壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程-编制说明

10一、项目来源根据《广西标准化协会关于下达2023年第四十二批团体标准制定项目计划的通知》（桂标协〔2023〕145号），《壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程》由广西壮族自治区药用植物园提出，广西白云山盈康药业有限公司、广东汉潮中药科技有限公司、广西壮族自治区药用植物园共同起草，项目编号为2023-4201。二、项目背景及目的意义1、目的意义中药材不仅是中医药事业传承和发展的物质基础，同时也是重要的农林经济作物，属于大健康产业的重要组成部分，党和国家高度重视中药发展工作，2019年中共中央、国务院印发《关于促进中医药传承创新发展的意见》，强调需加强中药材质量控制，强化中药材道地产区环境保护，修订中药材生产质量管理规范，推行中药材生态种植、野生抚育和仿生栽培；2021年，广西政府印发《促进全区中药材壮瑶药材产业高质量发展实施方案》，围绕在科学规划优势区域优势品种、实行以基地为核心的生产模式等七个方面提出具体工作措施，提出加强中药材壮瑶药材种质资源保护利用，建立良种繁育推广体系，推动中医药壮瑶医药产业高质量发展；2022年，广西区农业农村厅印发《广西“十四五”中药材种植业高质量发展专项规划》，从药材种植、加工、销售等方面明确了七项工作任务，其中提出了加强中药材资源保护，着力培育广西区域特色药材等措施。本项目开展“壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程”团体标准研究和编制，符合国家和广西中药发展有关政策规定，通过开展三叶青藤扦插繁育技术研究及技术规范制定，进一步加强广西境内各地区的三叶青藤种质资源的管理与利用，并为广西地区三叶青藤大面积人工栽培打下良好基础，促进壮药材三叶青藤可持续发展，为增加药农收入和促进乡村振兴，同时可推进三叶青藤有关制剂再创新和做强做优做大，创造更加良好的社会和经济效益。2、必要性三叶青藤属于广西壮族民间草药，是莲叶桐科植物红花青藤IlligerarhodanthaHance的干燥地上部分，收载于《广西壮族自治区壮药质量标准》第一卷（2008年版）。三叶青藤又名三姐妹藤、毛青藤等，三叶青藤植株为藤本，主要特征为叶互生、指状复叶，有小叶3片，小叶片卵形至倒卵状椭圆形或卵状椭圆形，基部圆形或近心形，侧脉约4对。聚伞花序组成圆锥花序，生于叶腋，密被黄褐色绒毛，花期6-11月，果期12月至次年4-5月。三叶青藤性温，味甘、辛、涩，具有祛风散瘀，消肿止痛，活血通络等作用，用于治疗跌打肿痛、肩周炎、风湿性骨痛、风湿性关节炎和小儿麻痹后遗症等，为广西壮族地区民间和临床常用草药，是广西民族药（壮药）“华佗风痛宝片”、“华佗风痛宝胶囊”、“祛风湿药酒”的主要原料之一。近年来，随着我国医药市场的不断扩容，三叶青藤需求量也不断增加，目前华佗风痛宝片、华佗风痛宝胶囊、祛风湿药酒需要三叶青藤约60（吨/年），其他科研研究、医疗机构制剂、临床及民间用药约40吨，年消耗三叶青藤总量约100吨，药材来源均为野生品，直接为三叶青藤产地的药农增收约180万元。但随着垦荒和气候、土壤环境恶化，加上野生三叶青藤资源遭到过度采集，野生资源越来越紧缺且质量日益下降，严重阻碍了三叶青藤药材及其制剂的发展，亟待人工种植加以解决。根据文献报道，三叶青藤的繁育技术研究包含组培快繁技术、扦插技术和种子繁育，但是针对三叶青藤繁育技术标准并未见文献报道，因此研究和制定团体标准《壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程》，具有较好的实用性与前瞻性，将明确三叶青藤扦插繁殖技术要点，助力三叶青藤的种质资源管理和标准化规模化育苗，有利于促进三叶青藤的产业化发展。