2025年人教版PEP选择性必修3生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教版PEP选择性必修3生物下册月考试卷782考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列关于限制酶的说法不正确的是（）A.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，体现了酶的专一性B.限制酶在特定的位点上切割DNA分子C.限制酶可以断开两条DNA链之间的氢键D.在基因工程的操作中，一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端2、下列有关植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是（）A.植物组织培养和动物细胞培养的原理都是细胞的全能性B.植物组织培养和动物细胞培养所用培养基都是固体培养基C.C；贴壁培养的细胞用胰蛋白酶处理获得细胞悬液后；直接分装到多个培养瓶中进行传。

代培养D.一般来说，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养3、下表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述，不正确的是（）。选项试剂操作作用A研磨液与生物材料混合提取溶解DNAB2溶液与提取出的DNA混合溶解DNAC冷却的酒精加入到离心后的上清液中溶解DNAD二苯胺试剂加入到溶解有DNA的溶液中鉴定DNA

A.AB.BC.CD.D4、下列有关培养基的叙述，正确的是（）A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素B.培养基中都只含有碳源、氮源、水和无机盐C.固体培养基表面可形成肉眼可见的单个细菌D.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基5、下图所示是利用高等哺乳动物的生殖细胞进行的体外受精技术培育试管动物的大致流程。下列说法中，错误的是（）

A.哺乳动物的体外受精包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤B.在体外受精前，要对精子进行获能处理，从而使精子具有与卵细胞受精的能力C.胚胎发育的卵裂期，胚胎中细胞数目不断增加但胚胎的总体积并不增加D.胚胎发育的过程是受精卵→桑甚胚→原肠胚→囊胚6、下列以洋葱为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A.根据DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，可去除部分杂质B.在切碎的洋葱中加入一定量的研磨液，充分研磨，过滤后弃去滤液C.滤液中加入冷酒精后，用玻璃棒搅拌会使DNA的提取量增加D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后振荡，观察颜色变化7、美籍华人张明觉首次实现哺乳动物体外受精：从兔子的子宫回收获能的精子在体外同卵子结合，然后根据同步化的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下列叙述错误的是（）A.为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理B.体外培养受精卵时需要给予一定量的CO2，以维持培养液pH的相对稳定C.囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化D.在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔8、下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是（）A.可用蒸馏水胀破细胞的方法从猪红细胞中提取到DNA和蛋白质B.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除部分杂质C.透析法分离蛋白质的依据是利用蛋白质不能通过半透膜的特性D.进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、电泳法等9、以下有关蛋白质工程的叙述，错误的是（）A.蛋白质工程发展的基础是基因工程B.蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、在传统发酵技术中；果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述不正确的是（）

A.发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生B.中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵C.后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度D.图乙中能正确表示pH变化的曲线是③11、下列有关生物技术安全性和伦理问题的做法中，错误的是（）A.对转基因生物产品进行标注，供消费者自主选择B.为挽救患病的孩子取用婴儿的造血干细胞或器官C.在动物克隆技术发展初期进行生殖性克隆人的研究D.全面禁止转基因微生物研究以免用于制造生物武器12、生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述正确的是（）A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿D.生物武器用微生物、毒素，干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力13、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA14、培养胡萝卜根组织可获得试管苗；获得试管苗的过程如图所示。

有关叙述正确的是（）A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B.步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织C.从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累D.步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用15、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中16、下列有关微生物的分离与培养实验的叙述，正确的是（）A.倒平板前，为了防止杂菌污染，需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰B.倒平板时，应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应立即挑取菌落D.用移液器吸取相应的菌液前，需要将样液充分摇匀评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)17、______——“分子手术刀”18、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。19、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。20、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。21、生态工程的设计所依据的是______和______原理22、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。23、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？24、生物数据库的知识与正在迅猛发展的生物信息学有关。什么是生物信息学________？25、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共2题，共8分)26、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误27、生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质的区别。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共21分)28、尿素是一种重要的农业氮肥；但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图1所示，图2是乙中的培养基配方。请回答下列问题：

（1）为了获得尿素分解菌；可在__________取样；经系列处理后如图2所示培养基，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是___________；__________。

