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DB37DB37/T1826—2011猪圆环病毒2型环介导等温扩增技术Loop-mediatedisothermalamplificationforporcinecircovirustype22011-04-08发布2011-06-01实施山东省质量技术监督局发布I1):):F3:5’-CTCCAGTGCTGTTATTCTAGATGA-3’B3:5’-TTTCCAGCAGTTTGTAGTCTCA-3’FIP:5’-GAAGGGCTGGGTTATGGTATGGC-TTTT-ACAGCCCTCACCTATGACC-3’BIP:5’-CCGCTACTTTACCCCCAAACCT-TTTT-GCCACAGCTGATTTCTTTTGTTG-3’2将病料剪碎放于灭菌的研磨器中磨碎,用生理盐水1∶5倍稀释,取悬液反复冻融3次,5000g离心BstDNAPolymerase(84.1.11%琼脂糖凝胶板的制备(见附3称取0.6g琼脂糖,加入60mL0.5×TBE缓冲液中,加热融化,温度降低后加入1%的EB,倒入电泳槽将LAMP扩增产物5μL与1μL6×LoadingBuffer混),成像系统仪下观察并拍照。如某一待测样品扩增产物的DNA条带与阳性对照的条带在同一直线上,并与4试剂的配制A.210%十二烷基硫酸钠(SDS溶液,pH7.2)5

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