2025年上外版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年上外版选择性必修3生物上册阶段测试试卷262考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、图甲是果酒和果醋发酵的装置图；图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列叙述不正确的是（）

A.用甲装置制作果酒时，加入酵母菌后，一直关紧阀a，适时打开阀b几秒钟B.用甲装置制作果醋时，阀a要关闭，阀b要持续打开C.乙图中过程②只能发生在缺氧条件下D.过程③和④都需要氧气的参与2、下列有关果酒和果醋制作的叙述，正确的是（）A.发酵过程中有关反应主要发生在细胞外B.发酵过程中为防止被污染，需要严格灭菌C.将葡萄汁制成果酒和果醋后，有机物总量减少而种类增加D.制成果酒后再制果醋，只需向装置中通入无菌空气3、SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原；在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。研制预防SARS病毒的疫苗简要的操作流程如下，有关叙述正确的是（）

A.步骤①所代表的反应过程需要RNA聚合酶B.步骤③和⑤常用的方法分别是农杆菌转化法和显微注射法C.④和⑥表达S蛋白的过程，所需ATP均来源于线粒体D.可用抗原-抗体杂交法检测细胞中是否真正成功表达了病毒S蛋白4、下列关于乳酸菌种的选育的叙述，不正确的是（）A.自然选育该菌种费时且盲目性大B.该菌能发生染色体变异C.采用基因工程的方法可构建工程菌D.诱变育种原理的基础是基因突变5、小鼠单克隆抗体会使人产生免疫反应，科学家将小鼠抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多。下列说法正确的是（）A.对小鼠单克隆抗体的改造属于细胞工程的范畴B.对“嫁接”小鼠单克隆抗体的高级结构的研究是成功的关键C.天然蛋白质的产生是由基因→蛋白质，蛋白质工程的思路是由蛋白质→基因D.产生人鼠单克隆抗体的技术本身是中性的，技术不会产生安全性问题评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器7、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达8、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述错误的是（）A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素B.目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒D.经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别9、生物兴趣小组的三位同学吃冰激凌后有两人严重腹泻，他们怀疑冰激凌中大肠杆菌超标。卫生部门规定1000mL自来水37℃培养48h后大杆菌菌落数不能超过3个，于是他们设计实验对此冰激凌进行检测。下列实验操作，不合理的是（）A.再去小店买一个同样品牌的同种冰激凌，然后配制伊红美蓝培养基（该培养基可用来鉴别大肠杆菌），灭菌、倒平板B.取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×105C.取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，共培养18个平板，在适宜温度下培养48hD.统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小10、营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。下列说法不合理的是（）

A.过程①的接种方法为稀释涂布平板法，过程②两种培养基的成分相同B.进行过程②培养时必须先将丝绒布转印至基本培养基上顺序不能颠倒C.统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致菌落数目偏大D.营养缺陷型菌株细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，可能与核孔复合体的蛋白质空间结构发生改变有关11、为探究提高“日照蓝莓”品质和产量的新途径，某生物兴趣小组以“日照蓝莓”的主要品种——兔眼蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述正确的是（）A.取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体B.用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时，要控制好时间以避免造成伤害C.对分化培养基灭菌前需添加生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类等生长调节剂D.脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大，产量更高，后代个体中更不易被病毒感染12、北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述不正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其表达13、载体是基因工程中携带外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞的重要运载工具，常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。下图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程示意图，下列相关叙述正确的是（）

A.重组载体重组载体B分别是基因克隆载体和基因表达载体B.载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因C.必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间D.培养细菌A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异14、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、选用去核______的原因：卵（母）细胞______；卵（母）细胞______。16、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。17、来源：主要是从______中分离纯化出来的。18、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。19、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）20、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。21、什么是生物武器？简述生物武器的危害。__________评卷人得分四、判断题(共2题，共14分)22、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误23、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共6分)24、餐厨垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。为探究用圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液时，单独接种和混合接种的效果差异及最佳接种量比，以制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

