DB51T 1079-2010 饲料中呕吐毒素的测定 高效液相色谱法

备案号：28169-2010DB51DB51/T1079—2010饲料中呕吐毒素的测定2010-06-01发布2010-07-01实施I前言 12规范性引用文件 1 14试剂和溶液 15仪器与设备 1 27分析步骤 28结果计算 29精密度 2附录A(资料性附录) 3DB51/T1079-2010本标准的附录A为资料性附录。本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准由四川省饲料工作总站负责起草。本标准起草人：柏凡、张静、李云、冯娅、魏敏、赵立军。1DB51/T1079-2010饲料中呕吐毒素的测定高效液相色谱法1范围本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及饲料原料的测定。本标准中检出限为0.3mg/kg。下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理测器检测，外标法计算呕吐毒素含量。4试剂和溶液4.1乙腈：色谱纯。4.3聚乙二醇8000(PEG8000)。4.4呕吐毒素标准品：含量大于98%。4.4.1标准贮备液：精密称取10mg呕吐毒素标准品，用乙腈溶解、定容至100mL,此贮备液浓100μg/mL,置于冰箱中2℃~8℃保存，有效期6个月。1.0μg/mL,2.0μg/mL,5.0μg/mL,10.0μg/mL。置于冰箱中2℃~8℃保存，有效期1个月。2DB51/T1079-20106试样制备按GB/T14699.1规定采集试样后，按GB/T20195规定，选取具有代表性的实验室样品1kg,四分法缩减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1试样溶液的制备7.1.1提取称取25g试样(精确至0.01g)于锥形瓶中，加入5g聚乙二醇8000(4.3),100mL水，振荡提取30min,离心，取上清液过滤，滤液待净化(浓度较高时滤液应用水稀释后待净化，以免小柱超载)。将免疫亲和柱中缓冲液排出，用1mL水过柱，准确吸取2.0mL提取液以1滴/秒的速度通过免疫亲和柱，用5mL水淋洗，抽干柱子，用2mL甲醇(4.2)洗脱。洗脱液60℃氮气吹干，准确加入流动相(7.2.3)500μL,涡旋30s,过0.45μm滤膜，上机测定。7.2色谱条件7.2.2柱温：30℃。7.2.3。7.2.5检测器：紫外检测器(或二极管阵列检测器),检测波长220nm。按上述色谱条件，分别将标准溶液和试样溶液上级测定，按照保留时间进行定性，单点或多点校正外标法定量。8结果计算试样中呕吐毒素的含量X,以质量分数毫克每千克(mg/kg)表示，单点校正按式(1)计算：V——上机定容体积，单位为毫升(mL);As——呕吐毒素标准溶液对应的色谱峰面积；A——试样溶液对应的色谱峰面积；Cs——呕吐毒素标准溶液的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);m——试样质量，单位为克(g);n——稀释倍数。结