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文档简介

CCSB04DB21TechnicalRegulationforidentificationofthepurityofvegetablehybridsbyKASPmarker辽宁省市场监督管理局发布I本文件起草人:王玉刚、黄胜楠、冀瑞琴、刘志勇、李承彧、章云、任杰、孙云霞、张迎欢、本文件发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估归口管理部门通讯地址:辽宁省农业农村厅(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话:1利用KASP标记鉴定蔬菜杂交种纯度技术规程本文件适用于已完成全基因组测序的蔬菜作物杂交种纯度快下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)GB/T3543(所有部分)农作物种子检验NY/T2472西瓜品种鉴定技术规程SNY/T2473结球甘蓝品种鉴定技术规程NY/T2474黄瓜品种鉴定技术规程SNY/T2475辣椒品种鉴定技术规程S全基因组重测序Whole-genomeRese指对已知基因组序列的物种进行不同个体的基因组测序,并在此基础上对个体或群体进行差异入缺失位点(InDel)、结构变异位点(SV,StructureVariation)和拷贝数NumberVariation)。KASP技术TheKompetitiveAlleleSp指可在广泛的基因组DNA样品中,对SNPs(EDTA:乙二胺四乙酸(EthyleneDiaminTris-HCl:三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Trishydrochlor2KASP:竞争性等位基因特异性PCR(KompetitiPCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReact按照NY/T2471~2476给出的方法,借鉴番茄、西瓜、结球甘蓝、黄根据双亲重测序筛选的SNP和InDel位置信息,设计特异正向引物两条,通用反向引物一条。SNP引物设计网站http://www.Tris-HCl(1M),氯化钠,EDTA31扩增结束后,利用实时荧光定量PCR仪检测荧光信号并3N——检测样品种子数。4首先将两对特异正向引物和通用反向引物分别

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