2024年北师大版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.过程①通过显微操作去除细胞核B.过程③可用电刺激使供体细胞和去核卵母细胞融合C.进行胚胎移植前，要对供体和受体进行克疫检查，以防止发生免疫排斥反应D.过程⑤操作前需要对代孕母牛进行发情处理3、草莓皱缩病毒（SCV）感染草莓时，会使其叶片扭曲皱缩，植株矮化，导致减产。为了能快速有效检测出该病毒，研究人员利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠，制备相应的单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（）A.从免疫小鼠体内分离获得的B细胞可无限增殖B.在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中，需要进行两次筛选C.用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗体杂交的原理D.在制备单克隆抗体的过程中，用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术4、如图表示高等动物的个体发育过程，下列说法正确的是（）

A.胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层B.受精卵卵裂形成囊胚的过程中，每个细胞的体积不断增大C.图中①过程表示胚胎发育，②过程表示胚后发育D.囊胚中的内细胞团将来会发育成胎儿的各种组织和器官5、蛋白质工程的基本流程正确的是（）

①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列A.①②③④B.④②①③C.③①④②D.③④①②6、下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，说法错误的是（）A.PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制B.PCR的产物一般要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定C.凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关D.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的工具也需要灭菌处理7、下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（）A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现C.蛋白质工程与基因工程密不可分，被称为第二代基因工程D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程完全相同评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)8、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.病人的iPS细胞分化而来的细胞移植回体内后，可以避免免疫排斥9、研究发现；某些致病菌生长繁殖需要外界提供相应的生长因子。将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时，金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象（图甲）为进一步探究流感嗜血杆菌所需生长因子的种类，把其菌悬液与不含生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从血液中提取的V；X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图乙所示。下列叙述正确的是（）

A.图甲中的不同菌落可以通过观察菌落特征进行鉴别B.卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致C.可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养D.图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V或X10、让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。下列说法不正确的是（）

A.图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等B.进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状D.通过上述技术得到小羊a和b的过程为有性生殖11、我国首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪的培育过程如图所示，其中字母代表结构或生物，数字代表过程，下列相关叙述错误的是（）

A.为了①和②的顺利完成，需要用灭活的病毒对细胞进行诱导B.将C的细胞核去掉，实质上是去除纺锤体—染色体复合物C.为避免将E植入F时产生排斥反应，移植前应给F注射免疫抑制剂D.移入F的桑葚胚要经历囊胚、原肠胚等阶段才能形成猪的幼体12、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上13、转基因作物的推广种植，大幅度提高了粮食产量，取得了巨大的经济效益和生态效益硕果累累的转基因成果在带给人们喜悦的同时，也促使人们关注转基因生物的安全性问题。下列有关转基因作物的安全性的叙述，正确的是（）A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大14、野生型大肠杆菌能够在基本培养基上生长，营养缺陷型的大肠杆菌则不能在基本培养基上生长，需要在培养基中添加某些营养物质。研究人员用影印培养法对诱变产生的营养缺陷型突变体进行筛选，方法如图所示。下列叙述正确的是（）

A.母板培养基与基本培养基的成分相同B.用稀释涂布平板法将菌液接种在母板培养基上进行培养C.作为接种工具的“印章”需经过灭菌后才能印在长有菌落的母板上粘取菌种D.母板培养基上的菌落4、5、6为营养缺陷型大肠杆菌繁殖而来15、下列有关菊花组织培养的叙述，正确的是（）A.实验中使用的培养基、器械和外植体都要灭菌B.外植体用酒精消毒30s后，再用流水充分冲洗C.诱导愈伤组织期间不需要光照，后续培养需要适当的光照D.一般先诱导根的形成，再转接到诱导生芽的培养基上评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。17、获取目的基因的方法______、______、______18、来源：主要是从______中分离纯化出来的。19、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。20、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。21、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。评卷人得分四、判断题(共1题，共10分)22、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共27分)23、（1）国家生活饮用水卫生标准中规定细菌学指标的限值：细菌总数为100CFU/mL（说明：CFU为菌落形成单位）。兴趣小组同学通过滤膜法对某小区自供水设备的蓄水池进行细菌总数测定，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是___________________。

