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文档简介

DB32DetectiontechnicalregulationforPorcineSap江苏省市场监督管理局发布I本标准主要起草人：李彬、范宝超、孙杰、何孔旺、郭容利、周金柱、1猪萨佩罗病毒检测技术本标准规定的RT-PCR法适用于本病毒的抗原确诊，间接ELISA试验适用于血清凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订单）GB/T6682分析实验室用水规格NY/T541动物疫病实验室检验采样方法AATACAGGATGACACAGGAAGGG-3`（见附录B）。PCR相关试剂。猪萨佩罗病毒阳性病料R取物反转录为cDNA作为阳性对照，水作为阴性对照。高速离心机（10000r/min）、PCR仪、电泳仪、4.2.1DNA模板制备），），4.2.2PCR2别采用55℃进行扩增30s，72℃30s，35个循环72℃延缓冲液混合后，加样到电泳孔中，9V/cm恒压下电泳15min～30mi在试验结果成立的前提下，如果样品扩增到689检测过程中的废弃物，应做好无害化处理，检测过程中防止交叉污染的措施见附猪萨佩罗病毒重组3C表达抗原，酶标抗体，标准阴性血清、标准阳性血清，酶标板及其他必要的试验溶液和酶标仪、移液器等仪器。待检血清样品采集于疑似患病5.2.2洗涤：甩掉酶标板孔内的液体，加入洗涤液200加入洗涤液，连续洗3次，最后一次甩掉洗涤液后，拍5.2.4加入待检血清和阴、阳性血清对照：待检血清用稀释液1:320稀释，每5.2.6加入底物，每孔加100μL，室温避光显色8min。5.2.7终止反应，每孔加入50μL终5.2.8测定光吸收值(OD)，在酶联免疫检测仪上于450nm波长处测定光吸用酶标仪检测OD值，计算S/P值，S/P值=（样品血清OD450nm值-阴性血清OD450nm值）/（阳性血清OD450nm值-阴性

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