植物工厂化育苗教学课件 8生根培养

生根培养——植物工厂化育苗继代接种切割顶芽或腋芽萌发伸长形成多节茎段嫩枝，剪成带1-2枚叶片，带一个芽或几个芽的一两个节间。遗传稳定。丛生芽可以先分成单株进行接种，培养成明显茎段的壮苗后按正常方式接种即可通过继代培养，材料增殖到一定数量后，部分培养物进入壮苗和生根过程。进一步在生根培养基上诱导生根，才能得到完整的植株。继代培养过程中细胞分裂素浓度增加有助于芽的分化和增殖，从而有助于增殖系数提升。但芽的分化增殖会伴有生长势减弱，芽，茎细弱等现象。这种苗移栽成活率低。必须经过壮苗。生根培养有试管内生根和试管外生根两种方式。（一）试管内生根

试管瓶内生根是指将长到一定长度的微枝（大于10mm）转移到生根培养基上继续培养。1．试管苗根的形成类型及生长（1）试管苗根的类型植物离体培养产生的根为不定根，不定根又分为皮部根和愈伤根两种类型。皮部根：维管束一般是与茎的维管束连通的，疏导组织连通，营养成分和水可以顺利在植物体内运输。愈伤组织形成的根与茎的疏导组织不连通。尤其是容易产生愈伤组织的植物（如刺槐）的试管苗生根，输导组织不通是试管苗根系质量的主要问题，也是限制移栽的主要因子。（2）根的生长

试管苗生根的时间长短不相同，草本植物一般较快，木本稍慢。一般形成根源基1周后即能长出明显的根，其颜色为白色，有的短粗，有的细长。较好的根为白色较粗的小短根成活率较高。根在培养基中盘根错节的生长，一段时间后逐渐由白色变成黄色，甚至褐色，根开始老化。此时其吸收能力明显降低，移苗成活率也低。2．生根的影响因素（1）植物材料的影响不同植物及同一植物不同基因型、不同材料和不同年龄对根的产生都有影响。扦插生根容易的植物，试管苗生根也容易。扦插生根难的植物，试管苗生根也难，如核桃、板栗等。植物生根的规律是：成年的比幼年的树难生根；木本植物比草本植物难生根；乔木比灌木难生根。（2）培养基的影响试管苗生根是从异养状态进入自养状态的一个变化。利用根系吸收营养和水分是植物本能。培养基中浓度较高的营养元素及糖可使试管苗产生依赖性而不易生根，减少营养成分及糖的浓度即可刺激生根。培养基中的一些无机盐成分不利于根的产生，要适当降低无机盐浓度才有利于根的分化。植物激素中生长素有促进根的分化的作用。一般可以用IBA、IAA、NAA等药品单独或者混合使用。胚轴、茎段、花梗等材料分化。根使用IBA居多，浓度为0.2-10.0mg/L，其中以1.0mg/L为多。生根培养时生长素含量也要适当降低。细胞分裂素对生长素有拮抗作用，能抑制根的形成。（3）培养条件的影响

温度、光照对发根都有很大的影响。一般诱导生根所需要的温度比增殖培养的温度要适当低一些，继代培养时适宜温度为25-28℃，生根适宜温度20-25℃左右。温度低于15℃，影响根分化生长，温度高于30℃，根的质量变差、数量减少，且出现徒长现象，移栽成活率会大大降低。大多数植物光照不抑制根原基的形成和生长，用普遍的正常光照下培养即可。3．生根培养基配制原则（1）降低继代培养基中无机盐的浓度。一般MS大量母液减半或1／4；（2）去掉原培养基中细胞分裂素成份；（3）降低蔗糖浓度（如减半）（4）适当浓度的生长素；（5）适当增加琼脂浓度；--一般增加琼脂浓度，增加吸水难度，加强自养，诱导生根能力（6）对有些植物可适当加些吸附剂（如活性炭），有促进生根的作用。例如：花楸继代培养基：MS＋BA2mg/L＋IBA0.2mg/L+2%蔗糖+0.55%琼脂花楸生根培养基：1/2MS＋IBA1.0mg/L+1%蔗糖+0.7%琼脂4．转接方法

高度在1cm长以上的较为粗壮的芽苗可进行生根培养。不足1cm的芽苗及愈伤组织用于继代培养。继代无菌芽苗在超净台上拿出后，芽丛纵向切成单株，将分离得到的单株植物的基部愈伤组织切掉，按形态上下极插入生根培养基中进行培养。

（二）试管瓶外生根

试管外生根是将组培苗的生根诱导同驯化培养结合在一起，直接将组培苗扦插到试管外有菌环境中，边诱导生根边驯化培养。试苗一般都在试管内生根。对于一些较容易生根的植物，如杨树，菊花、康乃馨、月季、樱桃等树种可以从试管内取出进行试管外生根，这样把生根和驯化过程结合起来，既可大幅度降低成本，又可提高移栽成活率。1．试管瓶外生根方法（1）诱导出根源基后再扦插（2）生长素处理法（1）诱导出根源基后再扦插

将继代丛生芽转接到生根培养基中进行培养，可插的密些，培养十天左右可见嫩茎基部明显产生根源基时取出，移栽到事先准备好的穴盘里进行培养。（2）生长素处理法将无根的试管苗取出后，用生长素溶液浸泡一小时或蘸生根粉后进行扦插。用生长素浓度一般比诱导生根培养基大10倍左右。草本可用IAA5mg/L＋NAA1mg/L，木本植物可用IBA5mg/L＋NAA1mg/L，浸泡1-2小时后扦插。生根粉ABT用法：将试管苗迅速放在1000mg/LABT生根粉溶液里蘸一下，然后进行移栽。或者是用20mg/L-50mg/L生根粉溶液浸泡试管苗12个小时后移栽，可大大加强生根率。2．基质选择（1）腐殖土（或草炭土）及珍珠岩（或细沙）1：1或（2-3）：1配制。（2）草炭土、蛭石和珍珠岩按5：4：1配制。（3）1／2MS加IAA或IBA（1-5）mg/L组成营养液加入基质（如沙质基质内）。

基质配好后可以装在穴盘、花盆、塑料育苗筐中进行培养。3．插后管理

插后需要进行栽后管理，以保证较高的成活率。湿度，环境要保持大于80℅湿度，一般要达到90℅以上饱和状态。宜采用塑料薄膜密封或间歇喷雾的方式保证湿度。温度，环境湿度以品种不同而异，有的要求略低于诱导温度如20-25度，有的要求较高于温度如30-35度。生根持续时间以植物种类不同而异，如丁香和白桦约4-6周，杜鹃花6-8周。下图是大花惠兰的试管外炼苗在组织培养试管苗时，将无根苗采用快繁计算机智能系统及技术进行瓶外生根(不经生根培养基促使生根后再移植)，这样可以降低成本，提高工效。

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