2024年华东师大版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.iPS细胞与肌肉细胞有相同的遗传物质，关键基因在肌肉细胞中能复制、转录和翻译B.过程①②③是基因选择性表达的结果，图示过程体现了iPS细胞具有全能性C.用该技术得到的新生器官替换供体病变器官，可避免异体移植产生的免疫排斥反应D.4个关键基因表达过程将改变肌肉细胞的细胞质环境，使iPS细胞功能趋向专门化5、下列有关基因工程的基本工具叙述正确的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同种限制酶切割的末端才能连接，不同限制酶切割的末端不能连接C.基因工程中，只能利用天然质粒，质粒上的标记基因用于重组DNA的筛选D.T4DNA连接酶既可以连接粘性末端，也可以连接平末端，但连接平末端的效率相对较低评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)6、科学家通过“治疗性克隆”研究发现；利用病人本身的细胞可治疗其患有的某些疾病。一般将胚胎干细胞进行基因修饰后，经诱导分化成相应的组织器官用于移植。其过程如下图所示。下列关于“治疗性克隆”的叙述不正确的是（）

A.人类“治疗性克隆”属于生物工程中的细胞工程B.该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养、胚胎移植等C.此过程体现了胚胎干细胞具有全能性D.“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比，其优点之一是避免了免疫排斥反应7、中国科学院动物研究所首席科学家；动物克隆与受精生物学学科带头人陈大元；曾主持科研攻关项目——“攀登”，进行大熊猫的异种克隆。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（）

A.整个过程用到的技术手段有动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植等B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.重构胚发育成囊胚所需营养主要来源于“代孕母体”D.步骤甲和步骤乙中的供体和受体需要同期发情处理8、嵌合体是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的聚合胚胎发育而成的个体嵌合体的制备是研究干细胞体内分化能力的有效方法之一，有望在未来为解决器官移植供体短缺等医学难题开辟新的方向。研究人员将小鼠诱导性胚胎干细胞（ES）注入到猪的囊胚期胚胎后获得猪一鼠嵌合体。下列相关叙述正确的是（）A.培育嵌合体与克隆动物的生物学原理不相同，前者运用的是细胞的增殖与分化后者是动物细胞核的全能性B.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能C.将胚胎干细胞注入猪囊胚的滋养层处才能获得猪—鼠嵌合体D.若培育出“人—兽嵌合体”将会面临与克隆人一样的伦理问题9、近年来；全人源化单克隆抗体技术发展迅速，利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体的制备流程如图所示，下列说法正确的是（）

A.该技术能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应B.过程①②采用核移植技术，体现了动物细胞核的全能性C.过程⑧要经过选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测等过程D.体外培养B细胞也可以大量获得针对该抗原的单克隆抗体10、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养11、为探究提高“日照蓝莓”品质和产量的新途径，某生物兴趣小组以“日照蓝莓”的主要品种——兔眼蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述正确的是（）A.取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体B.用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时，要控制好时间以避免造成伤害C.对分化培养基灭菌前需添加生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类等生长调节剂D.脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大，产量更高，后代个体中更不易被病毒感染12、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态，不同相对分子质量DNA进行琼脂糖凝胶电泳时可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切质粒后，电泳后出现3条带。下列叙述正确的是（）A.该质粒上只有3个酶切位点B.琼脂糖凝胶电泳可以用来分离DNAC.外加电场时，DNA向正极泳动D.琼脂糖带负电荷，有利于DNA的泳动13、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)14、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。15、______——“分子手术刀”16、___________（简称PCR）是一种____________迅速_______________的技术，它能以极少数的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。17、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。18、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________评卷人得分四、判断题(共2题，共4分)19、雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力()A.正确B.错误20、转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共15分)21、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。22、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。23、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分六、综合题(共4题，共16分)24、酶是细胞合成的生物催化剂；已经从实验室走进人们的生产；生活。请结合酶在食品、医药方面的应用来回答问题：

（1）腐乳又称豆腐乳，是中国流传数千年的特色传统民间美食。经过发酵的腐乳易于消化吸收，是因为毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成_____________。在制作腐乳过程中，加盐的作用是_____________（答出两点即可）。