三、项目编制过程（一）成立标准编制工作组团体标准《壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程》获得立项后，广西白云山盈康药业有限公司、广东汉潮中药科技有限公司、广西壮族自治区药用植物园成立了标准起草工作小组，组长吴禄祥，副组长马恩耀、张占江，组员唐春风、周淑瑶、周劲松、蓝晓东、黄宝优、钟林静、苏虹惠、江紫薇、张悦、彭玉德、陈路、覃佩莉、黄平权、黄若干、蓝祖栽，标准起草工作小组实行目标责任制和组长负责制，制订科学严谨的研究和起草编写方案，项目组成员分工明确、责任到人。具体分工见下表：表1编制工作组人员名单序号姓名性别年龄职务/职称从事专业工作单位责任分工1吴禄祥男36制药工程师制药工程广西白云山盈康药业有限公司标准整体方案设计、实施管理2马恩耀男32主管药师中药学广东汉潮中药科技有限公司标准整体方案设计3张占江男47研究员药用植物保育与可持续利用研究广西壮族自治区药用植物园技术指导4唐春风女45主管药师种质资源评价广西壮族自治区药用植物园技术指导、种子繁育研究5周淑瑶女26初级工程师遗传育种广东汉潮中药科技有限公司种子繁育研究6蓝晓东女32工程师化工与制药广西白云山盈康药业有限公司收集整理文献资料、药材标本及种子收集7周劲松男48高级工程师中药学广东汉潮中药科技有限公司技术指导、种子繁育研究8黄宝优男45高级工程师药用植物资源与保育广西壮族自治区药用植物园种子繁育研究9钟林静女28初级工程师林业工程广西白云山盈康药业有限公司种子繁育研究10苏虹惠女25初级工程师药学广西白云山盈康药业有限公司种子繁育研究11江紫薇女24初级工程师中药资源广东汉潮中药科技有限公司种子繁育研究12张悦女23初级工程师中药资源广东汉潮中药科技有限公司种子繁育研究13彭玉德男43高级工程师药用种质资源保育广西壮族自治区药用植物园种子繁育研究14陈路男43副主任药师中药学广西壮族自治区药用植物园种子繁育研究15覃佩莉女58高级工程师药学广西白云山盈康药业有限公司种子繁育研究16黄平权男58教授级高级工程师中药学广西白云山盈康药业有限公司种子繁育研究17黄若干男50副主任药师药学广西白云山盈康药业有限公司实施管理18蓝祖栽男57副主任技师中药资源广西壮族自治区药用植物园种子繁育研究（二）收集整理文献资料标准编制工作组经查阅，收集了国内有关三叶青藤资源评估和繁育技术相关文献资料。主要有：黄小燕,韦荣昌.三叶青藤的组织培养快速繁殖方法[P].广西壮族自治区：CN107278903B,2019-04-19.陈叶龙.三叶青藤特性及苗木繁育技术研究[J].大众科技,2011(11):145-147+144.李江,蔡小玲.民族药三叶青藤的研究现状[J].华夏医学,2009,22(05):992-994.黄平权,冯世鑫.红花青藤种子繁殖研究初报[J].中国民族民间医药,2019,28(13):47-51.黄平权,冯世鑫.民族药红花青藤资源调查研究[J].中国民族民间医药,2019,28(06):25-28.《中药材生产质量管理规范》（2022年第22号）（三）研讨确定标准主体内容标准编制工作组在对收集的资料进行整理研究后，组织组员召开标准编制会议，根据实际情况对标准整体框架及关键性问题进行了研究探讨，最终确定标准内容包括：范围、规范性引用文件、术语和定义、基质准备、育苗准备、扦插、扦插育苗管理、起苗、包装、标签、运输和储存、档案管理。（四）标准的主要起草过程前期研究基础该标准立项后，根据自治区对民族药材产业高质量发展战略，广西白云山盈康药业有限公司、广东汉潮中药科技有限公司和广西壮族自治区药用植物园标准制定小组立即着手进行有关三叶青藤扦插繁育技术方面的省内外调研、国家标准和地方标准查新工作，在大量收集和整理有关扦插繁育技术的相关资料后，按照制定标准的要求进行分类整理，同时由广西壮族自治区药用植物园和广东汉朝中药科技有限公司的实验人员在温室内和室外扦插繁育科研基地开展扦插繁殖实验，为本项目地方标准的制定提供了大量详实的实验数据。成立起草小组，开展基础工作标准制定方案下达后，项目承担单位及时成立了标准起草工作小组，讨论了标准的内容提纲以及工作计划，查阅了国内同类标准及资料，并进行了收集、整理和对比分析，在相关研究成果的基础上由广西白云山盈康药业有限公司和广西壮族自治区药用植物园专业技术人员确立制定《壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程》团体标准。