（1）将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌1：00：11：12：1

将上表菌液分别接种于l00mL________________中进行振荡培养。本实验还需设置空白对照，对照组接种________________。

（2）培养3天后测定活菌数，取一定量菌液用_____________法接种于基本培养基中培养，该方法包括_____________和____________两个操作。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在__________内的平板。实验结果如下图所示，由实验结果可知___________________。

25、Hela细胞系是人工培养具有无限增殖能力的水生瘤细胞系；在世界各地的相关实验室中为研究者提供了相同的研究对象。回答下列问题：

（1）Hela细胞源自一位美国妇女的宫颈癌细胞，目前实验室中为了进步研究Hela细胞，需进行___________(填“原代”或“传代”)培养。在动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小组为研究葡萄糖饥饿对Hela细胞生长的抑制情况，其他营养条件适宜，用不同葡萄糖浓度的培养基，培养Hela细胞24h，实验结果如下表所示：。葡萄糖浓度（mmol:L-1）Hela细胞生长抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

该实验_____________(填“需要”或“不需要”)另设对照组。实验结果表明：葡萄糖浓度与Hela细胞生长抑制率的关系是____________________。

（3）体内低浓度葡萄糖可_________________癌细胞的增殖，为肿瘤的限食疗法提供理论依据。Hela细胞在生物医学领域应用广泛，例如，它帮助科学家首次实现了人源细胞与小鼠细胞融合。细胞融合技术的意义是__________________________________________。26、四尾栅藻是一种淡水藻类；繁殖快；适应性强，可作为制备生物柴油的重要原料之一。为提高四尾栅藻油脂含量，研究人员将从含油量高的紫苏中获得的二酰甘油酰基转移酶基因（DGAT1）与pBI121质粒构建表达载体，经转化成功获得高产油脂四尾栅藻，主要研究过程如下图，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因为依据设计的一对引物，1acZ基因编码产物在X-ga1和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。请回答下列问题。

(1)过程①中需要的酶有____________，过程②应选用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因时，将克隆载体导入大肠杆菌的优点有____________。

①稳定保存②准确复制③快速表达④方便取用。

(3)过程③经转化的大肠杆菌通过____________（方法）接种到培养基上继续培养。为筛选获得目标菌株，培养基应加入的成分有____________。

(4)为检测表达载体转化四尾栅藻的情况及确定目的基因是否表达，研究人员进行了如下实验，请完成下表。实验步骤简要操作过程初筛培养经转化后的四尾栅藻接种于含①____________的BG11固体培养基并放置于人工气候箱培养，一段时间后观察其生长情况②____________在BG11固体培养基上分别挑取数个单藻落接种至BG11液体培养基中光照摇床培养，编号备用PCR验证收集四尾栅藻藻体，提取基因组DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R为引物，进行PCR验证，未转化的四尾栅藻作对照油脂含量测定利用索氏抽提法分别测定③____________的油脂含量结果处理统计并比较PCR验证结果及藻体中油脂的含量评卷人得分六、综合题(共2题，共16分)27、某科研小组将抗虫基因（图甲）与农杆菌Ti质粒（图乙）重组，PstI、SmaI、AluI表示限制酶切割位点；AmpR为氨苄青霉素抗性基因；tet为四环素抗性基因。利用人工破损处理的水稻幼苗细胞，借助农杆菌转化法获得抗虫水稻品种，农杆菌侵染植物细胞如图丙所示。

请回答下列问题：

(1)据图分析，构建基因表达载体时，最佳方案是使用______分别切割目的基因和Ti质粒，原因是______；再用DNA连接酶连接。

(2)经过基因表达载体构建形成的重组DNA分子，需要与______（填“有AmpR和tet”“有AmpR和无tet”“无AmpR和有tet”或“无AmpR和tet”）的农杆菌混合，进而使重组DNA进入农杆菌体内，其原因是__________________________。