（2）所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供________和_______外，还能提供磷酸盐和________。在培养过程中，不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有___________（至少写出两点）。

（3）上述检测过程在37℃条件下经24h培养后；测得如下结果：

。平板l平板2平板3细菌总数（CFU/mL）413538据上表结果判断，所取水样测定结果是_________________。24、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。25、赤霉素与其受体GID结合后；可以促进植物茎秆伸长。蓝光能够激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，为探究该机理，研究者分别构建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表达载体，表达出相应的融合蛋白。His和GST均为短肽，它们与其他蛋白形成的融合蛋白能与His或GST抗体结合，且不影响其他蛋白的结构和功能。

(1)构建含上述融合基因的表达载体。

①结合图1分析，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，则应在____________(填“F引物”或“R引物”)的___________(“5’”或“3’”)端加上His短肽的编码序列，理由是________________。

②为使融合基因能与载体相连接，还需在F引物和R引物上添加相应的酶切位点序列，该序列应该位于His短肽编码序列的_____________(填“5’”或“3’”)端。

③用同样的方法扩增GST-GID融合基因；并构建相关表达载体。

(2)将两个表达载体同时导人拟南芥细胞，一段时间后裂解细胞，将含有His抗体的磁珠加人裂解液中，充分孵育后收集磁珠，将磁珠上的蛋白(磁珠蛋白)分离下来，进行抗原-抗体杂交，结果如图2。

①对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交的目的是_______________。对磁珠蛋白进行His抗体检测的目的是_________。

②图示结果说明，蓝光的作用机理是__________。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)26、尿素是一种重要的农业氮肥；通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某微生物的培养基配方如下：

。KH2pO4

NaHPO4

MgSO4·7H2O

蛋白胨。

葡萄糖。

尿素。

琼脂。

1．4g

2．1g

0．2g

1．0g

10．0g

1．0g

15．0g

（1）配制上述培养基的过程中，其基本步骤是：计算、称量、溶化、_____，培养基常用的灭菌方法是_____。

（2）根据培养基的成分分析，其从物理形态上看属于_____培养基，该培养基上生长的细菌是否都能分解尿素_____（填“是”或“否”），原因是_____。

（3）接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养，原因是_____。

（4）为对分离得到的菌种作进一步的鉴定，常在固体培养基中加入_____指示剂并接种培养，若菌落周围颜色变成_____，可以初步确定该种细菌为目标菌。27、阅读下列材料并回答问题：

转基因生物就是利用重组DNA技术；将外源基因（目的基因）导入受体生物（动物；植物、微生物）体内。当这些外源基因与受体生物的基因整合后，外源基因就能随受体生物细胞的分裂而增殖，并能表达出受体生物原本没有的性状，且能遗传给后代。1999年我国培育的首例转基因牛诞生，2001年转基因鲤鱼（将大马哈鱼的生长激素基因转移到普通鲤鱼体内）在我国培育成功。此外，转基因兔、羊及转基因抗虫棉等也已培育成功。

（1）不同生物间基因移植成功，说明生物共用一套_____________；从生物进化的角度看，说明这些生物具有______________。

（2）转基因技术将给农业、医药等诸多领域带来革命，目前取得了许多成就，同时也可能给人类带来灾难性的后果。试各举一至两个实例：____________________________。

（3）有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点？试从新陈代谢的角度简要说明理由。____________________________。28、为研制抗病毒A的单克隆抗体；某同学以小鼠甲为实验材料设计了如图所示实验流程。

回答下列问题：

(1)在杂交瘤细胞的体外培养过程中，需要的气体主要有O2和CO2。O2的主要作用是______，CO2的主要作用是__________。

(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤；___________________。

(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于___________，使用该培养基进行细胞培养的结果是______。杂交瘤细胞增殖能力强，其主要增殖方式是______________________。

