T-ZJATA 0026-2024 水质 总磷测定预制磷钼蓝和钒钼黄试剂分光光度法

Z102024-07-08发布T/ZJATA0026—2024 1适用范围 2规范性引用文件 3术语和定义 5干扰与消除 26试剂或材料 7仪器和设备 8采样和样品 9测定条件 11结果计算与表示 13质量保证和质量控制 参考文献 T/ZJATA0026—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。考虑到生态环境监测类标准的专业性和特殊要求，本文件主要内容按HJ168-2020《环境监测分析方法标准制修订技术导则》的规定编制。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由浙江省分析测试协会提出并归口。本文件起草单位：浙江省生态环境监测中心、浙江迪特西科技有限公司本文件验证单位：浙江省海洋生态环境监测中心、浙江省杭州生态环境监测中心、浙江省台州生态环境监测中心、浙江省绍兴生态环境监测中心、浙江省金华生态环境监测中心、浙江环境监测工程有限公司、中科检测技术服务（嘉兴）有限公司。本文件主要起草人：朱晓丹、俞慧萍、蒋立英、傅强、赵娴、雷伟冬、郑婉琳、汪凌佳、林雪志、陈彩凤、叶尚锋、伍泓洁、包伟方1T/ZJATA0026—2024水质总磷测定预制磷钼蓝和钒钼黄试剂分光光度法警告：预制试剂含有硫酸。使用本文件的实验人员应注意安全防护，避免与试剂直接接触，实验过程中应防止试剂泄露。1适用范围本文件描述了测定水中总磷的预制磷钼蓝（钒钼黄）试剂分光光度方法本文件适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中总磷的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ91.2地表水环境质量监测技术规范3术语和定义3.1总磷Totalphosphorus；TP总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。3.2预制试剂precastreagent通过预先在生产工厂完成某种分析所需几种试剂的称量、溶解、混合、分装等流程，得到独立包装、即开即用的化学试剂产品。3.3实验室空白试验laboratoryblanktest将实验用水代替实际样品，按照与实际样品一致的分析步骤进行测定的过程。3.42T/ZJATA0026—2024全程序空白试验wholeprogramblanktest将实验用水代替实际样品，置于样品容器中并按照与实际样品一致的程序进行测定的过程。注：一致的程序包括运至采样现场、暴露于现场环境、装4原理测定时根据水样中总磷浓度水平的高低，选择低量程（过硫酸钾消解-磷钼蓝分光光度法）或高量程（过硫酸钾消解-钒钼黄分光光度法）测定总磷浓度值。低量程：水样加入到总磷预制试剂管内，在中性条件下用过硫酸钾使试样经高温消解后，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物，于波长880nm处测定吸光度值，换算成水样的总磷浓度值。高量程：水样加入到总磷预制试剂管内，在中性条件下用过硫酸钾使试样经高温消解后，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐和钼酸盐反应生成钼磷酸杂多酸，在钒存在下，生成黄色的磷钒钼黄，黄色深浅和磷含量成正比，于波长420m处测定吸光度值，换算成水样的总磷浓度值。5干扰与消除5.1低量程主要干扰物为有机物、浊度、色度、砷、砷酸盐、硫化物、铬、铁、铝、铜、镍、锌、酸度及强缓冲溶液、硅、硅酸盐等。有机物干扰会消耗过硫酸钾氧化剂，使总磷的测定结果偏低，可以通过稀释试样来减少影响，当用过硫酸钾高温密封消解未能完全破坏时，本方法不适用；浊度和色度可采用补偿方法减少影响；硫化物大于2mg/L时干扰测定，可通入氮气去除；砷大于2mg/L时干扰测定，可用硫代硫酸钠去除；铬大于50mg/L时干扰测定，可用亚硫酸钠去除；酸度过高及存在强缓冲溶液超出预制试剂的缓冲能力时，样品测试前应先调节pH值至中性。