技能训练2 组培常用仪器设备的使用

恒温水浴锅技能训练2组培常用仪器设备的使用恒温水浴锅技能目标1．清楚组织培养常用仪器设备的原理2．熟练使用组织培养常用的仪器设备训练前准备组织培养实验室；高压灭菌锅、超净工作台等常用仪器设备及相关试剂、用品等。1.精密pH计(PHS-3C型)的使用图1-12精密pH计(PHS-3C型)(1)构造与工作原理精密pH图1-12精密pH计(PHS-3C型)(2)操作步骤①开机前准备A.电极梗旋入电极插座，调节电极夹到适当位置；B.复合电极夹在电极夹上，拉下电极前端的电极套；C.用蒸水清洗电极，清洗后用滤纸吸干。②开机A.电源线插入电源插座；B.按下电源开关，电源接通后，预热30min后进行标定。③标定仪器使用前先要标定。如果仪器连续使用则每天要标定1次。A.在测量电极插座处拨去短路插座；B.在测量电极插座处插上复合电极；C.把选择开关旋钮调到pH档；D.调节温度补偿旋钮，使旋钮白线对准溶液温度值；E.把斜率调节旋钮顺时针旋到底（即调到100%位置）；F.把清洗过的电极插入pH6.86的缓冲溶液中；G.调节定位调节旋，使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温定下降时的pH值相一致（如用混合磷酸定位温度为10℃时，pH6.92）；H.用蒸馏水清洗过的电极，再插入pH4.00（或pH9.18）的标准溶液中，调节斜率旋钮使仪器显示读数与该缓冲溶液中当时温度下的PH值一致；I.重复（6）～（8）直至不用再调节定位或斜率两个调节旋钮为止，标定完成。④测量pH值经标定过的仪器，即可用来测定被测溶液。被测溶液与标定溶液温度相同与否，其测量步骤也有所不同。A.被测溶液与定位溶液温度相同时，测量步骤如下：

