葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用课件

（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用

（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用

（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用AIDS插管等侵袭性治疗肿瘤和免疫抑制治疗骨髓和实体器官移植广谱抗生素治疗侵袭性真菌感染率上升—（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用+600%+300%+300%Martinetal,NEJM2003;348:1546深部真菌感染不断增加（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用国内深部真菌感染不容忽视

刘正印等，中华医学杂志2003年3月第83卷第5期（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用国内情况我院血液科(2004.5-2005.5共118例患者)确诊和临床诊断有7例,发生率为5.9%以血液病为主的深部真菌感染高危患者中，发生感染的危险因素有2种及2种以上广谱抗生素应用、念珠菌菌落定植和应用尿管，其中广谱抗生素应用是最主要的危险因素

（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用深部真菌感染条件致病性真菌念珠菌病曲霉病隐球菌病其他（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用对于侵袭性真菌感染……诊断滞后治疗手段有限基础疾病病死率很高念珠菌血症若不治疗死亡率可以达到45-76%侵袭性曲霉病死亡率高达55-70%（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用诊断方法显微镜检查培养血清学分子生物学（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用镜检和培养方法敏感性低

血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区分定植和感染困难培养时间长有些标本采集困难（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用非培养方法优点快速报告结果敏感性提高取材简便多以真菌在致病状态产生的物质为检测标志物，结果阳性提示有致病性定量检测可判断感染严重程度及疗效评估（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用非培养诊断的方法简介真菌细胞壁成分（1-3）-β-

D-葡聚糖检测（G试验）真菌抗原检查半乳甘露聚糖（galactomannan)抗原（GM)甘露聚糖(mannan)抗原隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验）真菌特异的代谢产物D-阿拉伯糖醇真菌DNA的检测（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用深部真菌感染的诊断标准

EORTC/MSG2008修订版宿主因素临床特征病原学真菌镜检真菌培养组织病理学检查血清学检查方法（间接证据）CSF隐球菌抗原阳性——确诊GM-test,G-test——临床诊断ClinicalInfectiousDiseases2008;46（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用（1-3）-β-

D-葡聚糖检测（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用（1-3）-β-

D-葡聚糖检测b1,6glucansb1,3PPLbilayerchitinergosterolb1,3glucansynthasemannoproteins真菌细胞壁成份，占50%以上其他微生物、动物及人的细胞不含该成份用于侵袭性真菌感染的早期诊断（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用方法：G试验β-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。Beta-D-glucan通过激活G因子（FactorG）引起凝集内毒素通过激活C因子（FactorC）引起凝集试剂盒:祛除FactorC

Glucan特异（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测的特点可检测多种致病真菌感染念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等不能用于检测隐球菌和接合菌感染阳性结果代表存在侵袭性真菌感染真菌对数生长期释放量最大,可被体内葡聚糖酶降解(glucanase)每周检测2次（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测用于念珠菌血症

敏感度为62%-100%，特异度为64%-88%不同种念珠菌感染对葡聚糖检测无明显影响白念珠菌,光滑念珠菌,热带念珠菌,克柔念珠菌,季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌近平滑念珠菌BG水平较低Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测用于念珠菌血症

BG检测敏感度明显高于Mannan检测79.6%vs42%阳性早于血培养阳性和临床症状出现对于念珠菌血症,BG检测是首选检查Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用β-（1-3）-D-葡聚糖(BG)检测

用于侵袭性曲霉感染（IPA)敏感度为55%-100%特异度为52%-100%对于确诊IPA，阳性率为85.7-100%高度可疑IPA，阳性率为52.4-66%Med.Mycol.2006.44:5163–5172J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013J.Clin.Microbiol.2005.43:299–305（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测(阳性界值为60pg/mL)和GM（阳性界值为1.0）比较二者在体内的代谢动力学相似，敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均相同，分别为87.5%、89.6%、70%和96.3%二者联合可以提高特异度和阳性预测值，对敏感度和阴性预测值没有影响JClinMicrobiol,2005,43:299-305.侵袭性曲霉感染（IPA)

