2025年染色体畸变检测实验报告微核技术分析

式，微核发生率用来反应诱变物质对生物的遗传危本试验采用大蒜作为试验材料，具有许多长处：①用鳞茎进行无性增殖，防止了有性生殖过程中的遗传性变异，具有遗传背景稳定的优势；②分布广、材料易得，不受地区和季节的限制；③培萌生新根的数目较多；④价格低廉，对诱变剂敏感，是一种理想的试验材料。类接触到的有潜在遗传毒性的物质越来越多，其中一种较为突出的就是废旧电池的污染。废旧电池大的危害。咖啡的重要成分为咖啡因。德国生态学《okeo-test》的研究人员发现，他们所检测的所有24种品牌的研磨咖啡和7个品牌的浓咖啡中都具有致癌物质——丙烯酰胺。检测成果发现，丙烯酰胺也存2.试验材料与措施h,选择根长整洁一致，不定根长约0.5-1cm左右的大蒜随机分组。将试验材料分为六组，放入8ml不一样成分的培养液中，其中1组为阴性对照组，培养液为清水；2、3组为阳性对照组，培养液分别为25mmol/L、50mmol/LNaN3溶液；5——8组培养液分别为0.50g/ml浓度的咖啡和0.25g/ml浓度的咖啡以及分别添加2.5g和5.0g的电池内部粉末。将培养皿中置于20摄氏度左右室温下培养24h。阴性对照组阳性对照组1组咖啡咖啡电池电池(试验组采用的诱变剂是NaN₃,既是试验组，又是阳性对照组)阴性对照(清水)试验组(NaN)1组卡诺固定液中固定24小时，如不立即检测可移至70%乙醇中4℃下保留。①根尖用1MHCl处理的10min,水洗3次。②切取近根尖分生区的伸长区组织，用改良苯酚品红染色10min。③压片：加上盖玻片后，用铅笔轻敲使细胞分散，最终垂直压下去。每个根尖计数1000个细胞，记录含微核的细胞数，然后取平均值，即为该处理的微核千分率。2.3成果图1含微核的细胞(10*40)图2含微核的细胞(10*40)图31组(10*40)图42组(10*40)图53组(10*40)图64组(10*40)图53组(10*40)图75组(10*40)图86组、7组(10*40)2.3.2试验成果分析与记录组别阴性对照组阳性对照组1组3组5组咖啡咖啡2.5g电电池微核检出09算根据数据我们发现，咖啡存在一定的致癌率，但致癌作用要弱于NaN。伴随咖啡浓度的升高，试验分析微核是由有有丝分裂过程中的染色体断片，或丝分裂后期丧失着丝粒的染色体产生的，这些染微核的鉴定原则：①凡主核大小的三分之一如下的小核；②小核着色不管深浅；③小核形态可的伸长区中，压片观测此区域中的细胞呈正方弱；已知NaN3有很强的诱变作用，因此用25、50mmol/1的NaN3作为阳性对照组，其中50mmol/1的NaN3的根尖压片中可观测到大量微核，其数量是所有试验组中最大的，其千分率几乎为100%。试验活动，使细胞分裂活动延缓或终止停止，甚至死亡，后来的试验设计中必须牢记从图中可看出，本次试验压片效果不是很好，对微核率的记录及试验成果导致影响。图6中细胞轮廓不清晰，并且与周围细胞对比可看出装片中有多层细胞重叠的状况，压片时没有使细胞充足分散开。虽然本次试验不需观测染色体，对压片没有那么高的规定，但仍旧不能松懈，要做到视野中单层细胞，且细胞不重叠，计数才能更精确，才能获得很好的试验成果。1.由于培养大蒜的时候，放的大蒜不够多，导致长出根的大蒜相对较少，根的数量有限，难以进行多组试验。2.敲片的力度一定要掌握好，不能过重，也不能过轻。力度过大会导致细胞破裂，无法观测和计数具有微核的细胞。过轻会导致出现多层细胞重叠的现象，也影响微核的观测与计数。3.NaNs见光会分解，因此在用溶液处理材料时，不要把培养皿放置在窗台，最佳放置在恒温箱中，以免对试验产生误差。4.后续试验中，可以在本次试验的基础上，再设置不一样浓度梯度的咖啡试验组，并且分别处理不一样的时间，来观测对应的成果，进行定量分析。而对于电池粉末组则应当在充足阅读有关文献的基础上，重新设计合适的浓度梯度的试验组。6.切取根尖时要精确，若切取组织过大，制片后视野中细胞过多，且多层，影响观测；若过小，则丢失细胞。两种状况都会导致观测到微核偏少的现象。我们切取的应是根尖伸长区的细胞7.在解离之前和之后，均要用清水洗涤根尖，否则前者影响解离，后者影响染色。8.若诱变因子浓度较低，则微核较少；压片时也许压入杂质，染液也也许产生沉淀，因此在压片之后需要认真地进行镜检，不遗漏一种微核，也不把杂质误认为微核。本次试验，我们成功的通过微核检测技术评价咖啡诱变状况，所后来来应当少喝咖啡，并且本次试验我们虽然没有成功的检测电池浸出液的诱变作用，不过也可以从试验中验证废旧电池对生物的巨大危害，这提醒我们此后一定