郭勇酶工程第四版第四章思考题答案

郭勇酶工程第四版第四章思考题答案一、名词解释1、细胞破碎：许多酶存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。包括机械破碎,物理破碎：化学破碎：酶促破碎。2、酶的提取：是指将酶或其他含酶原料中提取出来，再与杂质分开，而获得所需求的酶制品过程。3、沉淀分离：使溶液中的溶质由液相转变为固相析出，古老、实用、简单的初步分离方法。4、层析分离：层析技术，亦称色谱技术，是一种物理的分离方法。它是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的（称为固定相），另一个相则流过此固定相（称为流动相）并使各组分以不同速度移动，从而达到分离的目的。5、凝胶层析：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。6、亲和层析：由吸附层析发展起来的，是从复杂混和物中纯化蛋白质的最好方法。又称：功能层析，生物专一吸附，选择层析，利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子，如：抗原和抗体；酶和底物或辅酶或抑制剂；激素和受体：RNA和其互补的DNA等。7、离心分离：离心是借助于离心机旋转所产生的离心力，使不同大小和不同密度的物质分开的技术。是最常用的一种方法。8、电泳：指带电粒子在电场中向着与其所带电荷性质相反的电极方向移动的过程。9、萃取：利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法。10、双水相萃取：又称水溶液两相分配技术，用两种不相溶的亲水性高分子聚合物水溶液，如聚乙二醇（PEG）和葡聚糖（Dextran）进行萃取。由于形成的两相均有很高的含水量（达70%-90%），故称“双水相”系统。11、超临界萃取：利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，超临界流体具有很好的流动性和渗透性，将超临界流体与待分离的物质分开.12、过滤：借助于过滤解质将不同大小、不同形状的物质分离的技术过程。包括膜过滤和非膜过滤。13、膜分离技术：大部分微滤以及超滤，反渗透，透析，电渗析等采用各种高分子膜为过滤介质，称为膜过滤，又称为膜分离技术。14、结晶：是指物质以晶体的状态从蒸汽或溶液中析出的过程。结晶既是酶是否纯净的标志（只有同类分子才能形成晶体），也是一种酶和杂蛋白分离的方法。二、填空题1、细胞破碎的主要方法有机械破碎，物理破碎，化学酶促。2、酶的提取方法主要有盐溶液提取，酸溶液提取，碱溶液提取。3、结晶的方法主要有盐析结晶，有机溶剂结晶法，透析平衡结晶法，等电点结晶法。4、离心方法主要有差速离心，密度梯度离心，等密度梯度离心。5、加压膜分离可以分为微滤，超滤，反渗透。6、常用的萃取方法有有机溶剂萃取，双水相萃取，超临界萃取，反胶束萃取。7、按照凝胶的组成系统不同，聚丙烯酰胺凝胶电泳可以分为连续凝胶电泳，不连续凝胶电泳，浓度梯度凝胶电泳，SDS-凝胶电泳8、在CO2超临界萃取中，目标产物的分离方法主要有等压分离，等温分离，吸附分离三、选择题1、酶的提取是（C）的技术过程。A、从含酶物料中分离获得所需酶B、从含溶液中分离获得所需酶C、使胞内酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中D、使从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中2、在凝胶层析的洗脱过程中，（A）A、分子质量最大的分子最先流出B、分子质量最小的分子最先流出C、蛋白质分子最先流出D、盐分子最先流出3、超临界流体能够用于物质分离的主要原因在于（C）A、临界流体的密度接近于液体B、超临界流体的黏度接近于液体C、在超临界流体中不同物质的溶解度不同D、超临界流体的扩散系数接近于气体，是通常液体的近百倍4、等电点聚集电泳系统中，形成pH梯度的主要原因是（B）A、系统中有pH梯度支持介质B、系统中有两性电解质载体C、系统中有不同等电点的蛋白质D、系统中阳极槽装酸液，阴极槽装碱液四、简答题1、简述酶沉淀分离的主要方法及其原理。沉淀分离方法分离原理。盐析沉淀法利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性，通过在酶液中添加一定浓度的中性盐，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离等电点沉淀法利用两性电解质在等电点时溶解度最低，以及不同的两性电解质有不同的等电点这一特性，通过调节溶液的pH值，使酶或杂质沉淀析出，从而使酶与杂质分离有机溶剂沉淀法利用酶与其它杂质在有机溶剂中的溶解度不同，通过添加一定量的某种有机溶剂，使酶或杂质沉淀析出，从而使酶与杂质分离。复合沉淀法在酶液中加入某些物质，使它与酶形成复合物而沉淀下来，从而使酶与杂质分离选择性变性沉淀法选择一定的条件使酶液中存在的某些杂质变性沉淀，而不影响所需的酶，从而使酶与杂质分离。2、何谓膜分离技术？在酶的生产中有何应用？膜分离技术：大部分微滤以及超滤，反渗透，透析，电渗析等采用各种高分子膜为过滤介质，称为膜过滤，又称为膜分离技术。应用，除菌，分离病毒及生物大分子，纯水制备。应用：脱盐，海水淡化，纯水制备，从发酵液中分离柠檬酸、谷氨酸及凝胶电洗脱。3、简述双水相萃取的概念与特点。双水相萃取：又称水溶液两相分配技术，用两种不相溶的亲水性高分子聚合物水溶液，如聚乙二醇（PEG）和葡聚糖（Dextran）进行萃取。由于形成的两相均有很高的含水量（达70%-90%），故称“双水相”系统。优点：①每一水相中均有很高的含水量，为酶等生物物质提供了一个良好的环境；PEG、Dextran和无机盐对酶等无毒害作用，不会引起变性。4、简述超临界萃取的概念与特点。超临界萃取：利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超