2025年粤人版选修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤人版选修3生物下册阶段测试试卷386考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、分析下面图解；判断以下哪一项不是精子；卵细胞发生的区别()

→

A.初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间B.MⅠ和MⅡ的时间连续性C.成熟生殖细胞是否经过变形D.成熟生殖细胞中染色体的数目2、传染病传染性最强的时候是（）A.未发病前B.发病初期C.发病最严重时期D.恢复期3、下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（）。成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏水含量10g10g2g0．4g0．065g1万单位适量1000ml

A.此培养基属于天然鉴别培养基，其中的氮源来自于牛肉膏B.能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因C.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D.此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中4、抗菌肽对治疗癌症有一定作用；下图表示抗菌肽合成过程。下列有关叙述错误的是。

A.用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶B.基因表达载体含有启动子和终止子C.筛选菌种时用基因探针检测相关蛋白质D.分离纯化的目的是获得较纯净的抗菌肽5、下图是基因文库的构建和获取目的基因的示意图。

下列叙述正确的是（）A.通过该途径获得的目的基因，通常是序列已知的B.①过程通常只用一种DNA酶切割全部DNAC.③过程需用CaC12处理，使大肠杆菌细胞壁的通透性增加D.④过程可用相应抗体，利用核酸分子杂交技术钓取目的基因6、微生物培养过程中；十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（）

①煮沸消毒可以杀死所有微生物；包括芽孢和孢子。

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行。

③无菌繁殖脱毒苗时；植物的外植体要进行消毒。

④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌。

⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌。

⑥植物组织培养、动物细胞培养、无土栽培都需要在无菌无毒环境中进行A.①③④B.②④⑥C.①③⑤D.①④⑥7、下图表示精子入卵后；发生（或引起的）一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述错误的是（）

A.图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子的减数第二次分裂B.经图中Y过程只形成了雌原核C.精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合D.精子入卵后精子的尾部留在外面，并在溶酶体的作用下自溶评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)8、利用农杆菌转化法可将抗虫基因导入玉米细胞而获得抗虫植株。下列说法正确的是A.若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术B.将重组的农杆菌Ti质粒喷洒到玉米伤口上，可成功转化C.利用害虫接种实验可从分子水平检测目的基因是否进入了玉米细胞D.将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物9、人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。下列叙述中，正确的是（）A.一旦发现转基因生物出现了安全性问题，应该马上停止实验，并销毁重组生物B.应该严格地选择转基因植物的目的基因，以避免产生对人类有害的物质C.转基因生物不会对生物多样性构成威胁，也不会影响生态系统的稳定性D.外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果10、所谓“设计试管婴儿”，是指将体外受精形成的胚胎（几个细胞期）在植入母体孕育前，将一个细胞取出进行某些基因检测，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。下列有关叙述正确的是（）A.“设计试管婴儿”应用了细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术B.与“设计试管婴儿”相比，“试管婴儿”不需要经过遗传学诊断C.“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都是有性生殖D.对于“设计试管婴儿”技术，我们应该强行禁止、反对争论11、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞；制备流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，可注射孕激素促进雌鼠产生更多的卵子B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.细胞a、b均是胚胎干细胞的良好来源，可在饲养层上分裂、分化12、下图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法不正确的是（）

A.图中A所示细胞将来能够发育成胎膜和胎盘B.胚胎干细胞的体积和细胞核都较小C.胚胎干细胞可以增殖而不发生分化D.利用胚胎干细胞培养的人造器官正在大规模应用13、下列关于生态系统和生态工程的叙述，正确的是（）A.生态系统中遗传基因库越丰富，营养结构越复杂，恢复力稳定性越强B.生态工程的特点是少消耗、多效益、可持续C.治理沙漠的目的是要消除沙漠，改善环境D.退耕还林、还湖可防止由于过度开垦土地种植粮食所导致的水土流失评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)14、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______15、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。16、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。17、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。18、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。19、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。20、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。21、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共40分)22、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误23、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误24、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误25、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误26、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共16分)27、人的血清白蛋白在临床上需求量很大；通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）