(3)图丙中，植物受损信号传导到农杆菌细胞内激活Ti质粒上的Vir区多个基因表达，其表达的蛋白质功能有______（至少写出两种）。

(4)将导入目的基因的水稻细胞经过______技术培养成幼苗，该过程利用的原理是______，获得的植株还需要进行______才能鉴定转基因水稻是否培育成功。28、花椰菜（2n=18；用MM表示）属十字花科，经人工长期定向选育，对黑腐病无抗性。黑芥（2=16，用NN表示）为花椰菜近缘野生种，对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将紫外线（UV）照射处理的黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株（过程如下图）

请回答下列问题：

(1)杂种植株的形成过程用到的植物细胞工程技术有______________和_____________。

(2)①过程用____________酶处理可以获得有活力的原生质体。

(3)图②表示______________过程，诱导过程常用的化学物质是________。

(4)杂种细胞形成的标志是：____________。理论上获得的杂种植株染色体组成为_________（用字母M和N表示）。

(5)已知供体黑芥叶肉原生质体在UV处理前后形态上没有明显的区别，但是在和下胚轴原生质体融合时较易破碎。在培养3天之内，用显微镜观察细胞中是否存在_________（细胞器）；作为早期鉴别杂合细胞的标志，初步筛选出融合细胞。

(6)请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法________________。

(7)对双亲和部分杂合新植株的染色体计数，结果如下表所示。。植株花椰菜黑芥杂合新植株H1杂合新植株H2杂合新植株H3染色体数/条1816581930

根据表中数据，尝试推测杂合新植株H2、H3染色体数目少于34（双亲染色体数之和），杂合新植株H1染色体数目大于34可能的原因__________________和________________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】根据题意和图示分析可知：甲是发酵装置；乙是果酒；果醋制作的实验原理，①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，②是酵母菌无氧呼吸的第二阶段，发生的场所是细胞质基质，③是有氧呼吸的第二、第三阶段，发生的场所是线粒体，④是醋酸菌发酵形成醋酸的过程。

【详解】

A、甲装置中，阀a控制进气，阀b控制排气，制作果酒时应关闭阀a以创造缺氧环境，适时打开阀b几秒钟以排出产生CO2；A正确；

B；由于制作果醋所需的微生物是醋酸菌；醋酸菌是好氧菌，所以阀a要始终打开，B错误；

D；乙图中过程②是无氧呼吸的第二阶段；需要在缺氧条件下进行，C正确；

D；过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段；该过程需用氧气的参与；过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该果醋也需要氧气的参与，D正确。

故选B。2、C【分析】1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：

有氧条件下；酵母菌有氧呼吸产生二氧化碳和水分，并释放大量的能量，无氧条件下，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳和酒精，释放少量的能量。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：

当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

当缺少糖源时；醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；发酵过程中有关反应主要发生在细胞内；A错误；

B；发酵过程中为防止被污染；需要进行消毒处理，但不需要严格灭菌，B错误；

C；将葡萄汁制成果酒和果醋后；有机物总量减少（细胞呼吸不断消耗有机物）而种类增加，C正确；

D；醋酸菌是好氧菌；制成果酒后制作果醋，需将装置转移至温度较高的环境中，同时还需要不断通入无菌空气，D错误。

故选C。3、D【分析】【分析】

分析题图：①是以RNA为模板合成DNA的逆转录过程；②表示基因表达载体的构建过程，③表示将目的基因导入大肠杆菌细胞，④表示目的基因在原核细胞中的表达；⑤表示将目的基因导入动物细胞，⑥表示目的基因在真核细胞中的表达。

【详解】

A；步骤①所代表的反应过程是以RNA为模板合成DNA的逆转录；该过程需要逆转录酶，A错误；

B、将目的基因导入微生物细胞常用Ca2+处理法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，即步骤③和⑤常用的方法分别是Ca2+处理法和显微注射法；B错误；

C；④和⑥表达S蛋白的过程；所需ATP主要来自线粒体，也可来自细胞质基质，C错误；

D；该目的基因能表达病毒S蛋白；且抗原（病毒S蛋白）能与抗体特异性结合，故可用抗原―抗体杂交法检测细胞中是否真正成功表达了病毒S蛋白，D正确。

故选D。4、B【分析】【分析】

自然选育的菌种来源于自然界；菌种保藏机构或生产过程；从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；此外也可通过诱变育种和基因工程育种获得。

