2025年浙科版选择性必修3生物下册月考试卷含答案VIP

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙科版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列叙述错误的是（）A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌2、下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程；下列相关说法错误的是（）

A.①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前需对精子进行离心处理B.②代表体外胚胎培养，在透明带中进行的受精卵的早期分裂称为卵裂C.③代表胚胎分割，可取样桑葚胚时期的滋养层进行DNA分析，鉴定性别D.⑤代表胚胎移植，操作前通常需要对代孕母牛做发情处理3、利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气后，再封闭，其结果是（）A.酵母菌大量死亡，酒精减产B.酵母菌数量不变，酒精增产C.酵母菌数量增多，酒精增产D.酵母菌数量增多，不产生酒精4、作物脱毒；改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、胚胎培养依次是下列哪项生物技术的应用（）

①基因工程②细胞工程③蛋白质工程④胚胎工程A.①②②③④④B.②①①③②④C.②①②③②④D.②①②④③②5、菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长。科研人员利用菌株Ⅰ和菌株Ⅱ进行如下实验：

实验1：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ在同时添加VB1和VB7的基本培养基中混合培养一段时间后；再将菌体离心提取；接种在基本培养基上，发现长出了菌落。

实验2：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ用微孔滤板（细菌不能通过；DNA等化合物可通过）隔离，培养一段时间后，再将两种菌体分别离心提取；接种在基本培养基上，发现均不长出菌落。

依据实验结果推测，最可能发生的是（）A.混合培养时发生DNA转移B.隔离培养时发生DNA转移C.混合培养时发生基因突变D.隔离培养时发生基因突变6、PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时()。A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸B.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸D.无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链7、下列有关微生物计数的叙述中，不正确的是（）A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C.测定土壤样品中的细菌数目，常用平板划线法进行菌落计数D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落8、模型构建是生命科学教学、科研的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析错误的是（）

A.若图示为食物网，则D可能是次级消费者、第二营养级B.若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞C.若图示为试管婴儿技术，C～D为早期胚胎培养和胚胎移植D.若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞9、我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是（）A.抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具B.重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图；有关叙述正确的是（）

A.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力D.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落11、下列有关生物技术安全性和伦理问题的做法中，错误的是（）A.对转基因生物产品进行标注，供消费者自主选择B.为挽救患病的孩子取用婴儿的造血干细胞或器官C.在动物克隆技术发展初期进行生殖性克隆人的研究D.全面禁止转基因微生物研究以免用于制造生物武器12、研究发现；某些致病菌生长繁殖需要外界提供相应的生长因子。将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时，金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象（图甲）为进一步探究流感嗜血杆菌所需生长因子的种类，把其菌悬液与不含生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从血液中提取的V；X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图乙所示。下列叙述正确的是（）

A.图甲中的不同菌落可以通过观察菌落特征进行鉴别B.卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致C.可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养D.图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V或X13、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：114、格瓦斯是一种广泛流传于东欧的低度酒精饮料。制作过程：①将发酵面包制成的面包液、糖化液装入发酵罐，加入保加利亚乳酸菌、酵母菌进行发酵；②发酵液经过严格的过滤；③过滤液经5～8s迅速升温到127℃进行高温杀菌，冷却后即可饮用。酵母菌产生酒精的能力差异较大，其产酒精能力与其耐受酒精的能力有关。下列说法正确的是（）A.保加利亚乳酸菌和酵母菌都能同时进行有氧呼吸和无氧呼吸B.面包液、糖化液可为微生物的生长提供碳源、氮源以及水和无机盐等营养物质C.若想得到产酒精能力比较强的酵母菌，可向培养基中添加较高浓度的酒精进行筛选D.过程③中瞬时高温灭菌可使微生物蛋白质空间结构迅速破坏，从而达到灭菌效果15、某植物有甲、乙两品种，科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是（）。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/（μmol·L-1）生长素/（μmol·L-1）I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3

A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基，即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素16、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶17、基因定点突变技术通过改变基因特定位点的核苷酸来改变蛋白质的氨基酸序列；常用于研究某个氨基酸对蛋白质的影响，其原理是利用人工合成的诱变寡核苷酸引物和多种酶来合成突变基因，过程如图所示。下列分析错误的是（）