用蒸馏水清洗电极头部，再用被测溶液清洗1次；

把电极浸入被测溶液中，用玻璃棒搅拌溶液使溶液均匀，在显示屏上读出溶液的pH值。B.被测溶液和定位溶液温度不相同时，在电极清洗后，要用温度计测出被测溶液的温度值，调节“温度”调节旋钮，使白线对准被测溶液的温度值，然后再实际测定溶液的pH值。图1-13超净工作台2.超净工作台的使用图1-13超净工作台(1)构造与工作原理超净工作台有水平风和垂直风、单人和双人之分，主要由三相电机、鼓风机、初过滤器和超过滤器、挡板、工作台面等几部分构成（图2-10）。通过电机带动，鼓风机将空气通过特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流(除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和幼苗孢子等)，在工作台面制造无菌区，这足以防止附近空气可能袭扰而引起的污染，20～30m/min的风速也不会妨碍采用酒精灯对器械的灼烧灭菌。(2)操作步骤①接通电源；②打开台内紫外灯杀菌30min；③30min后关紫外灯，打开风机20min；④打开照明灯，准备接种。(3)超净工作台使用时的注意事项①新安装的或长期未使用的超净工作台，使用前必须对超净工作台和周围环境使用超净真空吸尘器或不产生纤维的工具，认真进行清洁工作。②工作台面上不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流，不受干扰。③禁止在工作台面上记录，工作时应须尽量避免作明显扰乱气流的动作。④定期(一般为2个月)用热球式风速仪测量工作区风速，如发现不符合技术要求，则可调大风机的供电电压。⑤在工作台右侧有5A外接电源插座，可供使用。图1-14便携式压力灭菌锅3.便携式压力灭菌锅的使用图1-14便携式压力灭菌锅(1)构造与工作原理便携式压力灭菌器由锅体、内锅、电热管、搁帘、锅盖、压力表、橡胶密封垫、放气阀、安全阀等构成(图2-11)。其工作原理是利用所产生的高压湿热水蒸汽(温度为121～123℃，压力为0.10～0.15Mpa)(2)操作步骤①加水装锅打开锅盖，加入清水，至超过锅底搁帘1cm左右，然后放上内锅，装入灭菌物物品，盖上锅盖，对角线拧紧螺栓。②通电升压，排冷空气接通电源，使灭菌器开始工作。当压力0.05MPa时，打开放气阀，排放冷气，待指针回零后(根据具体情况，可反复2～3次排放冷气)，关闭放气阀，使灭菌器升压。③保压当压力达到0.10MPa时，开始计时，使锅内蒸汽压力保持0.10～0.15MPa的范围，维持15～30min的灭菌时间。④降压排汽：灭菌结束后断开电源，让锅内压力自然下降。当指针归零后打开放汽阀，排放余汽。⑤出锅冷却：当压力表指针为零时，打开放气阀，手戴隔热手套，开锅取瓶。用周转筐运至接种室或冷却室，待培养基冷却凝固后方可使用。(3)使用和维护时的注意事项①装锅时，不要装得太满，并且严禁堵塞安全阀的出气孔，必须留出空位保证其空气畅通。②灭菌液体时，应采用耐热玻璃瓶灌装，并且液体以不超过3/4体积为好，切勿使用未打孔的橡胶或软木塞。③长期使用压力锅，若压力表的指示不正确或不能回复零位，应及时检修。平时注意定期与标准压力表相对照，若不正常，应换上新表。④平时应将设备保持清洁和干燥，方可延长使用年限，橡胶密封垫使用日久会老化，应定期更换。⑤安全阀应定期检查其可靠性，工作压力超过0.165兆帕时需要更换合格的安全阀。4.HZS-H超级恒温水浴振荡器的使用(1)构造与工作原理恒温水浴振荡器主要由水浴槽和控制面板两部分构成(图2-12)。水浴槽上有密封盖，槽内装水；控制面板可设定温度和转速，根据培养材料的不同，设定相应的水温和转速为，从而实现离体材料的液体培养。图1-15恒温水浴振荡器(2)操作步骤图1-15恒温水浴振荡器①加水：检查仪器背面的放水胶堵是否安好在水箱内加不少于20立升的蒸馏水；②接通电源：将三芯插头插入电源插座．并将机器背面的“断路器”置“通”的位置；③开启右下角“加热”开关．此时仪表应能显示出箱内的温度值。④温度设定：按“参数选择”健至仪表显示设定值（表盘右侧“设定”处发光管亮）时，用锣丝刀调节“温度设定”钮至所需的温度，设定过程即告结束，仪器开始升温。⑤振荡调节：将”速度调节”扭至最小位置，开启右下角旋转开关．仪器开始振荡。按下“参数选择”健至仪表显示“转速”（表盘上“转速”发光管亮）时，调节“速度调节”钮，使仪器达到所需要的转速。⑥仪表参数显示的顺序是：每按一次“参数选择”键，仪表按“温度－转速－设定－温度”的顺序周而复始的变化。不论仪表显示哪一个参数，控温的调节系统都在正常进行。(3)设备使用与维护时的注意事项①本仪器应使用蒸馏水，长期不用时应将水放掉。水箱内如使用自来水，则要经常清洁箱内的水垢。②本仪器表面应经常擦拭，以保持清洁。操作时应避开议表控制箱的侧面，以免将水滴入机内，损坏设备。③仪器必须先加水后通电。④开机时“速度调节”应调至最小位置。⑤箱内要及时补充水量，以免烧干损坏设备。5.电子分析天平的使用图1-16电子分析天平图1-16电子分析天平日本岛津进口电子分析天平主要由天平机体、称重舱、天平盘、键板（包括4个键）、液晶显示屏等构成(图2-13)。国产分析天平与此类似。(2)操作步骤①调平天平放稳后，转动脚螺旋，使水平气泡在水平指示的红环内；②自检在空载下，天平内部进行自检，显示屏上相继显示CHE3→0，CAL4LINKWord.Document.8"C:\\MyDocuments\\2002－2003学年第二学期：植物组织培养幻灯片\\组织培养实践指导：2003年4月7日\\组织培养实习指导2003年4月.doc""OLE_LINK1"\a\r→0，CAL，END，CAL，OFF；③全显示按“ON／OFF”键，液晶屏进入全显示态；④这时再按“ON／OFF’键，液晶屏进入预热状态，有绿色指示灯显示。平时可放置在这个状态。当再启动“ON／OFF”键，又进入全显示状态；⑤清零按Tare键，液晶屏显示“0”⑥去皮重清零将硫酸纸放在天平盘上，再按Tare键清零，液晶屏再显示“0”⑦称样品将药品放在硫酸纸上，至液晶屏左侧稳定标志“→”出现，读数即为样品重量。小数点前为克单位。如1.234即为1.234克(3)设备使用与维护时的注意事项①天平为精密仪器，使用时双手、样品、容器及硫酸纸一定要洁净干燥，切勿将药品直接放到天平盘上。②不要把水、金属弄到天平盘上。③天平严禁靠近磁性物体。④天平使用时，不要撞击天平所在桌面，要关上附近的窗户，以防气流影响称重。⑤天平必须进入预热态方可断电。技能训练时的注意事项1.消除仪器设备的安全隐患，培养学生安全意识，要求学生正确操作和安全使用仪器设备。2.受实验室空间、仪器设备台数和教学时间的限制，应分组交替训练。训练与考核建议1．教师集中介绍仪器设备的构造、原理、使用方法及注意事项后，学生分组交替练习，教师加强组织与协调。2．技能训练侧重仪器设备和器械用具的使用。3．考核旨在提高组培常用仪器设备的熟练使用程度，为后续的组培操作奠定基础。考核重点侧重操作的规范性和熟练程度。考