人教版高中生物选择性必修3《生物技术与工程》全册考点复习提纲

人教版（2019）高中生物选择性必修3《生物技术与工程》全册考点复习提纲

第一章发酵工程

第一节传统发酵技术的应用

1、什么是发酵？人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的

过程

2、腐乳制作的原理是什么？蛋白质箜雪小分子的肽和氨基酸。脂肪型驾甘油和脂肪酸。

3、毛霉是什么样的菌？生殖方式是什么？代谢类型是什么？毛霉是一种丝状真菌，其繁殖方式为施子生殖，

代谢类型是异养需氧型

4、制作泡菜用的是什么菌？来源是哪儿？乳酸链球菌和乳酸杆菌。菌种来源：植物体表面天然的乳酸菌

5、泡菜制作的原理是什么？C6H加6上*2c3H6。3（乳酸）+能量

6、泡菜制作的流程是什么？配置盐水T原料处理T装坛T封坛发酵

7、乳酸菌和醋酸菌分别是什么样的菌？异养兼性厌氧型；异养需氧型

8、制作果酒的过程中对氧气的需求是？前期需氧，后期不需氧

9、制作果醋时，在氧气和糖源充足的情况下，反应原理是什么？C6HI206+202-^42CH3C00H+2C02+2H20+

能量

10、制作果醋时，在糖源不足时，反应式是什么？C2H5OH+O2—匕CH3COOH+H2O+能量

11、在果酒发酵时，发酵瓶要留有1/3的空间，原因是什么？让酵母菌大量繁殖；防止发酵液溢出

12、在果酒和果醋的制作过程中，怎么对发酵瓶消毒？用洗洁精清洗干净；并用70%的酒精消毒，晾干备用

13、酒精发酵时，温度要控制在多少度？时间是多长？18—30℃;10—12d

14、果醋发酵时，需要的环境温度和时间是什么？30—35℃;7—8d

15、制作泡菜时配制的盐水为什么要先煮沸，再冷却使用？一是为了杀死盐水中的杂菌，二是为了排出溶

解的氧气；冷却是防止温度过高杀死发酵所需要的乳酸菌

16、什么是发酵工程？发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用

的产品

17、发酵工程的基本环节是什么？选育菌种、扩大化培养、配置培养基、灭菌、接种、发酵、分离和提纯

产物、获得产品

18、啤酒的工业化的生产流程是什么？发芽T焙烤T碾磨T糖化T蒸煮T发酵T消毒T终止

19、发酵工程的特点是什么？生产条件温和、原料丰富且价格低廉，产物专一、废弃物对环境污染小易处

理

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20、发酵工程的中心环节是什么？发酵罐内发酵

21、发酵产品是微生物细胞本身，如何获得发酵产品？在发酵结束以后，采取过滤、沉淀等方法将菌体分

离和干燥

22、发酵产品是细胞代谢物，如何获得发酵产品？根据产物的性质采取适当的提取、分离、纯化的措施

23、单细胞蛋白是什么？以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得的大量的微

生物菌体

24、利用发酵工程相关知识，如何大量生产新冠病毒疫苗？可将新冠病毒的抗原基因转入某种微生物体内，

再通过发酵工程得到的产品可以当作新冠病毒疫苗。

25、酱油是如何生产的？利用产生蛋白酶的黑霉菌，将大豆中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，经淋