A.基因定点突变的原理是使基因发生碱基对的替换B.诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种核糖核苷酸C.突变基因的合成是以正常基因的单链作为模板的D.延伸过程遵循碱基互补配对原则，且需要DNA聚合酶的催化评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)18、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。19、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。20、生态工程的设计所依据的是______和______原理21、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。22、什么是生物武器？简述生物武器的危害。__________评卷人得分四、判断题(共2题，共12分)23、制备单克隆抗体时，2次筛选的目的不同。()____A.正确B.错误24、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共40分)25、鼠伤寒沙门氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培养基（含微量组氨酸）上生长形成菌落，而突变型的组氨酸营养缺陷型菌株（his-）不能合成组氨酸；无法在基本培养基上形成菌落。利用his菌株可检测环境或食品中是否存在化学致癌剂（诱发his-菌株突变）。回答下列问题：

(1).基本培养基的成分主要包括_____。制备基本固体培养基的操作：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时应注意：_____。

(2).检测是否存在化学致癌剂时，用_____法将his-菌株接种于基本培养基上，使其密集均匀分布在平板上，将浸泡过待测化合物的滤纸片贴于平板中央。若培养基灭菌合格，则可能影响该检测结果的两个重要因素是_____。若图A为对照组，B为实验组，则A组滤纸片的处理方法是_____。经正确检验后，结果如B所示，则实验结果和结论为_____。

(3).使用过的培养基在丢弃之前应做的处理及目的是_____。26、单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用；下图1是单克隆抗体制备流程图，下图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图3是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。

（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建____________________，并导入用__________处理的大肠杆菌细胞中；获取大量膜蛋白。

（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基嘌呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的__________（填“HAT培养基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以达到筛选目的，其原理是______________________________。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是______________________________。

（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________，体现的是双特异性单克隆抗体在__________方面的用途。27、科研人员进行了土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；实验流程如图1所示。农药；除草剂的长期使用，会使土壤受到严重污染。某科研小组为筛选能分解除草剂草甘膦的微生物，其流程示意图如图2所示。回答下列问题：

(1)图1中，“？”处是__________，纯化培养时采用的接种方法是_______________，该方法可用于菌落数的统计，原因是_________________________。

(2)图1中纯化培养所利用的培养基在营养成分和物理性质上的特点分别是____________________，图1和图2中的两个培养基在用途方面的共同点是____________________。

(3)图2中的接种方法需要连续划线，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是_________________。结果有的菌落周围有透明圈而有的没有，原因是________________。28、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分六、综合题(共4题，共32分)29、性别控制技术在畜牧生产中的应用；充分发挥了受性别限制的生产性状（如泌乳；生长速度、肉质等）的最大经济效益。如图所示，依据X染色体的DNA含量比Y染色体多，用流式细胞仪将牛的两种精子分离开来，再通过试管动物技术获得所需性别的试管牛。回答下列问题：

（1）将分离出的精子用钙离子载体A23187溶液进行_________处理后，才能与培养成熟的卵细胞融合形成受精卵。受精过程中防止多精入卵的生理反应有________________________。

（2）若培育生产血清白蛋白的乳腺生物反应器，需将血清白蛋白基因与_________的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法导入受精卵_________（填“甲”或“乙”）中，然后将该受精卵继续培养到_________阶段移入受体；使其生长发育成转基因试管牛。

（3）在胚胎移植前，需要用激素对“代孕母体”作_________处理。由于受体_________；从而保证胚胎能在受体内存活。

（4）用Y染色体上决定性别的SRY基因对滋养层细胞的DNA进行检测，可达到鉴定胚胎性别的目的，这种检测方法采用的是__________________技术。30、通常工业废水中含有低浓度；高毒性有机物一苯酚。为贯彻国家环保要求，某化工厂对工业废水进行处理后再排放，处理时需将苯酚分解为无害物质。为高效处理苯酚，科研人员采用富集方法（在含有大量苯酚的牛肉膏蛋白胨培养基上培养）从化工厂的污泥中分离能高效降解苯酚的菌株，其实验过程如图所示。请回答下列问题：

