第十三章巴比妥类药物的分析课件

第五章巴比妥类药物的分析

巴比妥类药物是一类临床常用的催眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒。本章重点介绍巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系，介绍鉴别、检查和含量测定的原理与方法。一、巴比妥类药物的基本结构通式

5,5-取代的巴比妥类药物

5区别各种巴比妥类药物

环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性

1.环状母核部分2.取代基部分二、理化性质（一）物理性质

1.白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点。

2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。

化学性质

巴比妥类药物分子结构中都有1,3-二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成水溶性的盐类。1.弱酸性与强碱的成盐反应：2.水解反应

（1）与银盐的反应

3、与重金属离子的反应（2）与铜盐的反应

有色配位化合物（3）与钴盐的反应

无水;所用试剂均应不含水分。反应条件：碱性：异丙胺（4）与汞盐的反应巴比妥类药物+汞盐→白色↓（可溶于氨试液）4、与香草醛（vanillin）的反应

紫色-蓝色乙醇5、紫外吸收光谱特征H2SO4溶液(0.05mol/L)pH9.9缓冲溶液NaOH溶液(0.1mol/L)(pH13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱Anm硫喷妥的紫外吸收光谱HCl溶液(0.1mol/L)NaOH溶液(0.1mol/L)巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离的程度有关

5,5-取代的巴比妥类药物在pH=2的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。在pH=10的碱性溶液中，发生一级电离于240nm处有最大吸收。在pH=13的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至255nm处。硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收。

7、显微结晶特征药物本身的晶形巴比妥：长方形；苯巴比妥：球形→花瓣状反应产物的晶形巴比妥＋铜吡啶试液→十字形紫色结晶苯巴比妥＋铜吡啶试液→细小不规则或似菱形的浅紫色结晶6、薄层色谱行为特征对照品对照鉴别（1）与银盐的反应、（二）铜盐反应二、鉴别试验（一）、丙二酰脲类反应（二）熔点测定巴比妥类的钠盐＋酸→游离巴比妥类药物↓→过滤→洗涤→干燥→测熔点苯巴比妥钠的鉴别取本品约0.5g，加水5ml溶解后，加稍过量稀盐酸，即析出白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用水洗净，在105℃干燥后，依法测定，熔点为174-178℃。

司可巴比妥可使溴试液或碘试液褪色不饱和烃取代基的反应①与溴试液或碘试液的反应②与KMnO4的反应可还原紫色的KMnO4为棕色的MnO2（三）、特殊取代基及元素的反应②与NaNO2—H2SO4反应

苯巴比妥与甲醛—H2SO4反应生成玫瑰红色

苯巴比妥与NaNO2—H2SO4反应生成橙黄色→橙红色③与甲醛—H2SO4反应①硝化反应芳香取代基的反应硫元素的反应

（四）、钠盐的鉴别反应1.焰色反应取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色

2.与醋酸氧铀锌反应取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色↓（五）、红外分光光度法第三节特殊杂质检查一、苯巴比妥的特殊杂质检查

酸度乙醇溶液的澄清度中性或碱性物质二、司可巴比妥钠的特殊杂质检查

溶液的澄清度中性或碱性物质

终点指示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示

一、银量法1.原理：反应摩尔比（1∶1）溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠第四节含量测定

苯巴比妥：

取本品约0.2g，精密称定，加甲醇40ml使溶解，再加新制的3％无水碳酸钠溶液15m1，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸银滴定液（0.1mo1/L）相当于23.22mg的C12H12N2O3。

2.测定方法与计算原料药：直接滴定法

3.注意事项（1）无水碳酸钠应新鲜配制（2）AgNO3滴定液应新鲜配制（3）银电极使用前应进行处理

凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。如司可巴比妥钠及其胶囊的测定二、溴量法1.原理

I2＋2Na2S2O3＝2NaI＋Na2S4O6KBrO3＋5KBr＋6HCl＝3Br2＋6KCl＋3H2O

Br2＋2KI＝2KBr＋I2司可巴比妥钠：取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10m1，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加盐酸5m1，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10m1，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。2.测定方法与计算原料药：剩余滴定法

3.注意事项（1）操作中要防止溴和碘的逸失（2）平行条件进行空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差。1.在水—醇混合溶剂中的滴定法弱酸性pKa7.3～8.4异戊水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡蓝色（三）、酸碱滴定法此法终点判断较困难

取本品约0.5g，精密称定，加乙醇20m1溶解后，加麝香草酚酞指示液6滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每lml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。

异戊巴比妥的含量测定

溶剂：二甲基甲酰胺滴定剂：甲醇钠（钾）指示剂：麝香草酚蓝

3、非水溶液滴定法2、在胶束水溶液中进行的滴定法

溶剂：表面活性剂-溴化十六烷基三甲基苄胺水溶液滴定剂：氢氧化钠滴定液指示剂：麝香草酚肽

四、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法

本法是将样品溶解后，根据溶液的pH值选用其相应的

max处进行直接测定。单组分定量方法：1.吸收系数法2.标准曲线法

3.对照法

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于硫喷妥钠0.25g），置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀释制成每1ml中约含5g的溶液；另取硫喷妥对照品，精密称定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5g的溶液。照分光光度法，在304nm的波长处分别测定A，根据每支的平均装量计算。每1mg硫喷妥相当于1.091mg的C11H17N2NaO2S。如注射用硫喷妥钠的含量测定（2）经提取分离后的紫外分光光度法根据巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶的特点，本法可消除干扰物质对巴比妥类药物测定的影响。取钠盐加水溶解，加酸酸化，用氯仿提取后再加碱反提。排除辅料或杂质的干扰。

1、测定方法-取两份相等的供试溶液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱或缓冲液改变溶液的pH，或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差值（

A值）。（3）多组分混合物不经分离的定量方法

——计算分光光度法差示分光光度法（

A法）2.必要条件

（1）供试品在不同的化学环境中以不同的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的差异。（2）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。

供试品在两种不同的化学环境中分别以x、y表示，干扰物用z表示3.定量依据即，吸收度差值（

A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。

可用对照法或标准曲线法定量

保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。4.特点5.应用（1）于波长240nm处，测定pH10和pH2两种溶液的吸收度之差（2）于波长260nm处，测定pH10和强碱溶液的吸收度之差（五）、高效液相色谱HPLC法同时测定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的浓度色谱条件：色谱柱AgilentZORBAXSB-C18柱(250×4.6mm,5µm),流动相为甲醇∶水∶乙腈(45∶45∶10）流速1.0ml/min,柱温30℃,检测波长254nm。血样处理：取内标溶液100µL，60℃水浴氮气吹干，加200µL待测血清,加提取液（氯仿：乙酸乙醋=50：50）2ml,旋涡混合5min,以4000转/分离心10min,用吸管吸取上层水层,弃去。用移液管移取有机相置带盖尖底塑料离心管中,于60℃水浴中氮气吹干,用流动相200µL溶解,取20µL进样测定方法验证：标准曲线与线性、精密度（RSD<3%)、方法回收率、提取回收率（大于87%）、稳定性等均符合中国药典的要求（六）电泳法-体内苯巴比妥、巴比妥测定（七）气相色谱-质谱联用体液中七种巴比妥类药物的同时测定，前处理方法为固相微萃取1、字体安装与设置如果您对PPT模板中的字体风格不满意，可进行批量替换，一次性更改各页面字体。在“开始”选项卡中，点击“替换”按钮右侧箭头，选择“替换字体”。（如下图）在图“替换”下拉列