洗、调制而成

26、啤酒的工业化生产主发酵阶段主要完成什么？酵母菌繁殖、糖的分解、代谢物的生成

27、啤酒的工业化生产后发酵阶段主要完成什么？形成成熟、澄清的啤酒

28、利用纤维素废料能生产什么？纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质

29、青霉素发酵是高耗氧的过程，如何能够保证发酵过程中给微生物持续高效供氧？用基因工程的方法，

将血红蛋白基因导入青霉素生产菌，提高菌体对氧的利用率

30、在青霉素发酵的过程中总有头抱霉素产生，如何改造青霉素生产菌使其只产生青霉素，或者只生产头

抱霉素？在青霉素和头把霉素的生产过程中，他们有一个共同的前体，这个前体经不同的酶催化，分别合

成2个产物。可以对两种酶的基因进行改造或敲除，从而使青霉素生产菌只能生产一种产物

31、青贮饲料中添加乳酸菌有什么意义？提高饲料的品质、使饲料保鲜、动物食用后还能提高免疫力

第二节微生物培养技术及应用

1、什么是培养基？人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质

2、培养基的用途是什么？用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物

3、培养的主要营养物质有什么？水、碳源、氮源、无机盐

4、以下微生物培养时有什么特殊需求？

①乳酸杆菌添加维生素

②霉菌pH调至酸性

③细菌pH调至中性或弱碱性

④厌氧微生物无氧

5、无菌技术包括什么？消毒和灭菌

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6、消毒的常用方法有哪些？煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒、化学药物消毒

7、灭菌常用的方法有哪些？湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法

8、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在哪里进行？超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行

9、什么是微生物的纯培养？获得由单一个体繁殖而来的子细胞群体

10、什么是菌落？分散的微生物在适宜的固体培养基表现或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结

构的子细胞群体

11、微生物的纯培养包括哪些步骤？配制培养基-►灭菌T倒平板T接种和分离T培养

12、用什么培养基培养酵母菌？马铃薯培养基

13、根据此图，回答平板划线法的正确流程是？

14、划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？

在第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？需要。划线结束后灼烧接种

环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者；能使细菌的数目随着划线次数的增加

而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落

接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，未接种的培养基表面

如果有菌落生长，说明了什么？对照，未接种的培养基经过培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功

的；若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。

15、怎么培养固氮微生物？缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中Nz的微生物

16、什么是选择培养基？允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长

17、什么是鉴别培养基？根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品，进而产生特定的

颜色或其他变化

18、怎么从微生物中筛选出真菌？在培养基中加入抗生素

19、怎么筛选出自养微生物？无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物

20、在稀释涂布平板法中，系列稀释操作的目的是什么？通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的

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增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散

21、涂布平板的操作步骤是什么？取菌液T涂布器消毒T涂布器灭菌T涂布平板

22、微生物数量的测定方法是？显微镜计数法；活菌计数法（稀释涂布平板法）

23、为了保证结果准确，一般选择菌落数在多少的平板进行计数？30--300

24、怎样分离尿素分解菌？配制以尿素为唯一氮源的培养基，能在该培养基中生长的细菌为尿素分解菌

25、稀释涂布平板法，统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，原因是什么？因为当两个或多个细胞连在

一起时，平板上观察到的只是一个菌落

26、在泡菜腌制过程中坛、蔬菜等均未进行严格灭菌，而在发酵过程中一般不会出现其他杂菌大量繁殖，

其原因是？乳酸菌产生的酸性及厌氧环境不利于其他杂菌的生长

27、所以发酵过程中一般不用严格灭菌，泡菜坛内表面会长出一层白膜，白膜是怎么产生的？大量酵母菌

聚集在发酵液表面形成的

第二章细胞工程

第一节植物细胞工程

1、植物细胞工程包括哪些技术？植物组织培养、植物体细胞杂交

2、什么是细胞的全能性？细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能

3、细胞的全能性在什么情况下能表现出来？离体、营养物质、激素、适宜的温度和pH

4、什么是植物组织培养？将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培

养条件，诱导其形成完整植株的技术

5、植物组织培养的基本过程是？接种外植体—诱导愈伤组织f诱导生芽f诱导生根f移栽成活

6、什么是脱分化？在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变

成未分化的细胞，进而形成愈伤组织的过程

7、什么是愈伤组织？脱分化产生的不定形的薄壁组织团块

8、什么是再分化？愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程

9、怎么对外植体进行消毒？酒精消毒30s-►无菌水冲洗2-3次T次氯酸钠溶液处理30minT无菌水冲洗2-3

次

10、长出完整试管苗以后，需将其移植到什么样的环境中，待其长壮后在移栽入土？将幼苗移植到消过毒

的蛭石或珍珠岩等环境中

11、在植物组织培养的过程中需要用到几种培养基？3种培养基。诱导愈伤组织的培养基，诱导生芽的培养

基，诱导生根的培养基

12、诱导愈伤组织形成需不需要光照？诱导形成愈伤组织不需要光照

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13、在培养基中，什么样的植物激素比例促进生根？什么样的比例促进生芽？什么样的比例促进愈伤组织