（2）从细胞中提取出的酶，应置于缓冲溶液中，原因是缓冲溶液能够_____________。若采用凝胶色谱法对酶进行纯化，装填色谱柱前应将凝胶加入洗脱液并用沸水浴加热，用沸水加热的优点有__________（答出两点即可）。

（3）“多酶片”是经特殊工艺制成的双层药片，可用于治疗消化不良。内层是肠溶衣（不易溶于胃液，可溶于肠液）包裹的胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶，外层是糖衣（可溶于胃液）包裹的胃蛋白酶。为使药物充分发挥作用，使用时建议____________（填“整片吞服”或“嚼碎服用”），理由是________________________。25、新型冠状病毒(RNA病毒)可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体引起肺炎。抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。如图为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图，序号①～④表示细胞。据图回答下列问题：

(1)诊断是否感染新型冠状病毒，可通过咽拭子取样，其检测的是病毒的________，还可采集血液样本检查血清中________________；另外通过胸透检测胸部是否有病毒侵染的阴影；也可确诊。

(2)研制抗S蛋白单克隆抗体时，需先给小鼠注射S蛋白以激活小鼠的免疫细胞。图中①、②分别表示______________、______________，用选择性培养基筛选获得③，再经多次筛选出的④为______________，该细胞的特点是_______________________。

(3)细胞①、②融合常用的化学法是用________作为诱导剂。26、重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物；使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子，并将改造后的目的基因导入质粒构建目的基因表达载体。

(1)上图所示的重叠延伸PCR技术中，PCR1的引物是_________。PCR4可获得大量定点诱变目的基因，此时的引物为__________。PCR3时模板DNA不能选择DNA分子③的原因是___________。

(2)为使重叠延伸PCR技术改造后的目的基因（该基因序列不含图中限制酶的识别序列）能与载体正确连接，PCR4时，应在基因上、下游引物的_________端分别添加限制酶_________的酶切位点。

(3)将目的基因、质粒及大肠杆菌混合，温育一段时间后涂在含四环素的平板上培养，一段时间后平板上长出菌落。这些菌落的菌体内_________（填“一定不一定”）含有目的基因，理由是_________。27、胰蛋白酶抑制剂（TI）可抑制昆虫蛋白酶活性；阻碍昆虫消化蛋白质。盐藻是一种无细胞壁的单细胞真核绿藻，是能在高盐条件下生长的新型生物反应器。研究人员利用基因工程技术构建TI基因的表达载体，并将其导入盐藻细胞中，进行了一系列实验。回答下列问题：

(1)研究人员利用PCR技术特异性地扩增目的基因的前提是需要___________，以便合成引物。PCR过程中温度的控制至关重要，将处理温度控制在90～95℃，是为了___________。

(2)获取目的基因后，为了构建基因表达载体，还需要使用的酶是___________（答出2种）。构建成功的基因表达载体应含有的结构有目的基因、启动子、___________（答出3种）等结构。

(3)研究人员将TI基因导入受体细胞后进行了检测，相关步骤和实验结果如表所示。该检测方法依据的原理是___________。据表分析，该实验结果说明___________。组别实验步骤实验结果①②③③转基因盐藻（A组）离心收集三组细胞制备可溶性蛋白质样品将TI注射到大白兔体内，获取TI抗体让TI抗体和样品进行混合检测有杂交带非转基因盐藻（B组）无杂交带无杂交带阳性对照组（C组）有杂交带有杂交带参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

1；果酒制作原理：酵母菌是兼性厌氧微生物。在缺氧、呈酸性发酵液中；酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物生长受抑制。酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵。酒精发酵的温度，20℃左右。

2；果醋的制作。

（1）菌种：醋酸菌；又名醋酸杆菌。①繁殖方式：二分裂。②代谢类型：异养需氧型。③温度：30℃-35℃

（2）原理：①当氧气充足；糖源充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。④当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；制作果酒的酵母菌为真菌；制作果醋的醋酸杆菌为细菌，属于原核生物，所以，二者菌种在结构上最大的差异是有无成形细胞核，A正确；

B；当氧气充足、糖源充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。要产生醋酸，氧气必须充足，不能缺乏，B错误；

C；醋酸菌的最适温度高于酵母菌；所以用葡萄酒制作葡萄醋时需将发酵的温度适当提高，C正确；

D；酒精与酸性重铬酸钾在酸条件下发生反应生成灰绿色；所以果汁发酵后是否产生酒精可用酸性重铬酸钾来检验，D正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

