2025年北师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年北师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷742考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b；c表示现代工程技术；①、②、③表示其对应的结果，下列说法正确的是（）

A.若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性B.若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同C.①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物D.若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能2、在胚胎移植过程中，很多操作步骤都需要“检查”，以避免后期人力、物力、财力的浪费，下列相关说法错误的是（）A.体外受精的受精卵移入特定培养液中培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力B.胚胎移植前，要对胚胎进行检查以确定其是否发育到桑椹胚或囊胚阶段C.在胚胎分割时，应取样内细胞团细胞做DNA分析，以检查胚胎的性别D.胚胎移植入受体母畜的子宫后，还需对受体母畜进行是否妊娠检查3、某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，正确的是（）A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板4、实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒B.做RT-PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针C.需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增D.病毒的检测还可以检测病毒引发产生的抗体，其原理是抗原-抗体杂交5、重庆忠州豆腐乳被业界称为“腐乳王”，因风味独特而盛销不衰，远销英国、加拿大、中东、东南亚等国家和地区，腐乳的制作流程为“让豆腐块长出白色菌丝（前期发酵）→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制”。下列相关说法正确的是（）A.腐乳制作过程中有多种微生物的参与，其中起主要作用的是曲霉B.霉菌分泌的蛋白酶等物质，能将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸C.加盐和卤汤腌制的目的仅仅是调味，并不能抑制瓶内杂菌的生长D.豆腐块相当于固体培养基，腌制用的玻璃瓶常用紫外线进行灭菌6、据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是（）

A.为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者B.DNA聚合酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键C.与启动子结合的是RNA聚合酶D.能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物7、二倍体马铃薯受核糖核酸酶基因（S-RNase）影响，普遍存在自交不亲和的现象——自交不产生种子，我国科研人员通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除了马铃薯的S-RNase基因，获得自交亲和的二倍体。马铃薯图示该技术的原理：由一条单链向导RNA引导内切核酸酶Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割。下列叙述错误的是（）

A.向导RNA和S-RNase基因识别结合的碱基互补配对方式与目标DNA双链中的碱基互补配对方式相同B.Cas9蛋白可催化磷酸二酯键水解，剪切特定DNA片段C.可让马铃薯自交看能否产生种子，从个体水平上检测该基因编辑技术是否成功D.向导RNA的序列越短，该基因编辑技术在编辑对象时出错的概率就越高8、新冠病毒包膜表面的S蛋白能识别人体细胞膜表面的ACE2受体并导致病毒入侵人体细胞。制备重组亚单位新冠疫苗的线路是：提取新冠病毒RNA→通过RT-PCR（反转录酶聚合酶链式反应）技术扩增筛选RBD蛋白（S蛋白中真正与ACE2结合的关键部分）基因（图1）→构建基因表达载体（图2）→导入CHO细胞并培养→提取并纯化RBD蛋白→制成疫苗。图3为利用电泳技术对PCR的产物进行纯度鉴定，1号泳道为标准（Marker），2号泳道为阳性对照组，3号泳道为实验组。下列相关叙述错误的是（）

A.利用RT-PCR技术获取RBD蛋白基因时，需加入逆转录酶、TaqDNA聚合酶B.利用PCR扩增含有限制酶切点的RBD蛋白基因时，应选择的引物为引物4、引物5C.2号泳道是以（提纯的）RBD蛋白基因片段为材料所做的阳性对照组D.为提高目的基因和运载体的正确连接效率，应选择限制酶EcoRI切割评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)9、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管10、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA11、下图是胚胎干细胞潜能示意图,相关叙述正确的是()

A.由细胞形态判断,4种细胞中细胞②最可能连续分裂B.胚胎干细胞能分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达C.分化得到的各种细胞,功能不同的主要差异是特定蛋白不同D.定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官,进行自体移植可避免免疫排斥反应12、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸检测。其原理是：先由病毒的RNA逆转录得到cDNA，然后对得到的DNA进行PCR扩增。在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每个DNA分子扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法错误的是（）

