DB3707T 078-2023 马冻精人工授精技术规程

ICS65.020.30CCSB433707RegulationoffrozensemenartificialinseminationinequineIDB3707/T078—2023 2规范性引用文件 3术语和定义 4授精基本条件 5输精准备 6母马发情鉴定 7输精 8妊娠检查 9档案管理 附录A（资料性）母马授精记录 DB3707/T078—2023本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由潍坊市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：山东畜牧兽医职业学院、潍坊市畜牧业发展中心、青岛德瑞骏发生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：索佳佳、王福江、董建宝、陶爽、高楠楠、杨万郊、王宝杰、姜八一、郑艳玲、王文超、郭海鹏、张志鹏、邹志钢。3DB3707/T078—2023马冻精人工授精技术规程本文件规定了马冷冻精液人工授精的术语和定义、授精基本条件、输精准备、母马发情鉴定、输精、妊娠检查和记录等操作技术要求。本文件适用于潍坊市马冻精人工授精技术应用。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T5458液氮生物容器3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1冷冻精液frozensemen将原精液用稀释液梯度温度稀释、平衡后快速冷冻，在液氮生物容器中保存的精液。冷冻精液包括颗粒冷冻精液和细管冷冻精液。3.2冷冻精液解冻thawingoffrozensemen冷冻精液使用前使冷冻精子重新恢复活力的处理方法。4授精基本条件4.1精液品质冷冻精液解冻活率大于35%，畸形率低于10%，符合授精精液的要求。4.2母马应选择身体健康，体格健壮，发情周期规律，生殖机能正常的3岁~10岁未妊娠母马。4.3授精人员授精人员应繁育理论扎实，授精技术熟练，输精操作时应剪短指甲，佩戴长臂手套。输精过程应密切关注马匹状态，确保自身及马匹安全。4DB3707/T078—20235输精准备5.1器具清洗和消毒凡接触精液和母马生殖道的输精用器具应进行清洗和消毒。5.2冷冻精液贮存冷冻精液应贮存在液氮生物容器中，液氮生物容器应符合GB/T5458的规定。包装好的冷冻精液由一个液氮容器转换到另一液氮容器时，在液氮容器外停留时间不应超过5s。5.3冷冻精液解冻冷冻精液宜37℃水浴1min进行解冻。5.4精液质量检查精液质量应符合4.1的要求。5.5母马输精准备输精前，应将母马打马尾绑带并吊起马尾，技术员掏净母马直肠宿粪，温水清洗母马外阴部并擦拭干净，用消毒液清洗并擦拭干净，最后用温水清洗并擦拭干净。5.6输精管准备一次性常规输精管用于冻精浅部输精，应提前置于37℃环境中。一次性冻精输精管用于细管冷冻精液的深部输精，应提前置于37℃环境中。剪去细管精液封口，剪口应正，断面应齐。如需输入多支精液则精液应保存在37℃环境中。6母马发情鉴定6.1B超检查通过B超监测子宫体和子宫角状态、卵泡大小形状和卵泡壁状态，对母马发情周期进行详细记录。通过对母马发情周期监测预测排卵时间，制定合理的输精时间，适时输精。6.2外部观察通过母马性情变化、运动量增大、外阴分泌物增多等变化判断母马是否发情和发情程度。5DB3707/T078—20237输精7.1输精时间确定B超监测母马发情情况及卵泡大小，母马卵泡大于35mm，密切监测，每6h检查一次，卵泡壁增厚且开始变形时每2h检查1次，接近排卵时，宜增加检查频率。输精时间应尽可能接近排卵时间。7.2输精方法7.2.1直肠把握深部输精法输精人员宜佩戴一次性长臂手套，右手握紧输精管，输精管顶端压于食指下方，拇指、中指握紧食指，涂布润滑剂，进入阴门，食指定位子宫颈，以食指引导输精管进入子宫；右手从阴道中退出后进入直肠，并在直肠中引导输精管前进方向，左手拇指食指慢慢推入输精管使其接近卵巢位置；辅助人员将冻精管放入输精管中，将输精管内芯对准冻精管棉塞端，缓慢匀速推进内芯；如需输多支冻精则以内芯取出冻精管，再放入另一支冻精，以此类推，最后缓慢取出输精管。7.2.2常规子宫浅部输精法浅部输精需输8支冻精，冻精解冻后，擦干，剪掉封口端及棉塞端，精液自行流下；一次性注射器连接输精管，先吸入5mL空气，再吸入精液；输精人员宜佩戴一次性长臂手套，右手握紧输精管，输精管顶端压于食指下方，拇指、中指握紧食指，涂布润滑剂，进入阴门，食指定位子宫颈，以食指引导输精管进入子宫，将注射器中的精液全部推入子宫，最后缓慢取出输精管。7.3输精部位直肠把握深部输精法输精部位在子宫角，常规输精法输精部位在子宫颈以内4cm~5cm。8妊娠检查8.1外部观察母马妊娠初期外部表现发情周期停止，食欲增进，毛色润泽，性情变温和，行为变安稳。妊娠中后期腹围增大，腹壁一侧突出，可观察到胎动，乳房胀大。8.2直肠检查输精后连续2个情期（40d左右）未发情，直肠检查可查出两侧子宫角不对称，孕侧子宫角较另侧略大，且柔软。60d后直肠检查可查出妊娠子宫增大、胎儿和胎膜。直肠触摸同侧卵巢较另侧略大，并有妊娠黄体，黄体质柔软、丰满，顶端能触感突起物。8.3B超检查B超检查母马的子宫及胎儿、胎动、胎心搏动，排卵的第11d使用B超应检测到胚胎，30d左右6DB3707/T078—2023应检测到胎心搏动。9档案管理母马号、母马