04HPV人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒产品介绍131217

人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)宫颈癌筛查新产品-系列讲座（一）产品介绍江苏省分子诊断工程技术研究中心浙江大学中国医药城研发中心江苏默乐生物科技有限公司25十二月20241目录宫颈癌现状12人乳头瘤病毒（HPV）介绍3临床HPV检测方法新品介绍4产品与其他类似产品优势比对5产品市场容量分析625十二月2024225十二月20243全球发病率大约50万/年，女性第二号杀手；我国新发病例约13万/年；新发病例逐年增加，呈年轻化趋势；随年龄的增大，感染率逐渐增加；我国宫颈癌死亡率约2万/年；宫颈癌25十二月20244获2008年诺贝尔生理学奖——哈拉尔德·楚尔·豪森；发现了HPV高危型病毒引起宫颈癌的分子机制；唯一病因明确的肿瘤——高危型HPV持续感染；97%的宫颈癌患者都发现高危型人乳头瘤病毒HPV感染；从HPV感染到宫颈癌，一般需要10－20年；早发现、早治疗，可以预防和根治的癌症；宫颈癌——目前唯一病因明确肿瘤25十二月20245病毒DNA主要衣壳蛋白次要衣壳蛋白双链闭环小DNA病毒；大小8000个bps；无包膜；球形；二十面立体对称结构；表面有72个壳体；

直径52～55nm；人乳头瘤病毒—HPV25十二月20246人类是HPV的唯一宿主；高度的宿主特异亲和力；嗜上皮性病毒，主要寄宿于人体皮肤及黏膜;在空气中可存活10+小时；庞大家族：目前有200+种型别HPV；约40多种型别与生殖道感染有关；大约20多种型与癌症相关；传播途径：直接感染（性接触/主要传播途径）

间接感染人乳头瘤病毒—HPV25十二月20247HPV分型和分类根据感染部位生殖器类非生殖器类根据组织类型嗜皮肤性嗜粘膜性根据与癌发生危险性高危型中高危型低危型25十二月20248HPV分型与宫颈癌高危型：16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68等；中高危型：HPV53、66、73、83、MM4和cp8304等低度子宫颈病变高度子宫颈病变子宫颈癌低危型：HPV6、11、42、43和44等良性的低度子宫颈改变尖锐湿疣(生殖器疣)已知的HPV型别有150多种，约有40种型别可感染妇女生殖道根据导致宫颈癌风险程度划分：即高危型（HR）、中高危型（IR）和低危型（LR）25十二月20249HPV感染其它疣类疾病宫颈炎、宫颈糜烂、CINI潜伏感染亚临床感染显性感染被清除宫颈癌、阴茎癌、外阴癌、肛门癌等高、低危型HPV高危型HPV尖锐湿疣HPV与宫颈癌25十二月202410HPV感染与宫颈癌的发生发展出现HPV相关的细胞学改变正常宫颈高度鳞状上皮内病变(HSIL,CINII,III/CIS)

宫颈浸润癌HPV

感染HPV持续感染约60%在2到3年内自然逆转30%-70%在10年内演变为低度鳞状上皮内病变(LSIL,CINI)约15%在3-4年内演变为25十二月202411宫颈癌前病变各期及宫颈癌的病理模式图正常宫颈轻度不典型增生中度不典型增生重度不典型增生浸润癌

CINICINIICINIII/CISInvasiveCA25十二月202412权威组织一致推荐：采用细胞学检查和HPVDNA联检进行宫颈癌筛查。宫颈癌筛查方案25十二月202413我国的宫颈癌筛查推荐方案经济发达地区：医生取材HPVDNA检测＋液基细胞学检查（TCT）经济欠发达地区：医生取材HPVDNA检测＋传统巴氏图片贫困地区：肉眼观察（VIA）引自：宫颈癌筛查及早诊早治方案/乔友林等.2003.725十二月202414宫颈癌临床主要检测方法（一）（1）细胞学检查:

巴氏涂片法(PAP)

液基薄层细胞学检测法（TCT)细胞学自动阅片系统（2）肉眼观察:醋酸白试验：用3%~5%的冰醋酸染色碘黄试验：用4%~5%的碘液染色（3）阴道镜检查:

阴道镜可将宫颈放大16～40倍形态学检测25十二月202415１、假阴性结果(10-30%)面临医疗纠纷；２、重复性不好；３、经验性:需要富有经验的专家；４、增加筛查成本:复诊率过高；５、在等待复查中承受焦虑和精神压力；形态学筛查存在的问题25十二月202416宫颈癌临床主要检测方法（二）---荧光PCR法(默乐生物）---杂交信号放大法(HC2)---基因芯片（凯普、亚能）HPVDNA分型检测方法特色新产品人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒荧光PCR法25十二月202417宫颈癌早期筛查新产品——人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)25十二月202418HPV荧光PCR检测流程和原理——人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)DNA提取PCR反应实验荧光检测结果判读适合多种荧光PCR仪器判读准确、数字信号一次实验三个结果时间短无交叉污染高通量可96孔板操作沉淀后煮沸法独特的引物设计MS2内标全程质控一管检三型——适合早期筛查25十二月202419高危13型：16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68等；中危6型：HPV53、66、73、83、MM4和cp8304等低危5型：HPV6、11、42、43和44等本试剂盒用于妇女宫颈脱落细胞；人乳头瘤病毒(HPV)核酸DNA的定性检测；一个反应检测三个（高危、中高危、低危）结果；产品特点——提取&质控25十二月202420质控1、竞争性内标技术：监测整个核酸抽提和检测过程是否有误，有利于消除反应出现的假阴性，结果更可靠。提取采用直接煮沸法1、离心沉淀细胞2、95℃煮沸裂解3、离心沉淀4、上清液模板产品特点——独特探针引物设计高保守无交叉阴阳性无漏检25十二月202421基于HPV分型原理：

根据HPVL1区基因保守序列设计一系列扩增引物富集24种型别的HPVPCR产物，再针对不同亚型设计不同探针，进行荧光PCR反应，通过荧光信号，和ct值实现高危、中高危、低危分型检测。25十二月202422产品特点——灵敏度高三家省级医院临床试验：浙江大学医学院附属妇产科医院

浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江省人民医院比对实验：基因测序法实验结果：

灵敏度：99.51%

高危符合率：98.32%

中危符合率：

96.49%

低危符合率：

96.97%总体符合率：92.63%产品特点——独立知识产权25十二月20242325十二月202424产品特点——质量认证安全——三家省级医院大规模临床试验;准确——荧光定量PCR检测技术;有效——阳性符合率达到95%以上，

阴性符合率达到90%以上;认证——13485质量管理体系认证；获得中国药监局SFDA注册产品;配图SFDA注册证HPV检测（25~64岁妇女）HPV（+）定期重复HPV检测HPV（—）细胞学检查细胞学≥LSIL6~12个月重复HPV检测和细胞学检查细胞学正常或ASCUS阴道镜检查HPV(—)细胞学HPV(+)细胞学＜LSIL细胞学≥LSIL按ASCCP指南处理定期重复HPV检测6~12个月重复HPV检测和细胞学检查与细胞学检查相比，HPV具有更高的灵敏度和重复性国际权威机构——欧洲生殖道感染和肿瘤研究组织（EUROGIN)推荐将HPV检测作为宫颈癌筛查的首选方法25十二月202425产品临床应用——宫颈癌早期筛查25十二月202426中国癌症基金会推荐的联合筛查方案高危HPV检测+液基细胞学检查HPV阴性Cyto≤ASC-USHPV阳性Cyto≤ASC-USHPV阴性Cyto≥ASC-HHPV阳性Cyto≥ASC-H阴道镜检查/多点活检+ECC随访（次/3年）随访（次/1年）相应治疗(+)(—)产品临床应用——宫颈癌早期筛查25十二月202427---单独和联合细胞学用于宫颈癌筛查---ASCUS，ASC-H和LSIL病人的分流与管理---CIN、CC治疗后随访产品临床应用HPV检测联合细胞学检测作为初筛首选方法,HPV检测比细胞学具有更高的敏感性HPV检测比细胞学更客观，更标准化25十二月202428产品检测——适用人群人群普查:有三年以上性行为或21岁以上有性行为的妇女高危人群筛查:宫颈细胞学检测异常或可疑的患者宫颈炎、宫颈糜烂患者尖锐湿疣患者男性尖锐湿疣患者的配偶有不洁性生活史的患者“特殊职业”妇女人群25十二月202429人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)——优点总结一管检三型，高危型、中危型、低危型；灵敏度高；独特内标、全程质控；操作流程简单，时间短；闭管实验，无交叉污染；无需洗涤；数字结果判读，客观可靠；可96孔板操作，适用于大规模筛查；适用多款荧光PCR仪器、无需专门的设备；反应时间短无需洗涤数字信号25十二月202430技术荧光PCR法杂交捕获法基因芯片厂商默乐生物QIAGEN凯普、亚能亚型241324分型高危13型

中危6型

低危5型高危13型高危13型

中危6型

低危5型杂交1.5小时1小时约30分种洗涤无4小时3.5小时耗时2小时5小时4小时特点一管检三型，适合早期筛查只检测高危型不适合早期筛查灵敏度高灵敏度较低；灵敏度较低；MS内标、内部质控单独质控单独质控判读准确、数字信号化学发光信号放大图形结果不易判断无需杂交杂交时间长杂交时间长无需洗涤洗涤过程烦琐洗涤烦琐无交叉污染存在交叉反应存在交叉反应高通量可96孔板操作通量低通量低适合多种荧光PCR仪器需配备独立设备需配备设备HPVDNA检测竞争产品比较产品市场容量分析国家统计局最近一次人口普查统计数据显示（2010），全国总人口13.4亿人人口计生统计报表显示，全国已婚育龄妇女27769万人HPV检测将作为已婚妇女的常规检查项目，每位育龄妇女一年常规体检一次，每次收费80元