2025年浙教版选修1生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选修1生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下列有关分解尿素的细菌，说法正确的是（）A.尿素固体培养基的平板中只有少量肉眼可见的菌体B.筛选分解尿素的细菌时，培养基中唯一的营养物质是尿素C.加有酚红的尿素培养基，兼有选择与鉴别目标菌种的功能D.脲酶需要经过内质网和高尔基体的加工后才具有生物学活性2、如图为四位同学选择不同温度范围进行的“探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响”实验的结果；其中所选择的温度范围最合理的是。

A.①B.②C.③D.④3、为了使测定亚硝酸盐含量的准确性提高，关键的是（）A.样品处理B.标准显色液的制备C.比色D.泡菜的选择4、下列关于传统发酵食品生产过程或特点的叙述正确的是（）A.制作泡菜时将新鲜蔬菜洗净，切成块状或条状，混合均匀，晾干后与蒜瓣、生姜等香辛料混合装满泡菜坛B.酿制果酒时，取新鲜葡萄，去除枝梗和腐烂的籽粒，再用清水冲洗1~2次，沥干然后榨汁装入发酵瓶中C.制作果醋时，可以先在碗中倒入少量醋，一段时间后用其表面产生的一层薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间D.传统发酵食品生产利用了天然存在的菌种，品质稳定，风味独特，是我国传统饮食文化的重要组成部分5、下列有关泡菜制作及亚硝酸盐含量测定的叙述中，正确的是A.泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为4：lB.泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响其含量C.亚硝酸盐含量的测定步骤为：重氮化-酸化-显色-比色D.常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌，乳酸杆菌还常用于生产酸奶6、关于电泳的说法不正确的是()A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C.蛋白质在醋酸纤维薄膜上的移动速度取决于它所带净电荷的多少D.电泳后需经染色、漂洗和脱色，才可长期保存评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)7、图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作；图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述正确的是。

A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中8、尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（）A.培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基B.微生物培养常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高D.若上述培养基被杂菌污染，则培养基上会有多种杂菌菌落出现9、下列有关发酵工程及其应用表述正确的是（）A.发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种和基因工程育种获得B.发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，不会影响微生物代谢产物的形成C.分离、提纯产物可以获得微生物细胞本身或者其代谢产物，这是发酵工程的中心环节D.发酵工程生产的各种各样的食品添加剂可以增加食品营养，改善食品口味、色泽和品质10、某同学设计了图示的发酵装置；下列有关叙述正确的是()

A.该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似11、下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（）A.进行植物组织培养时，操作者的双手和工作台要进行灭菌处理B.用二倍体植株进行花药离体培养后得到的植株高度不育C.植物组织培养过程中发生了基因重组和染色体数目变异D.外植体在诱导形成愈伤组织期间，每天必须进行适当时间和强度的光照评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)12、红细胞的洗涤。

①目的：去除________。

②方法：采用________离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色______，将下层______的红细胞液体倒入______，再加入五倍体积的________，缓慢搅拌________，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有______，表明红细胞已洗涤干净。13、电泳分类：________凝胶电泳；__________凝胶电泳。

在测定蛋白质相对分子质量时通常使用__________________凝胶电泳。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带________的多少以及__________等因素。而在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能使蛋白质发生________，由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会______成单条肽链，因此测定的结果只是________的相对分子质量。同时SDS所带的大量负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于__________。14、凝胶色谱法的原理_____________。所用的凝胶实际上就是些微小的_____________15、为了加速膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，这样做的目的是___________16、天然香料的主要来源是动物和植物，微生物中的___________也可以产生芳香化合物。17、细胞代谢会合成许多产物；人们可将其提取纯化后用于生产生活实践，请据此回答：

（1）植物芳香油的组成非常复杂，主要包括______________及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法，原因是____________________________________________________________。

（2）新鲜柑橘皮直接压榨，出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮___________________________。

（3）橘皮压榨液还要加入相当于橘皮质量0．25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，是为了_______________。

（4）提取胡萝卜素，一般采用__________________（填方法），提取时加热瓶口要安装回流冷凝装置，这是为了__________________________________。