形成？①适当提高生长素与细胞分裂素的比例容易生根。

②适当提高细胞分裂素与生长素的比例容易生芽。③比例适中诱导产生愈伤组织

14、选用菊花的外植体时，一般选用形成层细胞或组织块，其原因是什么？形成层细胞由于分裂旺盛，全

能性高，容易诱导形成愈伤组织，其他部分如叶、花全能性低，不易培养成完整植株

15、为什么说从繁殖方式上看，植物组织培养的繁殖方式是无性繁殖？植物组织培养是在细胞有丝分裂和

细胞分化的基础上实现的，此过程并没有生殖细胞的产生，所以是无性繁殖

16、在植物组织培养的过程中，为什么要求无菌操作？培养物一旦受到微生物的污染，这些微生物会和外

植体争夺培养基中的营养物质，并且产生大量对外植体有害的物质，导致外植体死亡

17、原生质体怎么获得？去除细胞壁获得原生质体，用到的酶是纤维素酶和果胶酶

18、诱导原生质体融合的物理方法有哪些？化学方法有哪些？人工诱导的物理法包括电融合法、离心法，

化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca?+—高pH融合法

19、原生质体融合成功的标志是什么？融合的原生质体再生出细胞壁，这是原生质体融合成功的标志

20、植物体细胞杂交技术的优势是什么？打破生殖隔离，实现远缘杂交育种

21、植物体细胞杂交实现的基础和植物组织培养的理论基础分别是什么？细胞膜的流动性；植物细胞的全

能性

22、植物细胞工程的应用有哪四个方面？快速繁殖、作物脱毒、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生

产

23、什么是初生代谢物？初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个生命过程中它一直进

行着

24、什么是次生代谢物？次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织和器官中，并在一定的环境

和时间条件下才进行

25、植物体细胞杂交形成的杂种植株是几倍体？染色体组数=两种植物体细胞内染色体组数之和。

②植物体细胞杂交形成的杂种植株，有几个染色体组就称为几倍体

26、植物细胞培养是什么？在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术

第二节动物细胞工程

1、动物细胞工程包括哪些技术？动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞工程、动物细胞融

合、动物细胞核移植

2、什么是动物细胞培养？从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，

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让这些细胞生长和增殖的技术

3、动物细胞培养需要的营养条件是什么？①营养条件：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微

量元素、血清

4、动物细胞培养怎么创造无菌、无毒的条件？无菌、无毒：培养液和培养用具进行无菌处理、培养液定期

更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害

5、动物细胞培养的温度和pH分别是？温度、pH和渗透压：温度36.5℃,pH7.2-7.4

6、动物细胞培养所需的气体环境是什么？气体环境：95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO?培养箱

7、5%的CO?的作用是什么？维持培养液的pH

8、动物细胞培养的过程是什么？

取动物组织块

如苗旺胰蛋白酶或

机械法|胶原蛋白酶

分散成单个细胞

加入

培养液

制成细胞悬液

性瓶

原代培养

「_____________

\细胞密度过

悬浮生长贴壁生长

一\物积累、营养-将前

物质缺乏等、

、分裂受阻或停止/

［分瓶

传代培养

9、如何制备细胞悬液？首先对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械方法，或用胰蛋白酶和胶原蛋白酶

处理一段时间将细胞分散成单个细胞，然后加入培养液制成细胞悬液

10、动物细胞培养的原理是什么？细胞分裂的原理

11、体外培养的动物细胞由哪两大类？体外培养的细胞包括体细胞培养和干细胞培养

12、什么是细胞贴壁？细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象

13、什么是接触抑制？接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的

现象

14、干细胞存在于哪儿？包括哪些类型？干细胞存在于早期胚胎、骨髓、脐带血等多种的组织和器官

15、什么是胚胎干细胞？简称ES细胞，存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细

胞，并进一步形成机体所有组织和器官甚至个体的潜能

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16、什么是成体干细胞？成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细

