临床输血检验技术 课件 项目六 临床输血程序

项目六临床输血程序临床输血程序是从采供血机构将符合国家标准的血液与医疗机构交接开始至患者输血后疗效评估等结束的整个过程，涉及到多个环节和部门，需要输血科（血库）技术人员、临床医生和护士三方共同完成这一治疗过程。临床医生输血科医护人员主要内容任务一血液预订、入库及存储血液预订需要依据医疗机构制定科学合理的临床用血计划，对于临床所需不同血型、各类血液品种日均使用量制订出合理的库存量，包括应急血液库存量、安全血液库存量、周转血液库存量。4312安全血液库存量应急血液库存量周转血液库存量用血计划预订比例预订方式电话网络传真3:3:3:1ABOAB注意事项01临床机构预订血液需向指定的血站预订02特殊稀有血型需进行提前预约03按“先进先出”的原则进行血液发放。04输血科建立血液预警机制05输血科根据血液保存期限及时血液库存的调整核对验收血液入库运输条件、物理外观、血袋封闭及包装是否合格，标签填写是否清楚齐全等血液入库血液储存储存条件血液入库后要按不同血型、不同血液品种分别贮存于输血科专用储血设备内。不同血液成分按照各自的保存温度进行保存。储血设备贮血设备必须是血库专用设备并加强监控和管理，应有温度异常报警装置或配备自动化实时温度持续监控系统。可采用人工或自动方式对温度进行监控并记录，且记录至少应保存到血液发出后1年储血环境储血设备内严禁存放其他物品。储存红细胞的冰箱内部、取血箱及血小板保存箱内部每月至少消毒一次。冰箱内空气培养每月一次，无霉菌生长或培养皿(90mm)细菌生长落＜8CFU/10min或＜200CU/m3为合格。任务二输血前评估、告知及申请决定输血之前临床医师应问自己10个问题输血的目的是什么？能否减少出血以降低患者的输血需求？该患者是否具有输血的临床或实验室指征？输血传播艾滋病、肝炎、梅毒疾病的风险如何？给该患者输血是否利大于弊？当无法及时获得血液时，有何其他治疗措施？是否具有经验丰富的医师负责监护输血患者，并能对不良反应及时处理？是否已经将输血决定及理由写入病程记录和输血申请单？是否应先给予其他治疗？如果患者是自己或自己孩子，在此情况下，是否接受输血？输血前评估评估原则风险评估只有在无替代输血的治疗方法或已实施的替代输血治疗不能有效纠正贫血和止凝血障碍，且不输血可能影响患者预后时方可输血。根据患者的病历记录、病史，体格检查以及实验室结果，评估患者输血风险输血前告知在决定输血治疗前，临床医师应当在输血前取得患者或其近亲属对输血治疗的知情同意，应向其告知输血治疗的目的、方式、风险以及替代治疗方案等，征得患者或其家属同意并在《输血治疗同意书》上签名后方可输血。输血申请

临床输血申请单

NO.0000001预定输血日期：年

月

日

时受血者姓名：性别：年龄：.病案号：科别：病区：床号：.临床诊断：.输血目的：输血性质：常规紧急大量特殊既往输血史：（有/无）孕产史：孕

产

.预定输血成分、量：去白细胞悬浮红细胞：

u;洗涤红细胞

u;病毒灭活血浆：ml;血小板：

治疗量；冷沉淀凝血因子：u:其他：.受血者：

ABO血型：

RH血型：.

血红蛋白：

HCT：.

血小板：

ALT：.HBsAg：

Anti-HCV：.Anti-HIV：

梅毒：.

主治医师签字：

执行护士：.上级医师审核签字：标本于:

年

月

日

时收到申请日期：年

月

日

时验收人：.备注：请医师逐项认真准确填写，并贴好标签，由医务人员于输血前送至输血科------------------------------------------------------------------------------临床医生应根据《医疗机构临床管理办法》填写输血申请单并按照输血分级审批签字。中级以上专业技术职务任职资格的医师提出申请，上级医师核准签发＜800ml中级以上专业技术职务任职资格的医师提出申请，经上级医师审核，科室主任核准签发800-1600ml中级以上专业技术职务任职资格的医师提出申请，科室主任核准签发后，报医务部门批准。＞1600ml＞1600ml800-1600ml＜800ml任务三患者标本采集、接收及处理标本采集输血申请单经审批签字后，临床采血护士应手持输血申请单对受血者进行血样标本的采集。采集的血液标本主要用于输血前传染病标志物检测和输血相容性检测，要是求3天内能代表患者当前免疫学状态的有效标本。采集流程：03标本要求04不能从输液管中抽取血液标本，若必须抽取，要先用生理盐水冲洗管道0102患者使用的药物能够干扰交叉配血试验，应在药物使用之前采集标本。使用EDTA真空抗凝管，采血量不少于2ml标本稀释、溶血，脂血、乳糜血均不能用于交叉配血试验标本运送由医护人员、授权人员或经过安全验证的方式进行运送唯一标识、生物安全、及时运送标本接收及处理拒收标准：由非医护人员、非授权人员或非安全验证方式送达的标本；标本标识不清；输血申请单信息不完善，如未标明血液制品种类或数量；自采集日期起超过3天的用于交叉配血的标本；各种原因引起溶血的标本（溶血性贫血除外）；输血申请单无医师签名等供血者和受血者标本置于2℃～6℃冰箱内保存至少7天任务四输血前实验室检查输血相容性检测技术输血相关传染病病原学标志物检测输血相关传染病病原学标志物检测乙肝病毒AB丙肝病毒输血前相关传染病标志物检测C梅毒螺旋体D人类免疫缺陷病毒输血相容性检测技术输血相容性检测是为了判断供受者血液是否相容，从而保证输血安全有效的前提。主要包括供血者和受血者的ABO血型鉴定（正定型和反定型）、RhD血型鉴定、交叉配血试验和受血者不规则抗体检查等。01040203ABO血型鉴定交叉配血不规则抗体检测RhD血型鉴定（一）ABO血型鉴定（正定型与反定型）输血前，受血者和供血者的ABO血型需要进行复核确认。通常利用红细胞凝集反应的原理进行ABO正、反定型，当ABO正定型与反定型结果相符时，才能确定被检者ABO血型。目前常用的方法包括试管法、微柱凝胶法等。（二）RhD血型鉴定Rh血型系统由于血清中不存在规律性的针对性抗体，所以RhD血型鉴定是利用已知的特异性抗体抗D检测红细胞上是否存在D抗原。常用检测方法有试管法、微柱凝胶法等。（三）交叉配血试验交叉配血试验是为了检测受血者、供血者血液之间是否存在不配合的抗原、抗体成分。主要检测方法包括盐水介质法（已学）、微柱凝胶抗人球蛋白法和低离子聚凝胺介质法。低离子介质聚凝胺法聚凝胺是一种碱性物质，本质是一种高价阳离子多聚季铵盐，在溶液中能产生很多正电荷。红细胞表面的酸性糖分子带有大量负电荷。聚凝胺的正电荷与红细胞表面的负电荷相互中和，减弱了红细胞之间的排斥力，缩短红细胞之间的距离，出现可逆性的非特异性聚集。低离子溶液的作用为降低反应介质的离子强度，减小红细胞的Zeta电位，进一步缩短红细胞间的距离，促进抗原抗体的结合。由于红细胞表面负电荷，有一定间距加入聚凝胺后，可以缩短红细胞之间的距离，使其非特异性凝集加入枸橼酸钠，可以中和聚凝胺红细胞的非特异性凝集消失聚凝胺交叉配血（阴性）聚凝胺枸橼酸钠红细胞上已有不完全抗体致敏加入聚凝胺后，缩短红细胞之间的距离，让不完全抗体可以同时与两个红细胞结合使其特异性凝集加入枸橼酸钠中和聚凝胺由于不完全抗体的结合，红细胞的特异性凝集不消失聚凝胺交叉配血技术（阳性）聚凝胺枸橼酸钠不完全抗体操作流程（5）加聚凝胺溶液（3）加样（1）配制2％～5％红细胞悬液（8）显微镜观察（6）加重悬液（4）加低离子介质溶液（2）标记试管主次侧（7）观察结果结果判断主侧和次侧管均无溶血，红细胞凝集散开，表明供血者和受血者血液凝聚胺介质交叉配血相合；主侧和(或)次侧管内出现溶血或红细胞凝集不散开，表明供血者和受血者血液凝聚胺介质交叉配血不相合。阳性阴性注意事项低离子聚凝胺介质法不适用于Kell系统的检测，容易发生漏检。加入重悬液后，应尽快观察结果，以防弱反应消失注意透析、介入、体外循环治疗的使用肝素的患者或使用肝素抗凝的血样。试验操作过程中应注意各个步骤，以防出现结果误差微柱凝胶介质法利用微柱凝集孔代替普通试管，微柱孔内注入颗粒介质，并在反应介质中预先添加抗人球蛋白抗体。由于颗粒介质具有分子筛作用，红细胞抗原与对应IgG抗体结合后，在抗人球蛋白抗体搭桥作用下形成细胞凝集团块。通过离心作用，未结合抗体的游离红细胞通过自身变形能力穿过介质到达底部，即为阴性反应;而发生抗原抗体反应出现凝集的红细胞被阻滞在介质上层或游离于介质中，即为阳性反应。