A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，经n次循环后，需要消耗荧光探针2n-1个C.C值越大表示被检测样本中病毒数目越多D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性13、将单克隆抗体与前体药物的专一性活化酶藕联（简称抗体导向酶偶联）是特异性治疗肿瘤并减少对正常细胞伤害的最新研究方向。碱性磷酸酶是抗肿瘤药物多柔比星前体的专一性活化酶，医学研究中利用抗体导向酶偶联机理将碱性磷酸酶与单克隆抗体制成“生物导弹”，通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤，进而抑制以DNA为模板进行的生理活动，达到治疗肿瘤的目的。下列说法正确的是（）A.为获得单克隆抗体应首先给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，得到能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程C.生物导弹综合利用了碱性磷酸酶的定向制导作用和单克隆抗体的特异性杀伤能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的细胞14、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基15、利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素原。下列相关叙述中，错误的是（）A.人和大肠杆菌在合成胰岛素原时，转录和翻译的场所是相同的B.DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖形成化学键C.通过检测发现大肠杆菌中没有胰岛素原产生，则可判断重组质粒未导入受体菌D.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有较高的生物活性评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、在课题1中，我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时，____________________。17、请回答下列有关生物技术的安全性和伦理问题：

（1）一些持支持态度的科学家认为，由于不同物种间存在__________，同时花粉的传播距离和__________有限；转基因农作物很难与其它植物杂交，因而不大可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中，绝大多数科学家都能自觉遵守科学研究道德。例如，把重组DNA的转移限制在遗传上具有___________的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的___________．

（3）一些持反对态度的科学家认为，由于克隆技术尚不成熟，现在就做克隆人很可能孕育出有严重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科学家则认为，一些技术问题可以通过胚胎分级、______和__________等方法得到解决。

（4）对于克隆技术，中国政府的态度是___________．但不反对___________。18、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。19、______——“分子手术刀”20、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。21、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。22、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____23、生物武器的致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，但对植物无害。（选择性必修3P111）()24、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)25、生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质的区别。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共18分)26、氨基丁酸（GABA）是具有降血压；抗焦虑等功能的水溶性氨基酸。科研人员通过实验研究了白方腐乳在前发酵盐腌和后发酵过程中GABA的含量变化；为寻找生产富含GABA腐乳的工艺奠定基础。实验步骤如下：

①豆腐白坯表面接种毛霉孢子后；在适宜的温度和湿度下培养48h，获得毛坯。

②将毛坯分层整齐地摆放在瓶中；盐腌5天。

③腌制后加入卤汤；置于28℃恒温箱中后发酵90天。

④分别采集各时段的腐乳坯样品；测定GABA含量，结果如图。

请分析并回答问题：

（1）前发酵过程中，毛坯的GABA含量发生明显变化的原因是毛霉产生的_______促进蛋白质水解产生GABA。

（2）步骤②中，加盐腌制的正确操作是______________。此过程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA会____________而导致测定值减小。

（3）后发酵所加的卤汤中，具有抑菌防腐和调味的成分主要有_______。此过程中，发酵_______天后的白方腐乳出厂销售比较适宜。27、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。28、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共24分)29、营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后；微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。回答下列问题：

(1)过程①的接种方法为______，平板倒置可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，以免造成污染。用此方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______。

(2)从培养基成分分析，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是______。

(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定；实验人员进行了如下操作：

①用接种针挑取菌落______（填“A”或“B”）接种于盛有完全培养液的离心管中；28℃振荡培养1～2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。

【规律提炼】由此可知，营养缺陷菌株在基本培养基和完全培养基上生长的特点是：___________________________________

②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在______（填“皿盖”或“皿底”）划分A、B、C、D、E五个区域。③在划分的五个区域对应的培养基上放入少量分组的氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。组别所含氨基酸A组氨酸苏氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸苏氨酸赖氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸赖氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸丝氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸丝氨酸

在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该氨基酸缺陷型菌株属于______缺陷型。30、金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性；感染人体易导致肺炎肠炎等。某人饮用鲜牛奶后出现肠胃不适，怀疑是鲜牛奶中含有金黄色葡萄球菌导致，为验证这一推测，进行了如图实验。

回答下列问题。

(1)实验中所用的肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括水、无机盐、__________等；从培养过程分析，振荡培养的目的是__________；从功能分析，该培养基属于__________培养基。