胞和睾丸中的精原干细胞。具有组织特异性，只能分化成特定的组织或细胞，不具有发育成完整个体的潜

能。

17、获取iPS细胞的方法？借助载体将特定基因导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞

18、胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？其应用有什么限制因素？通

过胚胎干细胞体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，从而解决供体器官不足问题，另一方面，由于是

自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因

而限制了应用

19、为什么科学家认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞？iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，而且iPS

细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应

20、什么是动物细胞融合技术？两个或多个细胞融合形成一个细胞的技术

21、怎么样诱导动物细胞融合？PEG、电融合、灭活的病毒

22、灭活病毒诱导细胞融合的原理是？灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能

够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜

打开，细胞发生融合。

23、B淋巴细胞的特点是什么？能分泌抗体，但不具有分裂能力

24、骨髓瘤细胞的特点是什么？能无限增殖

25、杂交瘤细胞的特点是什么？既能无限增殖又能产生特异性抗体

26、单克隆抗体的制备过程？

爰而施〈一◎…©…画⑥一⑥〉自身融合细胞

用特定的选择瑜藕福迹,1会赢合最百种融合的细胞死亡

®⑨杂交瘤细胞

\克隆上述杂交细胞

锻一专一抗体检测阳性

将不同种杂交细胞分开」并克隆专一抗体检测呈阳性的细胞

融

注射到.体外培养

腔内|4

KZ单克隆抗体?小单克隆抗体

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27、单克隆抗体的制备需要两次筛选，目的是什么？

第一次筛选：特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞（“B—B”细胞、“瘤

一瘤”细胞）都会死亡，只有杂交瘤细胞（“B—瘤”细胞）才能生长

第二次筛选：用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经

多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群

28、动物细胞完成融合的标志是什么？当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，则标志着动物细胞

融合的完成

29、什么是动物细胞核移植？将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发

育成新胚胎，继而发育为动物个体的技术

30、动物细胞核移植技术的原理是什么？动物体细胞核具有全能性

31、哺乳动物核移植分为哪两种？哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植

［取供,细胞）［卵巢卵母细胞］

一细胞培养］M!I怠核

［供一鲤a］|去单些母细胞］

［重而胚］

I

［完成细胞分裂和发育进程I

一胚胎移植一

（代.动物I

32、体细胞核移植的过程是？［与供体遗传物百藐相同的幼体〕

33、什么是抗体--药物偶联物？将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细

胞的选择性杀伤

34、怎么激活重构胚？用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂

35、什么是重构胚？人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力

36、动物细胞核移植技术中的去核方法有哪些？显微操作去核法、梯度离心、紫外线短时间照射

37、生物反应器怎么获得？将药用蛋白基因与在乳腺中特异性表达的基因的启动子连接在一起

38、MH的卵母细胞的核是什么？纺锤体--染色体的复合物

第三节胚胎工程

1、胚胎工程是什么？对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移

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植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求

2、胚胎工程技术包括什么？体外受精、胚胎移植、胚胎分割

3、胚胎工程的目的是什么？然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求

4、受精是什么？精子与卵子结合形成食工（即受精卵）的过程

5、受精的准备阶段包括？包括精子获能，卵子培养成熟到Mil中期

6、受精阶段包括哪四步？

精子穿越卵细胞膜外的结构

精子虚触卵细胞膜

精子状卵形成雄原核,卵子完成减数分裂U,

释放第二极体后，形成雌原核

雌、赢核结合形成受精卵

7、获能液的作用是使精子获能，包括哪两种？肝素、Ca?+载体

8、受精的标志是什么？观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志

9、防止多精入卵受精的生理反应有哪些？有什么意义？一是透明带发生生理反应，二是卵细胞膜发生生理

反应。防止多精入卵，保证受精卵中遗传物质与亲代体细胞一致，从而保证遗传的稳定性

10、胚胎发育包括哪些阶段?