（2）甲中培养基与乙中培养基的成分相比；唯一的区别是___________。

（3）在涂平板前需要对甲中的菌液进行稀释；稀释涂布后能得到菌落数目在___________________的平板，则说明稀释操作比较成功。

（4）对分离得到的尿素分解菌作进一步鉴定时；可在上述培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红的原因是尿素分解菌_____________________，再结合菌落的特征等进行确定。

（5）统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________，除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。29、德阳中江盛产蜜柚；汁多肉脆，口感香甜。但是近年各地大面积种植该类产品，导致大量果品积压。为了解决果农的燃眉之急，有一定生物学知识的村干部想到了多渠道开发产品的方法，帮助果农办起了加工厂。请回答下列相关问题；

（1）利用蜜柚果肉可以生产果汁，为提高出汁率和澄清度，可向蜜柚汁中加入果胶酶将果胶分解为________；生产果汁剩下的柚皮可用________法提取精油；作为工业原料。

（2）在利用蜜柚汁制作果酒的过程中；为了提高酵母菌的发酵效率，工作人员对酵母菌进行了固定化，过程如下：酵母细胞活化→①→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

上述流程中，①为配制________溶液；溶化海藻酸钠时，要用________加热；直至其完全溶化。

（3）上述固定酵母细胞的方法称为法________，而制备固定化淀粉酶则不用此法进行固定，原因是________________________________

（4）在利用蜜抽果酒制作果醋的过程中，一工作人员又向发酵装置中添加一定量的蜜柚汁（不影响菌种的活性），检测发现乙醇的利用速率迅速下降，原因是________________________________________________。30、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分六、综合题(共4题，共36分)31、经过一个世纪的发展；植物细胞工程技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题；花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富，回答相关问题：

（1）植物细胞工程最基本的技术是_______________，它所依据的生物学原理是______________。

（2）兰花、香蕉等优良植物的生产都可通过微型繁殖技术经过______________和再分化来提供试管苗，其优点是不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现无病毒种苗的大量繁殖，获得无病毒种苗的方法是__________________________________________。

（3）植物体细胞杂交技术的关键是获取有活力的原生质体以及诱导其融合，诱导融合的化学方法是用_________________________做诱导剂，植物体细胞杂交技术的重大意义是_________________________。

（4）人工种子的主体是_______________。在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在哪一部分?____________________________（填人工种皮或愈伤组织）。32、科研人员利用农杆菌转化法将抗除草剂基因导入甘蓝；过程如图1所示，①~④为操作步骤，BamHⅠ；BglⅡ、EcoRⅠ酶切位点唯一，识别序列和切割位点见表。

（1）步骤①为_________，其目的是___________。

（2）若目的基因用BamHⅠ和BglⅡ剪切，质粒用BamHⅠ剪切，剪切后的目的基因和质粒能连接在一起，原因是_________________。酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式，可用_______酶对两种重组质粒进行剪切，通过凝胶电泳分析产物大小进行区分，如图2所示，图中____(样品1/样品2)为所需基因表达载体。

（3）步骤②用______处理农杆菌后获得感受态细胞，以便将重组质粒导入。步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共同培养后，在步骤④的培养基中添加______以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。若要检测甘蓝是否具有抗除草剂的性状，需要在个体水平通过___________进行检测。33、大熊猫是我国特有的珍稀野生动物；每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_________。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_________培养基。

（2）配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_________。

（3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路_________。

（4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重（%）纤维素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3234、乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：

（1）玉米秸秆经预处理后，应该选用_______酶进行水解；使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶___________（多选题）

A.酿制果醋的醋酸菌。

B.生长在腐木上的霉菌。

C.制作酸奶的乳酸菌。

D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌。

E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物。

（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为_____________（按功能分），培养基中的碳源为__________。

（4）从生物体提取出的酶首先要检测_______，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用___________技术。

（5）发酵阶段需要的菌种是__________。在生产酒精时，要控制的必要条件是_________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

ABC；一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，可见，限制酶在特定的位点上切割DNA分子，体现了酶的特异性，A、B正确，C错误；

D；在基因工程的操作中；一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端，D正确。

故选C。2、D【分析】【分析】

植物组织培养和动物细胞培养的比较：

【详解】

A；植物组织培养的原理是细胞的全能性；动物细胞培养的原理是细胞增殖，A错误；

B；动物细胞培养所用的是液体培养基；植物组织培养所用的是固体培养基，B错误；

C；传代培养是将原代细胞从培养瓶中提取出来；配制成细胞悬浊液，分装到多个培养瓶中继续培养，C错误；

D；容易进行无性繁殖的植物；其细胞全能性较高，也容易进行组织培养，D正确。

故选D。3、C【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA粗提取的第一步就是加入研磨液充分研磨；A正确；