等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增；使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：

a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞；形成重组细胞①；

b．取出重组细胞①的细胞核；注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；

c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；

d．将胚胎移植到母牛的子宫内；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

(1)重组细胞①和②中________________（①/②）实现了基因的重组。

(2)在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是_________________。

(3)实验过程b利用的技术是________________，胚胎工程操作中最后环节是________________。

(4)若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型________________（相同/不同），理由是________________，此项技术称为________________。

(5)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用________________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是________________细胞。

(6)哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________________等物质。28、研究者取野生型小鼠（I+I-）的胚胎干细胞转入胚胎干细胞，用含新霉素抗性基因替换I+基因的外显子2片段使其变为失去功能的I-基因，再将突变的胚胎干细胞移回野生型小鼠胚胎，培育出带突变基因（I-）的杂合子小鼠。用此杂合体小鼠与野生型小鼠进行杂交实验，并通过DNA分子杂交技术检测小鼠的基因型，结果如图b。

（1）检测小鼠的基因型；需根据______序列设计DNA分子探针。根据杂交实验结果推测，I基因的功能是与_______有关。

（2）分析系谱图______（能/不能）判断I+、I-基因的显；隐性；理由是_____________。

（3）只有突变基因来自_______（父本/母本）时；杂合子小鼠才表现出发育迟缓，由此推测来自______的I基因在体细胞中不表达。

（4）为验证以上推测；提取小鼠体细胞的总RNA，检测Actin基因（编码细胞骨架蛋白）和新霉素基因的RNA，请将支持推测的实验结果填入下表i；ii、iii处。（能检测到用“+”表示，检测不到用“-”表示）

。

野生型小鼠。

突变基因来自父本的杂合子小鼠。

突变基因来自母本的杂合子小鼠。

Actin基因的RNA

+

+

+

新霉素抗性基因的RNA

i____

ii_________

iii_________

（5）若人类的某种遗传病以此种方式遗传，用常规的基因诊断能否确定胎儿是否发病？如果能请说明理由；如果不能，请提出一种确诊胎儿是否发病的检测方案。_________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共28分)29、人乳铁蛋白（hLF）对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如下图。RT-PCR过程需先进行逆转录合成DNA，然后再进行PCR。图中AseI、NheI、SalI、BamHⅠ代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因；BLG基因为B乳铁蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。回答下列问题：

(1)过程①中用到的酶是____________，经过程①得到的hLH基因不具有的结构是___________（至少答出2个）。

(2)过程②需要用___________酶处理pEB质粒和添加了相应识别序列的hLH基因；已获得重组质粒。

(3)过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是___________。GFP基因的作用是___________。

(4)过程③中用到的脂质体是由磷脂分子构成的，脂质体介导利用的原理是____________。若要将hLF基因导入植物细胞中表达，可采用的方法有_____________（答2种）。30、杂交水稻虽然性状优良；但在有性繁殖过程中，具有高产等优良特性会出现分离。由此，杂交作物的后代（杂种植物）无法保持同样的优良性状。在研究过程中，科研人员发现了一个关键的B基因，为探究其作用，进行了如下研究。

（1）绿色荧光蛋白基因（GFP）在紫外光或蓝光激发下，会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。将绿色荧光蛋白基因（GFP）与野生型水稻的B基因利用____________酶形成融合基因，转入到普通水稻获得转基因水稻（B-GFP），该变异属于___________。

（2）将野生型水稻与转基因水稻进行杂交或自交；授粉2．5小时后，利用免疫荧光技术检测胚中B基因的表达情况，请完成下表和问题。

。杂交组合。

♀B—GFP×♂野生型。

♀野生型×♂B—GFP

♀B—GFP×♂B—GFP

预期结果。

具荧光：无荧光=1：1

_____________

实际结果。

无荧光。

全部具荧光。

1/2具荧光。

根据结果可知只有来自________________________（父本/母本）的B基因表达，而出现了上述实验现象，并没有表现出________________________定律的特征。

