2024年沪教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

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A.该技术可避免母亲的红绿色盲基因传递给后代B.卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不会遗传给后代C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D.三亲婴儿的培育还需要转基因和胚胎移植等技术2、下列有关分离纤维素分解菌的实验过程，操作有误的是（）A.选择培养这一步可以省略，但所培养的纤维素分解菌浓度可能会比较低B.对照组可用等量纤维素分解菌培养液涂布到以葡萄糖为碳源的培养基上C.倒平板时就加入了刚果红的染色法，需要用1mol/mLNaCl处理15分钟D.为确定得到纤维素分解菌，需要进行液体或固体发酵产纤维素酶的实验3、下列有关泡菜制作的实验叙述中，正确的是（）A.将新鲜蔬菜和盐水一起煮沸冷却，目的是除去水中的氧气和杀灭杂菌B.发酵初期，泡菜坛口要先敞开一段时间，利于乳酸菌大量繁殖，后期盖好坛盖，并注满水C.亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但可在特定条件下转变成亚硝胺，亚硝胺具有致癌作用D.温度过高、盐用量过低、发酵时间过长，会导致亚硝酸盐含量不断增加4、下列关于微生物的培养与应用的叙述正确的是（）A.用涂布分离法分离细菌时，需要用接种环将菌液涂布到培养基平面上B.在尿素固体培养基上，产脲酶细菌菌落周围会出现白色的透明环带C.利用醋酸菌将果酒发酵成果醋，需要不断向发酵装置中通入无菌空气D.利用微生物进行发酵制成的泡菜美味可口，含有的成分对人体均有益5、维生素对视力、骨骼生长、免疫功能都有重要的调节作用。但是，人体不能合成维生素A，需要从食物中摄取。β-胡萝卜素是维生素A的前体，在人体内可以转化为维生素A，科学家将两个参与β-胡萝卜素合成的酶基因psy和crI转入籼稻中，使水稻的胚乳含有中富含β-胡萝卜素，由此生产出“黄金大米”。以下说法错误的是（）A.“黄金大米”的培育过程要利用植株组织培养技术B.食用“黄金大米”可以缓解维生素A缺乏症的病情C.培育“黄金大米”过程中，转入籼稻细胞中的目的基因有两个D.Psy或crI基因序列中含有构建重组质粒所用限制酶的识别序列6、Kohler和Milstein通过将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，得到了杂交瘤细胞，进而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破为医学与生物学基础研究开创了新纪元。下列关于单克隆抗体的制备叙述错误的是（）A.小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合依赖于细胞膜的流动性B.将某抗原纯化反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体也是单克隆抗体C.单克隆抗体可以用于运载药物、疾病的诊断和病原体鉴定等D.利用杂交瘤技术可大量生产抗体，且与传统方法相比，该技术生产的抗体纯度更高评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒8、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔9、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA10、土壤被称为“微生物的天然培养基”。科学工作者要从土壤中分离或鉴定需要的微生物，需要配制选择培养基，再通过接种、培养、纯化、筛选等技术获得微生物。下列关于培养基对微生物的分离或鉴定的叙述，正确的是（）A.从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，在灭菌后将培养基调至酸性B.从土壤中分离出纤维素的分解菌，需要配制含纤维素为唯一碳源的培养基且加刚果红C.以尿素为唯一氮源的培养基，采用稀释涂布平板法可分离出分解尿素的分解菌D.从土壤中分离固氮微生物需要配制不含氮源的培养基，且培养条件要适宜11、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止12、转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，插入另一位点。转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移，在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动。有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞。下列推测合理的是A.转座子不能独立进行DNA复制B.转座子可造成染色体变异或基因重组C.转座子可用于基因工程的研究D.细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)13、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。14、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。15、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。16、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。17、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。18、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。19、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________21、第四步：_____评卷人得分四、判断题(共2题，共12分)22、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误23、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共14分)24、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________25、某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的；难以降解的有机化合物A；其研究团队用化合物A、磷酸盐镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题。

