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文档简介
山东大学齐鲁医院宋欣燕孔北华研究背景肿瘤的发展也与周围微环境有关,二者相互作用影响肿瘤的生长、侵袭;因而,我们设想这种能支持正常发育过程的全能干细胞及其微环境能否逆转异常的肿瘤细胞表型。Nature,2007,448:1015-21StemCells,2006,24:501-505
JSurRes,2004,121:342
方法与路线
5-7周流产胎儿生殖嵴分离原始生殖细胞接种培养传代鉴定(AP,SSEA-1、3、4,OCT-4,TRA-1-60,TRA-1-81等)直接共培养EGcells与SKOV3cells研究EG细胞在体内对卵巢癌细胞生长的作用培养的EG细胞呈克隆样生长,边界清楚,似鸟巢状,AP染色阳性。HEG细胞鉴定结果A:SSEA-1B:SSEA-3C:SSEA-4D:TRA-1-60E:TRA-1-81结果HEG细胞的鉴定HEG自发分化共培养48h计数SKOV3cells实验组:(7.8±2.4)×104
对照组:(11.5±2.3)×104(p=0.0258)
结果TUNEL凋亡检测A、C:实验组B、D:对照组免疫细胞化学检测Caspase9的表达RealtimePCR检测AKTmRNA表达结果Westernblot检测p-akt、akt蛋白的表达结果
肿瘤生长曲线同期观察测量实验组肿瘤生长慢于对照组石蜡组织切片TUNEL凋亡检测结论与生殖干细胞体外共培养后,卵巢癌SKOV3细胞的生长显著受到抑制;体内注射实验也表明能够抑制肿瘤生长。Tunel结果初步表明:
此抑制现象可能是通过诱导凋亡途径发生。PI3Ks/Akt信号通路与肿瘤的发生发展密切相关,在人类肿瘤谱中广泛失调,
p-AKT可以通过激活或抑制下游的受体蛋白BAD、Caspase9等,进而调节细胞的增殖、分化、凋亡以及迁移等;本实验结果显示AKT信号通路参与了此诱导凋亡过程,表现为:
p-AKT表达减少,使凋亡抑制被解除;caspase-9被激活,引起SKOV3细胞的凋亡。干细胞对癌细胞的影响是通过胞外分泌形式还是细胞接触途径?需进一步验证。干细胞表达的产物多种多样,具体是哪些蛋白或蛋白多糖发挥了作用还需要进一步研究
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