5.2高量程主要干扰物为砷酸盐、氟化物、钍、铋、硫化物、硫代硫酸盐、硫氰酸盐或过量钼酸盐，都会引起负干扰；二价铁会使溶液变成蓝色，小于100mg/L时不影响测定；硫化物干扰可用溴水氧化法消除；酸度过高及存在强缓冲溶液超出预制试剂的缓冲能力时，样品测试前应先调节pH值至中性；铝、铁（三价）、镁、钙、钡、锶、锂、钠、钾、铵根离子、镉、锰、铅、汞（一价、二价）、锡（二价）、铜、镍、银、铀、锆、砷酸盐离子、溴离子、焦磷酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、钼酸盐、硫酸根离子、亚硫酸根离子、碳酸根离子、高氯酸根离子、氰根离子、碘酸根离子、硅酸根离子、硝酸根离子、亚硝酸根离子、乳酸盐、酒石酸盐、水杨酸盐、甲酸盐、四硼酸盐、草酸盐、硒酸盐、苯酸盐小于1000mg/L时不影响测定。6试剂或材料除非另有说明，实验时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，实验用水均为新制备的超纯水、蒸馏水或同等纯度的水。6.1预制试剂3T/ZJATA0026—20246.1.1低量程预制试剂主要组成成分应包括：)6，（6.1.2高量程预制试剂主要组成成分应包括：)6预制试剂在常温避光条件下，应至少能稳定保存1年。预制试剂在使用前应进行消耗性材料的质量检验，检验方法按附录A执行。6.2总磷标准溶液6.2.2总磷标准储备液，(以P计)，ρ=1000mg/L。准确称取磷酸二氢钾（6.中，转移至1000ml容量瓶中，加入2.5ml浓硫酸（6.3），用水稀释至标线，摇匀，贮存于具塞玻璃试剂瓶中。此溶液至少可储存6个月。或直接购买市售有证标准溶液。容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液至少可储存6个月。容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液在4℃冷藏条件下保存，可稳定1个月。间液Ⅱ（6.2.4加入到相应的100ml容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。此系列溶液使用当天配制。和30.00ml的总磷标准中间液Ⅰ（6.2.3加入到相应的100ml容量瓶中，此系列溶液使用当天配制。6.3硫酸7仪器和设备4T/ZJATA0026—20247.1分光光度计：应符合HJ924的相关要求，具备数据存储、曲线存储、查阅、校准等功能，能清晰显工作时，吸光度示值稳定性、测量重复性和测量误差应符合HJ924中规定的性能指标要求。仪器测量范围应满足方法测定范围的要求。7.2恒温消解器：应符合HJ924的相关要求，应具有自动恒温加热、计时鸣叫等功能，有透明且通风的防消解液飞溅的防护盖。恒温消解器加热孔深度一般不低于或高于消解管内反应液高度5mm，加热后应在10min内达到设定的温度（165℃±2℃)。压力，管盖应耐热耐酸，使用过程中应加强外观检查，所有消解比色管和管盖均无任何破损或裂纹，其用于光度测定的部位应光滑透明且无擦痕、粗糙和沾污。7.4消解比色管支架：能耐165℃以上高温，方便消解比色管的放置和取出，不可擦伤消解比色管光度测量的部位。7.5吸量管、容量瓶：A级。7.6移液器（枪），最小分度体积不大于0.01ml。7.7一般实验常用仪器和设备。8采样和样品8.1样品采集与保存按照HJ91.1、HJ91.2、HJ164相关规定采集水样。样品采集于聚乙烯或玻璃瓶中，采集后如不能在现场立即测定，应立即加入硫酸（6.3至pH≦2，常温下可保存24h，-20℃冷冻可保存一个月。对于总磷≦0.01mg/的样品，不可用聚乙烯瓶储存，冷冻保存状态除外。8.2样品的预处理在吸取水样进行分析前，应振摇样品瓶使其均匀，必要时应将水样进行均质化处理，可使用电磁搅拌器进行搅拌，以确保组分均匀。