（1）在培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于____________培养基。

（2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量____________。

（3）若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用______方法进行计数。请你预测目的菌的种群数量会发生怎样的变化。

（4）将目的菌用于环境保护实践时，还有哪些问题需要解决？_______

（5）有人提出，可以通过改造细菌的基因来获得能够降解化合物A的细菌，请分析这种方法是否可行。_______评卷人得分六、综合题(共3题，共18分)26、下图1（a）是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程。图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702，其中tsr为硫链丝菌素抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaI；BglⅡ、PstI、SacI和SphI在pIJ702上分别只有一处识别序列。

（1）图1（a）中，从卵巢取出的a细胞需要在培养箱中培养到______（时期），CO2的主要作用是___________________。

（2）若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是________（填“丙”；“丁”或“丙、丁”）（不考虑基因突变）。

（3）为获得大量的大鼠生长激素基因，可选择图1（b）中引物_______（用图中罗马数字表示）组合进行PCR扩增。

（4）以SacI和SphI同时切割大鼠生长激素基因和质粒pIJ702，获取的目的基因去置换pIJ702上0．4kb的片段，构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因的片段长度为________kb。参照表1数据，如果用PstI和ClaI同时酶切质粒pZHZ8，则两种酶可将pZHZ8切成______个片段。

（5）质粒pZHZ8上的标记基因是______，在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰______色的菌落。27、育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题。

（1）图I过程由番茄韧皮细胞形成幼苗A的过程要经过__________形成愈伤组织，再通过_________形成幼苗，该过程依据的原理是_____________。

（2）植物组织培养除了需要提供一定的营养、_______________、温度和光照外，还必须在_________的条件下培养。

（3）已知番茄的红果（Y）对黄果（y）为显性，少室（M）对多室（m）为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室（Yymm）番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是______。Ⅲ过程中植物体C的基因型有_________________。

（4）图Ⅲ、Ⅳ过程中需要去除细胞壁，方法为_________。

（5）在图中Ⅳ过程中，在促融因子的作用下，原生质体的融合概率大大增加，容器内至少存在_____种细胞。经过鉴别和筛选后，通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状，根本原因是________________。28、米酒；旧时叫“醴”，其酿制工艺简单，口味香甜醇美。下图表示发酵过程中的代谢途径。回答下列问题：

(1)制作时用糯米酿制，需要等煮熟的糯米温度降低后再拌上酒曲（酵母菌）进行发酵，这是为了防止________________________________。在家中用陶土罐酿制米酒时，不需要进行严格的灭菌处理，这是因为_________________________________。

(2)陶土罐中要预留部分空间，一方面通过①②过程可以___________________________，另一方面是为了避免_____________________________。

(3)制作成功的米酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，此时发挥作用的微生物是________。此现象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易发生，其原因是_________________________________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

1；核移植时选择MⅡ中期卵母细胞作为受体的原因：

（1）此类细胞体积大；易于操作；

（2）卵黄多；营养物质丰富，可为发育提供充足的营养；

（3）卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。

2；根据题图；“三亲婴儿”的培育应用了动物细胞核移植技术、体外受精技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。

【详解】

A；母亲提供的是细胞核；而红绿色盲基因位于细胞核中，因此该技术不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代，A错误；

B；卵母细胞捐献者提供的是细胞质；而红绿色盲基因位于细胞核中，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不会遗传给后代，B正确；

C；三亲婴儿的染色体来自两个亲本；即父亲和母亲，C错误；

D；三亲婴儿的培育运用了核移植技术；而且还需要采用早期胚胎培养技术、胚胎移植等技术，不需要转基因技术，D错误。

故选B。2、C【分析】【分析】

分解纤维素的微生物的分离：

（1）实验原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；它们可以产生纤维素酶；纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；

（2）纤维素分解菌的筛选实验流程为：土壤取样；选择培养、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生透明圈的菌落。