（5）有一种Car-red菌可以生产天然β-胡萝卜素，现采用固定化细胞技术固定该菌生产胡萝卜素，固定Car-red菌应采用________________法。18、为防止发酵液被污染，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为_______________的酒精消毒。19、透析：取1mL的________溶液装入________中，将其放入盛有300mL的物质的量浓度为20mmol·L－1的__________中（pH为______），透析12h。20、色谱柱填料的处理。

商品凝胶是干燥的颗粒，使用前需直接放在________中膨胀。为了加速膨胀，可以将加入__________的湿凝胶用________加热，逐渐升温至接近沸腾。这种方法不仅时间______，还能除去凝胶中可能带有的________，排除胶粒内的______。评卷人得分四、实验题(共3题，共9分)21、杏仁油具有很高的营养价值；可采用压榨；萃取等方法进行提取。请回答下列问题：

（1）用萃取法提取杏仁油时；萃取前要进行的操作是__________。常用正己烷作萃取剂，正己烷沸点为67~69℃，溶解度优异，化学性质稳定，毒性小，还具有__________的特点。萃取的效率主要取决于__________，此外还受原料颗粒大小；紧密程度、含水量萃取的温度和时间等条件的影响。

（2）下表为在几种不同条件下；杏仁油的提取效率。

。试验。

料液比。

提取温度/℃

提取时间/min

提取率/%

1

1：10

40

60

51．51

2

1：10

50

80

53．35

3

1：10

60

100

55．37

4

1：12

40

80

53．12

5

1：12

50

100

56．49

6

1：12

60

60

58．76

7

1：14

40

100

52．88

8

1：14

50

60

55．99

9

1：14

60

80

59．08

据表分析；3个因素中对杏仁油提取率影响最大的因素是__________，在实际操作中，提取温度选择为__________（填“40℃”“50℃”或“60℃”）最佳。

（3）萃取时；要在加热瓶口安装__________，以防止有机溶剂挥发。萃取后，可进一步用蒸馏装置对萃取液进行__________处理。

（4）若采用压榨的方法，压榨得到毛油，经收集后需进行______除水、脱胶、脱酸等工序，才能制成成品。22、细胞的结构；代谢、遗传等都与蛋白质的结构和功能密切相关；而对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。从红细胞中提取和分离血红蛋白的流程图如下：

（1）流程图中步骤A、B分别是____________，步骤B所用方法的原理是__________。

（2）洗涤红细胞的目的是_________，此过程中若离心速度过高和时间过长会导致________。

（3）在利用凝胶色谱法纯化血红蛋白的过程中，色谱柱不能有气泡存在，原因是__________。

（4）在上述实验中利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的目的是_____________________。

（5）下图1、2是某同学利用电泳法和凝胶色谱法分离同一种样品得到的结果，在电泳过程中，电泳迁移率取决于________，同时在图2中与图中蛋白质P对应的是______________________。

23、回答下列（―)；（二）小题：

（一）下图为利用苹果制备果汁；果酒、果醋的流程图。

（1）果胶酶可以通过苹果青霉来生产，____________是筛选高表达菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用__________培养基进行扩大培养。

（2）酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为____________而又有酶活性的制剂。下图是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是___________。

A.实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用。

B.为防止杂菌污染；图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌。

C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率；保证反应充分进行。

D.固定化果胶酶不可重复使用；每次生产前需重新装填反应柱。

（3）图中①过程也可利用附着在苹果皮上的____________做菌种。为获得高纯度、糖含量高的苹果酒，需向果汁中添加_____________。

（4）由图中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是____________。

（二）科研工作人员利用胚胎干细胞（ES细胞）通过胚胎工程克隆鼠；以供医学治疗需要，其技术流程如下图：

（1）图中的X细胞可以称为___________细胞。

（2）图中的X细胞依次经___________后由代孕母鼠产生克隆鼠。

A.核移植、胚胎培养、胚胎移植B.胚激活；胚胎培养、胚胎移植。

C.胚胎培养、胚激活、胚胎移植D.核移植；胚激活、胚胎体外培养。

（3）在克隆胚胎的培养基中以___________作为能源物质。

（4）为了提高已有胚胎的利用率，可采取____________技术。进行胚胎移植时，代孕母鼠对移入子宫的克隆胚胎基本上不发生___________；这为克隆胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能。