（受精卵月胚胎发育的起点

■细胞分裂方式为有丝分裂

卵裂细胞数量增多，胚胎总体积并不增

.加或略有减小，每个细胞体积变小

卵裂产生的子细胞形成致密的细胞团,

（桑其胚卜

形似桑甚

内细胞团：发育成胎儿的各种组织

（囊胚

滋养层：发育成胎膜和胎盘

"外胚层：原肠胚表面的细胞层

（原肠胚内胚层：由原肠胚向内迁移的细胞形成

中胚层：由一部分细胞在内、外两个

【胚层之间形成

11、囊胚阶段包括哪些结构？滋养层、内细胞团

12、原肠胚包括哪些胚层？外胚层、内胚层、中胚层

13、什么是孵化？囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程

14、孵化的意义是什么？如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育

15、将体外培养的胚胎移植到子宫时，应选择至少发

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到什么阶段的胚胎：小鼠？绵羊？猪？马？牛？小鼠：桑黄胚；绵羊：16细胞；猪：4〜6细胞；马：囊胚；

牛：8〜16细胞。

16、胚胎早期发育过程中，具有全能性的时期有哪些？桑甚胚期及之前的时期

17、卵母细胞要培养到什么时期才具备受精能力？Mil

18、胚胎移植的概念？通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体

内，使之继续发育为新个体的技术

19、胚胎移植中的供体是？提供胚胎的遗传性状优良的、生产能力强的个体

20、胚胎移植中的受体是？接受胚胎的具有健康体质和正常繁殖能力的个体

21、胚胎移植的操作过程是？

22、胚胎移植的生理学基础是？

哺乳动物发情排卵后，同种动物的

供、受体生殖器官的生理变化是

相同的

哺乳动物的早期胚胎形成后，在

、一定时间内不会与母体子宫建立

组织上的联系，而是处于游离状态

受体对移入子宫的外来胚胎基本

一上不发生免疫排斥反应

供体胚胎可与受体子宫建立正常

'的生理和组织联系，且供体胚胎

的遗传特性不受影响

23、胚胎分割选择什么样的材料？发育良好、形态正常的桑甚胚或囊胚

24、胚胎分割的操作要求是？分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割

25、胚胎移植时怎样才能做到超数排卵？对供体母畜用促性腺激素处理

26、胚胎移植时怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？对供体和受体母畜进行同期发情处

理

27、胚胎移植的优势是什么？可以发挥雌性优良个体的繁殖能力

28、胚胎分割是指什么？采用机械的方法将早期胚胎分割成2等份、4等份、或8等份，经移植获得同卵双

胎或者多胎的技术

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第三章基因工程

第一节重组DNA技术的基本工具

1、基因工程的概念？按照人们的意愿，通过转基因等技术手段，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人

们需要的生物类型和生物产品。

2、重组DNA技术的基本工具有哪些？限制酶、DNA连接酶、载体

3、限制性内切核酸酶的来源是？主要来自于原核生物

4、限制酶的作用是什么？识别双链DNA分子中特定的核甘酸序列，使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断

开。

5、DNA连接酶的作用是什么？将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核普酸之间的磷酸

二酯键

6、连接酶有哪两种？分别连接什么末端？E・coliDNA连接酶，连接黏性末端；LDNA连接酶，连接黏性末

端和平末端

7、常见的载体有哪些？质粒、噬菌体、动植物病毒

8、载体的特点是什么？有一个至多个限制酶切割位点；携带外源DNA片段的质粒进入到受体细胞后，能在

细胞内进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制；常有特殊的标记基因，便于重组DNA

分子的筛选

9、限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列

或识别序列已经被修饰

10、选择限制酶对DNA进行切割时，怎么确保出现相同黏性末端？用相同的限制酶去切割质粒或目的基因

11、为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接，应该怎么样选择限制酶？也可使用不同的限制酶切割目