BG检测与半乳甘露聚糖(GM)检测（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测与半乳甘露聚糖(GM)检测BG检测与GM检测敏感度67%vs38%特异度90%vs100%感染曲霉种类的影响抗真菌药物应用的影响抗生素应用的影响（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测对于烟曲霉和非烟曲霉感染无差别OrganismSensitivity,%Specificity,%PPV*,%NPV*,%A.fumigatusn=6961887579A.non-fumigatusn=3964886488J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用GM检测烟曲霉感染的敏感性明显低于非烟曲霉感染OrganismSensitivity,%Specificity,%PPV*,%NPV*,%A.fumigatusn=6913999066A.non-fumigatusn=3949999586J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用抗真菌治疗对GM检测的影响抗真菌治疗使GM检测敏感性下降确诊IPA的造血干细胞移植未接受抗真菌治疗，GM试验的敏感度为87.5%接受抗真菌治疗，敏感度为20%应用卡泊芬净后，GM值会出现升高BG检测的敏感性与抗真菌治疗无明显关系Clin.Infect.Dis.2005.40:1762–1769.Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用抗生素治疗

对BG检测和GM检测的影响BG检测假阳性与应用β内酰胺类抗生素无关Antimicrob.AgentsChemother.2006.50:3450–3453.GM检测哌拉西林/他唑巴坦导致假阳性（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用IPA的诊断方法BG检测GM检测烟曲霉可能阳性率低二者联合可以提高检测的阳性率（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测用于肺孢子菌检测BG是肺孢子菌包囊壁的组成成分可释放入血液可用于肺孢子菌检测（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测57名PCP患者238名非PCP患者敏感度92%，特异度86%阳性预测值0.61，阴性预测值0.96界值31.1pg/mLCHEST2007;131:1173-1180（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测AIDS患者合并PCP阳性率为97%（31/32）非HIV感染合并PCPBG值仍旧较高J.Infect.Chemother.2007.13:1–7.J.Med.Microbiol.2000.49:391–392.（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用BG检测用于PCP诊断敏感度好临床一致性好数值升高明显，甚至高于念珠菌感染PCP(1,299-

1,151pg/ml;median,945pg/ml)念珠菌血症(700-

779pg/ml;median,447pg/ml).J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用其它深部真菌感染镰刀菌、组织胞浆菌、毛孢子菌、地霉、枝顶孢霉感染均可出现阳性对于接合菌和隐球菌均为阴性JMedVetMycol,1997,35:371-374.J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用（1-3）-β-

D-葡聚糖(BG)

检测方法Fungitec-G(Japan)界值为20pg/mL

Fungitell(US)界值为60pg/mL或80pg/mL

GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒(国内金山川公司)界值为20pg/mL或50pg/mL

（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用Fungitec-GTM

20pg/mL41名确诊IA患者中有37名阳性59名无真菌感染的肿瘤或结缔组织病的对照中，无一例阳性JClinMicrobiol,1995,33:3115-3118

202名发热患者敏感度和特异度分别为90%和100%，阳性预测值为59%，阴性预测值为97%

Lancet,1995,345:17-20.（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用FungitellTM

60pg/mL，80pg/mL60pg/mL

敏感度70%，特异度87%80pg/mL敏感度64%，特异度92%ClinInfectDis,2005,41:654-659.（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒

对于侵袭性念珠菌感染以健康人做对照敏感度88.9%,特异度90.2%阳性预测值50%,阴性预测值98.7%界值定为13.7pg/ml中国真菌学杂志，2007，2（4）：202-206（1,3）-β-D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的应用GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒

北京大学第一医院2008年4月至2008年8月住院患者临床怀疑侵袭性真菌感染的患者98例50pg/mLBG≥50pg/mL15例，IFI组7例敏感度63.6%，阳性预测值46.7%BG＜50pg/mL83例，对照组79例特异度90.8%，阴性预测值