(2)接种环节除本实验中方法外，还有__________；后者除用于分离微生物外，还常用于统计样品中活菌的数目，依据是__________。

(3)金黄色葡萄球菌在血平板上生长时会破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。经过实验，发现血平板上菌落周围出现__________，初步证明鲜牛奶中含有金黄色葡萄球菌。若要对本实验进一步完善，可增设一组对照，该组的处理是__________。31、科研工作者将柽柳匙叶草液泡膜IIa+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内；获得了耐盐新品种。图1是含有目的基因的DNA片段，Sau3AI；EcoRI、BamHI为三种限制酶（Sau3AI、BamHI切割形成的黏性末端相同）；图2是农杆菌Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：

(1)目前常用_____方法从柽柳叶草基因组中获取TaNHX2基因，该方法需有分别与两条模板链结合的2种引物，引物是_____。

(2)计划用EcoR1分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒；以构建基因表达载体。

①构建表达载体的目的是_____需要的工具酶是_____。

②本方案的缺陷是：可能导致_____以及目的基因与质粒的反向连接。

③为避免上述缺陷，最佳方案是用_____切割图1的DNA，用_____切割图2质粒。

(3)目的基因成功导入受体细胞后，还需要利用_____技术才能得到转基因棉花苗，这一技术的原理是_____。

(4)要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是_____。32、面对新冠疫情；最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测，原理为实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测法，技术流程如下图所示，①②③表示相关步骤。请回答：

(1)PCR技术与DNA体内复制过程相比，两者的复制方式都是______。RT-PCR过程中，需先以RNA为模板合成cDNA，故装置中需添加______酶。装置中加入引物的作用是______。

(2)过程①中，RNA提取裂解液可同时灭活病毒，原因是______。RNA酶抑制剂的作用是______。

(3)检测新型冠状病毒的方法还可采用抗原检测和抗体检测。这些检测方法的原理是______。对于新型冠状病毒疑似患者早期确诊，抗体检测比核酸和抗原检测滞后的原因是____________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

1；动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。

2；体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精；该技术产生的动物称为试管动物。

3；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

【详解】

A；通过核移植技术获得动物个体只能证明动物细胞的细胞核具有全能性；A错误；

B；胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割成多份；获得多个后代个体，属于无性繁殖系，获得的个体的基因型一定相同，但是表现型是基因型和环境条件共同作用的结果，B错误；

C；珍稀的或存量少的雌性动物属于保护动物；不能作为生物工程的受体，应该用本地中数量较多的雌性动物，C错误；

D、若b是体外受精技术；则②为试管动物，这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。

故选D。

【点睛】2、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

AB；哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。精子与卵子在体外受精后；应将受精卵移入发育培养基中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，并将其培养至桑椹胚或囊胚进行胚胎移植，所以胚胎移植前，要对胚胎进行检查以确定其是否发育到桑椹胚或囊胚阶段，AB正确；

C；在胚胎移植前；若要对胚胎的性别进行鉴定，应取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，C错误；

D；胚胎移植入受体母畜的子宫后；还需对受体母畜进行是否妊娠检查，以保证其为移植的胚胎提供孕育的条件，D正确。

故选C。3、C【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A、分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源；A错误；

B；倒平板时；不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，正确的做法是：用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；

C、无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定；C正确；

D；在完全正确的操作情况下；空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染（或培养基不合格），属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。

故选C。

【点睛】4、A【分析】【分析】

根据题意；通过病毒的RNA进行逆转录产生cDNA，cDNA在PCR过程中解旋后可以和引物一起与模板结合，探针两侧有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，延申过程DNA酶破坏了探针使淬灭基团分离后发出荧光而检测到是否有cDNA来判断是否有病毒。

【详解】

A；若检测结果有强烈荧光信号发出；说明被检测者体内有该病毒RNA，即被检测者感染病毒，A错误；

B；PCR需要根据目的基因的核苷酸序列合成引物；同时RT-PCR还需要探针与待测样本DNA混合，B正确；

C；PCR扩增必须以DNA为模板；RNA不能作为PCR扩增的模板，所以需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增，C正确；

D；RNA病毒的检测还可以通过特异性抗体检测；即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体，原理是抗原-抗体杂交，D正确。

故选A。

【点睛】5、B【分析】【分析】

腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【详解】

A；参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，A错误；

B；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶；将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸，B正确；

C；加盐腌制和加卤汤的目的是抑制瓶内杂菌生长的同时又能调制腐乳的风味；C错误；

D；豆腐块相当于固体培养基；能为微生物发酵提供营养条件等，在密封腌制时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，用灼烧法进行灭菌，以防止瓶口被污染，D错误。