【详解】

A；自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选；所以费时且盲目性大，A正确；

B；乳酸菌属于原核生物；原核生物无染色体，B错误；

C；基因工程是以基因重组为原理；能够实现定向改造基因的技术，可采用基因工程的方法可构建工程菌，C正确；

D；菌种的选育可以采用诱变育种的方法；其原理是基因突变，D正确。

故选B。5、B【分析】【分析】

对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

【详解】

A；对小鼠单克隆抗体的改造是要产生一种自然界不存在的蛋白质；属于蛋白质工程，A错误；

B；蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构；因此对“嫁接”小鼠单克隆抗体的高级结构的研究是成功的关键，B正确；

C；蛋白质工程的思路是由蛋白质→基因→蛋白质；C错误；

D；转基因作为一项技术本身是中性的；但由其生产的产品是否安全不得而知，还需要经过一系列的安全性评价才能确定，D错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)6、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。7、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。8、B:C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；影响酶促反应的因素有温度、pH、酶浓度、底物浓度等；因此酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素，A正确；

B；根据题意可知；限制酶BamHⅠ的识别序列及切割位点为G↓GATCC，因此目的基因经BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B错误；

C；由于这两种酶切割形成的黏性末端相同；因此分别用这两种限制酶切割，不能保证目的基因定向插入质粒，C错误；

D；经两种酶处理得到的重组质粒的相应部位的序列不能再被这两种酶识别；D正确。

故选BC。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法；稀释涂布平板法可用于微生物的计数。

2；稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：①当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

【详解】

A；若只对一个冰激凌进行检测；样品太少则不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题，正确的做法是再去小店随机买多个同样品牌的同种冰激凌，A错误；

B、测定细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行培养，应取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×106；B错误；

C；实验应该设置对照；取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，再取一个平板接种等量无菌水（作为对照），共培养19个平板，在适宜温度下培养48h，当对照组无菌落生长时，选择菌落数在30-300的平板进行计数，C错误；

D；因为当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，故统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小，该说法合理，D正确。

故选ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

完全培养基中含有微生物生长所需要的各种营养成分；基本培养基缺少某种营养成分，通过影印培养法，二者接种的菌种相同，基本培养基上不能生长的菌株即为营养缺陷型菌株。

【详解】

A；过程①得到的菌落均匀分布；接种方法为稀释涂布平板法，过程②两种培养基的成分不同，基本培养基中缺乏某种氨基酸，A错误；

B；进行过程②培养时先将丝绒布转印至完全培养基上；可能会携带某种氨基酸进入基本培养基，因此顺序不能颠倒，B正确；

C；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次；直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致菌落数目偏小，C错误；

D；若该菌株为原核细胞；则不存在核孔复合体，营养缺陷型菌株细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，应是控制该酶合成的基因发生突变，D错误。

故选ACD。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。

【详解】

A；取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体；这是因为芽尖分裂旺盛，且很少带有病毒，甚至不含毒，A正确；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时；要控制好时间以避免造成伤害，否则外植体会受到损失，导致实验失败，B正确；

C；生长调节剂应该在培养基灭菌后添加；否则高温可能使其失去效果，C错误；

D；脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大；产量更高，后代个体中含病毒较少，但并不是不易被病毒感染，D错误。

故选AB。12、A:C:D【分析】【分析】

分析题图：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。基因表达载体通常由启动子；目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞。

【详解】

A；过程①是通过人工合成法获取的目的基因；由于真核生物体内的基因含有不能编码蛋白质的序列（内含子），导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，因此人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多；抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，可以通过DNA分子杂交或PCR技术检测受体细胞是否含有目的基因，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；但表达的产物通常是蛋白质，可利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选ACD。