（3）研究人员进一步检测授粉6．5小时后的受精卵，发现来自于母本的B基因也开始表达。由此推测，可能是来自于父本B基因的表达__________________（促进/抑制）后期来自于母本中的该基因的表达；从而启动胚的发育。

（4）研究人员设想：可以使野生型水稻（杂种植物）在未受精的情况下；诱发卵细胞中B基因表达，发育为胚。研究人员进行了如下图操作，请你根据技术操作及相关知识回答问题：

①卵原细胞经M技术处理后进行____________________分裂形成卵细胞。

②精细胞参与了形成_____________________的过程，卵细胞在未受精情况下发育为新个体，该育种方式的优势是_________________________。31、通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势（甲耐盐，细胞中含M条染色体;乙高产，细胞中含有N条染色体）；培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题。

（1）B是____________，D是具有____性状的幼芽。

（2）由C形成植株的过程利用了______技术。愈伤组织形成D需要经过____过程。整个培养过程要在____和人工控制条件下进行。

（3）植物体细胞融合完成（成功）的标志是_________。

（4）从理论上讲，目的植株的染色体的数目为_____。这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于__________。

（5）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律?______。32、如图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究；请据图分析回答：

（1）图示中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从____________或____________中分离获取。

（2）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了__________________。该过程对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

（3）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有_______________的特点。

（4）进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作。

（5）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意对________________；以免影响胚胎的恢复和进一步发育。

（6）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_______________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、D【分析】【分析】

哺乳动物精子和卵子发生的不同点：

（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一。（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；

（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的；MⅡ是在受精过程中完成的；

（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。

【详解】

A；初级精母细胞和初级卵母细胞的形成时间不同；A正确；

B；精子形成过程中；MI和MII在时间上是连续的，而卵细胞形成过程中，MI和MII在时间上不是连续的，B正确；

C；精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形，C正确；

D；精子和卵细胞中的染色体数目相同；都是体细胞的一半，D错误。

故选：D。2、B【分析】【分析】

传染病是指由病原体引起的；能够在人与人之间；人与动物之间传播的疾病，具有传染性和流行性的特点，病原体是能引起人和动植物传染病的微生物和寄生虫的统称。

【详解】

传染病的流行必须同时具备三个环节：传染源（能够散播病原体的人或动物）、传播途径（病原体离开传染源到达健康人所经过的途径）、易感人群（对某种传染病缺乏免疫力而容易感染该病的人群），而传染病传染性最强的时候往往在传染病的发病初期表现出症状时，因此对传染病要做到早发现、造治疗、早隔离。综上所述，B正确，A、C、D错误。3、D【分析】【分析】

据表分析：该培养基中加有伊红美蓝；可用于鉴别大肠杆菌，同时加的青霉素还使该培养基具有选择作用。培养微生物的培养基的营养成分主要有碳源；氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等。

【详解】

A；牛肉膏可为培养的微生物提供氮源；根据分析可知，此培养基可用于鉴定大肠杆菌，由于牛肉膏中的具体成分不确定，所以属于天然培养基，另外其中的青霉素还使该培养基具有选择作用，A错误；

B；抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上；B错误；

C；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准；不能检测其它细菌含量，C错误；

D；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌；此培养基含有青霉素，能筛选含有青霉素抗性基因的生物，可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，D正确。

故选D。4、C【分析】【分析】

1；PCR技术。

①概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；

②原理：DNA复制；

③条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

2；基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

3；目的基因的检测与鉴定：基因探针--用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段。

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

【详解】

A；用PCR克隆目的基因时；利用高温变性，不需要DNA解旋酶，A正确；

B；基因表达载体一般由目的基因、标记基因、启动子和终止子等组成；B正确；

C；基因探针可检测目的基因是否导入受体细胞或目的基因是否转录成mRNA；但不能检测相关蛋白质，C错误；

D；分离纯化的目的是获得较纯净的抗菌肽；D正确。

故选C。5、C【分析】【分析】

基因文库指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段；导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。

