细胞因子使用方法详解VIP

细胞因子使用方法详解关键词：重组蛋白，细胞因子，复溶方法、储存条件Abbkine细胞因子均由重组蛋白冻干粉及配套复溶buffer组成。注意：不同产品复溶buffer成分有所差异，不建议混合使用图1.Abbkine细胞因子产品组成首先使用前检查产品状态（冻干粉状）第一步：开盖前离心开盖前务必离心，将管壁的冻干粉离心至管底，离心条件10000rpm离心30-60s或4000rpm离心5min图2.开盖前离心第二步：复溶获得储存液细胞因子冻干粉为无菌生产，复溶时超净工作台内无菌操作。推荐使用配套复溶buffer对离心后的冻干粉进行复溶。复溶过程中，用枪吹打混匀即可，避免剧烈涡旋震荡，否则有可能影响细胞因子的活性，储存液浓度参考说明书推荐控制在0.1-1mg/ml，可根据产品规格对复溶buffer用量进行计算。举例：如订购5ug规格冻干粉，复溶时添加50ul复溶buffer获得0.1mg/ml储存液。注意：禁止略过复溶步骤直接将冻干粉稀释为低浓度工作液，否则可能导致无法完全溶解，造成损失。第三步：稀释为工作液使用稀释液（如：培养基或1×PBS）将储存液进一步稀释为工作液，也可取适量复溶后的储存液直接添加至培养基中用于细胞培养。细胞因子的工作浓度应结合具体实验需求而定，首次实验可查阅参考文献。图3.稀释为工作液第四步：添加载体蛋白溶液长期储存向储存液中添加终浓度为10%FBS载体蛋白溶液。已溶解的细胞因子在4℃可保存1周，添加载体蛋白后可分装于-20℃或-80℃长期保存。注意：分装冻存时，需保证蛋白浓度不低于10μg/ml，而且每管中的溶液体积不小于10μl!常见的含载体蛋白溶液：0.1%BSA（牛血清白蛋白）10%FBS（胎牛血清）5%HSA（人血清白蛋白）图4.添加终浓度为10%FBS载体蛋白溶液产品推荐产品编号产品名称规格PRP3001Ulp1(SUMOProtease/Ulp1peptidase)500U/1000U/5000UPRP3002TerminalDeoxynucleotidylTransferase(TdT)40μg/100μgPRP3003HumanAnnexinV/ANXA5protein100μg/1mg/10mgPRP3004Luciferasefirefly5mg/25mgPRP1137MouseIL-4protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1048HumanTGF-βprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1151RecombinantGM-CSF，Mouse，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1068HumanFGF-2（154aa）protein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1138MouseIFN-γ20μg/100μg/500μg/1mgPRP1085HumanIL-4Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049HumanEGFprotein100μg/500μg/1mg/10mgPRP1158MouseIL-1betaProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1114MouseRANKLprotein2μg/10μg/100μg/1mgPRP1171Mouse/RatTGFbeta1,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1113MouseTNF-αprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1087HumanIL-6Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1050HumanIFN-γprotein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1060RecombinantIL-1beta，Human，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051HumanIL-13protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136MouseM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055HumanIL-10protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056HuamnRANKLprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054HumanVEGF165protein5μg/20μg/100μg/1mg欢迎广大“蝌蚪”们多多关注Abbkine公众号，还会有更多科研惊喜等着大家哟。同时，Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台，经过不懈努力，将多种高端生物实验的干货整理出来，后期陆续在微信公众号中