(1)科研人员应从____________中取样，过程①～③对样品进行富集培养时应选用液体培养基，原因是__________________。

(2)过程④所用接种方法为__________________。

(3)过程④所用培养基从物理状态角度分析属于____________培养基，从培养目的角度分析属于____________培养基。为证明该培养基的培养目的，可用____________作对照实验。

(4)已知苯酚降解后会在培养基上形成透明圈。为获得目的菌株，科研人员应在⑤中平板上挑选具有____________特征的菌落的进一步纯化。31、不同动物细胞膜表面的分子标签（MHC；主要组织相容性抗原）具有特异性，使得即使在相同抗原的刺激下，与人类相比，所产生的免疫反应也有很大的差异性，为此，构建人MHC转基因小鼠模型并应用于疫苗研发，具有重要的价值。如图是人MHC转基因小鼠模型的构建过程。

(1)过程①用__________处理可以获取更多的卵（母）细胞，过程③所用的技术是___________。将早期胚胎植入代孕母鼠前，需对受体进行______________。

(2)图中X表示__________过程。从基因组数据库中查询人MHC的mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成_________用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是______________。

(3)通过上述途径和杂交选育虽然可获得含有人源MHC基因的纯合子代小鼠，但该模型小鼠还不是理想的模型动物，理由是____________________，表达的产物会干扰疫苗的筛选或评价。欲获得理想的模型动物，后续的实验设想是______________________。32、新冠病毒肆虐全球；给人们的日常生产；生活带来很大的影响，因此研发新冠病毒疫苗受到广泛关注。疫苗研制时常需要构建重组病毒载体，部分过程如下图所示，其中A~C表示结构或物质，NcoI、SphI、NheI、BamHI四种酶的识别序列和酶切位点详见下表。

限制酶NcoISphINheI．BamHI识别序列和切割位点C↓CATGGGCATG↓CG↓CTAGCG↓GATCC

（1）分析图中C的黏性末端可确定，需要用_______（填限制酶名称）切割质粒B。

（2）重组质粒1用_______（填限制酶名称）处理获得线性化片段，在缓冲液中将其与某克隆片段混合，适宜条件下成功连接。由图可知线性分子可以与克隆片段连接成环的原因可能是_______。连接后可得到的环状DNA分子最多有_______种（上述片段均足量且不考虑3个及以上DNA片段的连接）。

（3）获得的重组病毒载体可以导入工程菌，高效表达出_______用于制备疫苗。与减毒活疫苗比较，该类疫苗安全性更高，其原因是_______。

（4）新型冠状病毒感染人体后，其S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，使病毒侵入细胞，同时会引起人体相应的免疫反应。重组人源蛋白ACE2可用于治疗新冠病毒肺炎，请推测该药物的作用机理：_______。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

刚果红可以与纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；刚果红可以与纤维素形成红色复合物；A正确；

BC；刚果红不能与纤维的分解产物（纤维二糖和葡萄糖）形成红色复合物；B错误，C正确；

D；根据分析：由于刚果红可以与纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，所以如果培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤素分解菌，D正确。

故选B。

【点睛】2、C【分析】【分析】

分析题图：图中①表示体外受精；②表示早期胚胎培养，③表示胚胎分割，④表示胚胎移植。

【详解】

A；与体内受精相比；体外受精精子获能处理前对精子进行离心处理，目的是除去精液以利于精子获能，A正确；

B；胚胎发育早期是在透明带内进行的；这一时期称为卵裂期，B正确；

C；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞；C错误；

D；过程⑤是将早期胚胎移植入代孕母牛的子宫内；操作前需要对代孕母牛进行发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。

故选C。

【点睛】3、C【分析】【分析】

酵母菌属于兼性厌氧菌；其在有氧条件下繁殖速度快，不产生酒精，在无氧条件下繁殖速度慢，但可产生酒精。

【详解】

利用酵母菌酿酒时；一开始持续通入空气后，酵母菌大量繁殖，再封闭，酵母菌无氧呼吸产生的酒精会增多，C正确，ABD错误。

故选C。4、A【分析】【分析】

1；通过植物组织培养技术可获得脱毒苗；通过基因工程可获得抗毒苗。

2；通过基因工程可生产自然界已有的蛋白质；通过蛋白质工程可生产自然界没有的蛋白质。

【详解】

作物脱毒是植物组织培养技术；属于②细胞工程；改善畜产品的品质，将乳糖酶基因导入奶牛基因组，使得转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，属于①基因工程；抗除草剂是DNA重组技术，属于①基因工程；干扰素是一种蛋白质，用于治疗癌症和病毒感染，很难保存，运用③蛋白质工程可获得易保存的干扰素；检测有毒物质，判断某物质的毒性，利用②细胞工程中动物细胞的培养；性别鉴定，在囊胚中取滋养层细胞做分析，属于④胚胎工程。