植物细胞工程中在不损伤植物细胞的结构的情况下除去细胞壁的方法是酶解法；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，即用纤维素酶和果胶酶处理，使细胞壁溶解。

【详解】

植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；在不损伤植物细胞内部结构的情况下，可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，以去除细胞壁，B正确。

故选B。3、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。自然界所有生物共用一套遗传密码子；所以一种生物的基因能在另一种生物体内表达。

【详解】

A；转基因生物可能拥有特定的某些更适应环境；更具有竞争力的性状，则其可能威胁到生态系统中其他生物的生存，A正确；

B；由于植物与害虫间是相互选择的；转基因抗虫植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B错误；

C；由于不同生物共用一套遗传密码；所以动物生长激素基因转入植物后也能表达，C错误；

D；即使转基因植物的外源基因来源于自然界也可能会存在安全性问题；转基因植物是否存在安全性问题，要通过验证才能确定，D错误。

故选A。

【点睛】4、C【分析】【分析】

分析题图：首先将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个肌肉细胞成为具有类似干细胞功能的多能干细胞（iPS细胞），再诱导多能干细胞（iPS细胞）分化形成神经细胞；心肌细胞和肝脏细胞等。

【详解】

A；肌肉细胞中无关键基因；因此与iPS细胞的遗传物质不同，A错误；

B；图示过程中没有新个体的产生；因此没有体现出细胞的全能性，B错误；

C；用该技术得到的新生器官替换供体病变器官；可避免异体移植产生的免疫排斥反应，C正确；

D；由图可知；4个关键基因的表达使肌肉细胞发生了“脱分化”，使iPS细胞功能趋向多能化，D错误。

故选C。

【点睛】5、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶大多来自原核生物；只能识别DNA分子的特定核苷酸序列，A错误；

B；不同限制酶切割后；若黏性末端相同也能连接，B错误；

C；基因工程中用到的质粒多是在天然质粒的基础上进行过人工改造的；C错误；

D、T4DNA连接酶是从T4噬菌体中分离得到的；既可以连接粘性末端，也可以连接平末端，但连接平末端的效率相对较低，D正确。

故选D。二、多选题(共8题，共16分)6、B:C【分析】【分析】

1；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。2、分析题图：图示为治疗性克隆的大概过程，即从患者身上提取一个体细胞核，移植到去核的卵细胞中，形成一个新细胞，经过动物细胞培养成胚胎干细胞，经过细胞分裂、分化形成组织和器官。

【详解】

A；人类“治疗性克隆”应用的主要技术有核移植、动物细胞培养；属于生物工程中的动物细胞工程，A正确；

B；由图可知；该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养，没有应用胚胎移植技术，B错误；

C；此过程没有形成完整个体；不能体现胚胎干细胞的全能性，C错误；

D；“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比；器官来自于同一个体，其优点之一是避免了免疫排斥反应，D正确。

故选BC。7、A:B【分析】【分析】

1；析题图：步骤甲为细胞核移植；步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素。

2；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。

3；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内；使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。

【详解】

A；步骤甲和步骤乙分别是指细胞核移植和胚胎移植作用；所以整个过程用到的技术手段有动物细胞培养（重组胚胎培养）、动物体细胞核移植和胚胎移植等，A正确；

B；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正确；

C；重组细胞发育成早期胚胎所需营养主要来源于去核的卵母细胞；C错误；

D；步骤乙中的供体和受体需要同期发情处理；甲不需要，D错误。

故选AB。

【点睛】

分本题结合图解，考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记体外受精的过程及条件；识记早期胚胎培养的过程及条件，能结合图中信息准确判断各选项。8、A:B:D【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。

2；胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后；同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体内的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】

A；培育嵌合体的生物学原理是细胞的增殖和分化；克隆动物的生物学原理是动物细胞核具有全能性，两者的原理不相同，操作方法有差别，A正确；

B；由题干信息“将小鼠诱导性胚胎干细胞（ES）注入到猪的囊胚期胚胎后获得猪一鼠嵌合体”可知；胚胎干细胞分化程度低，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能，B正确；