B；DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，使用2mol/LNaCl溶液能溶解DNA，B正确；

C；DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离，C错误；

D；在沸水浴加热条件下；DNA与二苯胺反应呈现蓝色，D正确。

故选C。

【点睛】4、A【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质。

【详解】

A；在培养乳酸杆菌时；需要在培养基中添加维生素即生长因子，A正确；

B；培养基中一般都含碳源、氮源、水和无机盐；但还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质的需求，B错误；

C；微生物在固体培养基上生长时；稀释度足够高时，可形成肉眼可见的单个菌落，肉眼不能看到单个细菌，C错误；

D；液体培养基没有加入凝固剂；固体培养基中含有凝固剂，加入少量水也不会制成液体培养基，D错误。

故选A。5、D【分析】【分析】

分析题图：图示是体外受精技术培育试管动物的大致流程；体外受精包括精子的采集和获能；卵母细胞的采集和培养、受精作用；试管动物的培育除了采用体外受精技术，还采用早期胚胎培养和胚胎移植技术。

【详解】

A；哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤；A正确；

B；在体外受精前；要对精子进行获能处理，从而使精子具有与卵细胞受精的能力，B正确；

C；胚胎发育的卵裂期的胚胎中细胞数目不断增加；但胚胎的总体积并不增加或略有缩小，C正确；

D；胚胎发育的过程是受精卵→桑甚胚→囊胚→原肠胚；D错误。

故选D。6、A【分析】【分析】

DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的，当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液，·利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响；④蛋白质不能耐受较高温度，在80℃条件下会变性，而DNA对温度的耐受性较高；⑤DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；由于DNA在不同氯化钠溶液中的溶解度不同；因此可以采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法去除部分杂质，A正确；

B；在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐；充分研磨，DNA溶解在滤液中，过滤后不能丢弃滤液，B错误；

C；DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精；因此在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精后，用玻璃棒轻缓搅拌，这样可以进一步纯化DNA，不会使DNA的提取量增加，C错误；

D；将白色丝状物溶解在NaCl溶液中；加入二苯胺试剂后，需要水浴加热观察染色变化，D错误。

故选A。7、A【分析】【分析】

同期发情处理目的是使供体与受体出现相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境。动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液和所有培养用具需要进行灭菌处理，以及在无菌环境下进行操作。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；②营养：使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分；③温度、pH、渗透压：哺乳动物多是36.5℃左右，适宜pH为7.2-7.4；④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】

A；受体子宫不会对移植的胚胎发生免疫排斥；供体和受体要进行同期发情处理目的是使供体与受体出现相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境，A错误；

B、在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体；维持培养液的pH的稳定，B正确；

C；囊胚进一步发育扩大；会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这个过程叫做孵化，C正确；

D；随着胚胎的进一步发育；胚胎内部出现了含有液体的腔即囊胚腔，这时的胚胎叫做囊胚，D正确。

故选A。8、A【分析】【分析】

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和其他膜结构；而DNA的提取实验需要获取较多DNA，因此一般不用哺乳动物的血（包括猪血）做实验，所以蒸馏水涨破细胞的方法不适用于猪血提取DNA。但是可以用于血红蛋白的提取。

【详解】

A；猪属于哺乳动物；其成熟的红细胞没有细胞核和其他膜结构，而DNA的提取实验需要细胞内有较多DNA，但是该细胞可以用来提取蛋白质，A错误；

B；提取DNA的方法是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。利用这一特点；选择适当的盐溶液，就能使DNA充分溶解，使杂质沉淀，或相反，用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除部分杂质，B正确；

C；提取蛋白质的方法有透析法；透析法的原理是小分子可以自由进出半透膜，蛋白质分子不能透过半透膜，C正确；

D；进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、电泳法等；D正确。

故选A。9、C【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程．蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。

【详解】

A；蛋白质工程是在基因工程的基础上；延伸出来的第二代基因工程，A正确；

B；蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程；B正确；

C；对蛋白质的改造是通过直接改造相应的基因来实现的；C错误；

D、蛋白质工程可以通过改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性，如在T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性；D正确。