（5）若分离出内细胞团进行胚胎干细胞培养，当干细胞达到一定的密度时，需进行___________培养以得到更多数量的细胞。还可以对胚胎干细胞进行______________________，通过一系列的培育过程，以获得适合人体移植的动物器官，减弱或消除排斥反应。评卷人得分五、非选择题(共4题，共16分)24、玫瑰精油能使人产生愉悦感；被称为“液体黄金”，是制作高级香水的主要成分。回答下列问题：

(1)玫瑰精油适合用________法提取；其理由是玫瑰精油具有_________等性质。

(2)玫瑰花作为提取玫瑰精油的原料时；为提高玫瑰精油提取量，用于提炼玫瑰精油的玫瑰花要在_________________期采收，选用________(填“新鲜”或“干”)的玫瑰花更佳。

(3)某同学设计了如图所示装置提取玫瑰精油；指出该装置中的两个错误：①________。②____________________。

(4)密封不严的瓶装玫瑰精油最好存放在温度较_________的地方，目的是_________________。25、利用不同微生物的发酵作用来制作果酒；果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久；遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；_______和_________；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是保证坛内乳酸菌发酵所需的__________________。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于__________的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是________。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于____________；而现代的腐乳生产是在_____________条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是________________(填序号）。

①防腐②与有机酸结合形成脂③利于后期发酵④满足饮酒需要。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由__________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。26、下图是利用山楂制作果酒果醋的流程：回答下列问题：

回答下列问题：

（1）酒精发酵主要利用酵母菌的____________呼吸；酵母菌与醋酸菌在结构上的主要区别是____________。

（2）酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供____________。下图表示白砂糖的添加量对酒精生成量的影响；白砂糖的添加量为____________%左右最为合理。

（3）醋酸发酵前；需要加入纯净水对山楂果酒进行稀释，原因是________________________。

（4）转为醋酸发酵后；应将反应条件改变为________________________。

（5）将发酵好的山楂果醋在80℃左右的温度下热处理8〜10min，其目的是____________，同时还可以防止杂菌污染。27、请回答血红蛋白的提取和分离的相关问题：

（1）分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法；也称做______________，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。该方法用到如下装置，其中C溶液的作用是_______。

（2）血红蛋白提取和分离的程序可分为样品处理、________、_______和纯度鉴定。样品处理步骤中洗涤红细胞的目的是________。评卷人得分六、综合题(共3题，共15分)28、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌；将玉米种子用自身固氨菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：

(1)步骤①土样应取自当地____________（填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是____________。

(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。

(3)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_______。

Ashby培养基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40．2g，MgSO4·7H2O0．2g，NaCl0．2g，K2SO40．3g，CaCO35g；蒸馏水1000mL。

LB培养基：蛋白胨1g；酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7．0-7．2

(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时；经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

CK：对照处理组。

N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）

CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液）

①对照组（CK）的处理为____________。

②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与尿素处理组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约____________%。

③自生固氨菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是____________。29、请运用酵母菌的分离与纯化；果酒制作与应用的知识；回答下列问题:

（1）某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是______________________。

（2）通过如图乙所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0．1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器___________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为60个、53个、55个、16个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为___________个。

（3）小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，应将发酵的温度控制在___________，果酒制作是否成功，发酵后可用___________来鉴定，检验的原理是___________。

（4）发酵完成后，某小组制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将分离纯化出的酵母菌在-20℃长期保存，菌液中需要加入一定量的___________。由于密封不严，果酒放置一段时间后变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是___________。30、如图表示葡萄酒的酿制过程；请据图分析：

（1）葡萄酒的酿制原理是：先通气使酵母菌进行增殖，以增加酵母菌的数量，然后使酵母菌____________获得葡萄酒。

（2）乙中排出的气体是发酵过程产生的__________。

（3）如果利用丙进行葡萄醋的发酵，利用_____菌，在30-35℃下发酵7-8天，过程中____（是/否）通气，该菌与酵母菌在结构上最显著的区别是____________。

（4）微生物培养中，为计数目的菌的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的菌液0．1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原菌液中上述目的菌的数量约为___________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，若PH升高，指示剂将变红；脲酶能够将尿素分解成氨和CO2。