【点睛】13、A:B【分析】【分析】

分析题图：图中重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增；因此是基因克隆载体，而重组载体B导入受体菌后，表达产生胰岛素，因此是基因表达载体。

【详解】

A；重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增；因此是基因克隆载体，而重组载体B导入受体菌后，表达产生胰岛素，因此是基因表达载体，A正确；

B；作为运载体必须要具备的条件有：含有限制酶的切割位点(便于目的基因的插入)、复制原点(便于目的基因的扩增)及标记基因(便于筛选含有目的基因的受体细胞)等；因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因，B正确；

C；培养细菌A的目的是扩增目的基因；不需要获得表达产物，因此目的基因不一定要插入重组载体A的启动子和终止子之间，C错误；

D；培养细菌A的目的是扩增目的基因；培养细菌B的目的是获得胰岛素，因此培养两者的培养基在营养成分和功能上有明显差异，D错误。

故选AB。14、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【解析】①.卵（母）细胞②.比较大，容易操作③.细胞质多，营养丰富。16、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）21、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物，若用与战争，则可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物。四、判断题(共2题，共14分)22、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。23、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。五、实验题(共3题，共6分)24、略

【分析】微生物实验室培养的实验操作：1；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程为：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。2、纯化大肠杆菌：（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞；使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。（2）微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在-起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）将上表菌液分别接种于100mL餐厨垃圾废液中进行振荡培养；振荡处理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌与溶液充分接触；本实验还需设置对照组为接种等量无菌水。

（2）测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据菌落的特征对两种菌进行区分，并选取菌落数在30-300内的平板。由实验结果可知：两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

【点睛】

本题结合图表，考查微生物的分离和培养，要求考生识记制备培养基的过程;识记接种微生物常用的两种方法及微生物的计数方法，能结合柱形图中信息准确答题。【解析】某餐厨垃圾废液等量无菌水稀释涂布平板系列（梯度）稀释涂布平板菌落特征30~300两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化25、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2；培养条件：

（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒--定期更换培养液；防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。

（2）营养：

成分：所需营养物质与体内基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。

培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）

（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜；多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。

【详解】

（1）目前实验室中为了进一步研究Hela细胞；需进行传代培养；由于是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶（最适pH是强酸性）已失去活性，所以在动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶处理制备细胞悬液。

（2）分析表格数据；该实验需要另设对照组，观察在正常条件下细胞生长情况。实验结果表明：葡萄糖浓度与Hela细胞生长抑制率的关系是葡萄糖浓度越低，Hela细胞生长抑制率越高。

（3）体内低浓度葡萄糖可抑制癌细胞的增殖；为肿瘤的限食疗法提供理论依据。两个或多个细胞融合形成的单核细胞叫做杂交细胞，细胞融合技术的意义是突破了有性杂交局限，使远缘杂交成为可能。

【点睛】

本题考查动物细胞培养的相关内容，重点考查动物细胞培养的过程和条件，相关知识点只需考生识记即可正确作答，属于考纲识记层次的考查。对于此类试题，考生在平时的学习过程中，应该注意构建知识网络结构。【解析】传代在多数动物细胞培养的适宜pH范围内，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖浓度越低，Hela细胞生长抑制率越高抑制突破了有性杂交局限，使远缘杂交成为可能26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性内切核酸酶；识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。DNA连接酶，将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。载体，将外源基因送入受体细胞。

2；基因工程的基本过程：目的基因的筛选与获取；基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和鉴定。

【详解】

（1）过程①包括逆转录和PCR，逆转录需要反转录酶的参与，PCR过程需要耐高温的DNA聚合酶。限制酶的作用是识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，对比几种限制酶的结合位点和DGAT1-F、DGAT1-R的碱基序列，可知过程②应选用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）将克隆载体导入大肠杆菌；可以与外界环境隔离，能够稳定保存，准确复制，大肠杆菌比基因方便取用，故选①②④。

（3）根据培养基上菌落的分布可知所用接种方法是稀释涂布平板法。克隆载体中含有氨苄青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因编码产物在X-ga1和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色，所以