【详解】

A；题中的目的基因序列未知；是从基因文库中分离出来的，A错误；

B；①过程使用限制性核酸内切酶；其识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列，B错误；

C、转化前用CaCl2处理大肠杆菌；可使其细胞壁的通透性增大，C正确；

D；④过程可用特定的基因探针；利用核酸分子杂交技术钓取目的基因，D错误。

故选C。

【点睛】

常用钙离子处理法将目的基因导入微生物细胞，用显微注射法将目的基因导入动物细胞。6、D【分析】【分析】

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞；芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程．常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢；①错误；

②酒精灯火焰附近存在一个无菌区；为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；

③无菌繁殖脱毒苗；植物的外植体要进行消毒，③正确；

④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌；所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；

⑤培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌；⑤正确；

⑥动物细胞培养与植物组织培养过程中均需要灭菌处理；需要在无菌无毒环境中进行，无土栽培的培养基应含有各种必需矿质元素，但不需要灭菌，⑥错误。

综上错误的选项有①④⑥；D正确。

故选D。

【点睛】7、B【分析】透明带反应形成第一道屏障，卵细胞膜反应形成第二道屏障，在受精过程中卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体，形成雌原核，A正确，B错误；精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合，C正确；尾部留在外面并在溶酶体的作用下自溶，D正确。二、多选题(共6题，共12分)8、A:D【分析】【分析】

农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）：

①农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物；对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。

②转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上进入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

【详解】

A；PCR技术是体外复制特定目的基因片段的技术；若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术，A正确；

B；将重组的农杆菌Ti质粒导入农杆菌；再用农杆菌去侵染玉米才可能成功转化，B错误；

C；利用害虫接种实验可从个体水平检测目的基因是否进入了玉米细胞；C错误；

D；将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物；导致基因污染，D正确。

故选AD。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，解题关键是识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项。9、A:B:D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；一旦发现转基因生物出现了安全性问题；应该马上停止实验，并销毁重组生物，避免对安全造成影响，A正确；

B；应该严格地选择转基因植物的目的；使用安全基因为目的基因，以避免产生对人类有害的物质，B正确；

C；转基因生物有可能产生新的生物；可能会对生物多样性构成威胁，也可能会影响生态系统的稳定性，C错误；

D；外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；有可能会出现意想不到的后果，因此存在安全性问题，D正确；

故选ABD。

【点睛】10、B:C【分析】【分析】

试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；“设计试管婴儿”没有应用细胞核移植技术；A错误；

B；“试管婴儿”技术不需要检测基因；也不需要经过遗传学诊断，B正确；

C；“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都需要体外受精；都是有性生殖，C正确；

D；“设计试管婴儿”不同于为解决不孕夫妇的生育问题出现的试管婴儿。一般是为了救治病人；需要试管婴儿的骨髓、干细胞、脐带血等，这样的设计都符合伦理道德，D错误；

故选BC。11、A:C:D【分析】【分析】

囊胚期胚胎分化为了内细胞团和滋养层；内细胞团细胞具有全能性，可以诱导分化为各种类型的细胞。

【详解】

A；为获得更多的囊胚；可注射促性腺激素促进雌鼠产生更多的卵子，A错误；

B、胚胎干细胞和诱导出的各种动物细胞都需在CO2培养箱中进行培养；B正确；

C；用胰蛋白酶将细胞a周围的胶原蛋白水解后；而不是将膜蛋白水解，可获得分散的胚胎干细胞，C错误；

D、细胞a是内细胞团细胞，是胚胎干细胞的良好来源，细胞b是滋养层细胞已经不是具有全能性的胚胎干细胞了；将胚胎干细胞培养在饲养层上，只能分裂不能分化，D错误。

故选ACD。12、A:B:D【分析】【分析】

1；哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。

2；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

3；胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症；如帕金森综合症。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；图中A所示细胞为内细胞团细胞；具有全能性，将来能够发育成胎儿的各种组织，A错误；