故选B。6、D【分析】【分析】

基因表达载体的构建：1；过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。2、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

【详解】

A；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ识别的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同时切割目的基因和质粒可防止二者任意结合，A正确；

B；DNA聚合酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键；前者是连接单个的脱氧核苷酸，后者是连接DNA片段，B正确；

C；启动子和终止子都是一段有特殊结构的DNA片段；其中启动子是RNA聚合酶的结合位点，能启动转录过程，而终止子能终止转录过程，C正确；

D；重组DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的检测与鉴定；但是有目的基因也不一定成功表达，D错误。

故选D。7、A【分析】【分析】

由图分析可知；向导RNA可识别S-RNase基因一条链并与之配对，引导内切核酸酶Cas9蛋白到特定的基因位点进行切割，以敲除马铃薯的S-RNase基因。

【详解】

A；向导RNA和S-RNase基因识别结合的碱基互补配对方式存在U-A；而目标DNA双链中的碱基互补配对方式为T-A，A错误；

B；Cas9蛋白为内切核酸酶；可催化磷酸二酯键水解，以剪切特定DNA片段，B正确；

C；二倍体马铃薯原本自交不产生种子；该基因编辑技术成功后可产生种子。故可让马铃薯自交看能否产生种子，从个体水平上检测该基因编辑技术是否成功，C正确；

D；向导RNA的序列越短；与其他基因片段结合的概率越大，该基因编辑技术在编辑对象时出错的概率就越高，D正确。

故选A。8、D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，利用的原理是DNA复制，需要条件有模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），过程包括：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；RT-PCR技术是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术；利用RT酶PCR技术，获取S蛋白基因时，需加入逆转录酶、Taq酶，A正确；

B；引物与模板链的3'端碱基互补配对；故引物1、引物2、引物7和引物8不合适，扩增得到的RBD蛋白基因也应该含有限制酶的酶切位点，故引物3和引物6不合适，故选引物4和引物5，B正确；

C、PCR的产物可通过电泳鉴定，设置如下：1号泳道为标准（Marker）；2号泳道是以RBD蛋白基因片段为材料做的阳性对照组，3号泳道为实验组，C正确；

D；质粒上没有SmaⅠ酶切位点；且若使用EcoRⅠ酶切，易造成目的基因和质粒自身环化，故应该选择BamHⅠ和HindⅢ，D错误。

故选D。二、多选题(共7题，共14分)9、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。10、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。11、A:B:C:D【分析】【分析】

干细胞：在个体发育过程中；通常把那些具有自我复制能力，并能在一定条件下分化形成一种以上类型的细胞的多潜能细胞称为干细胞。

（1）全能干细胞：如胚胎干细胞；

（2）多能干细胞：如造血干细胞；

（3）专能干细胞：如骨髓瘤细胞；皮肤生发层干细胞。

【详解】

A；由细胞形态判断；①为精细胞，③为肌肉细胞，④为神经细胞，这3种细胞都是高度分化的细胞，所以推测图示4种细胞中细胞②分化程度最低，最可能连续分裂，A正确；

B；胚胎干细胞分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达；B正确；

C；分化得到的各种细胞；功能不同的主要差异是特定蛋白不同，C正确；

D；定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官；进行自体移植可避免免疫排斥反应，D正确。

故选ABCD。

【点睛】12、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；基因扩增过程中需要特定的引物；该引物的作用是定位基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点，扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上，A错误；

B、若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，每个DNA分子需要1个探针，扩增n次，可得到2n个DNA分子，则共需要消耗2n-1个探针；B错误；

C；由题可知C值越大；该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大，即每次循环出现的荧光信号越少。每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少，C错误；

D；如果样本内的病毒RNA被降解；会导致无法检测出样本内的正确病毒数目，D正确。

故选ABC。13、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体制备过程中；需要给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，刺激小鼠产生体液免疫，才能得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；

B；制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程；第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；生物导弹综合利用了单克隆抗体的定向制导作用和碱性磷酸酶的特异性杀伤能力；C错误；

D；根据题干信息“通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤；进而抑制以DNA为模板进行的生理活动”，说明多柔比星还可以抑制细胞的转录过程，而不增殖的细胞也具有转录过程，D错误。