待测试样如无明显干扰，可摇匀直接或用纯水稀释后取样，如存在干扰可采用5.1及5.2中方法对样品进行预处理后再取样测定。8.3水样稀释如果水样的总磷浓度值超过方法的测定上限时，需用水稀释原样，一般每次稀释取样量不少于5ml。如果水样的总磷浓度值超过低量程方法的测定上限时，可采用高量程方法测试。9测定条件由于测试结果取决于测定条件，设定的分析测定条件应保证测试时，被测组分与预制试剂生成的络合物能够得到有效的识别。根据水样中总磷浓度范围选择高、低量程进行测定，本文件分析测定条件见5T/ZJATA0026—2024表1分析测定条件(℃)10分析步骤10.1校准曲线分光光度计（7.1）具有制作校准曲线功能，测定时可使用预制试剂生产商提供的校准曲线，使用前需用总磷标准中间液Ⅰ（6.2.3）和总磷标准中间液Ⅱ（6.2.4）分别配制高、低量程校准曲线中间点浓度标准溶液进行核查。当测试条件、仪器性能、预制试剂、人员等实验条件发生较大改变时，会对校准曲线的符合性带来一定的影响，尤其对低浓度水平的测定影响会更大，应核查校准曲线的符合性，核查时，选取曲线相应的低、中、高浓度点的标准溶液进行测定。核查时，其测定结果与曲线对应点浓度之间的误差应不超过表2规定的限值。如果需要自行建立校准曲线测定样品，按附录B执行。表2校准曲线的符合性要求10.2低量程样品测定10.2.1打开恒温消解器，使温度稳定在125℃±2℃之间。10.2.2打开低量程消解比色管密封盖。摇匀。取出消解比色管降温，待消解比色管冷却至室温。10.2.5将试剂B内的粉剂倒入每支管中，摇匀，使粉剂溶解。6T/ZJATA0026—202410.2.8用实验用水代替水样，按照10.2.1至10.2.7的步骤进行实验室空白试验。空白试验应不少于2个平行样，选择总磷浓度值较低的实验室空白样作为参比溶液。10.2.9用无毛纸擦净消解比色管外壁，以实验室空白样作为参比溶液，在880nm波长处直接读取总磷浓度值。10.3高量程样品测定10.3.1打开消解器，使温度稳定在125℃±2℃。10.3.2打开高量程消解比色管密封盖。10.3.3准确加入5.00mL的待测水样，将试剂A内的粉剂倒入每支消解比色管中，盖紧密封盖，摇匀。10.3.4将消解比色管放入消解器的加热孔中，待温度回升至125℃±2℃开始计时，加热消解30min。取出消解比色管降温，待消解比色管冷却至室温。10.3.5当消解后消解比色管中溶液有颜色时，加入1滴试剂B进行脱色。10.3.7用实验用水代替水样，按照10.3.1至10.3.6的步骤进行实验室空白试验。空白试验应不少于2个平行样，选择总磷浓度值较低的实验室空白样作为参比溶液。10.3.8用无毛纸擦净消解比色管外壁，以实验室空白样作为参比溶液，在420nm波长处直接读取总磷浓度值。当分光光度计带有自动取均值功能时，每支样品管读数1次作为最终浓度值；当分光光度计无自动取均值功能时，为减少读数误差，每支样品管转动应不少于3个方向，记录读数，取平均值作为最终浓度值。10.4当消解后样品浑浊时，应采用色度、浊度补偿。取1支消解比色管，按样品测试步骤，记录总磷浓度值H；另取1支消解比色管，用实验用水代替试剂C，其他同样品操作步骤，记录总磷浓度值Q，11结果计算与表示11.1结果计算水样中总磷以质量浓度ρ计，按公式（1）计算：7T/ZJATA0026—2024ρ=ρ′×f……(1)式中：ρ—水样的总磷浓度值，单位为毫克每升(mg/L)；ρ′-分光光度计直接测定的总磷浓度值，单位为毫克每升(mg/L)；f－水样的稀释倍数。11.2结果表示留三位有效数字。12准确度12.1精密度12.1.1低量程测定的精密度12.1.2高量程测定的精密度8T/ZJATA0026—202412.2正确度12.2.1低量程测定的正确度活污水和1.00mg/L的工业废水统一实际样品，加标量分别为0.2μg、2.0μg、4.0μg和4.0μg的，12.2.2高量程测定的正确度一实际样品，加标量分别为10.0μg、40.0μg和60.0μg，重复测定6次：加标回收率分别为93.9~13质量保证和质量控制13.1空白试验每批样品(≤20个）应至少做2个实验室空白样，以空气为参比，低量程在880nm波长处测定，高量程在420nm波长处测定，空白试验浓度差值应不大于本文件的方法检出限，否则应查明原因，重新测定合格后才能测定样品。