B；胚胎干细胞的体积小；细胞核大，核仁明显，B错误；

C；在体外培养的条件下；胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，C正确；

D；利用胚胎干细胞培育的人造器官；还正在临床试验阶段，D错误。

故选ABD。

【点睛】13、B:D【分析】【分析】

生态工程学的研究对象是社会-经济-自然复合生态系统；需遵循“整体；协调、循环、再生”的生态工程原理。

【详解】

A；生态系统中遗传基因库越丰富；营养结构越复杂，其抵抗性稳定性越强，恢复力稳定性越弱，如热带雨林，A错误；

B；生态工程是在人的参与下；遵循“整体、协调、循环、再生”的原理，以达到“少消耗、多效益、可持续”的目的，B正确；

C；治理沙漠的目的是为了固沙、保水、改善环境以及缺水用水的问题；并不是为了消除沙漠，C错误；

D；退耕还林、退耕还湖可以防止因过度开垦而导致的水土流失问题；能够改善和恢复环境，使人与自然更加和谐，D正确。

故选BD。三、填空题(共8题，共16分)14、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码15、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补17、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存18、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆19、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用20、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖21、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共40分)22、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。23、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。24、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。25、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。26、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、实验题(共2题，共16分)27、略

【分析】【分析】

分析题文：a过程是基因工程，b过程是细胞核移植；d过程是胚胎移植。分析题图：图示为乳腺生物反应器的培育过程，首先构建基因表达载体，即将血清白蛋白基因与质粒连接形成重组质粒，其次将目的基因导入雌性奶牛胚胎细胞中形成重组细胞①；利用核移植技术将胚胎细胞核移植到去核卵细胞，形成重组细胞②；进行早期胚胎培养和胚胎移植，最终得到转基因克隆牛。该过程使用到了基因工程；细胞工程、胚胎工程。

（1）将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中；形成重组细胞①，进行的是基因工程的导入程序，原理是基因重组，因此重组细胞①和②中①实现了基因的重组。

（2）选择雌性奶牛胚胎的目的是；雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白。

（3）取出重组细胞①的细胞核；注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②，此过程是核移植技术；胚胎工程操作的最后环节是胚胎移植。

（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞；让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型相同，原因是它们来自同一个受精卵，此技术是胚胎分割技术。

（5）使内细胞团分散成单个细胞需要胰蛋白酶；培养过程中作为饲养层的是胚胎成纤维细胞。

（6）动物细胞培养的营养成分除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清。【解析】(1)①

(2)雌性转基因牛进入泌乳期后；可以从其乳汁中获得血清白蛋白。

(3)核移植胚胎移植。

(4)相同它们来自同一个受精卵胚胎分割。

(5)胰蛋白酶胚胎成纤维。

(6)动物血清28、略

【分析】【分析】

1；DNA分子杂交技术是将转基因生物的基因组DNA提取出来；在含有目的基因的DNA片段上，用放射性同位素标记，以此作为探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，则说明目的基因已经插入染色体DNA。

2；分子杂交技术是从转基因生物中提取出mRNA；用标记的目的基因做探针，与mRNA杂交，如果显示杂交带，则说明目的基因进行了转录。

【详解】

（1）DNA分子杂交技术是将转基因生物的基因组DNA提取出来；在含有目的基因的DNA片段上，用放射性同位素标记，以此作为探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，则说明目的基因已经插入染色体DNA，所以应根据突变位点外显子2新霉素，其设计分子探针杂交实验结果检测小鼠的基因型，需根据I基因外显子2和新霉素抗性基因序列设计DNA分子探针。