【详解】

A；尿素固体培养基的平板中会形成一些肉眼可见的菌落；A错误；

B；筛选分解尿素的细菌时；尿素是唯一氮源，但不是培养基中唯一的营养物质，B错误；

C；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂；培养某种细菌后，如果pH升高指示剂将变红，可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素，所以加有酚红的尿素培养基，兼有选择与鉴别目标菌种的功能，C正确；

D；脲酶是细菌合成分泌的；不需要经过内质网和高尔基体的加工就具有生物学活性，D错误。

故选C。2、B【分析】【分析】

【详解】

A；曲线图显示；①的反应速率随时间的递增而降低，说明选择的温度范围过高，不能得到最适温度的范围，A错误；

B；②的反应速率随时间的递增先增加后降低；因此能得到最适温度的范围，B正确；

CD；③、④的反应速率随时间的递增而增加；说明选择的温度范围过低，不能得到最适温度的范围，C、D错误。

故选B。3、B【分析】【详解】

试题分析：亚硝酸盐含量是通过与标准显色液进行目测比较而估算出的；所以只有标准显色液制备标准才能比较出正确的结果。故选B

考点：本题主要考查对亚硝酸盐含量测定原理的理解。

点评：本题意在考查考生的理解能力，属于容易题。4、C【分析】【分析】

1；果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。

2；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

【详解】

A；制作泡菜时将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀；装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，A错误；

B；制作果酒时；为避免杂菌污染，挑选新鲜葡萄，先进行冲洗，再除去枝梗，B错误；

C；制作果醋时；可以先在碗中倒入少量醋，一段时间后用其表面产生的一层薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间，C正确；

D；传统的发酵没有进行严格的灭菌；生产的食品安全性较低，品质也不够稳定，D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

1.泡菜的制作。

(1)菌种来源：附着在蔬菜上的乳酸菌。

(2)制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。反应式：C6H12O6→2C3H6O3。

(3)制作流程。

(4)测定亚硝酸盐的含量。

①检测原理。

a.NO＋对氨基苯磺酸→反应物；

反应物＋N－1－萘基乙二胺盐酸盐→玫瑰红色染料。

b.亚硝酸盐溶液的浓度高；颜色深些；溶液浓度低，颜色浅些。

②检测步骤：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色。

2.泡菜制作的注意事项。

(1)材料的选择及用量。

①蔬菜应新鲜；若放置时间过长，蔬菜中的硝酸盐易被还原成亚硝酸盐。

②清水和盐的质量比为4∶1；盐水要煮沸后冷却。煮沸有两大作用：一是除去水中的氧气，二是杀灭盐水中的其他细菌。

(2)防止杂菌污染：每次取样用具要洗净；要迅速封口。

(3)氧气需求。

①泡菜坛要选择透气性差的容器；以创造无氧环境，有利于乳酸菌发酵，防止蔬菜腐烂。

②泡菜坛坛盖边沿的水槽内注满水；以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境，并注意在发酵过程中经常补水。

(4)温度：发酵过程温度控制在室温即可；温度过高则易滋生杂菌，温度过低则发酵时间延长。

【详解】

A；泡菜制作需要配制盐水；其中盐与水的质量比为1：4，A错误；

B；腌制时间长短、腌制温度和食盐的用量都会影响亚硝酸盐的含量；B错误；

C；亚硝酸盐含量的测定步骤为：酸化﹣重氮化﹣显色﹣比色；C错误；

D；常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌；乳酸杆菌还常用于生产酸奶，D正确；

因此选D。

【点睛】

本题主要考查了泡菜制作及亚硝酸盐含量测定的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。扎实的基础知识是解题的关键。6、C【分析】【详解】

电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，A正确；由于同性相斥、异性相吸，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，B正确；在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电，加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小，C错误；电泳后需经染色、漂洗和脱色，才可长期保存，D正确。二、多选题(共5题，共10分)7、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母细胞的实验步骤：1、酵母细胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）；4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合；5、固定化酵母细胞。

【详解】

A；溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合；A错误；

B、海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中；以制备凝胶珠，B正确；

C；搅拌可使酵母菌与培养液充分接触；有利于发酵的顺利进行，C正确；

D；凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次后；再转移到发酵装置中，D正确。

故选BCD。8、B:C【分析】【分析】

本题是对用于微生物培养的培养基；选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法等相关知识的综合性考查；回忆微生物培养的培养基、选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法的具体操作和目的，然后结合问题进行解答。