故选C。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)10、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；若发酵初期不通入气体；由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；

B；中期可以闻到酒香；说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；

D；醋酸发酵过程中；发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。

故选ACD。11、B:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食。

2；对生物技术中的伦理问题的争论；中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；2002年；我国农业部颁布了《农业转基因生物标识管理办法》，要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注，供消费者自主选择，A正确；

B；不能用婴儿的造血干细胞或器官来挽救患病的孩子；B错误；

C；我国政府的态度是禁止生殖性克隆人的研究；C错误；

D；对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食，D错误。

故选BCD。12、A:B:C【分析】【分析】

（1）生物技术安全性问题包括食物安全；生物安全、环境安全三个方面。

（2）伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议。

【详解】

A；转基因植物合成的某些新蛋白质；可能会成为过敏原而引起少数人过敏，A正确；

B；治疗性克隆是为了从胚胎中取出干细胞用于医学研究和治疗；生殖性克隆就是将人的体细胞移植到去核的卵中，然后将其在体外形成的胚胎移植到母体子言中，最终经足怀胎后生下的婴儿就是克隆人，当今社会的大多数人对克隆人的研究持否定态度，但不反对治疗性克隆，B正确；

C；反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿；C正确；

D；生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等，这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，对军队和平民造成大规模杀伤效果，干扰是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它是一种抗病毒的特效药，D错误。

故选ABC。13、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。14、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养过程：离体的植物器官；组织或细胞→愈伤组织→胚状体→植物体。常用的植物激素生长素和细胞分裂素。

【详解】

A；图中对根段进行消毒；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，防止培养过程中杂菌污染，又减少消毒剂对细胞的伤害，A正确；

B；步骤③切取的组织块中要带有形成层；形成层的细胞保持分裂和分化能力，全能性相对容易表现出来，形成层容易诱导形成愈伤组织，B正确；

C；从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为诱导愈伤组织形成的植物激素和诱导愈伤组织分化的植物激素的种类和比例不同；C错误；

D；步骤⑥要进行照光培养；诱导叶绿素的形成，因为叶绿素的形成需要光照，使试管苗能够进行光合作用，D正确。

故选ABD。15、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。16、A:D【分析】【分析】

平板划线的操作的基本步骤是：(1)右手持接种环；经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。(3)烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。(4)将平板倒置，放入培养箱中培养。

【详解】

A；倒平板前；需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰，通过灼烧灭菌防止杂菌污染，A正确；

B；倒平板时；应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免杂菌进入，而不是为了防溅，B错误；

C；接种环经灼烧灭菌后应等到冷却后再挑取菌落；否则高温会使菌落死亡，C错误；

D；用移液器吸取相应的菌液前；需要将样液充分摇匀，保证菌液中微生物均匀分布，提高实验的准确性，D正确。

故选AD。三、填空题(共9题，共18分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2019、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】生态学工程学22、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间23、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。24、略

【分析】【详解】

生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科，生物信息学主要是核酸和蛋白质序列数据的计算机处理和分析。【解析】生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科25、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共2题，共8分)26、A【分析】【详解】

生殖性克隆，即通常所说的克隆人，通过克隆技术产生独立生存的新个体，即通常所说的克隆人，该说法正确。27、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质区别；最重要的体现在目的不同。

【详解】

治疗性克隆：是指把克隆出来的组织和器官用于治疗疾病，这种用于医疗目的的使用克隆技术制造胚胎称为治疗性克隆。生殖性克隆：处于生殖的目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎。治疗性克隆和生殖性克隆最重要的差别是目的不同。五、实验题(共3题，共21分)28、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的筛选要根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找，要分离尿素细菌应该使用只含有尿素为唯一氮源培养基进行培养，这样的培养基其他细菌不能生存，存活下来的细菌则是可以分解尿素。

【详解】

（1）自然界中目的菌株的筛选要根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找，要获得分解尿素的细菌，应到含尿素较多的土壤中去取样，图2中培养基为微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲为液体培养基；乙为固体培养基，唯一的区别在于甲培养基内无琼脂；

（3）为了保证结果的准确性；一般应选择菌落数在30-300的平板进行计数，在30-300范围内的菌落数说明稀释比较成功；

（4）酚红遇碱变红；合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强；

（5）该小组采用稀释涂布平板法统计土壤溶液中活菌的数目时；统计的菌落数比活菌的实际数目低，是因为当两个或多个菌落连在一起时，只能统计一个菌落，细菌还可以使用显微镜直接计数。

