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第二章蛋白质的结构与功能第四节

蛋白质的分离、纯化与鉴定

一、蛋白质分离纯化的一般步骤1.蛋白质样品的前处理2.蛋白质粗提液的粗分级分离3.浓缩蛋白质的细分级分离4.蛋白质结晶二、蛋白质分离纯化方法主要是根据蛋白质在溶液中的性质不同对蛋白质进行分离纯化分子大小溶解度电荷吸附性质对配体分子的生物学亲和力高效液相层析和快速蛋白质液相层析三、蛋白质含量的测定及纯度鉴定1.蛋白质含量的测定

测定蛋白质总量常用的方法有：凯氏定氮法、双缩脲法、Folin-酚试剂法、紫外吸收法、染料结合法和胶体金测定法等。2.蛋白质纯度鉴定

蛋白质纯度鉴定通常采用物理化学的方法，如电泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。目前采用的电泳分析有等电聚集、聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS、毛细管电泳等。

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