【详解】

A；培养基中加入尿素作为唯一碳源；该培养基是选择培养基，A错误；

B；微生物培养常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；B正确；

C；细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强，pH升高，可加入酚红指示剂进行检测，C正确；

D；由于培养基中加入尿素作为唯一碳源；其他不分解尿素的微生物不能生长，故不会有多种杂菌长出来，D错误。

故选BC。9、A:D【分析】【分析】

微生物发酵指的是利用微生物；在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。

【详解】

A；用于发酵的菌种可以从自然界中筛选；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；

B；发酵罐培养的环境条件会影响代谢的途径从而影响产物的形成；例如谷氨酸发酵过程中，发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4∶1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，B错误；

C；发酵工程的中心环节是发酵过程；C错误；

D；发酵工程生产的各种各样的食品添加剂可以增加食品营养；改善食品口味、色泽和品质，D正确。

故选AD。

【点睛】10、A:B:D【分析】【详解】

果酒制作是厌氧发酵，该装置水可阻止空气进入；果酒发酵产生的气体是CO2，该装置便于CO2的排出；该装置弯管为了排出发酵产生的气体，不能保证果醋发酵需要的O2；去除弯管中的水后；与巴斯德的鹅颈瓶作用相似，排出气体，避免杂菌污染。

【考点定位】本题考查果酒、果醋的制作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。11、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养概念（广义）又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层；薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

【详解】

A；植物组织培养需要在严格的无菌和无毒条件下进行；因此要用酒精等对操作员的手、操作的操作台、植物组织培养的外植体等进行消毒处理；用于植物组织培养的培养基需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；

B；用二倍体植株花药离体培养获得单倍体植株；高度不育，B正确；

C；植物组织培养过程中；细胞通过有丝分裂方式增殖，不会发生基因重组，C错误；

D；植物细胞组织培养时现脱分化形成愈伤组织；这段时间要无菌、恒温、避光，D错误。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)12、略

【分析】【详解】

①红细胞含有大量血红蛋白；故红细胞的洗涤需要去除杂蛋白。

②方法：采用低速短时间离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。【解析】杂蛋白低速短时间血浆暗红色烧杯生理盐水10min黄色13、略

【分析】【详解】

电泳分为琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳；在测定蛋白质相对分子质量时通常使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带静电荷多少以及分子大小等因素。而在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能使蛋白质发生完全变性，由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链，因此测定的结果只是单条肽链的相对分子质量。同时SDS所带的大量负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。【解析】琼脂糖聚丙烯酰胺SDS-聚丙烯酰胺静电荷分子大小完全变性解聚单条肽链分子的大小14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法多孔球体15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不但可以节约时间，而且可以除去凝胶中可能带有的微生物，排除凝胶内的空气16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】真菌17、略

【分析】【分析】

1；植物芳香油主要包括萜类化合物及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法；原因是水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

2；新鲜柑橘皮直接压榨；出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

3、固定方法：。名称原理适用范围包埋法将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中多用于细胞的固定化学结合法利用共价链、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上多用于酶的固定物理吸附法通过物理吸附作用，把酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃和离子交换树脂等载体上

4；胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶；化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，因此提取胡萝卜素常用萃取法。

【详解】

（1）植物芳香油的组成非常复杂；主要包括萜类化合物及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法，原因是水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

（2）新鲜柑橘皮直接压榨；出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

（3）橘皮压榨液还要加入相当于橘皮质量0．25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；是为了使橘皮油易于与水分离。

（4）提取胡萝卜素；根据胡萝卜素易溶于有机溶剂，一般采用萃取法，提取时加热瓶口要安装回流冷凝装置，这是为了防止加热时有机溶剂挥发。

（5）Car-red菌为细胞；体积较大，难以被吸附或结合，适于采用包埋法固定。

【点睛】

本题考查固定化技术、从生物材料中提取某些特定成分，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】萜类化合物原料焦糊和有效成分水解干燥去水，并用石灰水浸泡使橘皮油易于与水分离萃取法防止加热时有机溶剂挥发包埋18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】70%19、略