【点睛】

熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与计数等相关基础知识、形成清晰的知识网络，在此基础上从题意中提取信息并进行作答。【解析】含尿素较多的土壤中葡萄糖尿素甲中培养基无琼脂30~300的平板（则说明稀释操作比较成功）合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强低显微镜直接计数29、略

【分析】【分析】

1；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

2；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

3；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）为了提高出汁率和澄清度；需要用果胶酶和纤维素酶处理，果胶酶可将果胶分解成半乳糖醛酸（和半乳糖醛酸甲酯）；考虑到成本和技术难度问题，通常采用压榨法提取精油；

（2）固定化酵母菌的流程是：酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞，故①为配制CaCl2溶液；海藻酸钠溶化时；最好采用小火间断加热的方法，避免海藻酸钠焦糊；

（3上述过程将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中；其固定酵母细胞的方法称为包埋法；酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化淀粉酶则不用此法进行固定；

（4）结合分析可知；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，加入蜜柚汁后，发酵装置中糖源充足，醋酸菌直接将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，故对乙醇的利用率迅速下降。

【点睛】

本题以利用蜜柚开发产品为情景，考查固定化酶和固定化细胞技术及果醋的制作，学生的理解能力和综合分析能力是解答本题的关键。【解析】半乳糖醛酸压榨CaCl2小火间断包埋酶分子较小，容易从包埋材料中漏出当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将蜜柚汁中的果糖分解成醋酸30、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体六、综合题(共4题，共36分)31、略

【分析】【分析】

1；植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。

2；人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；通过人工薄膜包装得到的种子。

3；人工种子包括胚状体、人工胚乳和人工种皮；其中胚状体是通过脱分化和再分化过程形成的；人工胚乳可为种子提供营养；人工种皮具有保护作用（可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育）

【详解】

（1）植物细胞工程最基本的技术是植物组织培养；它所利用的的生物学原理是细胞的全能性。

（2）植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程。微型繁殖技术即植物组织培养技术；属于无性生殖，能保持母本的优良性状，目前生产上采用茎尖分生组织离体培养方法快速繁殖脱毒种苗，以保证该品种的品质和产量。

（3）原生质体的融合过程；必须进行人工诱导，常用的化学方法是用聚乙二醇做诱导剂。植物体细胞杂交在育种工作中突出的优点是可以克服远缘杂交不亲合的障碍。

（4）人工种子包括胚状体；人工胚乳和人工种皮；其中主体部分是经过脱分化和再分化过程形成的胚状体。在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在人工种子结构的人工种皮中。

【点睛】

本题考查植物组织培养、植物体细胞杂交、人工种子的制备，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程、条件及意义再结合所学的知识准确答题。【解析】植物组织培养细胞的全能性脱分化用茎尖进行植物组织培养聚乙二醇克服远源杂交不亲和胚状体等人工种皮32、略

【分析】【分析】

分析题图可知；①为基因表达载体的构建，②为将重组质粒导入农杆菌，③为农杆菌侵染愈伤组织，④为植物组织培养。

【详解】

（1）步骤①为基因表达载体的构建；目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在；并可遗传给下一代，同时是目的基因能够表达和发挥作用。

（2）据图表可知，BamHI切割得到的黏性末端为-GATC，BglⅡ切割得到的黏性末端为-GATC，其黏性末端相同，故剪切后的目的基因能与质粒连接在一起；重组质粒形成后，在重组质粒上，不再有BglⅡ的识别位点，质粒上的切割位点会有EcoRI和BamHI，目的基因的编码顺序是从BamHI到BglⅡ，用EcoRI和BamHI会将正向连接的目的基因片段剪切去除；正向连接的重组质粒会被切去20+25=45kb长度的片段，反向连接的重组质粒会被切去20kb长度的片段；电泳凝胶中，DNA分子量越大，在凝胶中收到的阻力越大，迁移距离越短，正向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小介于反向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小之间，说明样品2是所需的基因表达载体。

（3）步骤②用Ca2+处理农杆菌获得感受态细胞；质粒中含有潮霉素抗性基因；故在步骤④的培养基中需要添加潮霉素以筛选出含目的基因的甘蓝