动物细胞融合和单克隆抗体

考纲考情

2013海南2014新课标Ⅰ

高考指数:★★★动物细胞融合与单克隆抗体Ⅱ知识回顾1.动物细胞融合过程：动物细胞A动物细胞B诱导，融合2个完整的杂交细胞AB有丝分裂（膜融合、质融合）（核融合）突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。主要是应用杂交瘤技术制造单克隆抗体2.意义：3.应用：三、动物细胞融合方法？4.植物体细胞杂交和动物细胞融合比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法用途意义细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去壁用胰蛋白酶使细胞分散物理、化学方法物理、化学、生物方法获得部分或完整植株主要用于制备单克隆抗体考点疑难分析克服远源杂交不亲和的障碍突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能（讨论归纳）

高考仿真题练1.(2016·海口模拟)(1)动物细胞诱导融合运用的原理是____________，该过程中区别于原生质体融合的方法是用__________处理。细胞膜具有流动性灭活病毒2.科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析回答：⑴该实验结果说明了细胞膜

，这是因为⑵若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于0℃条件下再保持40min，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧光，另一半膜发红色荧光，这说明具有一定的流动性

构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制1.单克隆抗体的概念单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体将单个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞分泌的四、单克隆抗体(1)单克隆抗体：(2)制备原理：知识回顾B-B

B-瘤

瘤-瘤（未融合的B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。2.单克隆抗体制备过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养基杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测产生所需抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体2.单克隆抗体制备过程图解（用箭头和文字写出概念图）知识自主构建提纯（讨论归纳）共有几种细胞？（1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合小鼠骨髓瘤细胞可大量增殖，B淋巴细胞能产生抗体。（2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗

有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。感悟拓展（3）整个制备过程为何要经过两次筛选第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。

3.单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合（2）用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速单克隆抗体的优点：优点:疗效高、毒副作用小特异性强，灵敏度高，能大量制备。（2013年海南卷）31.(15分)单纯疱疹病毒I型HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗SV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题：

(1)在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗_

的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了___反应，再从小鼠的___

_中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的___

_

细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是___。：HSV—1蛋白体液免疫脾脏无限增值且产生专一抗体骨髓瘤真题感悟(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的____

中使其增殖，再从___

_中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白，其原因是该抗体具有

__和__

__等特性。腹腔腹水纯度高特异性强2014新课标Ⅰ卷(第40题)（15分）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：：真题感悟（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过____次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是____小鼠，理由是___4Y（2）细胞融合完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有

，体系中出现多种类型细胞的原因是

。（3）杂交瘤细胞中有

个细胞核，染色体数目最多是

条。（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是

。Y小鼠的血清抗体效价最高骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞淋巴细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的且融合率达不到100%1100不能无限增殖1.(2016·河南名校测试）(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________________。(2)单克隆抗体的特点是：__________________。特异性强、灵敏度高、并可大量制备动物细胞培养、动物细胞融合高考仿真题练(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的

细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。（2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成

种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是

，其特点是_________________________________________。效应B

抗原

细胞融合

聚乙二醇灭活的病毒

选择性3既能无限增殖又能产生特异性抗体

杂交瘤细胞2.(2015·甘肃模拟)根据图解回答问题：(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。特异性强、灵敏度高

有丝无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境

两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势课堂小结重点课后作业：三维设计P104知命题热点二、11、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：

（1）该方案能达到预期效果吗？。原因是

________________________________

______________。

（2）图中②为

过程，常用

作为诱导剂。该细胞继承了_____________________

，因此不仅能分泌

___________，还有

本领。

不能

没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞

细胞融合

灭活病毒

双亲细胞的遗传物质

特异性抗体

大量增殖制备单克隆抗体（3）该方案的目的是_________________________。能力提升1、字体安装与设置如果您对PPT模板中的字体风格不满意，可进行批量替换，一次性更改各页面字体。在“开始”选项卡中，点击“替换”按钮右侧箭头，选择“替换字体”。（如下图）在图“替换”下拉列表中选择要更改