故选C。

【点睛】5、A【分析】【分析】

题图分析；将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ单独涂布于基本培养基上时都没有产生菌落，而将两者混合后涂布于基本培养基上时产生了菌落，据此推测可能是二者在混合培养过程中发生了基因的转移。

【详解】

A、菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长；但混合培养后在基本培养基上长出菌落，据此可推测混合培养时发生DNA转移，A正确；

B；根据实验结果可知；隔离培养可能没有发生DNA转移，因而两种菌种依然不能在基本培养基上生长，B错误；

C；基因突变的发生于混合培养没有必然的联系；因此根据上述实验结果不能推出混合培养时发生基因突变的结论，C错误；

D；基因突变具有自发性；但根据隔离培养后菌落都没有在基本培养基上出现，不能推出在隔离培养时发生基因突变的结论，D错误。

故选A。6、B【分析】【分析】

关于PCR技术的相关知识：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2、原理：DNA复制。

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5′端，因此与它互补的子链从另一端开始合成，即与引物II结合进行DNA子链的延伸。

故选B。7、C【分析】【分析】

从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。稀释涂布平板法可以用于微生物计数，通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

【详解】

A；因为土壤中各类微生物的数量不同；所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离，A正确；

B；测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量；选用的稀释范围不同，B正确；

C；平板划线法可以用于微生物的分离；而不能用于计数，稀释涂布平板法可以用于微生物计数，C错误；

D；牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目；说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D正确。

故选C。

【点睛】

本题主要考查筛选与分离目的微生物的相关知识，意在强化学生对所学知识的识记、理解与掌握。8、A【分析】【分析】

试管婴儿是体外受精+胚胎移植技术的俗称；是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。

【详解】

A；若图示为食物网；则D可能是次级消费者、第三营养级，A错误；

B；若图示为基因工程；则C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，B正确；

C；若图示为试管婴儿技术；C为早期胚胎培养，D为胚胎移植，C正确；

D；动物核移植；经常移植到去核卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，D正确。

故选A。9、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；抗虫基因的提取和运输需要专用的工具和运载体；如提取时可能需要限制酶，而运输时需要运载体等，A正确；

B；重组DNA分子中增加一个碱基对；会引起基因突变，但由于密码子的简并性等原因，基因突变不一定会导致毒蛋白的毒性丧失，B正确；

C；抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种；从而造成近缘物种也有抗虫基因，该近缘物种再通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，C正确；

D；转基因棉花是否具有抗虫特性；是通过检测棉花细胞中是否产生毒蛋白或从个体水平上检测转基因棉花是否能抗虫来确定的，D错误。

故选D。二、多选题(共8题，共16分)10、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，A正确；

B；要筛选出能高效分解尿素细菌；所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；

C；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种；形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；

D；步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散；可以获得单细胞菌落，D正确。

故选ACD。11、B:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食。

2；对生物技术中的伦理问题的争论；中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；2002年；我国农业部颁布了《农业转基因生物标识管理办法》，要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注，供消费者自主选择，A正确；

B；不能用婴儿的造血干细胞或器官来挽救患病的孩子；B错误；

C；我国政府的态度是禁止生殖性克隆人的研究；C错误；

D；对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食，D错误。

故选BCD。12、A:B:C【分析】【分析】

据图分析可知；流感嗜血杆菌的菌落主要分布于添加了X和V的区域的交界处，说明该菌生长需要的生长因子是X和V。

菌落的特征：形状；大小、颜色、隆起程度、质地、边缘等。

培养基的营养组成：碳源；氮源、水、无机盐、特殊生长因子。

【详解】

A；鉴定不同种的菌落可以观察菌落的特征；比如形态、颜色、隆起程度等，A正确；

B；流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时；金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，由此推测卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致，B正确；