(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有__________参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、A【分析】炭疽杆菌会引起炭疽病，可以用作生物武器；醋酸杆菌可用于醋酸的生产；酵母菌可用于酿酒；灭活的乙肝病毒可用作预防乙肝的疫苗。2、C【分析】【分析】

1；动物细胞核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

2；体细胞核移植过程：（以克隆高产奶牛为例）

【详解】

A；去除牛卵母细胞中的细胞核可以用显微操作技术；A正确；

B；③供体细胞核植入受体卵母细胞后；通常用电脉冲、钙离子载体、乙醇等使供体细胞和去核卵母细胞融合，B正确；

C；受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应；因此胚胎移植过程中，不需要对供体和受体进行免疫检查，C错误；

D；过程⑤是将早期胚胎移植入代孕母牛的子宫内；操作前需要对代孕母牛进行发情处理，D正确。

故选C。

【点睛】3、A【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；从小鼠体内中分离获得的已免疫的B细胞；能产生抗体，但不能增殖，A错误；

B；将已免疫的小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过专一抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；单克隆抗体的优点特异性强；灵敏度高，可大量制备，单克隆抗体检测草莓是否感染SCV，利用了抗原-抗体杂交的原理，C正确；

D；动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础；动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，D正确。

故选A。4、D【分析】【分析】

胚胎发育通常是指从受精卵起到胚胎出离卵膜的一段过程。在动物个体发育过程中；经过幼虫或幼体至成虫；或成体达到性成熟时的发育过程，称为胚后发育。

【详解】

A；细胞分化开始于囊胚期；A错误；

B；受精卵卵裂形成囊胚的过程中；细胞体积减小，数目增多，胚胎体积基本不变，B错误；

C；过幼虫或幼体至成虫、或成体达到性成熟时的发育过程；称为胚后发育，图中①是早起胚胎发育，幼体到成体是胚后发育，C错误；

D、囊胚中的内细胞团将来会发育成胎儿的各种组织和器官，滋养层细胞发育成胎膜和胎盘，D正确。5、C【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。

【详解】

蛋白质工程的基本流程是：③预期蛋白质功能→①预期蛋白质分子结构组成→④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列→②合成DNA。综上所述；C正确，ABD错误。

故选C。6、C【分析】【分析】

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

【详解】

A；PCR技术利用了DNA的热变性原理；通过调节该变性-复性-延伸步骤中不同温度来控制DNA双链的解聚与结合，A正确；

B；对PCR扩增后的产物；一般需要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，凝胶中的DNA分子需要染色，以便使电泳结果更直观，B正确；

C；在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度有关；C错误；

D；为避免外源DNA等因素的污染；PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前都必须进行高压灭菌处理，D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质。

【详解】

AB；蛋白质工程是在分子水平上对基因直接进行操作；AB错误；

C；蛋白质工程与基因工程密不可分；被称为第二代基因工程，C正确；

D；蛋白质工程的流程为：预期蛋白质供能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质；这和天然蛋白质合成的过程是不相同的，D错误。

故选C。

【点睛】二、多选题(共8题，共16分)8、B:C【分析】【分析】

分析题图：图中表示将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞）以及多能干细胞的分化过程，即图中①②③表示细胞分化。

【详解】

A；用iPS细胞诱导分化成需要的器官后进行自体移植；没有免疫排斥反应，可缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），可见iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；图中关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；用患者自己的体细胞通过体外诱导成iPS细胞；所以将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。

故选BC。9、A:B:C【分析】【分析】

据图分析可知；流感嗜血杆菌的菌落主要分布于添加了X和V的区域的交界处，说明该菌生长需要的生长因子是X和V。

菌落的特征：形状；大小、颜色、隆起程度、质地、边缘等。

培养基的营养组成：碳源；氮源、水、无机盐、特殊生长因子。

【详解】

A；鉴定不同种的菌落可以观察菌落的特征；比如形态、颜色、隆起程度等，A正确；

B；流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时；金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，由此推测卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致，B正确；