【分析】【分析】

1；透析的原理是透析袋能使小分子自由进出；而大分子则保留在袋内。因此透析时间过长也不会导致血红蛋白渗漏出去。

2；透析可以去除样品中分子量较小的杂质；或用于更换样品的缓冲液。

【详解】

透析过程：取1mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋有放入盛有300mL物质的量浓度为20mmol·L－1的磷酸缓冲液(pH为为7.0)的烧杯中，透析12h。【解析】血红蛋白透析袋磷酸缓冲溶液PH=720、略

【分析】【详解】

色谱柱填料的处理。

商品凝胶是干燥的颗粒，使用前需直接放在洗脱液中膨胀。为了加速膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾。这种方法不仅时间短，还能除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。【解析】洗脱液洗脱液沸水浴短微生物空气四、实验题(共3题，共9分)21、略

【分析】【分析】

选取不同的提取方法蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来；形成油水混合物，冷却后分离油层和水层，获得芳香油；压榨法是利用机械压力将原料压紧，将原料中的芳香油挤压出来；萃取法是将粉碎；干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中，然后蒸发掉有机溶剂、获得芳香油的方法。

【详解】

（1）萃取前要进行的操作是粉碎和干燥。选择正已烷作为萃取剂是综合考虑了杏仁油在正已烷中溶解度高；正己烷的沸点高；与水不混溶以及毒性和能否从产品中完全除去等多种因素。萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，此外，还受原料颗粒大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

（2）温度相同；料液比和提取时间不同时，提取率差异很小（40℃时，最大值和最小值的差值为1．61%，50℃时，为3．14%，60℃时为3．71%）；提取时间相同，料液比和提取温度不同时，总是温度在60℃时提取率最高（最大值和最小值的差值：60min为7．25%，80min为5．96%，100min为3．61%）；料液比相同时，仍表现出提取率和温度成正相关，60℃时具有最大的提取率，最大值和最小值的差值分别为3．86%；5．64%、6．20%；综合判断可知，温度是影响提取率的最主要因素。正已烷的沸点为67~69℃，提取温度应小于沸点，且根据表中数据，60℃时萃取效率最高，故应该选择60℃。

（3）萃取时；要在加热瓶口安装回流冷凝装置，萃取后，可用蒸馏装置对萃取液进行浓缩。

（4）压榨得到毛油；经收集后需进行过滤；除水、脱胶、脱酸等工序才能制得成品。

【点睛】

本题主要考查植物有效成分的提取的，意在强化学生对相关知识的识记与理解，考生对蒸馏法、压榨法和萃取法提取植物有效成分的过程的识记是解题的关键。【解析】粉碎和干燥不与水混溶萃取剂的性质和使用量提取温度60℃回流冷凝装置浓缩过滤22、略

【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定——SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

（1）样品处理过程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析；所以图中A；B依次是血红蛋白的释放、透析；透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。

（2）为去除杂蛋白（或血浆蛋白）；需要洗涤红细胞；在该过程中离心速度过高和时间过长会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，达不到分离效果。

（3）因气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序；降低分离效果，故在凝胶色谱柱装填时不得有气泡存在；磷酸缓冲液（pH为7.0）能够准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致，以保证血红蛋白的结构和功能稳定。

（4）血红蛋白的纯化是通过凝胶色谱（或分配色谱）法将杂蛋白除去；最后经SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳对分离的蛋白质样品进行纯度鉴定。

（5）SDS凝胶电泳装置是垂直的装置；此种电泳方法主要取决于蛋白质分子量的大小，与电荷无关，同时加样在“-”极，通电后，样品蛋白质向“+”极移动，分子量相对小的，移动距离大，因此从图1的电泳结果分析，P比N；M移向“+”距离大，说明P的分子量相对比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图2中的丙。

【点睛】

理清血红蛋白的提取和分离的实验原理、样品处理和凝胶色谱操作的流程及其注意事项等相关知识。在此基础上，以图示中的“箭头指向和文字信息”为切入点，从中把握所蕴含的生物学信息，进而对相关题情境进行分析解答是解题关键。【解析】血红蛋白的释放、粗分离（或透析）透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内去除杂蛋白（或血浆蛋白）白细胞和淋巴细胞一同沉淀，达不到分离的效果气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果对分离的蛋白质样品进行纯度鉴定分子的大小丙23、略