C；分析题干信息可知；可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养，C正确；

D、图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V和X，不是V或X，D错误。13、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。14、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；在无氧条件下乳酸菌能够将葡萄糖分解为乳酸。

【详解】

A；乳酸菌为严格厌氧菌；只能进行无氧呼吸，A错误；

B；面包液、糖化液主要成分为糖类；也含有其他物质，可为微生物的生长提供碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，B正确；

C；酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关；利用选择培养基，向培养基中添加较高浓度的酒精筛选出产酒精能力比较强的酵母菌，C正确；

D；过程③中瞬时高温会破坏微生物的蛋白质空间结构；进而将微生物杀死达到灭菌效果，D正确。

故选BCD。15、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时；两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化。

【详解】

A；Ⅰ阶段为脱分化；II阶段和Ⅲ阶段为再分化，Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达，A错误；

B；实验至少配制了3种不同的培养基；即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基，B错误；

C、由于参照品种B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L；C错误；

D；生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素；D正确。

故选ABD。16、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。17、B:C【分析】【分析】

1；DNA复制过程为：

（1）解旋：需要细胞提供能量；在解旋酶的作用下，两条螺旋的双链解开。

（2）合成子链：以解开的每一段母链为模板；在DNA聚合酶等酶的作用下，利用游离的4种脱氧核苷酸为原料，按照碱基互补配对原则，合成与母链互补的子链。

（3）形成子代DNA分子：延伸子链；母链和相应子链盘绕成双螺旋结构。

2；特点：边解旋边复制；复制方式：半保留复制。

3；条件：模板是亲代DNA分子的两条链；原料是游离的4种脱氧核苷酸；能量是ATP；酶是解旋酶、DNA聚合酶。

【详解】

A；定点突变改变特定位点的核苷酸；先是人工合成诱变寡核苷酸引物，随后经过延伸和复制，产生新的突变基因，A正确；

B；诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种脱氧核苷酸；B错误；

C；突变基因的合成以正常基因的单链为模板；C错误；

D；延伸过程中遵循碱基互补配对原则；该过程需要将脱氧核苷酸连接起来，所以需要DNA聚合酶的催化，D正确。

故选BC。三、填空题(共5题，共10分)18、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】生态学工程学21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖22、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物，若用与战争，则可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物。四、判断题(共2题，共12分)23、A【分析】【详解】

制备单克隆抗体时，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故正确。24、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。五、实验题(共4题，共40分)25、略

【分析】【分析】

培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节pH→分装→灭菌→倒平板→（冷却后）倒置平板。微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分离纯化。具体来说，就是在无菌条件下，用接种环或接种针等专用工具，从一个培养皿（上面可能存在各种杂菌落）挑取所需的微生物，转接到另一个培养基中进行培养的方法。【小问1】

培养基的组成成分包括碳源；氮源、水、无机盐、生长因子等。倒平板时；应待培养基冷却到50℃左右倒平板，平板冷凝后要将平板倒置，倒平板过程中应在酒精灯火焰附近进行，以防止杂菌污染。【小问2】

题干中表明菌体密集均匀分布在平板上；所以是稀释涂布平板法接种。培养基灭菌合格，影响因素应为除培养基灭菌以外可能的影响因素，因此，可能操作过程中是否无菌操作，以及使用的滤纸条是否灭菌合格等。A为对照组，应除自变量以外，其他条件都相同，因此，处理方法为浸泡在无菌水中处理后贴于平板中央；实验中能观察到出现野生型菌株菌落，说明环境中存在化学致癌剂导致突变型菌株突变成野生型菌株。【小问3】

使用过的培养基应灭菌后再丢弃；以防止培养基中的有害物质污染环境或感染实验操作者。

【点睛】

本题考查培养基的成分、制备过程以及微生物的接种方法等相关知识，意在考查考生对所学知识的识记和理解能力。【解析】【小题1】①.碳源；氮源、水和无机盐②.待培养基冷却至50℃左右时；在酒精灯火焰旁附近倒平板。