【详解】

A；从土壤中分离含量较多的微生物时；进行富集的选择培养可以省略，但培养分离的纤维素分解菌少，A正确；

B；对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素但以葡萄糖为碳源的培养基上；B正确；

C；倒平板时就加入了刚果红的染色法；不需用1mol/mLNaCl洗去多余的刚果红染液，C错误；

D；为确定得到纤维素分解菌；需要进行液体或固体发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的测定方法，一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定，D正确。

故选C。3、C【分析】【分析】

泡菜发酵的实验原理：

（1）乳酸菌在无氧条件下；将糖分解为乳酸。

（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。

温度过高；食盐用量不足10%；腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。

（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。

【详解】

A；煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌；而新鲜蔬菜不要煮沸，A错误；

B；由于乳酸菌的严格厌氧的；因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水，B错误；

C；亚硝酸盐一般不会危害人体健康；但可在特定条件下转变成亚硝胺，亚硝胺具有致癌作用，C正确；

D；整个发酵过程中；亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，D错误。

故选C。4、C【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；用涂布分离法分离细菌时；所用的工具是涂布器，不是接种环，A错误；

B；在尿素固体培养基上；产脲酶细菌菌落周围会出现红色环带，因为细菌产生的脲酶催化尿素分解产生了氨，导致培养基呈碱性，培养基中的酚红指示剂遇碱性条件会变红，B错误；

C；醋酸菌在有氧条件下才能将乙醇氧化成醋酸；所以利用醋酸菌将果酒发酵成果醋，需要不断向发酵装置中通入无菌空气，C正确；

D；利用微生物进行发酵制成的泡菜中含有一定量的亚硝酸盐；其对人体是有害的，D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；一个基因表达载体需要含有目的基因；启动子、终止子及标记基因等，其中标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；在构建时，需要用相同的限制酶分别切割目的基因和载体，以获得相同末端，然后用DNA连接酶将二者连接，为保证基因表达载体能有效发挥作用，在限制酶切割时不能破坏目的基因、标记基因等必需结构。

【详解】

A；“黄金大米”的培育过程要利用植株组织培养技术将含有目的基因的籼稻细胞培育成完整植株；最终获得胚乳中富含β-胡萝卜素的大米，A正确；

B；“黄金大米”的胚乳含有中富含β-胡萝卜素；β-胡萝卜素可以缓解维生素A缺乏症的病情，B正确；

C、培育“黄金大米”过程中，转入籼稻细胞中的目的基因包括两个参与β-胡萝卜素合成的酶基因psy和crtⅠ；C正确；

D、Psy和crtⅠ基因为目的基因；其基因序列中若含有用到的限制酶的识别序列，则基因结构会被破坏，因此这两个基因内均不能含有限制酶的识别位点，D错误。

故选D。6、B【分析】【分析】

1；动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息；

2；把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合；所得到的融合细胞就可能大量增殖，产生足够数量的特定抗体，得到单克隆抗体。

【详解】

A；小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞的融合依赖于细胞膜的流动性；A正确；

B；单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体；通常利用杂交瘤技术来制备，将抗原纯化反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体不是单克隆抗体，B错误；

C；单克隆抗体可以用于运载药物、多种疾病的诊断、病原体鉴定等；其本身也可以用于治疗疾病，C正确；

D；与传统的免疫动物方法制备抗体相比；利用杂交瘤技术可以制备出高纯度的单克隆抗体，并且可以进行单克隆抗体的大量生产，D正确。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)7、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。8、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。9、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长；而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。

【详解】

A；青霉素能杀死细菌；对真菌无影响，因此，从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，且调试pH需要在灭菌前，A错误；

B；纤维素分解菌含纤维素水解酶能利用纤维素；其他微生物不能利用纤维素，刚果红和纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后出现透明圈，所以能分离和筛选纤维素的分解菌，B正确；

