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DB45草菇菌种保藏技术规范TechnicalspecificationforpreservingVolvariellavolvaceaculture广西壮族自治区质量技术监督局发布I1草菇菌种保藏技术规范本标准规定了草菇（Volvariellavolvacea）菌种保藏的术语和定义、原则、要求和保藏方法。3.1菌种culture3.2母种stockculture3.3菌种保藏culturepreservation3.44.1应根据菌种的使用频率选择适宜方法进行保藏。25.1菌种保藏所使用的器皿应清洁、透明、无破损、无裂痕。5.2接种时应对菌株编号及培养基分别进行核对，采用适宜的培养基和无菌操作。5.3菌种培养至有厚垣孢子产生后进行保藏。5.4菌种移植培养后，应与原保藏菌株的培养特性及其登记卡（包含菌株名称、编号、所用培养基、5.5保藏期间应定期检查菌种存放设施的温度、湿度，菌株有无污染、棉塞有无霉变、培养基是否干5.6传代过程中，将保藏菌种在营养贫乏和丰富的新鲜培养基中作交替培养。6.1定期移植保藏法6.2液体石蜡保藏法6.3液氮超低温保藏法3A.2.1宜在接种培养后用硅胶塞封存。A.2.2使用前检查确认菌株是否变异，移植传代次数不宜超过4次。A.3.1培养基制备A.3.1.1配方A.3.1.2配制A.3.1.3分装A.3.1.4灭菌4A.3.1.5灭菌效果检查A.3.2接种A.3.3培养A.3.4性状指标A.3.5保藏A.3.6定期移植5B.2.1应选用化学纯液体石蜡。B.2.2操作时应防止液体石蜡燃烧。B.2.3应使用电子式火焰灭菌器对移种过培养物的接种铲灭菌。B.2.4保藏场所应保持干燥，防止胶塞污染。B.2.5保藏期间应定期检查，如培养基露出液面，应及时补充无菌液体石蜡。B.3.1液体石蜡准备B.3.2培养物制备符合附录A.3.1的规定。B.3.3石蜡灌注B.3.4保藏情况，液体石蜡减少，露出培养基斜面时应及时补充经B.3.5恢复培养6C.2.1操作时应戴上面具和皮手套，冻存管应拧紧螺帽。C.2.2运送液氮应使用专用特制液氮罐，存放液氮罐的房间应保持良好通风。C.2.3应防止安瓿管爆裂。C.2.4注意液氮罐中液氮的残存量，定期填充液氮。C.3.1准备C.3.1.1安瓿管或冻存管C.3.1.2标签C.3.1.3保护剂C.3.1.4培养物C.3.2分装7C.3.3预冻预冻时，温度宜控制在

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