【分析】【详解】

分析题图：该图是通过核移植、胚胎工程克隆鼠的过程，图中的X细胞是重组细胞；由重组细胞通过胚激活；胚胎培养、胚胎移植后，由代孕母鼠产生克隆鼠．为了提高已有胚胎的利用率，可采取胚胎分割技术。

（一）（1）单菌落的分离是筛选高表达菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用液体培养基进行扩大培养。

（2）酶在水溶液中很不稳定；且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为不溶性于水而又有酶活性的制剂。

A．实验中所用的固定化果胶酶吸附后可重复使用，但酶活性也受影响，不能永久利用，A错误；

B、固定化细胞是活细胞，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌会将细胞杀死，B错误；

C、通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行，C正确；

D、固定化果胶酶可重复使用，D错误。

（3）图1中①过程可利用附着在苹果皮上的野生酵母菌做菌种．为获得高纯度；糖含量高的苹果酒；需向果汁中添加蔗糖。

（4）由图1中①（果酒制备）转变为②（果醋制备），除改变温度、调节pH外；还需调整的发酵条件是通入无菌空气，因为醋酸菌是好氧性细菌。

（二）（1）图中的X细胞是卵母细胞质和内细胞团细胞的核形成的重组细胞。

（2）图中的X细胞依次经胚激活、早期胚胎培养、胚胎移植，后由代孕母鼠产生克隆鼠，B正确。

（3）动物胚胎培养基中添加有葡萄糖；在克隆胚胎的培养基中以葡萄糖作为能源物质。

（4）为了提高已有胚胎的利用率；可采取胚胎分割技术．进行胚胎移植时，代孕母鼠对移入子宫的克隆胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为克隆胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能。

（5）若分离出内细胞团进行胚胎干细胞培养，当干细胞达到一定的密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞。为获得适合人体移植的动物器官，还可以对胚胎干细胞进行基因敲除，以减弱或消除对克隆器官的排斥反应。【解析】单菌落的分离液体不溶性于水C野生酵母菌蔗糖通入无菌空气重建（或重组）B葡萄糖胚胎分割免疫排斥反应传代基因敲除五、非选择题(共4题，共16分)24、略

【分析】【分析】

1；植物芳香油的提取有蒸馏、压榨和萃取等；具体采用哪种方法要根据原料的特点来决定；

2；题图中的温度计和用于冷却的进出水口位置错误；

【详解】

（1）玫瑰精油具有易挥发；难溶于水、化学性质稳定的性质；所以玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取。

（2）玫瑰花在盛花期玫瑰油含量高；此时采收可以提高玫瑰精油提取量，并且选用新鲜的玫瑰花更佳。

（3）蒸馏装置中；温度计测的是蒸汽温度，应使温度计的液泡与支管口下沿相平，图中蒸馏烧瓶中的温度计的位置太靠下；冷凝管应进水口在下，出水口在上，与蒸汽流向相反，图中蒸馏装置中的进水口与出水口接反了。

（4）玫瑰精油易挥发；因此密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度较低的地方，以减少其挥发。

【点睛】

植物有效成分提取常用的方法有蒸馏法、压榨法和萃取法；蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后分离油层和水层，获得芳香油；压榨法是利用机械压力将原料压紧，将原料中的芳香油挤压出来；萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中，然后蒸发掉有机溶剂、获得芳香油的方法；选择植物芳香油的提取方法时用根据产品的性质和原料特点选取不同的提取方法。【解析】水蒸气蒸馏化学性质稳定、难溶于水、易溶于有机溶剂、易挥发盛花新鲜温度计下端应在蒸馏烧瓶的支管口位置冷凝管进水口、出水口接错(二者顺序可颠倒)低减少挥发25、略