C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再转化NO3-、NH4+被植物利用；其他微生物细胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生长，C正确；

D、固氮菌能利用空气中N2；其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培养基进行筛选，且培养条件要适宜，D正确。

故选BCD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。12、B:C:D【分析】【分析】

本题考查DNA复制；生物变异的相关知识；意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。

【详解】

根据题干中“转座子是一段可移动的DNA序列；这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来”，说明转座子可以独立进行DNA复制，A错误；根据题干中“转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移”，说明转座子可造成真核生物染色体变异或基因重组，B正确；根据题干中“转座子可在细菌的拟核DNA；质粒或噬菌体之间自行移动”，说明转座子可用于基因工程的研究，C正确；根据题干中“有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞”，说明细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变，D正确。

【点睛】

可遗传的变异有三种来源：基因突变、染色体变异和基因重组：

（1）基因突变是基因结构的改变；包括碱基对的增添；缺失或替换。

（2）基因重组的方式有同源染色体上非姐妹单体之间的交叉互换和非同源染色体上非等位基因之间的自由组合，另外，外源基因的导入也会引起基因重组。

（3）染色体变异是指染色体结构和数目的改变。三、填空题(共9题，共18分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2515、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1418、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。19、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定四、判断题(共2题，共12分)22、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。23、A【分析】【详解】

生殖性克隆，即通常所说的克隆人，通过克隆技术产生独立生存的新个体，即通常所说的克隆人，该说法正确。五、实验题(共2题，共14分)24、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）25、略

【分析】【分析】

分析题干信息；该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群体生长规律；将单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板方法进行计数。培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分；空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降。

（4）将目的菌用于环境保护实践之前；还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确判断。【解析】筛选出能降解化合物A的细菌选择低增多稀释涂布平板培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分、空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性六、综合题(共3题，共18分)26、略

【分析】【分析】

分析图1（a）：图1（a）是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程。Ⅰ采用了核移植技术；Ⅱ采用了基因工程技术；其中①表示基因表达载体的构建过程，然后导入小鼠受精卵。

【详解】

（1）图1（a）中，从卵巢取出的a细胞需要在培养箱中培养到MⅡ期（或减数第二次分裂中期），CO2的主要作用是维持培养液pH。

（2）大鼠丙的细胞核遗传物质都来自大鼠甲；因此丙携带致病基因；丁只含有来自乙的生长激素基因，故不携带致病基因。

（3）PCR技术扩增目的基因过程中；引物与模板链的3′端结合，子链从引物的3′端开始延伸，所以选择的引物应该是②③。

（4）质粒PIJ702的长度为5.7kb，而重组质粒pZHZ8的长度为6.7kb，又已知构建基因表达载体时，目的基因置换了PIJ702上0.4kb的片段，由此判断目的基因的片段长度为6.7-5.7+0.4=1.4kb。用ClaⅠ切割质粒PIJ702时只产生一种长度的DNA片段；但用该酶切割重组质粒pZHZ8时能产生两种长度的DNA片段，这说明目的基因中含有ClaⅠ的切割位点，同理目的基因中也含有PstⅠ的切割位点，即重组质粒pZHZ8中含有2个PstⅠ酶切位点，也含有2个Clal酶切位点。因此，用这两种酶同时酶切重组质粒pZHZ8时，可将pZHZ8切成4个片段。

（5）构建基因表达载体时，破坏了mel（黑色素合成基因），但没有破坏tsr（硫链丝菌素抗性基因），因此重组质粒pZHZ8上的标记基因是tsr基因（硫链丝菌素抗性基因）；由于mel（黑色素合成基因）被破坏；含有重组质粒的受体细胞不能表达产生黑色素，因此含重组质粒的细菌在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰黑色的菌落。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再运用图中信息准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查，有一定难度。【解析】MⅡ期（或减数第二次分裂中期）维持培养液pH丙Ⅱ和Ⅲ1．44tsr基因（或硫链丝