【小题2】①.稀释涂布平板②.滤纸片是否灭菌彻底和待测化合物是否含有杂菌③.（滤纸片）用无菌水浸泡④.his-菌株在培养基上突变为his+菌株；说明待测化合物中存在致癌剂（或待测化合物中存在化学诱变剂，这些化学物质具有致癌性，叙述合理即可）

【小题3】灭菌，避免对环境造成污染26、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）

据图分析，科研人员利用基因工程将目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建基因表达载体，并导入用CaCl2处理的大肠杆菌细胞中；使目的基因增殖并表达可获取大量膜蛋白。

（2）

杂交瘤细胞由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成；其合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径。“HAT培养基”有筛选作用，在添加了氨基喋吟的HAT培养基中，杂交瘤细胞“D途径”虽然被氨基嘌呤阻断，但可通过“S途径”合成DNA，不断分裂增殖；而淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，而不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，也不生长。

（3）

带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合；可起到标记目标微生物的作用。

（4）

双特异性单克隆抗体借助单克隆抗体的导向作用；能将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病方面起到运载药物的用途。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】（1）基因的表达载体Ca2+或CaCl2

（2）HAT培养基淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力；故不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。

（3）标记目标微生物。

（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞治疗疾病（运载药物）27、略

【分析】【分析】

将微生物接种到固体培养基常用稀释涂布平板法；接种前先要将菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一定的稀释度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成单个细胞，在适宜的条件下培养让菌体进行繁殖，能够在培养基表面形成单个菌落。稀释涂布平板操作：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽。②取少量菌液，滴加到培养基表面。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽冷却8-10s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基上，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。

【详解】

（1）图1中是将土壤悬浮液取1mL；加入9mL无菌水进行稀释10倍。图1中微生物接种方式为稀释涂布平板法。该方法可以用于对菌落数进行计数，因为当样品的稀释度足够高时，培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

（2）土壤中某种固氮菌的分离和纯化培养；培养基需要采用固体培养基，才可用于稀释涂布平板法，且因为是分离固氮菌，所以培养基中不加氮源。图1和图2中的两个培养基都是用于从多种微生物中分离目的菌种。

（3）图2中接种方法为平板划线法，且除第一次划线外，后面的每一次划线都要从上一次划线的末端开始，目的是将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果。图2中培养基时为了筛选出能分解除草剂草甘膦的微生物，所以有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈。【解析】(1)无菌水稀释涂布平板法当样品的稀释度足够高时；培养基表面可以获得由单个细菌繁殖而成的单菌落，通过统计菌落的数量可以推测所涂菌液中细菌的数量。

(2)没有氮源；属于固体培养基从多种微生物中分离出目的菌。

(3)将聚集的菌种逐步稀释，分散到培养基表面，最终达到分离的效果有的菌落中的细菌能分解草甘膦，菌落周围因为草甘膦被分解而出现透明圈，有的菌落中的细菌不能分解草甘膦，菌落周围不能形成透明圈28、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气六、综合题(共4题，共32分)29、略

【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理)；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段)；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

据图分析；牛的精子有两种，含X染色体精子和含Y染色体精子，其中甲形成的受精卵中含有XX，则试管牛甲是雌性，而乙成的受精卵中含有XY，则试管牛乙是雄性。

【详解】

（1）精子获能后才具有受精能力。将分离出的精子用钙离子载体A23187溶液培养的目的是为了让精子获能；获能后的精子与培养成熟的卵细胞融合形成受精卵，在该过程中，透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障。

（2）基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子等；题干中的目的基因是血清白蛋白基因，需与受体中乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组才能进行转录，为了培育乳腺生物反应器，即能产奶的母牛，因此选择受精卵甲作为受体细胞，用于移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。

（3）在胚胎移植前；对“代孕母体”进行同期发情处理，其目的是通过注射激素使其与供体同期发情，以使受体处于相同的生理狀况，有利于接受移植的胚胎。由于受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，因此能保证胚胎在受体内存活。

（4）SRY基因是Y染色依上的性别决定基因；将细胞内DNA提取出来，用SRY基因探针对滋养层细胞的DNA进行检测，可以确定是否为雄性，该方法采用了DNA分子杂交技术。

【点睛】

熟知胚胎工程、基因工程的原理和操作要点是解答本题的关键，掌握胚胎工程和基因工程的实际应用是解答本题