C；分析题干信息可知；可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养，C正确；

D、图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V和X，不是V或X，D错误。10、B:C:D【分析】【分析】

分析图解：图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab。

【详解】

A、图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab；故图中涉及的现代生物技术有动物体细胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，A正确；

B；进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚；因囊胚期细胞未分化，而原肠胚已经分化，不能进行胚胎分割，B错误；

C；通过图解分析可知；小羊只获得了羊N的细胞核，其细胞质中的基因不会遗传给小羊，C错误；

D；上述核移植技术得到克隆动物；属于无性生殖，D错误。

故选BCD。11、A:C【分析】【分析】

分析图解，可以看出绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪涉及了多项生物工程技术。图中B表示基因表达载体的构建；然后将目的基因导入猪胎儿的成纤维细胞，经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与猪的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞。重组细胞经过早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成转基因克隆猪。由此可见，该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

A；①是将重组DNA导入受体细胞；直接采用显微注射法，无需对受体细胞进行诱导，②过程通常是将细胞注入去核卵母细胞中，然后利用电融合法使D构建成功，A错误；

B；C是处于MⅡ期的卵母细胞；这个时期的“核”实际上是纺锤体—染色体复合物，B正确；

C；受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；因此无需给F注射免疫抑制剂，C错误；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要经历囊胚、原肠胚阶段的发育才能成为猪的幼体，D正确。

故选AC。12、C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成；B正确；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，D错误。

故选CD。13、A:B:D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因生物具有某些特殊性质；他们在某地区的竞争能力较强，可能成为“外来入侵物种”，威胁生态系统中其他生物的存在，从而影响生态系统的稳定性，A正确；

B；转基因作物的基因可以通过花粉传播到田间近缘野生植物体内；该近缘物种在通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，B正确；

C；即使目的基因来自自然界；培自出的转基因植物仍然可能会有潜在的安全性向题，C错误；

D；大面积种植转基因抗虫棉；有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增加，D正确。

故选ABD。14、B:C:D【分析】【分析】

影印培养法；是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是:用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小(或略小)的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。

【详解】

A；母板培养基上有发生突变的营养缺陷型和野生型大肠杆菌的菌落；而基本培养基上只有野生型大肠杆菌的菌落，由此可知母板培养基与基本培养基的成分不同，A错误；

B；分析题图可知；用了稀释涂布平板法将菌液接种在母板培养基上进行培养，B正确；

C；作为接种工具的“印章"需经过灭菌处理才能印在长有菌落的母板上；以防止杂菌污染，C正确；

D；根据基本培养基上的菌落分布和添加不同营养物质的补充培养基上的菌落分布对应位置可知；4、5、6为营养缺陷型大肠杆菌，理由是这三个菌落在基本培养基上都没有，而分别在添加了不同营养物质的补充培养基上形成，D正确。

故选BCD。15、B:C【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。

【详解】

A；无菌技术包括消毒和灭菌；植物组织培养需要无菌操作，防止杂菌污染，所用器械需灭菌，实验人员和外植体需消毒操作，A错误；

B；菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min；用流水冲洗干净后，在70%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用无菌水多次冲洗，B正确；

C；诱导培养愈伤组织期间一般不需要照光；在后续培养过程中，每日需要给予光照，目的是诱导叶绿素的形成，进一步形成叶绿体进行光合作用，C正确；

D；诱导愈伤组织形成试管苗的过程；需要将生长良好的愈份组织先转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导生根，D错误。

故选BC。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3020、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色221、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。四、判断题(共1题，共10分)22、A【分析】【详解】

生殖性克隆，即通常所说的克隆人，通过克隆技术产生独立生存的新个体，即通常所说的克隆人，该说法正确。五、实验题(共3题，共27分)23、略

【分析】【分析】

1；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。

2；统计菌落数目使用的方法有显微镜直接计数法和活菌计数法；其中活菌计数法即稀释涂布平板法，一般选择菌落数目在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）平板倒置后既可使培养基表面的水分更好地挥发；又可防止冷凝水滴落培养基，造成污染，影响实验结果。