明确编制提纲，确定标准框架在拟定标准编制工作进度后，2022年1月至2022年12月在温室内和室外育苗科研基地完成扦插繁殖和病虫害防治工作基础上，2023年由广西白云山盈康药业有限公司在上述基地开展了种苗质量综合评价试验，最终总结出三叶青藤扦插繁育技术方法。标准编制工作组通过认真研究和讨论，提出了制定提纲，敲定了制定规范的框架。起草标准文本，征求意见并形成标准送审稿2023年7月，起草小组认真查阅了标准修订的有关文件，对标准的格式、内容、术语表达方式等进行了深入学习，严格遵循GB/T1.1－2020《标准化工作导则》所规定的标准编写要求，起草了“壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程”初稿，2023年8月，起草工作小组对标准的草案进行了数次修改，形成了征求意见稿。四、标准制定原则1、实用性原则本文件中有关广西三叶青藤扦插繁育技术规程内容及要求的规定，是在充分收集相关资料和文献，分析广西地区三叶青藤繁育现状，以现有的三叶青藤繁育技术为基础而制定，符合当前三叶青藤扦插技术的要求，具有较强的可操作性。2、协调性原则本在标准编写过程中注意了广西三叶青藤扦插繁育技术相关法律法规、标准的协调问题，在内容上与现行法律法规、标准协调一致。3、规范性原则本文件严格按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求和规定编写本文件的内容，保证标准的编写质量。4、前瞻性原则本技术规程，具有较强的创新性和可操作性，由于当前广西地区三叶青藤繁育无标准进行统一规范的现状，因此制定了广西三叶青藤扦插繁育技术的具体操作规程，弥补当前标准的空白，有力支持了广西壮药的种质资源保护与繁育应用，符合前瞻性原则。五、标准主要章节内容及确定依据团体标准《壮药材三叶青藤扦插繁育技术规程》技术内容依据为《中药材生产质量管理规范》（2022年），主要章节内容包括：术语和定义、基质准备、育苗准备、扦插、扦插育苗管理、起苗和包装等。其适用于广西境内三叶青藤扦插培育。标准主要内容及依据来源说明如下：术语和定义三叶青藤有着悠久的用药历史，属于广西壮族民间常用草药，具有祛风散瘀，消肿止痛，活血通络等作用，常用于治疗跌打损伤、风湿性关节炎等。标准编制工作组在查阅总结了相关标准、著作、专利、论文等文献资料的基础上，对广西三叶青藤扦插繁育技术规程所涉及的概念进行统一定义、确立术语。三叶青藤为莲叶桐科藤本植物红花青藤（IlligerarhodanthaHance）的干燥地上部分，又名毛青藤、三姐妹藤，以叶互生、指状复叶，小叶3片为主要形态特征，在广西地区主要生长于林间、边缘树林等地，并依赖于其他植物攀缠。图1野生三叶青藤植株基质准备扦插繁育可用苗床与容器进行，但为了防止起苗与移栽过程根系有所损害，本技术规程选用容器育苗作为主要育苗方式。根据三叶青藤的生长特性和插穗长度，宜采用上口直径×下口直径×高为（10-16）cm×（9-15）cm×（8-14）cm育苗杯或育苗袋。据文献材料和实际考察发现，在自然状态下，三叶青藤着生地的土壤类型有黄壤、黄红壤或灰黑土，土壤酸碱度偏酸性，pH值为4.8-6.2，肥料元素因分布区不同而异。为了得到三叶青藤扦插基质，本试验采用单因素随机区组试验设计，利用泥炭土、黄泥土、粗河沙、蛭石等基质按体积进行配比，共设5个处理，基质1为河沙；基质2为黄泥土；基质3为黄泥：蛭石=1：2；基质4为泥炭土：蛭石=1：2；基质5为泥炭土：河沙：蛭石=1：2：1。所有基质配制完成后，分别使用育苗盆分装，使用0.5%高猛酸钾溶液喷淋后覆膜1天进行基质消毒完成后掀膜淋水，待3天后开始扦插，其中扦插环境设定在温室（遮光度70%），温度控制在25℃-30℃。根据表2可知基质2黄泥土扦插效果较差，插穗难以成活，可能是由于黄泥土具容易板结的特点往往导致透气性和透水性下降，不适宜直接作为扦插基质，基质1河沙以及基质5为泥炭土、河沙、蛭石的组合更适合作为三叶青藤的扦插基质。