卵巢内的储备；是在胎儿时期完成的，B错误；

C；卵子产生过程中的减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的；即在受精作用过程中完成的，因此它们的场所是相同的，C正确；

D；精子的头部主要含细胞核；高尔基体发育为它的顶体，D错误。

故选C。5、C【分析】【分析】

1；涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

A；微生物培养前应对培养基先灭菌再接种；以防培养基被污染，A正确；

B；酵母菌既能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸；在有氧呼吸条件下大量繁殖，故溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径，B正确；

C；用纤维素作为唯一碳源的培养基是用来分离纤维素分解菌的；分离自养型微生物要用不加有机碳源的培养基，C错误；

D；筛选分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法；常以菌落的特性来筛选鉴别微生物，D正确。

故选C。6、A【分析】【分析】

分析题图：①和②是植物组织培养过程；其中①是脱分化过程；②是再分化过程，一个途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；另一个途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。

【详解】

A；图中高产细胞系的获得辣椒素；并没有培养成植株，没有体现植物细胞的全能性，A错误；

B；图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程；B正确；

C；②是再分化；该过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理，C正确；

D；将愈伤组织用酶解法分离成单细胞时；需要破坏细胞壁，常用的酶是果胶酶和纤维素酶，D正确。

故选A。7、C【分析】【分析】

1；盐分能通过提高培养液的渗透压使微生物失水死亡；从而实现防腐抑菌；

2；在发酵初期；盐浓度的提高对真菌及乳酸菌形成有效抑制；

3；发酵过程中；随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程。

【详解】

A；高浓度盐分能通过提高培养液的渗透压使微生物失水死亡；从而实现防腐抑菌，A正确；

B；由表格内容可知；在发酵初期提高盐浓度，对真菌及乳酸菌形成有效抑制，B正确；

C；由表中数据可知；低盐组、中盐组和高盐组的细菌数量随发酵时间推移数量减少；而真菌和乳酸菌数量随着发酵时间的推移呈现先增后减的趋势，C错误；

D；发酵过程中；随时检测培养液中的微生物数量，可以更好地了解发酵进程，D正确。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)8、A:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体；能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应，A正确；

B；过程①②利用的是转基因技术；B错误；

C；融合后的细胞需要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞；还要经过克隆化培养、（专一性）抗体检测等，C正确；

D；B细胞在体外培养条件下不能无限增殖；体外培养B细胞不能获得大量的单克隆抗体，D错误。

故选AC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

2；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后形成单个菌落。

【详解】

A；为获得长满测试菌的琼脂平板；需要用到的接种方法是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法需要用到酒精灯、涂布器和培养基，A正确；

B；MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。说明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要达到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加浓度才行，B正确；

C；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株；这些突变株在抗生素的环境下能够存活并繁殖形成菌落。细菌是原核生物，发生变异最可能是基因突变，C正确；

D；在抑菌圈中出现的菌落都是对该种抗生素具有抗性的菌株；它们之间抗性的强弱无法根据题干信息进行判断。如果要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，D错误。

故选ABC。

【点睛】

本题考查的知识点包括：微生物接种，微生物培养及微生物的应用。10、A:B:C【分析】【分析】

聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要从某咸水湖中寻找生产PHA菌种，首先要进行目的菌株的筛选，可将咸湖水接种在含盐量较高的选择培养基上，筛选培养得到嗜盐细菌；然后，从选择培养基上挑选多个单菌落分别进行扩大培养，扩大培养的培养基是液体培养基；最后检测嗜盐细菌的数目和PHA的产量，选择PHA产量最高的嗜盐细菌作为目的菌株。

【详解】

A；PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；

B；步骤③培养基浓度过高；会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；

C；步骤④扩大培养应选用液体培养基；液体培养基中无需加入琼脂，C错误；

D；要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌；挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。

故选ABC。11、A:D【分析】【分析】

分析题图：图中质粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的识别序列和切割位点；若用酶A切割会同时破坏质粒上的两个抗性基因。

【详解】

A；质粒中含有2个酶A的酶切位点；所以切割后会产生4个游离的磷酸基团，A正确；

B；如果用酶A和酶C同时切割质粒；会破坏质粒的标记基因，B错误；

C；根据B项分析；需要用酶B和酶C切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四环素的培养基中生长，C错误；

D；若用酶B和酶C切割；产生不同的黏性末端，可避免质粒自身环化，D正确。

故选AD。12、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。三、填空题(共9题，共18分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80细胞膜溶解19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖20、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药21、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。四、判断题(共3题，共6分)22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。23、A【分析】【详解】

转入到油菜的抗除草剂基因，则可能通过减数分裂进入到花粉细胞中，进而传入环境中的其他生物体内。本说法正确。24、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共4题，共28分)25、略

【分析】【分析】

【详解】

⑴新生营养芽分裂能力强；细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；根据题干可知，PLBs，类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。⑵据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高。⑶①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA。②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取5次样；空白组不需要重复，处理组，每组重复三次，因此每次取样中，需要记录15个样品中的数据，取样5次共需要测定的样品数为75。③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。

【考点】

本题主要考查植物组织培养和设计实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、具有对一些生物学问题进行初步探究的能力和并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。【解析】细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs细胞的脱分化生长起始较快快速生长时间较长PLBs产量较高灭菌、冷却75PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大26、略

【分析】【详解】

本题以杂交瘤细胞为背景；考查了动物细胞融合；细胞分裂和细胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗体效价大于16000，所以最少需要经过四次免疫.由图可知，血清抗体效价均达到16000以上时，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞。

（2）B细胞与骨髓瘤细胞在一起融合时；可能发生B细胞与骨髓瘤细胞融合，B细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和B细胞与骨髓瘤细胞融合。由于细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故体系中会出现多种类型的细胞。