（2）所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外；还能提供磷酸盐和维生素。区分菌落种类的依据是菌落的形状；大小、隆起程度和颜色等特征。

（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次；直到各类菌落数目稳定，以防因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目。表格中3个平板的平均菌落数为（41+35+38）÷3=38个，低于国家标准，因此所取水样符合饮用水标准。

【点睛】

本题考查微生物分离和培养的相关知识，要求考生识记培养基的成分，掌握微生物分离和计数的方法，属于考纲理解层次的考查。【解析】防止冷凝水滴落污染培养基碳源氮源维生素菌落大小、形状、隆起程度和颜色等符合饮用水的标准24、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取；基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。

【详解】

（1）①由图1可知，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，即获得“3’—His短肽—CRY基因—5’”的基因表达载体；由图可知CRY基因的3’端对应的为F引物，即要将His短肽加在CRY的氨基端，应在CRY基因模板链的3’端上加His短肽编码序列，对应的是F引物；而且加上的His序列不与CRY转录模板配对，所以只能加在F引物5’端，才能保证引物与模板配对后可以正常延伸。

②为使融合基因能与载体相连接；酶切位点序列应该位于F引物的3’端，His短肽编码序列的5’端。

（2）①为确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞中已正常表达；应对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，并且为了确定磁珠上的His抗体可以结合His短肽，对磁珠蛋白进行His抗体检测。

②由题意可知，蓝光可以激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，分析图2，对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，无论黑暗或蓝光条件下，均具有条带，但含有His抗体的磁珠蛋白组，黑暗条件下没有检测到GST条带，但蓝光组出现了GST条带，说明蓝光激活CRY后，CRY与赤霉素受体GID结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用。【解析】(1)F引物5’要将His短肽加在CRY的氨基端；则应在CRY基因模板链的3’端上加His短肽编码序列，对应的是F引物；而且加上的His序列不与CRY转录模板配对，所以只能加在F引物5’端，才能保证引物与模板配对后可以正常延伸5’

(2)确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞中已正常表达确定磁珠上的His抗体可以结合His短肽光激活CRY后，CRY与赤霉素受体GID结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用六、综合题(共3题，共9分)26、略

【分析】【分析】

1；尿素分解菌能合成分解尿素的脲酶。培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法灭菌。筛选尿素分解菌的培养基应以尿素作为唯一的氮源；并加入酚红指示剂，由于尿素分解菌能够将尿素分解为氨而使pH升高，酚红指示剂能够与氨反应呈红色，故可以用酚红指示剂检测尿素分解菌。

2；平板倒置的原因是防止培养皿盖上的冷凝水滴入培养基；也可以避免培养基中的水分过快的挥发。

【详解】

（1）配制上述培养基的过程中；其基本步骤是：计算；称量、溶化、灭菌、倒平板，培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

（2）由题可知培养基中加入了琼脂；从物理形态上看属于物理培养基，该培养基上生长的细菌不是都能分解尿素，原因是培养基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，能利用蛋白胨作为氮源的微生物也能生长。

（3）接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养；原因是防止培养皿盖上的冷凝水滴入培养基，也可以避免培养基中的水分过快的挥发。

（4）为对分离得到的菌种作进一步的鉴定；常在固体培养基中加入酚红指示剂并接种培养，若菌落周围颜色变成红色，可以初步确定该种细菌为目标菌。

【点睛】

本题考查尿素分解菌的筛选，掌握筛选尿素分解菌的基本原理是解答本题的关键。【解析】灭菌、倒平板高压蒸汽灭菌法物理否培养基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，能利用蛋白胨作为氮源的微生物也能生长（或培养基中含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素，也能为微生物提供氮源；固氮微生物或利用氨作为氮源的微生物也能生长）防止培养皿盖上的冷凝水滴入培养基，也可以避免培养基中的水分过快的挥发酚红红色27、略

【分析】【分析】

20世纪中叶；基础理论取得了重大突破，催生了基因工程，如“肺炎双球菌的