C；滋养层细胞将来发育成胎膜、胎盘；内细胞团将来发育为胚胎的各种组织、器官，故应将胚胎干细胞注入猪囊胚的内细胞团处才能获得猪—鼠嵌合体，C错误；

D；若培育出“人—兽嵌合体”将会面临与克隆人一样的伦理问题；是不道德的，D正确。

故选ABD。

【点睛】9、A:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体；能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应，A正确；

B；过程①②利用的是转基因技术；B错误；

C；融合后的细胞需要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞；还要经过克隆化培养、（专一性）抗体检测等，C正确；

D；B细胞在体外培养条件下不能无限增殖；体外培养B细胞不能获得大量的单克隆抗体，D错误。

故选AC。10、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。11、A:B【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。

【详解】

A；取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体；这是因为芽尖分裂旺盛，且很少带有病毒，甚至不含毒，A正确；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时；要控制好时间以避免造成伤害，否则外植体会受到损失，导致实验失败，B正确；

C；生长调节剂应该在培养基灭菌后添加；否则高温可能使其失去效果，C错误；

D；脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大；产量更高，后代个体中含病毒较少，但并不是不易被病毒感染，D错误。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

分析题干：质粒上的DNA分子为环状；某种限制性内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带（相同分子量的为一条带），即3种不同分子量DNA（至少被切割成3条DNA片段），因此环状质粒上至少有3个酶切位点。

【详解】

A；由分析可知；该质粒上至少含有3个酶切位点，A错误；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，DNA在一定的电场力作用下，在凝胶中向正极泳动，DNA分子越大，泳动越慢，因此琼脂糖凝胶电泳可以用来分离DNA，B正确；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，因此外加电场时，DNA向正极泳动，C正确；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，若琼脂糖带负电荷，使得电场力增强，有利于DNA向正极泳动，D正确。

故选BCD。13、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)14、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】多聚酶链式反应体外扩增DNA片段17、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。18、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质四、判断题(共2题，共4分)19、A【分析】【详解】

雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，精子获能的过程不是获得能量的过程，是获得受精能力的过程，可在获能液或受精液中完成，故正确。20、A【分析】【详解】

转入到油菜的抗除草剂基因，则可能通过减数分裂进入到花粉细胞中，进而传入环境中的其他生物体内。本说法正确。五、实验题(共3题，共15分)21、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层22、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是显微注射法。

（3）上述建构好的表达载体含有能够表达β-萄糖苷酶(BglB)的基因；转基因大肠杆菌能够分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能够降解纤维素。

（4）蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA连接酶显微注射法。

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列六、综合题(共4题，共16分)24、略

【分析】【分析】

（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

2；凝胶色谱法的原理：根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

【详解】

（1）参与腐乳发酵的微生物主要是毛霉；其产生的蛋白酶可将豆腐中的大分子有机物蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。腐乳制作过程中；加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块变质。要制作出色香味俱全的腐乳，关键在于的卤汤配制。

（2）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法。从细胞中提取出的酶；应置于缓冲溶液中，可通过缓冲液调节外界的酸和碱溶液对溶液pH的影响，维持pH基本不变。处理色谱柱填料时，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，以加速膨胀，这种方法不但能够节省时间，而且还可以除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒中的空气。

（3）多酶片内层是肠溶衣（不易溶于胃液；可溶于肠液）包裹的胰蛋白酶；胰脂肪酶、胰淀粉酶，外层是糖衣（可溶于胃液）包裹的胃蛋白酶。为使药物充分发挥作用，使用时建议整片吞服，理由是整片吞服使肠溶衣在胃液中不被破坏，确保肠溶衣包裹的酶在肠溶液中发挥作用，若嚼碎服用，肠溶衣包裹的酶释放后会在酸性的胃液中失活，无法发挥作用。

【点睛】

本题主要考查腐乳的制作、蛋白质的提取和分离、多酶片的作用效果等，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象等，需要考生在平时的学校过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作中不会过早酥栏；同时抑制微生物的生长，避免豆腐块变质；调味抵制外界的酸和碱溶液对溶液pH的影响，维持pH基本不变节约时间；除去凝胶中可能带有的微生物；排除凝胶内的空气整片吞服整片吞服使肠溶衣在胃液中不被破坏，确保肠溶衣包裏的酶在