（3）由于核膜也具有流动性；故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。B细胞有40条染色体，骨髓瘤细胞有60条染色体，融合后的杂交瘤细胞有100条染色体。

（4）未融合的B淋巴细胞是已分化的细胞；不能无限增殖，所以多次培养后不能存活。

【点睛】

本题考查动物细胞工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%1100不能无限增殖27、略

【分析】【分析】

1；培养基的种类及用途：（1）按物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。液体培养基应用于工业或生活生产；固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。（2）按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。

2；灭菌（1）灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。（2）灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

【详解】

（1）利用酵母菌发酵产生酒精的过程中；要先充气后闭气，原因是酵母菌是兼性厌氧菌，因此果酒发酵时先通气使酵母菌大量繁殖，后闭气使酵母菌进行酒精发酵。

（2）利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，由于该培养基以秸秆（纤维素）为唯一碳源，原则上，只有能分解纤维素的微生物才能在该培养基上生存，因此按功能分，该培养基属于选择培养基。

（3）虽然不同的生物对营养物质的需求不同；但是培养这些微生物的培养基，一般都含有水；无机盐、碳源、氮源（基本成分）和生长因子等。培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。

（4）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是酒精灯火焰旁存在无菌区域，可以避免周围环境中的微生物的污染。【解析】(1)先充气有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；当酵母菌繁殖到一定数量后，需要闭气造成无氧环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒；

(2)选择培养基纤维素。

(3)水无机盐氮源高压蒸汽灭菌法。

(4)平板划线法稀释涂布平板法避免周围环境中的微生物的污染28、略

【分析】【分析】

1；克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

3；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。

【详解】

（1）体细胞分化程度高；表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

（2）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至减数分裂II中期；去核是指去除纺锤体—染色体复合物；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，在此过程中，灭活的仙台病毒的作用是诱导体细胞与去核卵母细胞融合。目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法，核移植的具体操作是将体细胞注入去核卵母细胞，从而得到重构胚，使其具有发育成完整个体的能力；体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养；培养过程中需要定期更换培养基，并创造无菌；无毒环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。

（3）通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型相同，细胞质基因来源于受体细胞；为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，该实验的自变量是BMAL1基因是否敲除，因变量是是否出现睡眠紊乱症状。所以对照组的设置应为与克隆猕猴生理状态相同的正常的猕猴个体(或不存在BMAL1缺失）。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，因为猴与人的亲缘关系更近，故选用“模型猴”更优于“模型鼠”。【解析】(1)胚胎细胞分化程度低；表现全能性相对容易。

(2)MⅡ纺锤体-染色体复合物诱导细胞融合发育成完整个体无菌；无毒的环境；温度、pH、渗透压，气体环境。

(3)相同与克隆猴生理状态相同的正常个体（或不存在BMAL基因缺失个体）猴与人的亲缘关系更近六、综合题(共4题，共32分)29、略

【分析】【分析】

本题考查基因工程；考查对限制酶作用特点；基因工程操作程序的理解。解答此题，可根据质粒和外源DNA中SmaⅠ酶切位点的个数和位置分析SmaⅠ酶切可能导致的结果。

【详解】

（1）①获得耐盐基因后；构建重组DNA分子所用的限制酶，DNA连接酶都作用于图中的a处（磷酸二酯键）。

②将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法；基因枪法、花粉管通道法。

③要确定耐盐转基因水稻是否培育成功；需要从分子水平和个体水平两方面进行鉴定，分子水平的目的基因检测就是要用放射性同位素标记的耐盐基因作探针进行分子杂交检测。

（2）④切割前质粒为环状；不含游离的磷酸基团。切割后质粒成了一个链状的双链DNA分子，含两个游离的磷酸基团。

⑤因为SmaⅠ识别序列中均为G—C碱基对；G；C之间含三个氢键，热稳定性高。

⑥标记基因可以鉴别并筛选受体细胞是否含有目的基因。

⑦若用同种限制酶切割质粒和外源DNA中的目的基因；因为两端的黏性末端相同，会出现自身环化的情况，而用两种限制酶切割，因为两端形成的黏性末端不同，不会出现自身环化现象，可以防止质粒和目的基因自身环化和反向连接。

【点睛】

本题结合图；表；考查基因工程的相关知识，意在考查考生的审图能力和理解应用能力。

选择限制酶的方法。

(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类。

①应选择切点位于目的基因两端的限制酶；如图甲可选择PstⅠ。

②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶；如图甲不能选择SmaⅠ。

③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接；可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。

(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类。

①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致；以确保具有相同的黏性末端。

②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后将不能自主复制。【解析】aa基因枪耐盐基因2高鉴别并筛选含目的基因的受体细胞防止质粒和目的基因自身环化和反向连接30、略

【分析】【分析】

分析题图可知，a表示将致癌基因导入胚胎干细胞；b表示胚胎干细胞的体外培养；c表示早期胚胎培养；d表示胚胎移植。

【详解】

（1）图中的ES细胞为胚胎干细胞；除了从早期胚胎中分离出来，还可以来自原始性腺；该细胞在形态上表现体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上具有发育的全能性（即具有发育为任何一种组织的潜能）。

（2）将基因表达载体导入ES细胞（动物细胞）的方法是显微注射技术；检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA是目的基因检测与鉴定的第一步；可采用DNA分子杂交技术：若出现杂交带，则证明插入成功。

（3）胚胎干细在体外可以维持（只增殖）不分化状态；要维持该状态，通常需要在饲养层细胞上培养；若要诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，就需要加入分化诱导因子如牛黄酸等。

（4）胚胎移植