表1扦插基质配比基质分组基质配比基质1河沙基质2黄泥土基质3黄泥：蛭石=1：2基质4泥炭土：蛭石=1：2基质5泥炭土：河沙：蛭石=1：2：1表2不同扦插基质对插穗萌芽的影响基质配方插穗数（条）萌芽条数（条）出芽率平均出芽率%1201365.00%75.00±10.00201785.00%201575.00%220735.00%38.33±5.7720945.00%20735.00%3201050.00%51.67±12.5820840.00%201365.00%420945.00%53.33±7.64201260.00%201155.00%5201680.00%78.33±7.64201470.00%201785.00%图2不同扦插基质平均出芽率育苗准备三叶青藤在广西地区多见生长于在常绿阔叶林的林缘、沟边、丘陵等较阴凉地域，且目前三叶青藤尚无人工繁育基地，因而扦插材料插穗的获取依赖于野生环境采摘。本试验的插穗采摘于广西壮族自治区南宁市高峰林场，在当地选择无病虫害、生长健壮，茎粗壮的三叶青藤植株作为采穗母株。扦插育苗环境设置组分别为温室（遮光度约70%）、小型遮雨棚（遮光度70%）、室内（遮光度90%）、户外林荫（遮光度约50%）处进行，其中扦插基质为河沙。通过观察插穗萌芽情况发现扦插环境需要适当通风与光照，完全在室内扦插容易造成插穗发病变黑，萌芽率仅仅只有15%，几乎无法成活（表3），因此扦插适宜在小型遮雨棚，并配有70%遮阳网进行，或者在通风良好的遮光度在70%-80%温室进行（图4）。另外，不同枝条部位不同粗细的插穗木质化程度不同、营养状态不同，往往能对扦插成活率产生重要影响（表4），若插穗偏细小则容易失水发黑变软失活，即使插穗已萌发新芽也易出现“假活”现象，即插穗出芽2-3天枯死，因此三叶青藤的扦插不适合选用当年生的枝条为插穗，宜选用健康且粗壮的二年生以上的枝条作为插穗。表3不同扦插环境对插穗萌芽的影响序号扦插环境插穗数（条）萌芽条数（条）出芽率平均出芽率%1温室（遮光度70%）201260.00%61.67±12.58201575.00%201050.00%2小型遮雨棚（遮光度70%）201365.00%65.00±5.00201260.00%201470.00%3室内（遮光度90%）20315.00%16.67±7.6420525.00%20210.00%4户外林荫处（遮光度50%）20525.00%25.00±10.0020315.00%20735.00%表4不同插穗直径对插穗萌芽的影响序号插穗直径（mm）插穗数（条）萌芽条数（条）出芽率平均出芽率%11.0-2.02015.00%1.67±2.892000.00%2000.00%22.0-3.520420.00%21.67±2.8920525.00%20420.00%33.5-5.0201470.00%66.67±15.28201680.00%201050.00%图3不同扦插环境和插穗直径的平均出芽率扦插三叶青藤为藤本类植物，脱离母株的枝条容易丧失水分，因此从母株剪下枝条后需尽快进行处理，随剪随插。在3-5月份春季阴雨天傍晚进行扦插，能使得插穗水分不易丧失。使用干净锋利剪刀将枝条剪成有3-4芽的粗壮茎段，上口平剪，距离第一个芽1cm左右，下口约45°斜剪，剪掉叶，形成切口平滑、无破损、芽保持完好的健壮、无病虫害的二年生以上的半木质化枝条作为插穗。由于扦插环境要求湿度较高，往往容易出现插穗发黑、黑杆的现象，因此扦插时候应将剪下的插穗使用1：1000的多菌灵溶液浸泡消毒灭菌5min，而后使用生根粉液浸枝促根(具体浓度、用量及浸泡时间等参照厂家说明)，并消毒促根后及时进行扦插，防止插穗因水分散失而萎蔫。采用直插的方式，将处理后的插穗下切口朝下垂直插入湿润扦插基质，扦插深度为插穗长的1/2，并压紧插穗周围土壤，扦插完成后及时浇水一次，使水分完全渗透于基质内部。图4温室扦插30天（遮光度70%）图5温室扦插37天（遮光度70%）5、扦插育苗管理扦插出芽前遮阳网需保持遮光率达70%，相对空气湿度80％-90％。当插穗出芽后可选择在遮光率达50%的遮雨棚进行扦插育苗管理，并保持空气流通，以此提高扦插苗的生长速率与环境适应性（图6）。育苗期间持续保持基质湿润，及时浇水，若使用小