（2）分析系谱图可知：杂合子小鼠既有体型正常的，又有发育迟缓、体型瘦弱的，所以也无法判断I+、I-基因的显；隐性。

（3）由图可知：突变基因来自父本时；杂合子子代表现出发育迟缓，而突变基因来自母本时，子代体表现正常，推测I基因来自母体时不表达，所以只有突变基因来自父本时，杂合子小鼠才表现出发育迟缓，由此推测来自母本的I基因在体细胞中不表达。

（4）题意显示：新霉素抗性基因出现在突变个体中；野生小鼠体内不存在，突变基因来自父本时该基因表达，提取的总RNA中含有突变基因对应的mRNA，可以与RNA探针结合，由于母本中该表达，故不产生相应的mRNA，无法与探针结合。故实验结果是：表i（-）；ii（+）、iii（-）

（5）由该遗传病遗传方式特殊性可知；用常规的基因诊断不能否确定胎儿，故可以通过检测胎儿细胞的RNA或蛋白质来确诊。

【点睛】

认真分析题干信息是解答本题的关键，本题的第一空就难于突破，属于难题级别。【解析】I基因外显子2和新霉素抗性基因个体发育（发育速度与体型大小）不能杂合子小鼠既有体型正常的，又有发育迟缓、体型瘦弱的，无法判断性状的显、隐性，所以也无法判断I+、I-基因的显、隐性父本母本一、+、一不能，检测胎儿细胞的RNA或蛋白质（合理即可）六、综合题(共4题，共28分)29、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

（1）过程①是经RNA获得目的基因的过程；RT-PCR过程需先进行逆转录合成DNA，然后再进行PCR，该过程需要逆转录酶，且PCR温度较高，还需要耐高温的DNA聚合酶；由于在转录过程中经过剪切等过程，成熟的mRNA不含有启动子等非编码部位，故以mRNA为模板经逆转录过程获得hLH基因，该cDNA基因不具有的结构是启动子；终止子和内含子。

（2）在构建基因表达载体时；为避免自身环化和反向连接，通常选择两种限制酶进行切割，分析题意，本过程中GFP基因为绿色荧光蛋白基因，属于标记基因，不能将其破坏，故不能选择NheI进行切割，故过程②需要用SalI和BamHI酶处理pEB质粒和添加了相应识别序列的hLH基因，已获得重组质粒。

（3）hLF基因是目的基因；BLG基因为B乳铁蛋白基因，过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使hLF基因在山羊乳腺上皮细胞中表达（或使目的基因表达）；GFP基因为绿色荧光蛋白基因，其表达后一定条件下可产生绿色荧光，故用作标记基因，用于筛选成功导入hLF基因的乳腺细胞。

（4）③是将目的基因导入受体细胞，该过程脂质体介导利用的原理是膜的流动性；将目的基因导入植物细胞的方法是农杆菌转化法（最常用）、花粉管通道法（我国科学家独创）。【解析】(1)逆转录酶；耐高温的DNA聚合酶启动子、终止子、内含子。

(2)SalI和BamHI

(3)使hLF基因在山羊乳腺上皮细胞中表达（或使目的基因表达）用于筛选成功导入hLF基因的乳腺细胞。

(4)膜的流动性农杆菌转化法、花粉管通道法30、略

【分析】【分析】

1.限制性核酸内切酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时；产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。

2.DNA连接酶将两个双链DNA片段缝合起来；恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

【详解】

（1）将绿色荧光蛋白基因（GFP）与野生型水稻的B基因利用DNA连接酶形成融合基因；转入到普通水稻获得转基因水稻（B-GFP）。这过程中标记基因；目的基因与受体细胞内的基因的重新组合，属于基因重组。

（2）根据上述实验结果可知，只有来自父本的B基因表达。♀B-GFP×♂B-GFP杂交，即Bb×Bb，子代的基因型及比例为B_∶bb=3∶1；表现型为具荧光∶无荧光=3∶1，而实际结果是具荧光∶无荧光=1∶1，说明上述实验并没有表现出基因分离定律的特征。

（3）由（2）题的分析可知；授粉2.5