13.2全程序空白每批样品(≤20个）至少做1个全程序空白样，测定结果应低于方法检出限，否则应查明原因，重新分析至合格后才能测定样品。13.3精密度控制每批样品(≤20个）至少测定10%的平行样，样品数量≤10个时，应至少测定1个平行样。9T/ZJATA0026—2024采用低量程测试时，当样品总磷浓度均值≤0.03mg/L时，平行双样测定结果的相对偏差应≤25%；总磷浓度均值为＞0.03mg/L时，平行双样测定采用高量程测试时，当样品总磷浓度均值≤0.2mg/L时，平行双样测定结果的相对偏差应≤20%；总磷浓度均值为＞0.2mg/L时，平行双样测定结果的相对偏差应≤10%。13.4正确度控制每批样品(≤20个）至少测定1个有证标准样品或基体加标样品。有证标准样品测定值应在其给14废弃物处理实验产生的废弃试管与试剂应统一收集，根据国家或地方的有关规定进行安全处理。15注意事项15.1装有预制试剂的密封消解管在加热过程中均有一定的压力，应密切关注和避免管内压力急剧增加而发生危险，应加强防护，做好必要的安全措施。密封消解管使用前应仔细检查，任何有裂痕或有脏物均不得使用。15.2装有预制试剂的密封管在加热消解时，必须盖紧螺旋盖保持密封，加热消解完毕应冷却至室温后，才能拧开盖子。15.3样品加热消解时应保证加热器恒温，均匀加热，使密封消解管中的溶液缓慢沸腾（处于微沸回流状态），但不宜爆沸。如出现爆沸，说明溶液中出现局部过热，会导致测定结果有误。15.4当需要自行建立校准曲线测定样品时，制作的校准曲线不得少于6个浓度点，应尽量覆盖被测样品的浓度范围，且最低浓度点的浓度水平应接近方法检出下限；校准曲线回归方程的相关系数│r│值应≥0.999。T/ZJATA0026—2024预制试剂的质量检验方法A.1检验目的确保预制试剂的质量满足本文件要求。A.2检验技术要求、检验项目和试验方法A.2.1检验技术要求预制试剂使用前应进行质量检验，以满足方法测定结果的精准度要求。检验时随机抽取含预制试剂的消解管进行试验。检验项目包括空白试验及标准样品正确度试验。A.2.2空白试验A.2.2.1以测定任意二支实验室空白样的差值为空白试验的检验指标。A.2.2.2试验步骤低量程预制试剂按10.2.1~10.2.8规定进行，用无毛纸擦净消解比色管外壁，以空气为参比，在880nm波长处直接读取实验室空白样（A.2.2.1）总磷浓度值；高量程预制试剂按10.3.1~10.3.7规定进行，用无毛纸擦净消解比色管外壁，以空气为参比，在420nm波长处直接读取实验室空白样（A.2.2.1）A.2.2.3一般同一批次预制试剂至少做2个实验室空白样的差值，要求至少重复测定3次，取平均值作为最终值。A.2.3正确度试验分别采用低量程方法及高量程方法对总磷有证标准样品进行试验，要求至少重复测定3次，取平均值作为最终值。试验步骤低量程预制试剂按10.2规定进行，高量程预制试剂按10.3规定进行。A.3检验结果评判空白试验浓度差值不大于本文件方法检出限，且标准样品测定结果在有证标准物质允许误差范围内，则判定该预制试剂的质量符合要求。否则，判定该预制试剂的质量不合要求，应查找原因进行纠正。T/ZJATA0026—2024自建立校准曲线的样品测定方法B.1概述当实验室需要自行建立校准曲线测定水样时，可按以下给出的样品测定方法进行试验。B.2总磷标准溶液的配制4），优级纯，105℃±5℃干燥恒重，保存在干燥器中。B.2.2总磷标准储备液(以P计)：ρ=1000mg/L，该标准溶液的配制见6.2.2。B.2.3总磷标准中间液I(以P计)，ρ=100mg/L。该标准溶液的配制见6.2.3。B.2