【分析】试题分析：本题考查果酒和果醋的制作；腐乳的制作、酸奶的制作等知识；要求学生识记果酒、果醋、腐乳和酸奶制作的原理及过程，能结合所学的知识准确答题。果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，因此酒精发酵的条件是无氧且温度控制在18～25℃，酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测发酵过程是否产生酒精；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或酒精转化成醋酸，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30-35℃，因此醋酸发酵时应该持续通入氧气并将温度控制在30-35℃；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸；酸奶制作的原理是乳酸发酵。据此答题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；温度和食盐的用量；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这样可以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于产膜酵母的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在无菌条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是①防腐，②与有机酸结合形成脂，③利于后期发酵。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。【解析】温度食盐的用量无氧环境产膜酵母先增加后减少空气中的毛霉孢子无菌①②③醋酸菌26、略

【分析】分析：本题考查了果酒；果醋的制作的相关知识。酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时；酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃。醋酸菌是好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

详解：（1）酵母菌是一种兼性厌氧微生物；在缺氧时，其可以发酵产生酒精与二氧化碳，因此酒精发酵主要利用酵母菌的无氧呼吸，酵母菌是真核生物，而醋酸菌是原核生物，二者的主要区别是前者有以核膜包被的细胞核。

（2）白砂糖属于蔗糖；是一种含碳的有机物，酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供碳源，据曲线图可知，当白砂糖的含量为15%时，酵母菌通过酒精发酵产生的酒精的量最多，因此酵母菌进行酒精发酵时，白砂糖的添加量为15%左右最为合理。

（3）由于醋酸发酵前；酵母菌通过酒精发酵产生大量的酒精，酒精浓度过高会抑制醋酸菌的发酵，因此醋酸发酵前，需要加入纯净水对山楂果酒进行稀释。

（4）醋酸使一种严格的需氧菌；且其最适生长温度为30—35℃，因此转为醋酸发酵后，应将反应条件改变为持续通气，温度提高为30—35℃。

（5）醋酸发酵完成生成山楂果醋后；山楂果醋内存在活的醋酸菌，为了防止醋酸菌继续发酵（或杀死醋酸菌），将发酵好的山楂果醋在80℃左右的温度下热处理8〜10min，这样做还可以防止杂菌污染。

点睛：本题以山楂果酒和山楂果醋的研制为背景，考查学生从材料中获取信息的能力和对知识的理解迁移能力，难度中等。需要学生掌握果酒、果醋的制作原理及过程，明确制作果酒的酵母菌属于真核生物，其生长繁殖的最适温度为30—35℃；制作果醋的醋酸杆菌属于原核生物，是一种需氧型生物，其最适生长温度为30—35℃。【解析】无氧前者有以核膜包被的细胞核碳源15酒精浓度过高会抑制醋酸菌的发酵持续通气，温度提高为30—35℃防止醋酸菌继续发酵（或杀死醋酸菌）27、略

【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：

（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。

（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液；②透析。

（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。

（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

（1）凝胶色谱法也叫分配色谱法；是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法；图中C溶液的作用是洗脱血红蛋白。

（2）血红蛋白提取和分离的程序为：样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定；样品处理步骤中洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白。

【点睛】

解答本题的关键是掌握血红蛋白的提取和分离的基本程序，弄清楚每一个步骤的具体要求以及实验的原理，进而根据题干要求分析答题。【解析】分配色谱法洗脱血红蛋白粗分离纯化去除杂蛋白六、综合题(共3题，共15分)28、略

【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质；在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。

【详解】

（1）土壤中含有丰富微生物；同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大；种类最多。在富含有机质的土壤表层，有更多的微生物生长，故步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中。

（2）由图观察可知；步骤③中的稀释梯度分别为10；100、1000倍，实验中取样进行培养的是稀释倍数为1000的试管，实验采用的是稀释涂布平板法，所以步骤④中所用的接种工具是涂布器。

（3）由题干信息分析可知，科研人员的目的是分离土壤中自生固氮菌，故为了模拟类似的生长环境，培养基中需要添加多种无机盐来模拟土壤环境，同时不能有含氮物质，因此步骤④应选择其中的Ashby培养基；纯化培养时；需同时进行未接种培养基的培养，目的是检测培养过程中培养基是否被杂菌污染。

（4）①对照组的目的是排除无关变量对实验的影响；故对照组（CK）的处理为每盆土壤浇50mL无氮植物营养液。

②由柱状图可知；空白对照组中土壤微生物有机氨含量为10，故尿素处理组的土壤微生物有机氨含量为12-10=2，而CM12处理组土壤微生物