的基因和质粒

12、与DNA有关的几种酶的比较？

①限制酶的作用是什么？将DNA分子切成两个或多个DNA片段

②DNA连接酶的作用是什么？将两个DNA片段连接成一个DNA分子

③DNA聚合酶的作用是什么？以DNA单链为模版，依次将单个脱氧核甘酸连接到单链的末端

④解旋酶的作用是什么？将双链DNA分子的局部解旋为单链，形成两条长链

⑤DNA水解酶的作用是什么？将DNA片段水解为单个的脱氧核普酸

13、基因拼接的理论基础是什么？①DNA的基本单位都是脱氧核普酸;②DNA分子都遵循碱基互补配对原则；

③双链DNA分子的结构都是双螺旋结构

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第二节基因工程的基本操作程序

1、什么是目的基因？在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因

2、PCR是什么？（聚合酶链式反应）：是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各

种组分与反应条件，对目的基因的核甘酸序列进行大量复制的技术

3、PCR反应的条件是什么？一定的缓冲溶液、DNA模板、2种引物、4种脱氧核苔酸、耐高温的DNA聚合酶，

以及能自动调控温度的仪器

4、PCR的过程是？高温变性T低温复性T适温延伸

5、PCR过程中加入的既能充当原料，又能提供能量的物质是什么？dNTP（即dATP、dGTP、dTTP、dCTP）,

既可作为合成DNA子链的原料，又可为DNA的合成提供能量。

6、PCR中的引物是什么？引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。

7、PCR扩增过程中的循环图示与规律

.卿mnB鼠

飙皿I皿吧g：

3,,HnnHy

-51

3,-----

—目标序列

---侧翼序列

•^HHIIH/

循环3：

变性-复性►延伸变性一复性一延伸

8、PCR进行n次，共消耗的引物的数量是多少？25一2

9、DNA粗提取的原理是什么？DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精；DNA溶于2mol/L的NaCI溶液

10、DNA怎么鉴定？DNA与二苯胺试剂在沸水浴的条件下呈蓝色

11、电泳的原理是什么？DNA分子具有可解离的基团，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，

这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。

12、PCR的产物一般怎样鉴定？PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定

13、在凝胶中DNA分子的迁移速率与哪些因素有关？在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子

的大小和构象等有关。

14、DNA电泳如何鉴定？凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300_nm的紫外灯下被检测出来。

15、基因工程的核心是什么？基因表达载体的构建

16、基因表达载体的作用及其组成？

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目的基因：编码蛋白质的基因或具有调

控作用的因子

表达载体启动子：RNA聚合酶识别和结合的部

复制原点位；能驱动基因转录出mRNA

终止子：转录的终点，在转录过程中

起调控作用

标记基因：供重组DNA分子的筛选

17、启动子的作用是什么？位于基因的上游，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA

18、终止子的作用是什么？位于基因的下游，使转录在所需要的地方停下来

19、起始密码子的作用是什么？翻译的起始信号（编码氨基酸），位于mRNA上

20、终止密码子的作用是什么？翻译的结束信号（不编码氨基酸），位于mRNA上

21、如何将目的基因导入植物细胞？将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中T农杆菌T导入植物细胞T整合

到受体细胞的染色体DNA上-►表达

22、农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入分别是什么？第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T—DNA

上，第二次拼接（非人工操作）是指插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞的染色体DNA上；第一次导入是

将含目的基因的Ti质粒导入农杆菌，第二次导入（非人工操作）是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。

23、转化是什么？目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。此处“转化”与

肺炎链球菌转化实验中的“转化”含义相同，实质都是基因重组。

24、如何将目的基因导入动物细胞？将含有目的基因的表达载体提纯-►取卵（受精卵）T显微注射T受精卵

发育T获得具有新性状的动物

25、如何将目的基因导入微生物细胞？Ca?+处理细胞T细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状

态T基因表达载体导入

26、如何在分子水平进行目的基因的检测与鉴定？PCR等技术、抗原抗体杂交

27、如何在个体生物学水平