故选AB。14、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。15、A:C:D【分析】【分析】

大肠杆菌是原核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜；核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行。

【详解】

A；人体胰岛细胞是真核细胞；在合成胰岛素原时，转录在细胞核中进行，翻译在细胞质的核糖体上进行，原核细胞没有细胞核，A错误；

B；DNA连接酶能在两个相同黏性末端配对后的磷酸与脱氧核糖之间形成化学键（磷酸二酯键）；B正确；

C；通过检测；大肠杆菌中没有胰岛素原产生，不能判断重组质粒未导入受体菌，也可能是导入后没有表达，C错误；

D；大肠杆菌是原核生物；没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，D错误。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌17、略

【分析】1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

3；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；生物安全主要是指转基因生物释放到环境中，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。

【详解】

（1）一些持支持态度的科学家认为；由于不同物种间存在生殖隔离，同时花粉的传播距离和存活时间有限，不会造成转基因农作物与其它植物的杂交，因而也不太可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中；为保证转基因生物的安全，要把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的蛋白质等等。

（3）坚持克隆人的科学家则认为；一些技术问题可以通过胚胎分级；基因诊断和染色体检查等方法得到解决。

（4）中国政府对于克隆技术的态度是禁止生殖性克隆；但不反对治疗性克隆。

【点睛】

本题难度一般，属于考纲中识记、理解层次的要求，结合基因工程的应用，综合考查了基因工程、试管婴儿和转基因生物的安全性问题，并且深入考查了相关基础知识，要求考生能够构建一定的知识网络．面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。【解析】①.生殖隔离②.存活时间③.特定缺陷④.蛋白质⑤.基因诊断⑥.染色体检查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治疗性克隆18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1422、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药23、略

【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，同时可毁坏植物，该说法错误。【解析】错误24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、判断题(共1题，共8分)25、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质区别；最重要的体现在目的不同。

【详解】

治疗性克隆：是指把克隆出来的组织和器官用于治疗疾病，这种用于医疗目的的使用克隆技术制造胚胎称为治疗性克隆。生殖性克隆：处于生殖的目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎。治疗性克隆和生殖性克隆最重要的差别是目的不同。五、实验题(共3题，共18分)26、略

【分析】【分析】

腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

1；让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。

2；加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中；同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐研制的时间约为8d左右．加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

3；加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。

4；密封腌制。

【详解】

（1）前发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶促进豆腐中的蛋白质水解产生GABA，使得毛坯的GABA含量明显升高。

（2）步骤②中；加盐腌制的正确操作是将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。此过程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食盐会抑制毛霉生长，酶的活性降低；②豆腐中的水分渗出，部分GABA会溶解于水而导致测定值减小。

（3）卤汤是由料酒及各种香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。后发酵过程中GABA的含量变化曲线图显示，在60天以后，GABA的含量达到最大值且保持相对稳定，所以此时出厂销售白方腐乳比较适宜。

【点睛】

解答本题的关键是掌握腐乳的制作的相关流程和知识要点，主要依靠学生对课本知识的理解和掌握，并结合题目中所给的GABA为水溶性氨基酸这一关键信息回答问题，同时需要学生在做题时思考符合经济效益的选择。【解析】蛋白酶逐层加盐随着层数的加高增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些随水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6027、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异28、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。六、综合题(共4题，共24分)29、略

【分析】【分析】

分析题图；图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基；完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。

【详解】

（1）根据过程①培养的效果图可以判断；该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法；平板倒置可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，以免造成污染；用稀释涂布平板法接种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落。

（2）在基本培养基中；氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此从完全培养基上可获得相应的营养缺陷型菌株。

（3）①在基本培养基中；氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此图中菌落A应该为氨基酸缺陷型菌株，则用接种针挑取菌落A接种于盛有完全培养液的离心管中。

②由于平板倒置；故待其冷凝后用记号笔在皿底划分A；B、C、D、E五个区域。

③表中信息显示：A、D区域含有、其它区域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而实验结果只有A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于天冬氨酸缺陷型。【解析】(1)稀释涂布平板法低。

(2)氨基酸。

(3)A氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长，而在完全培养基中能够生长皿底天冬氨酸30、略

【分析】【分析】

微生物培养需要配置供其生长繁殖的营养基质——培养基；培养基中一般含有水