离心3分钟离心开始离心游离红细胞能通过凝胶间隙（1）抗体游离红细胞能通过凝胶间隙（2）离心结束离心6分钟离心阴性反应离心开始离心离心3分钟凝集红细胞不能通过凝胶间隙（1）抗体离心结束离心6分钟离心凝集红细胞不能通过凝胶间隙（2）阳性反应操作流程（5）离心（3）加样（1）配制0.8％～1％红细胞悬液（6）观察结果（4）孵育（2）标记微住凝胶孔主次侧结果判断若主侧管和次侧管内红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与供血者血液相容，供血者血液可以输给受血者；若主侧管和（或）次侧管内红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，或出现溶血，提示受血者和供血者血液不相容。注意事项不同生产商提供的血清试剂对于加样量、孵育时间要求可能有所不同，应严格按照试剂说明书操作配制红细胞悬液时应注意红细胞悬液浓度的高低实验前要将微柱凝胶卡空卡放入微柱凝胶卡离心机中离心尽可能使用当日采集的新鲜血标本，不能使用溶血、细菌污染、脂血标本进行交叉配血试验（四）不规则抗体检测不规则抗体检测是输血相容性试验之一，主要包括不规则抗体的筛选与鉴定，输血前检测受血者血液中是否存在具有临床意义的不规则抗体，选择对应抗原为阴性的红细胞制品给受血者输注，避免输血不良反应的发生，提高输血安全。不规则抗体的筛选不规则抗体主要通过输血、妊娠或其他免疫刺激产生。患者血液中若含有不规则抗体，一旦输入的血液制品中含有对应抗原，产生免疫反应而导致溶血性输血反应。医疗机构应对有输血史、妊娠史或短期内需要大量输血的患者应进行不规则抗体筛查，同时，采供血机构也应对供血者血清进行不规则抗体筛查工作，以减少含有不规则抗体的血液进入受血者体内。不规则抗体筛选常用的检测方法为经典抗人球蛋白法、聚凝胺介质法、微柱凝胶抗人球蛋白法。以下以抗人球蛋白法为例：经典抗人球蛋白法多数IgG抗体与红细胞膜上相应血型抗原结合后，在盐水介质中只能发生致敏反应而不能出现肉眼可见的凝集，当加入抗人球蛋白试剂后，该抗体可与多个包被在红细胞膜上的IgG抗体的Fc段结合，通过抗人球蛋白的桥联作用，使致敏红细胞发生肉眼可见的凝集。抗人免疫球蛋白IgG操作流程（5）再离心（3）离心（1）标记试管Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、自身对照（8）显微镜观察（6）加抗人球蛋白试剂（4）水浴（2）加样（7）观察结果结果判断试管法微柱凝胶法若自身对照孔及I、Ⅱ、Ⅲ孔均阴性，表明未检出IgG类不规则抗体；若自身对照孔阴性，I、Ⅱ、Ⅲ孔中至少有1孔阳性，表明被检者血清(或血浆)含有不规则抗体；若自身对照孔及I、ⅡⅢ孔均阳性，表明被检者血清(或血浆)含有自身抗体或同时伴有不规则抗体当自身对照管及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管均无凝集或溶血，表明未检出IgG意外抗体；当自身对照管无凝集或溶血，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管中至少有1管出现凝集或溶血，表明受检者血清（或血浆）含有IgG意外抗体不规则抗体鉴定若不规则抗体筛查呈阳性，则需要进行不规则抗体鉴定试验，以确定其特异性，根据其抗体特异性选择对应抗原阴性的血液进行输注。不规则抗体鉴定常用的检测方法包括盐水抗人球蛋白法和微柱凝胶抗人球蛋白法，其原理与不规则抗体筛查试验基本相同，操作步骤相近。以下介绍盐水抗人球蛋白法操作流程：操作流程（5）再离心（3）离心（1）依据谱细胞数量标记试管（8）显微镜观察（6）加抗人球蛋白试剂（4）水浴（2）加样（7）观察结果结果判断依据谱红细胞反应格局表对应查找出抗体特异性。序号Rh-hrKellDuffyKiddLewisPMNSsLutheranDCEceKkKpaKpbFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLub1++--+-+-++-+-----+++-+2++--+++-+-+-+-+++++--+3-+++-++-+++-++-+-+++-+4-+-++-+-+-+-+-+--+++-+5+---+-+-++-++-++-+-+-+6--++--+-+-+++-+++-+--+7---++-+-+-+++-++-+-+-+8---++-++++--+-++++-+-+9---+++--++-++-+-+++-++10---++-+-++++--++-++--+11+++-+-+-+-++++-+++-+-+12+++++++-++-+++-+-+-+-+任务五血液发放、输注及输注后

疗效评价血液发放发血时，取血与发血双方应当分别核对患者姓名、出生日期、病案号、血型和交叉配血结果，以及献血者编号或条形码、血型、血液成分、数量、有效期、外观等。核对无误双方在发血记录单上签字后，血液方可发出。不得发放血液的情况①血袋标签脱落、破损、字迹不清②血袋有破损、漏血③血液中有明显凝